99mTc标记抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体在实验性急性心肌损伤大鼠体内分布的研究

目的：研究^99mTc标记的抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体（AcTnIMA）在实验性急性心肌损伤大鼠体内的分布,探讨^99mTc-AcTnIMA是否可以作为心脏放射免疫显像剂。方法：实验组：20只急性心肌损伤大鼠注射^99mTc-AcTnIMA0.2mci,分别于注射后2、4、6、8h处死（每次5只）,取血液、肝、脾、肾、正常肌肉、肺和心脏,以计算每克组织放射性计数占总注入计数的百分比（ID%/g）及心-肺ID%/g比（HLR）。药物对照组：20只急性心肌损伤大鼠注射^99mTc标记的非特异性免疫球蛋白（N-IgG）0.2mci,处死方法同实验组。取肺及心脏,计算ID%/g及HLR;空白对照组：20只正常大鼠注射^99mTc-AcTnIMA0.2mci,处理方法同药物对照组。结果：急性损伤心肌对^99mTc-AcTnIMA为特异性摄取,摄取的高峰时间为4h。结论：^99mTc-AcTnIMA有望作为心脏放射免疫显像剂诊断急性心肌损伤。     

实验性心肌损伤大鼠血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的检测

目的应用抗人cTnI单克隆抗体检测大鼠血清cTnI。方法SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素8mg/kg,对照组大鼠注射等体积的生理盐水,4h后处死,观察心肌组织病理改变;应用2株抗人cTnI单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清cTnI。结果大鼠注射异丙肾上腺素后心肌呈散在局灶性病变,表现为心肌纤维呈波浪样改变,部分心肌纤维断裂,心肌间质内炎细胞浸润、水肿。血清cTnI(OD值)明显高于对照组大鼠(1.28±0.78∶0.30±0.22,P<0.01)。结论本实验建立了大鼠血清cTnI双抗体夹心ELISA方法。血清cTnI能反映大鼠心肌病理变化,可作为诊断大鼠心肌损伤的一个可靠指标。     

梗塞心肌摄取锝标抗心肌肌凝蛋白轻链mAb 99Tcm-AMLCA的影响因素

目的: 探讨注射锝标抗心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体(99Tcm-AMLCA)后不同时间,梗死时间和梗死区域对大鼠梗死心肌摄取99Tcm-AMLCA的影响. 方法: 大鼠静脉注射99Tcm-AMLCA 7.4 MBq,观察不同注射时间(2, 4, 8, 24 h),不同梗死时间(心梗后6, 12 h, 1～14 d)和不同梗死区域(梗死中央、周边的内层心肌和外层心肌)对梗死心肌/正常心肌发射性比的影响. 结果: 注射后2 h梗死心肌开始摄取99Tcm-AMLCA,梗死心肌/正常心肌发射性比是1.67±0.96, 4～8 h摄取逐渐增加,24 h达到高峰,梗死心肌/正常心肌发射性比是4.38±0.80. 心肌梗死后6 h～14 d,梗死心肌均有很强的99Tcm-AMLCA摄取,心梗后5 d摄取最强,梗死心肌/正常心肌发射性比是3.82±0.67;梗死中央区内层心肌的放射性摄取比值是4.52±0.60,外层心肌是3.32±0.58两者具有统计学显著意义(P<0.01). 结论: 急性心肌梗死大鼠梗死心肌特异性地摄取99Tcm-AMLCA迅速持久,不受心梗时间影响,梗死中央区内层心肌摄取最强,为99Tcm-AMLCA亲梗死心肌显像临床应用提供了实验依据.     

99mTC-5-FU免疫纳米粒在荷人胃癌SCID鼠模型体内的分布

目的 探索制备99mTc标记载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒(99mTc-5-FU-Ab-NPs)的方法,并观察99mTc-5-FU-Ab-NPs胃癌移植瘤模型体内的分布情况.方法 用改进的Schwarz方法对载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒进行99mTc标记,经SephadexG250柱分离纯化,用纸层析法测定标记率与放化纯度;ELISA法和免疫组化法测定标记物的免疫活性;经荷人胃癌鼠静脉注射99mTc-Ab-5-FU-NPs(实验组)及99mTc标记鼠源性多克隆IgG纳米粒(对照组),并于2、6 h行放射免疫ECT显像,用感兴趣区(ROI)技术获得实验组和对照组荷人胃癌鼠全身和肿瘤放射性计数及肿瘤与对侧正常组织(T/NT)的放射性比值;24 h显像后处死鼠,测定体内放射性分布,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及T/NT比值.高效液相色谱法检测两组鼠肿瘤组织和血液中5-FU的浓度.结果 制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs标记率为90%～95%,抗体的活性在标记前后无明显下降;荷人胃癌鼠放射免疫显像结果提示静脉注射99mTc-5-FU-Ab-NPs 2 h后肿瘤已显影,随时间延长到6 h更清晰,2和6 h肿瘤组织ID%/g均显著高于对照组;6 h时实验组肿瘤组织ID%/g和肿瘤与血液的放射性比值较2 h时升高;同时,实验组肿瘤组织中5-FU浓度随着时间延长呈持续升高且与对照组5-FU浓度相比有显著性差别.结论 本研究制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs能较好地满足放射免疫显像的要求;抗VEGF单克隆抗体的免疫导向作用可靠,注射后6 h,99mTc-5-FU-Ab-NPs在肿瘤组织中有相对较高的特异性浓聚.     

牛心肌肌钙蛋白Ⅰ的提纯

心肌肌钙蛋白 (c Tn )是心肌的结构蛋白 ,具有高度的心肌组织特异性 ,但缺乏种属特异性。 c Tn 现被证明是诊断急性心肌损伤疾病最特异、最敏感的血清标志物之一 ,可以为心肌损伤疾病的早期诊断提供依据。本研究借鉴国外文献资料 ,旨在从牛心肌组织中快速提纯 c Tn ,获得高活性、高纯度、结构完整的免疫原 ,为进一步研制 c Tn 单克隆抗体奠定基础。1　材料和方法1.1　材料　新鲜小牛心脏 (- 2 0℃保存 1～ 6个月 )。1.2　肌钙蛋白 C(Tn C)的纯化 [1 ] 　 2 0 0 g牛心室肌剪碎 ,A液 (5 0 mmol/ L Tris- HCl p H 7.5 ,0 .1m ol/ L KCl…     

急性心肌损伤后大鼠臂旁核外侧亚核c-fos和GFAP的表达变化

目的观察急性心肌损伤后大鼠臂旁核外侧亚核神经元和星形胶质细胞的反应。方法30只大鼠心肌内注射福尔马林造成急性心肌损伤,另30只大鼠注射生理盐水作为对照,分别在1h、2h、4h、8h、24h和72h不同时间各取5只大鼠延髓组织,免疫荧光染色观察臂旁核外侧亚核中c-fos阳性和神经胶原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的反应情况。结果急性心肌损伤后1h,大鼠臂旁核外侧亚核c-fos阳性神经元表达显著升高,2h达峰值,然后开始下降,但各时点仍高于对照组(P<0.05)。急性心肌损伤后4hGFAP阳性星形胶质细胞荧光强度明显增强,24h达高峰然后下降,但仍高于对照组(P<0.05)。结论急性心肌损伤后,大鼠臂旁核外侧亚核中神经元和星形胶质细胞先后被激活,参与心肌损伤后疼痛的中枢调控。     

99mTc-EGFR-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像研究

目的:评价99mTc标记的表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体(Monoclone antibody,McAb)用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像(Radioimmunoimaging,RII)效果,并进行相关比较分析.方法:①建立荷人肺腺癌裸鼠动物模型;②采用99mTc直接标记法标记抗EGFR的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;③利用99Tc-EGFR-McAb进行荷人肺腺癌裸鼠模型的RII及体内分布研究.结果:99mTc对EGFR-McAb的标记率为91.5%±3.8%,标记抗体比活度为(2.8±0.2)MBq/μg,放射化学纯度为96.5%±3.2%.放射免疫显像结果显示,99mTc-EGFR-McAb对肿瘤组织有较高的亲和性,通过感兴趣区(Regional interest,ROI)技术测得T/NT比值为2.74±0.5,明显高于对照组(P＜0.05).标记抗体的体内分布结果与显像结果基本一致.结论:99mTc-EGFR-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的靶/非靶比值,EGFR是肺腺癌放射免疫显像研究值得推荐的目标抗原.     

挤压伤大鼠模型早期心脏损伤及其与心脏内皮素、心钠素、心肌肌钙蛋白Ⅰ的关系

目的观察挤压伤大鼠早期心电图及心脏内皮素- 1( ET- 1)、心钠素( ANP),血清 ANP及心肌肌钙蛋白 I( cTnI)的动态变化.方法:复制挤压伤大鼠动物模型,标准Ⅱ导联记录心电图,化学发光法检测血清 cTnI水平 ,放射免疫法检测血清 ANP和心脏组织 ET- 1、 ANP含量.结果挤压伤后大鼠心电图 ST段明显抬高,心率显著下降,同时,心脏 ET- 1、 ANP含量明显下降,血清 ANP、 cTnI则明显升高,这些变化持续 24 h以上.结论挤压伤大鼠早期存在心肌细胞损伤,这种损伤可能有 ET- 1、 ANP的参与.     

^99mTc标记抗人喉癌单克隆抗体在荷人喉癌裸鼠模型体内的分布研究

目的 :探索99mTc标记抗人喉癌单克隆抗体 (McAb -Lc)的方法 ,观察99mTc-McAb -Lc在喉癌移植瘤模型体内的分布情况。方法 :应用改良Schwarz法进行99mTc标记McAb -Lc,用γ计数仪测定放射强度 ,计算肿瘤和非肿瘤组织的单位质量摄取放射性活度的百分比 (ID % g)和肿瘤与非肿瘤组织的放射性比值 (T NT)。结果 :改良Schwarz法制备的99mTc -McAb -Lc无毒、无菌、无热原 ,性质稳定 ,标记率在 90 %～ 95% ,抗体的活性在标记前后无明显改变。注射99mTc -McAb -Lc后 ,各时相肿瘤组织ID % g均显著高于注射99mTc-鼠IgG对照组 (P≤ 0 .0 0 3) ,注射99mTc -McAb -Lc后 2h和 6h ,肿瘤组织ID % g和肿瘤与血液的放射性比值 (T B)分别从 4.56± 0 .51、1 .0 3± 0 .1 7增加到 7.84± 1 .46和 1 .84± 0 .30 ,差异有高度显著性 (P≤ 0 .0 0 5)。结论 :改良Schwarz法制备的99mTc -McAb -Lc ,能较好地满足放射免疫显像 (RII)的要求 ,McAb -Lc的免疫导向作用可靠 ,注射后 6h ,99mTc -McAb -Lc在肿瘤组织中有相对较高的特异性浓聚。     

大鼠心肌急性高原性损伤特征的形态学观察

本实验将大鼠由近海平面区在10天内携往高原,通过对其心脏标本的光,电镜观察,提出以(1)右心室为主的全心性损伤(2)心肌细胞混浊肿胀,空泡变性,溶解坏死,间质水肿及(3)心肌细胞膜系统改变,收缩成份破坏,细胞内外水肿和糖元颗粒减少等分别为急性高原性大鼠心肌损伤的组织学及超微结构特征。