绞股蓝总皂甙对原代培养大鼠肝细胞四氯化碳损伤的影响

采用四氯化碳(CCl_4)制成原代培养大鼠肝细胞损伤模型,观察了绞股蓝总皂甙(GPS)对肝细胞损伤的保护作用。结果表明,预先用 GPS 处理肝细胞 lhr,可明显减轻 CCl_4引起的肝细胞 DNA 合成速率降低,减少肝细胞 ALT 逸出,抑制培养上清液中 MDA 含量的升高和 SOD/MDA 比值的缩小,并与 GPS 浓度呈依赖关系。提示 GPS 能减轻 CCl_4对离体培养的大鼠肝细胞损伤,保护肝细胞 DNA 合成,其作用机理与抗脂质过氧化有关。     

三种胃肠肽对四氯化碳损伤原代培养肝细胞的保护作用

目的 研究表皮生长因子（EGF）、神经降压素（NT）、降钙素基因相关肽（CGRP）对四氯化碳（CCl4)损伤原代培养肝细胞的保护作用。方法 建立大鼠离体培养肝细胞损伤模型，设对照组、损伤组及不同浓度胃肠肽预处理组（胃肠肽提前1h加入），24h后测上清液酶水平、肝细胞SOD活性和MDA（丙二醛）含量，以台盼蓝染色试验计算肝细胞存活率，观察形态学变化。结果 EGF、NT明显降低原代培养肝细胞CCl4损伤后上清液酶学水平、MDA含量，提高SOD活性和细胞存活率（P＜0．01），改善形态学变化。CGRP对上述指标和形态学改变无明显影响。结论 EGF、NT对离体培养肝细胞CCl4损伤有直接保护作用，而CGRP无此作用。EGF、NT可能是通过稳定生物膜、抗脂质过氧化起作用的。     

HSS,EGF对CCl4肝细胞损伤作用的研究

本文通过传代肝细胞株BRL体外培养，观察肝细胞再生刺激因子（HSS）、表皮生长因子（EG）对CCI4毒染细胞的保护作用，并了解两者的联合作用。材料与方法（--）CC。直接损伤作用观察：按常规消化培养传代肝细胞株BRL（上海市中科院细胞所提供），调整细胞浓度至IX10’／ml，加人     

氟对原代培养大鼠肝细胞的氧化损伤作用研究

目的探讨氟对原代培养大鼠肝细胞的氧化损伤作用。方法采用半原位酶消化法分离大鼠肝细胞，氟化物染毒24h后用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率，检测培养液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量。结果氟对大鼠肝细胞具有明显的毒性作用，表现为细胞存活率下降，ALT、AST的活性升高，MDA含量增加。结论脂质过氧化引起的氧化损伤作用是氟致原代培养大鼠肝细胞毒性的主要原因。     

益肝康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用及超微结构观察

目的探讨益肝康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞损伤的保护作用.方法采用40%CCl4皮下注射制备大鼠实验性肝纤维化模型,与秋水仙碱对照,观察益肝康对肝功能、肝脏组织病理变化和超微结构变化的影响.结果益肝康能明显改善实验性肝纤维化大鼠的肝功能,提高血清白蛋白(Alb)、减轻肝细胞脂肪变性和坏死.血清丙氨酸转氨酶(ALT)、Alb和血清球蛋白(Glb)的变化,与对照组比较差异有显著性意义(分别为P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05).益肝康组大鼠肝组织的脂肪变性程度较秋水仙碱组明显减轻,脂肪变性积分分别为2.00±1.36和2.75±0.65(P＜0.05);电镜观察表明益肝康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤具有保护作用.结论益肝康对CCl4损伤性肝细胞有保护作用,可改善肝功能,对线粒体等细胞器的损伤具有保护作用.     

益肝康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用及超微结构观察

目的 :探讨益肝康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞损伤的保护作用。方法 :采用 4 0 % CCl4 皮下注射制备大鼠实验性肝纤维化模型 ,与秋水仙碱对照 ,观察益肝康对肝功能、肝脏组织病理变化和超微结构变化的影响。结果 :益肝康能明显改善实验性肝纤维化大鼠的肝功能 ,提高血清白蛋白 (Alb)、减轻肝细胞脂肪变性和坏死。血清丙氨酸转氨酶 (AL T)、Alb和血清球蛋白 (Glb)的变化 ,与对照组比较差异有显著性意义 (分别为 P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。益肝康组大鼠肝组织的脂肪变性程度较秋水仙碱组明显减轻 ,脂肪变性积分分别为 2 .0 0± 1.36和 2 .75± 0 .6 5 (P <0 .0 5 ) ;电镜观察表明益肝康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤具有保护作用。结论 :益肝康对 CCl4 损伤性肝细胞有保护作用 ,可改善肝功能 ,对线粒体等细胞器的损伤具有保护作用     

Wy14643对缺氧复氧损伤原代大鼠肝细胞的保护作用及机制

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）选择性激动剂Wy14643对原代大鼠肝细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制。方法采用两步灌流法分离大鼠肝细胞并进行原代培养,将培养细胞随机分成6组：C组（正常组）、H/R组（缺氧复氧组）、D组（对照组）、Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组均在缺氧前2 h加入Wy14643（终浓度分别是10、30、100μmol/L）再行复氧处理。将肝细胞缺氧4 h、复氧10 h诱导细胞损伤,然后分别收集细胞培养上清液和肝细胞,测定上清液中谷丙转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）活性和细胞内谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性,MTT法测定肝细胞的存活率,电子显微镜观察肝细胞损伤情况。结果与C组比较,H/R组ALT、AST、MDA增高（P〈0.01）,SOD、GSH下降（P〈0.01）,细胞存活率降低（P〈0.01）。Wy14643处理后,肝细胞上清液ALT、AST活性降低,并且呈剂量依赖性（P〈0.01）;肝细胞内SOD、GSH活性增强（P〈0.05）,MDA含量降低（P〈0.05）;细胞存活率升高（P〈0.05）。电子显微镜显示H/R组肝细胞比C组损伤明显,Wy14643处理后损伤逐渐减轻。结论 Wy14643对肝细胞缺氧复氧损伤有保护作用,可能与提高肝细胞抗氧化能力有关。     

硒和维生素C对氟致大鼠肝细胞DNA损伤的影响

目的研究氟对大鼠肝细胞DNA的损伤作用以及硒和维生素C对氟致大鼠肝细胞DNA损伤的影响。方法氟(F)组、氟 硒(F Se)组、氟 维生素C(F VC)组分别用NaF 150mg／L、NaF 150mg／L Na2SeO2 5mg／L、NaF 150mg／L VC 1000mg／L喂养雄性SD大鼠4周，应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测肝细胞DNA的损伤率。结果F组肝细胞DNA损伤率(44．80％)明显高于对照组(9．40％)；而F Se组(12．60％)和F VC组(14．60％)的DNA损伤率明显低于F组，与对照组差异无显著意义。结论过量氟摄入可导致大鼠肝细胞DNA损伤，而适量的硒和维生素C对氟致DNA损伤有一定的拮抗作用。     

氟中毒对大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤的影响

目的：研究氟中毒对大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤的影响。方法：雄性SD大鼠饮用含150mg/L氟化钠(NaF)的蒸馏水溶液4周，用单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤。结果：氟中毒能明显诱导大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤，总损伤细胞百分率分别为50．20％和44．80％。结论：氟中毒能引起大鼠口腔粘膜细胞和肝细胞DNA损伤。     

表皮生长因子对大鼠肝细胞DNA合成的刺激作用——单克隆抗Brdu染色法及流体细胞学测定

本文应用单克隆抗溴脱氧脲嘧啶抗体染色法(抗Brdu)及流体细胞学测定等技术,对于表皮生长因子(EGF)、胰高血糖素和胰岛素对大鼠正常培养肝细胞及CCl_4诱导损伤的肝细胞DNA合成的刺激作用,进行了体外与体内研究。体外试验表明,当加入EGF后,DNA合成细胞的标记指数由对照组的0.075%提高到1.34%,当EGF与胰高血糖素及胰岛     

用流式细胞计检测表皮生长因子对肝细胞DNA合成的刺激作用

用流式细胞术和单克隆抗溴脱氧脲嘧啶抗体标记 DNA 技术检测了表皮生长因子、胰高血糖素和胰岛素对大鼠初代培养肝细胞 DNA 合成的刺激作用。结果表明表皮生长因子对肝细胞DNA 合成具有明显的增强作用,并且这种作用可以被胰岛素进一步加强。当表皮生长因子、胰岛素和胰高血糖素三者联合使用时,肝细胞 DNA 合成显著增强。提示表皮生长因子,特别是它与胰岛素和胰高血糖素联合使用可以明显刺激肝细胞的再生。     

L-精氨酸对糖尿病大鼠肝损伤的保护作用

目的探讨L-精氨酸(L-Arg)对糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用。方法给大鼠腹腔注射四氧嘧啶制备糖尿病模型,随机分为糖尿病组、L-Arg治疗组及正常对照组;用药4周末处死大鼠,检测肝细胞线粒体超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,肝组织细胞一氧化氮合酶(NOS)、Na -K -ATPase、Ca2 -ATPase活性以及NO含量。结果与正常组比较,糖尿病组大鼠肝细胞线粒体Mn-SOD、GSH-Px活性明显降低,MDA含量显著升高,肝组织细胞内NOS、Na -K -ATPase、Ca2 -ATPase活性明显降低;与糖尿病组比较,L-Arg治疗组大鼠肝细胞线粒体Mn-SOD、GSH-Px活性明显升高,且肝组织细胞内NOS、Na -K -ATPase、Ca2 -ATPase活性及NO含量显著升高。结论L-Arg对糖尿病大鼠肝脏损伤具有一定的保护作用。     

肝再生刺激因子、胰岛素和胰高血糖素对体外肝细胞增殖的作用

本研究采用体外细胞培养分组对比法检测肝再生刺激因子（HSS），胰岛素或／胰高血糖素对大鼠原代培养肝细胞和人肝肿瘤细胞株HEPg2DNA合成（肝细胞再生）的作用。结果发现，HSS无论对大鼠肝细胞成人肝肿瘤细胞均具有较强的刺激DNA合成的作用（与对照组相比分别增加1．14和1．05倍，P＜0．01）。而对人纤维母细胞则无促进DNA的合成的作用。低浓度胰岛素或／和胰高血糖素对肝细胞DNA合成无作用。高浓度胰岛素（10^-5M)具有中等度促进肝再生的作用（与对照组相比增加40％，P＜0．05）。两者联合应用（G＋1）似无协同作用。据此，我们认为：HSS是一种潜在的促进肝再生的有效因素，可能具有临床实用价值。体外应用优于现在临床广泛应用的胰岛素加胰高血糖素（G＋I）疗法。     

γ-干扰素对四氯化碳诱导的大鼠损伤肝细胞DNA和胶原合成及Ⅳ型胶原a3链mRNA的影响

目的在四氯化碳诱导的大鼠原代肝细胞损伤模型的基础上,探讨γ-干扰素对损伤肝细胞DNA和胶原合成以及Ⅳ型胶原α3链mRNA的影响.方法利用3H-胸腺嘧啶核苷和3H-脯氨酸掺入量测定方法、逆转录PCR技术,观察γ-干扰素对四氯化碳诱导的大鼠损伤肝细胞DNA和胶原合成及Ⅳ型胶原α3链mRNA的影响.结果①低浓度的INF-γ对损伤肝细胞DNA的合成就有明显的抑制作用,5,10,25,50,100μ/mL浓度组抑制率分别达到19.89%,30.92%,38.24%,52.23%,65.54%,呈浓度依赖性.②低浓度的INF-γ对损伤肝细胞胶原的合成也有明显的抑制作用,5,10,25,50,100μ/mL浓度组抑制率分别达到21.16%,35.71%,47.45%,61.40%,71.36%,呈浓度依赖性.③逆转录PCR发现从浓度(5～100)μ/mL的INF-y作用损伤肝细胞Ⅳ型胶原α3链其mRNA含量逐渐减少.结论γ-干扰素抗肝纤维化作用的机制之一是能抑制损伤肝细胞的增殖及胶原合成.     

γ-干扰素对四氯化碳诱导的大鼠损伤肝细胞DNA和胶原合成及Ⅳ型胶原03链mRNA的影响

目的在四氯化碳诱导的大鼠原代肝细胞损伤模型的基础上,探讨γ-干扰素对损伤肝细胞DNA和胶原合成以及Ⅳ型胶原α3链mRNA的影响.方法利用3H-胸腺嘧啶核苷和3H-脯氨酸掺入量测定方法、逆转录PCR技术,观察γ-干扰素对四氯化碳诱导的大鼠损伤肝细胞DNA和胶原合成及Ⅳ型胶原α3链mRNA的影响.结果①低浓度的INF-γ对损伤肝细胞DNA的合成就有明显的抑制作用,5,10,25,50,100μ/mL浓度组抑制率分别达到19.89%,30.92%,38.24%,52.23%,65.54%,呈浓度依赖性.②低浓度的INF-γ对损伤肝细胞胶原的合成也有明显的抑制作用,5,10,25,50,100μ/mL浓度组抑制率分别达到21.16%,35.71%,47.45%,61.40%,71.36%,呈浓度依赖性.③逆转录PCR发现从浓度(5～100)μ/mL的INF-y作用损伤肝细胞Ⅳ型胶原α3链其mRNA含量逐渐减少.结论γ-干扰素抗肝纤维化作用的机制之一是能抑制损伤肝细胞的增殖及胶原合成.     

大蒜素对高脂饮食致大鼠肝慢性损伤的影响

目的观察大蒜素对高脂饮食致大鼠发生肝脏慢性损伤时,大鼠肝功能及肝组织病理形态学的变化。方法以高脂饮食复制大鼠慢性肝损伤组模型,大蒜素分别按大剂量（1 ml/kg）、小剂量（0.5 ml/kg）灌胃给药。分别于4周、8周、12周末腹主动脉采血测定血浆丙氨酸氨基转移酶（ALT）,取肝组织用于组织病理切片的制备及丙二醛（MDA）及甘油三脂（TG）水平的检测。结果大蒜素可降低血清ALT、肝脏MDA及4周末TG水平;减轻肝细胞脂肪变性或炎症细胞的浸润。结论大蒜素对高脂饮食致大鼠肝慢性损伤有明显保护作用。     

中药抗肝纤维化的细胞机制

1 降低肝细胞胶原合成,减轻肝细胞坏死,保护肝细胞功能,清除肝纤维化诱因 肝细胞既能合成胶原基质,也是非胶原基质纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的主要细胞来源。采用原位杂交方法观察,新分离的和原代培养的肝细胞内含有胶原及前胶原mRNA,CCI_4损害的大鼠肝细胞内也有Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原mRNA合成。     

缺血后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨缺血后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法将75只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和缺血后处理组,建立大鼠肝脏局部缺血再灌注模型。检测大鼠血清、肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平,并行肝组织病理学和超微结构检查及免疫组化法检测内源性一氧化氮合成酶（eNOS）的表达。结果与缺血再灌注组相比,缺血后处理组血清ALT和AST水平及肝组织MDA明显降低（P＜0．01）,而SOD水平则显著升高（P〈0．01）;肝组织病理损伤减轻,在再灌注7min时IPO组肝组织eNOS蛋白表达比IR组增强。结论缺血后处理可通过抑制再灌注后氧自由基的过量生成和再灌注损伤保护激酶通路,从而减轻肝细胞损伤。     

14-3-3γ对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌损伤的保护作用

目的研究14-3-3γ在异丙肾上腺素(Iso)诱导的大鼠心肌损伤中的保护作用。方法构建pc DNA3.1~(-1)4-3-3γ重组载体,使用pc DNA3.1~(-1)4-3-3γ或pc DNA3.1对体外培养的H9c2(2~(-1))细胞进行转染。实验分为四组:pc DNA3.1~(-1)4-3-3γ+Iso损伤组,pc DNA3.1+Iso损伤组,Iso损伤组及空白对照组(未经任何处理细胞组)。Western印迹检测心肌细胞中14-3-3γ的表达情况;MTT法检测心肌细胞增长率;取培养液检测各组细胞丙二醛(MDA)含量变化和超氧化物歧化酶(SOD)活性变化;流式细胞法检测重组质粒转染对心肌细胞凋亡的影响。结果 Iso损伤使心肌细胞的MDA含量显著增加、SOD活性降低、细胞增长率降低、细胞凋亡增加,转染pc DNA3.1~(-1)4-3-3γ重组质粒后再进行Iso损伤,则MDA含量显著减少、SOD活性增高、细胞增长率增高、细胞凋亡减少(P0.05)。结论 14-3-3γ对Iso诱导的大鼠心肌细胞损伤有明显的对抗和保护作用。     

漏芦提取物对CCl_4诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用及机制探讨

目的观察漏芦提取物对CCl_4诱导大鼠原代肝细胞损伤的保护作用,并探讨其机制。方法将原代培养的大鼠肝细胞分为分为正常对照组、CCl_4损伤组及漏芦大、中、小剂量组。培养24 h以后,向漏芦大、中、小剂量组分别加质量浓度为5、2.5、1mg生药/ml的漏芦提取物,向其他组加等量RPMI-1640培养液;培养6 h,向CCl_4损伤组及漏芦大、中、小剂量组加入50%CCl_4-DMSO溶液(CCl_4终浓度为5 mmol/l),正常对照组加等量RPMI 1640培养液。继续培养6 h,检测各组细胞培养上清液中的天门冬氨酸转移酶(AST)、丙氨酸转移酶(ALT)、丙二醛(MDA)、谷光苷肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)。结果与正常对照组比较,CCl_4损伤组肝细胞培养上清液中ALT、AST水平明显升高(P均<0.01),SOD、GSH-Px活性显著降低(P均<0.01);与CCl_4损伤组,漏芦大、中、小剂量组肝细胞培养上清液中ALT、AST、DA水平明显降低(P均<0.05),SOD、GSH-Px活性显著增加(P均<0.05),且里一定剂量依赖性。结论漏芦提取对物CCl_4诱导的大鼠原代肝细...