免疫隔离大鼠胰岛移植治疗小鼠药物性糖尿病的研究

目的　探讨免疫隔离的胰岛异种移植治疗小鼠药物性糖尿病的可行性。方法　新生 Wistar大鼠胰岛分离后包裹在由 THF制成的免疫隔离室内 ,移植给药物诱导的 Balb/ c糖尿病小鼠。移植后不使用免疫抑制剂 ,观察血糖变化情况。结果　免疫隔离及非隔离的胰岛均显示了良好的对葡萄糖加茶碱刺激的反应能力 ,胰岛素的释放量在 2组间无明显差异。移植后免疫隔离胰岛移植组血糖在 3d内降至正常 ,平均维持正常血糖 (72 .8± 3.1) d,多饮、多尿现象明显改善。单纯胰岛移植组血糖降低后仅维持平均 (8.1± 0 .5 ) d。对照组小鼠则持续高血糖状态。组织学检查示免疫隔离室外形成厚度不一的纤维化反应层 ,隔离室内大部分胰岛坏死 ,部分可见残存的胰岛。结论　免疫隔离胰岛异种移植能有效延长移植物的存活 ;隔离室外的纤维化反应是造成移植物丧失功能的主要原因     

大囊包被胰岛异种移植治疗糖尿病小鼠的实验研究

为防止胰岛异种移植后的排斥反应，根据免疫隔离原理，采用琼脂糖和胶原包被大鼠胰岛异种并将其植入糖尿病小鼠体内，观察受者的血糖变化。结果显示，接受大囊包被胰岛移植后，９２．３％的糖尿病小鼠血糖恢复正常，在不使用任何免疫抑制的飞速２下，受者正常血糖持续时间达１２５．８±５７．９天，而对照组正常血糖持续时间仅６．７５±２．９９天。受者耐糖曲线与正常对照组相似；     

大囊包被胰岛异种移植治疗糖尿病小鼠的实验研究

为防止胰岛异种移植后的排斥反应，根据免疫隔离原理，采用琼脂糖和胶原包被大鼠胰岛，并将其植入糖尿病小鼠体内，观察受者的血糖变化。结果显示，接受大囊包被胰岛移植后，９２３％（３６／３９）的糖尿病小鼠血糖恢复正常，在不使用任何免疫抑制剂的情况下，受者正常血糖持续时间达１２５８±５７９天，而对照组正常血糖持续时间仅６７５±２９９天；受者耐糖曲线与正常对照组相似；术后１０３天取出植入的大囊包被胰岛未见组织反应及纤维化。提示大囊包被胰岛不仅能纠正受者的糖代谢紊乱，维持正常血糖水平，而且能有效地防止排斥反应     

微胶囊化胰岛移植研究进展

胰岛移植是治疗糖尿病的一种理想方法 ,但由于存在免疫排斥反应 ,胰岛移植物不能长期存活。为提高移植物和患者的存活率 ,必须使用免疫抑制剂 ,而免疫抑制剂的大量应用 ,会带来一定的不良反应。为此 ,国内外学者一直在努力开发不良反应小的新一代免疫抑制剂和免疫隔离技术。 1 980年Ｌｉｍ等[1 ] 首先报道用海藻酸钠 聚赖氨酸生物膜包裹鼠胰岛进行移植具有免疫隔离作用。这种无毒副反应的生物膜具有特殊的通透性 ,允许小分子的营养物质、激素和代谢产物等自由通过 ,阻止免疫细胞、补体和免疫球蛋白等大分子物质通过 ,从而抑制受体对移植物…     

壳聚糖/海藻酸钠微胶囊包埋大鼠胰岛异种腹腔移植的实验研究

目的 探讨用壳聚糖代替聚赖氨酸,制备包埋大鼠胰岛的壳聚糖/海藻酸钠(ACA)微胶囊进行异种胰岛移植的可行性.方法 SD大鼠胰腺原位消化法分离纯化胰岛,气流吹喷制作海藻酸钠/壳聚糖/海藻酸钠(ACA)微囊化大鼠胰岛,比较微囊化与未微囊化胰岛的胰岛素释放情况、在异种受体腹腔内存活情况及糖尿病小鼠模型血糖逆转情况.结果 实验组与对照组的胰岛素释放试验差异无显著性(P＞0.05);实验组糖尿病小鼠模型血糖正常持续时间为23～65 d(平均48 d),对照组为3～6 d(平均5 d),两组差异有显著性(P＜0.05);小鼠腹腔灌洗分离ACA微囊化大鼠胰岛,发现微囊膜完整,囊壁无纤维化,胰岛存活良好.结论 ACA微胶囊具有良好的免疫隔离作用,胰岛素释放正常并可使异种胰岛移植物存活时间明显延长.     

微囊化大鼠胰岛异种移植于糖尿病小鼠的实验观察

观察海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠微胶囊对异种胰岛组织移植的免疫隔离作用。方法采用ＳＵＮ氏ＡＰＡ微胶囊技术包裹大鼠胰岛细胞团,移植于链脲霉素诱发的糖尿病模型小鼠腹腔。     

微囊化大鼠胰岛异种移植长期逆转小鼠糖尿病的研究

微囊化大鼠胰岛异种移植长期逆转小鼠糖尿病的研究周茂华陈东明夏兆骥朱洪荫胰岛移植是临床替代外源性胰岛素治疗Ⅰ型糖尿病最有希望的方法。移植物排斥和自身免疫对移植胰岛的损害是其失去功能的重要原因。免疫隔离技术是避免移植排斥的一个重要途径。本实验采用海藻酸钠...     

大囊包被异种胰岛免疫保护机理初探

继实验证明琼脂糖大囊包被异胰岛移植能减排斥反应之后，作者又对琼脂糖大囊包被异种胰岛的免疫保护机理进行了初步探讨。     

胰岛移植对糖尿病大鼠周围神经病变的改善作用

目的：观察胰岛移植对糖尿病周围神经病变（DPN）的改善并探讨其可能机制。方法：SD大鼠采用腹腔注射单剂链脲菌素建立糖尿病模型,糖尿病模型建立12周后进行胰岛移植。分为正常对照组、假手术组、糖尿病组、糖尿病胰岛移植组。于糖尿病模型建立后16 周,观察各组大鼠痛敏反应时间,采用HE染色观察坐骨神经的病理变化,实时荧光定量PCR检测坐骨神经肿瘤坏死因子α（TNF-α）的mRNA表达,Westernblot观察B淋巴细胞瘤2 蛋白（BCL-2）、BCL-2 相关X蛋白（BAX）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase3）的表达。结果：与糖尿病组大鼠比较,糖尿病胰岛移植组大鼠坐骨神经纤维变性及断裂均有减少,痛敏反应时间明显缩短,坐骨神经内TNFα的mRNA表达明显下降,且BCL-2表达上调,BAX、caspase3表达下调（P＜0.05）。结论：胰岛移植后血糖下调,明显改善DPN,可能是通过下调TNFα的分泌、上调BCL-2,下调BAX、caspase3,抑制凋亡来实现的。     

胰岛培养后胸腺内移植的实验研究

【目的】观察胰岛培养后胸腺内移植对移植物存活时间的影响。【方法】以C57BL/ 6小鼠为受体 ,BALB/c小鼠为供体。胸腺内胰岛未培养组分为单纯移植和移植的同时加腹腔内 1次性注射兔抗小鼠胸腺细胞血清 (ATS)两组。胸腺内胰岛培养组分为 2 4℃培养后单纯移植和移植时加用ATS两组。【结果】未培养胰岛单纯胸腺内移植后平均存活期为 (19 5±10 1)d ,加用ATS后 ,可延长至 10 0d以上 ,其中 6只受体 (6 / 8)胸腺内移植物长期存活 ,并且诱导了受体对供体的特异性无反应性。胰岛经 2 4℃培养后单纯胸腺内移植或移植后应用ATS ,均可获长期存活 (分别为 >92d ,>10 0d) ,但未能诱导受体对供体的特异性无反应性。【结论】胸腺可能为胰岛移植的免疫特许部位 ,新鲜分离胰岛中的抗原在维持免疫耐受中具有重要的作用。     

经门静脉肝内胰岛细胞移植

为了探讨胰岛细胞移植的最适宜部位，利用四氧嘧啶诱发的糖尿病鼠，以经门静脉肝内移植为实验组，腹腔内和肌肉内移植为对照组，移植用胶原酶消化提取的乳鼠胰岛细胞．结果，实验组治愈率为６０％，与对照组相比有有显著性差异．移植后第８周，未形成肝门静脉高压症，肝脏苏木素 伊红染色切片上，未见病理变化，再经胰岛素抗体过氧化物酶 抗过氧化物酶法证实肝脏内有散在的胰岛细胞分泌的胰岛素颗粒．实验结果认为，肝脏是特殊免疫器官，排斥反应小，肝内移植易于诱发免疫耐受或免疫无反应性，其特殊的血运和生理功能是胰岛细胞移植的最佳部位．     

不同消化条件对小鼠胰岛分离纯化效果的影响

目的探讨提高小鼠胰岛分离纯化后数量和质量的适宜消化条件。方法通过胆总管逆行灌注胶原酶P溶液进行小鼠胰腺消化,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度和消化时间对胰岛分离结果的影响。结果胶原酶浓度和消化时间对小鼠胰岛分离效果有重要影响。在胶原酶P浓度为1.0 mg/ml、37℃消化25 min条件下,胰岛分离效果最佳。结论胶原酶浓度和消化时间影响小鼠胰岛分离结果,优化消化条件可提高胰岛分离数量和质量。     

海洛因依赖大鼠胰岛D细胞免疫组织化学研究

目的:探讨海洛因依赖对大鼠胰岛生长抑素(somatostatin,SS)免疫反应(IR)细胞(D细胞)的影响.方法:用免疫组织化学SABC单染法、形态计量法,观察海洛因依赖大鼠胰岛SS-IR细胞免疫组织化学反应及平均灰度值的变化.结果:与正常组和盐水对照组比较,海洛因依赖大鼠胰岛SS-IR细胞免疫染色增强,平均灰度值降低,差异有显著性.结论:胰岛SS-IR细胞参与了海洛因依赖期间机体的调节过程.     

健胰方通过调控胰高血糖素样肽-1表达改善糖尿病大鼠胰岛细胞功能的研究

【目的】从胰高血糖素样肽-1(GLP-1)合成、分泌和灭活3个环节探索健胰方影响GLP-1改善胰岛细胞功能的可能机制。【方法】采用高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)法诱导糖尿病模型大鼠,随机分为模型组、复方组与正常组,干预4周。快速血糖仪测定血糖,Luminex液相蛋白芯片技术测定血浆GLP-1和胰岛素(insulin)水平,实时荧光定量PCR检测胰腺组织胰岛—十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)m RNA表达,免疫组织化学法检测回肠L细胞合成GLP-1,酶联免疫法检测Ⅳ型二肽基肽酶(DPP-Ⅳ)。【结果】健胰方可显著降低糖尿病模型大鼠的空腹及糖负荷后血糖水平(P0.05),促进糖尿病大鼠血中胰岛素的分泌(P0.05),提高胰腺PDX-1 m RNA表达(P0.05),提高血浆GLP-1水平与回肠组织GLP-1阳性反应面积及累积光密度值(P0.05);但血清DPP-Ⅳ各组间比较无显著性差异(P0.05)。【结论】健胰方可能是通过调控GLP-1的合成与分泌,从而促进PDX-1基因表达和胰岛素分泌以降低糖尿病大鼠血糖水平的。     

糖尿病对大鼠外周神经形态结构的影响

通过定量分析大鼠坐骨神经的结构,观察糖尿病状态对外周神经的损害。将SD大鼠用四氧嘧啶腹腔注射诱发糖尿病模型后,非糖尿病大鼠及糖尿病大鼠随机分两组,饲养6个月后,在麻醉状态下,切取坐骨神经分别做光镜检查,包括：单神经外形频率分布,横截面细径分析,神经内膜毛细血管密度。电镜分析包括轴突,髓鞘,雪旺细胞的超微结构改变。结果表明,糖尿病大鼠组坐骨神经显示给旁脱髓鞘,节段性脱髓鞘,轴突萎缩,有髓纤维密度下降。糖尿病大鼠组糖代谢指标：血糖,山梨醇．糖基化血红蛋白水平显著高于非糖尿病对照组,神经内膜毛细血管密度两组无显著差异。提示：糖尿病状态可导致外周神经病变,病理机制可能是多因性的。     

国产加贝酯治疗大鼠实验性急性胰腺炎的实验研究

本实验观察了国产加贝酯对大鼠实验性急性胰腺炎的治疗效果,并与进口药品FOY及抑肽酶作了比较。结果表明国产加贝酯能提高急性胰腺炎大鼠的存活率;抑制病鼠血清淀粉酶、脂肪酶活性及尿素氨水平的升高;改善病鼠胰腺组织病变程度,减轻脂肪组织坏死。其疗效与FOY相同,优于抑肽酶。可为临床上一种治疗急性胰腺炎的新药。     

四氧嘧啶对大鼠胰岛B细胞损伤机理的实验研究

为探讨四氧嘧啶对大鼠胰岛B细胞的损伤机理,对11只大鼠于尾静脉一次性注射四氧嘧啶50mg/kg体重,以5只为对照。在注药前及注药后两周测其血糖浓度,并对胰腺组织作光、电镜检查。结果发现,注药后血糖明显高于注药前(P<0.01)。光镜下见注药组胰岛数目少,胰岛细胞数锐减,残存者多固缩变性。电镜下见残存B细胞膜模糊不清;核染色质边集成块,核周间隙变宽;线粒体肿胀,嵴断裂空化及出现多数电子致密颗粒;分泌颗粒变型、变小、变少及至形成吞噬性溶酶体;内质网扩张成池并脱颗粒等变化。     

奥曲肽对链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠胰岛功能的影响

目的探讨奥曲肽对糖尿病大鼠胰岛功能的影响。方法选用雄性SD大鼠32只,腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病大鼠模型。分4组（每组8只）,分别予奥曲肽（DA组）、胰岛素（DI组）、奥曲肽加胰岛素（DAI组）、生理盐水（DC组）治疗4周。另8只同龄SD大鼠一次性腹腔注射相应剂量的柠檬酸钠缓冲液,作为正常对照（NC）组。分别测定治疗前后空腹及糖耐量2 h血糖、血浆胰高血糖素、胰岛素和C肽。结果治疗前,糖尿病各组血浆胰高血糖素较NC组显著升高、血浆胰岛素和C肽显著降低（均P〈0.001）。治疗后,DA组和DAI组的2 h血糖均较治疗前显著下降（P〈0.01或〈0.001）;DAI组的2 h血糖均比DA组和DI组明显降低（均P〈0.05）。DA组和DAI组的空腹及2 h血浆胰高血糖素均较治疗前明显下降（P〈0.05或〈0.01）。DA组的空腹及2 h血浆C肽明显高于DC组（P〈0.001或〈0.05）。胰岛素结果类似于C肽。结论奥曲肽可降低STZ诱导的糖尿病大鼠的餐后高血糖和高胰高血糖素水平,改善胰岛A细胞功能;并可使“B细胞休息”,保护胰岛B细胞。