大脑中动脉阻塞大鼠MMP-9基因表达及补阳还五汤对其影响

目的：探讨脑缺血再灌后血脑屏障(blood brain barrier，BBB)通透性、金属基质蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)基因表达的变化，及补阳还五汤对其影响。方法：采用大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型，设假手术组、模型组和模型 补阳还五汤组，于再灌1h、3h、24h、48h、5d测定。结果：模型 补阳还五汤组BBB通透性及MMP-9mRNA较模型组表达降低。结论：补阳还五汤可以保护BBB，其作用可能和抑制MMP-9在缺血脑组织中的表达有关。     

补阳还五汤对阿尔茨海默病小鼠血脑屏障通透性的影响

目的探讨补阳还五汤对阿尔茨海默病小鼠血脑屏障通透性的影响及其机制。方法雄性小鼠随机分成对照组、模型组、治疗组(吡拉西坦0.62g·kg-1·d-1)、补阳还五汤高剂量组(37.06g·kg-1·d-1)、补阳还五汤中剂量组(18.53g·kg-1·d-1)、补阳还五汤低剂量组(9.26g·kg-1·d-1),连续治疗28d后取材。检测小鼠脑组织含水量、EB含量。采用双抗体夹心法测定脑组织IL-6水平。结果与对照组比较,模型组小鼠脑组织含水量、EB含量和IL-6含量明显升高(P0.05);与模型组比较,补阳还五汤组脑组织含水量、EB含量和IL-6含量明显降低(P0.05)。结论补阳还五汤可以有效降低阿尔茨海默病模型小鼠血脑屏障破坏的程度。     

通腑法开通玄府对大鼠脑缺血再灌注损伤血脑屏障及脑组织水通道蛋白4 mRNA的影响

目的 研究通腑醒神胶囊(简称TFXSJN)通腑法开通玄府对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,简称MCAO)再灌注损伤模型血脑屏障(blood brain barrier,简称BBB)通透性及脑组织水通道蛋白4(Aquaporin-4,简称AQP4)mRNA表达的影响.方法 采用线栓法制作大鼠MCAO模型,2 h后拔线造成缺血再灌注损伤.大鼠处死前2 h经股静脉注射伊文思蓝(Evans Blue,简称EB)并测量各组大鼠1,3 d及7 d时脑EB含量,以及拔线后12 h,1,2,3 d及7 d时间点大鼠神经行为评分、脑组织AQP4mRNA的表达水平.结果 TFXSJN治疗后能明显减轻大鼠在1,2,3d及7 d时的神经功能评分,与模型组相比有明显差异(P<0.05或P<0.01);造模后TFXSJN组、模型组脑EB含量在1,3,7 d时均明显高于假手术组(P＜0.05),1 d时开始升高,3 d时达高峰,7 d时有所下降,但仍高于正常,其中3 d时TFXSJN组EB含量明显低于模型组(P＜0.05),1,7 d时TFXSJN组EB含量均数亦低于模型组,但无统计学意义(P>0.05);TFXSJN组及模型组大鼠脑组织损伤侧AQP4mRNA的表达在12 h时已经明显升高,与健侧、假手术组及正常组相比均具有显著性差异(P<0.01);模型组在3 d时达高峰,TFXSJN组在2 d时达高峰,3 d时已有所下降,与模型组损伤侧相比有明显差异(P<0.05),但仍高于健侧(P<0.05).7 d时两组损伤侧的AQP4 mRNA表达水平基本恢复正常,与健侧、假手术及正常组相比无明显差异(P>0.05).假手术组在各时点内其损伤侧AQP4 mRNA表达水平与健侧及正常组相比均无明显差异(P>0.05).结论 脑急性缺血再灌注损伤时存在BBB通透性的增高和AQP4 mRNA基因表达的上调.而TFXSJN通腑法开通玄府法能够调节缺血再灌注损伤后BBB通透性增高与AQP4 mRNA表达的失衡,减轻缺血再灌注损伤,从而起到神经保护作用.其调节BBB通透性与AQP4mRNA基因的异常表达可能是通腑法开通玄府治疗缺血性中风的分子机制之一.因此推测玄府与BBB及细胞膜上通道蛋白(如AQP4等)之间可能存在共同的实质内涵.     

补肾祛痰活血汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织BBB及VEGF的影响

目的:探讨补肾祛痰活血汤对SD大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障(BBB)通透性及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、治疗组、对照组;治疗组予补肾祛痰活血汤干预,对照组予消栓通络胶囊干预,正常组、模型组、假手术组予相应量的生理盐水。术前3 d灌胃给药干预,在造模后72 h,评估血脑屏障对伊文思蓝(EB)的通透性,测定SD各组大鼠脑组织含水量的变化,检测血清血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果:在造模后72 h,模型组、治疗组、对照组SD大鼠脑组织中EB含量、脑组织含水量均高于正常组、假手术组;模型组SD大鼠脑组织中EB含量、脑组织含水量均高于对照组;对照组SD大鼠脑组织中EB含量、脑组织含水量均高于治疗组;脑组织EB含量及含水量与脑组织损伤程度相关。缺血再灌注模型组SD大鼠血清VEGF高于正常组、假手术组,治疗组高于对照组,对照组高于模型组(P0.01)。结论:补肾祛痰活血汤能抑制脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障破坏,减轻脑组织水肿,减轻缺血再灌注脑组织损伤,可促进局灶性脑缺血再灌注后VEGF的表达。     

补阳还五汤联合MSCs移植对TIMP-1干预后MCAO模型大鼠凝血Ⅷ因子的影响

目的:揭示补阳还五汤联合MSCs移植对大脑中动脉栓塞再灌注大鼠模型((MCAO))抗凝血、促进血管新生的机理。方法:采用TIMP-1对模型进行干预,侧脑室给予MSCs,联合补阳还五汤灌胃,采用免疫组化法检测凝血因子Ⅷ的表达。结果:联合补阳还五汤联合MSCs移植组能够降低缺血区凝血因子Ⅷ数量,12 h、24 h最为明显,与模型组、抑制剂组、单纯MSCs组相比,有极显著性差异(P0.01);至36 h时有一定升高,与其他组相比,无显著性差异(P0.05),随后表达Ⅷ因子数量又开始下降,至48 h时,与模型组、抑制剂组相比,有显著性差异(P0.05),与单纯MSCs组相比,无显著性差异(P0.05)。结论:补阳还五汤联合MSC移植,能够降低TIMP-1干预后脑缺血模型大鼠缺血脑组织Ⅷ因子数量,起到抗凝血,抑制血栓的形成。     

手十二井穴放血对pMCAO大鼠脑组织血脑屏障通透性的影响

目的观察手十二井穴放血对永久大脑中动脉栓塞(Permanent Middle Cerebral Artery Occlusion,p MCAO)大鼠局灶性脑缺血损伤早期脑组织血脑屏障(Blood-brain Barrier,BBB)通透性的影响。方法选用雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、模型组和放血组,用Longa法建立大脑中动脉栓塞模型后在5 h、24 h、72 h 3个时间点尾静脉注射2%伊文思蓝(Evans Blue,EB),通过测量提取脑组织中EB吸光度来评估EB的渗出量,以观察BBB的通透性。结果模型组大鼠脑组织EB渗出量要显著高于假手术组(P0.01),放血组大鼠的脑组织EB渗出量低于模型组(P0.01)。结论手十二井穴刺络放血可以降低pMCAO大鼠血脑屏障通透性,其效果在缺血后24 h和72 h均极为显著。     

醒脑静注射液对大鼠脑出血模型血脑屏障通透性及相关蛋白的影响

目的 观察醒脑静注射液对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠血脑屏障通透性及其相关蛋白表达的影响。方法 将27只雄性SD大鼠随机分为假手术组9只和模型组18只,采用右侧尾状核微量注射胶原酶Ⅶ的方法制备大鼠脑出血模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组和醒脑静组,每组9只。连续给药3天后,采用伊文思蓝(evens blue,EB)法观察各组大鼠血脑屏障通透性;透射电镜观察脑组织的超微结构并分析计算星形胶质细胞足突的水肿面积;免疫组化法检测脑组织水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测脑组织AQP4、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白(tight junction protein,ZO-1)的表达。分别比较假手术组与模型组、模型组与醒脑静组血脑屏障的EB渗透程度、足突水肿面积以及血脑屏障相关蛋白的表达。结果(1)与假手术组相比,模型组大鼠脑出血后血脑屏障EB渗透性增加;与模型组相比,醒脑静组大鼠脑组织血脑屏障EB渗透性降低。(2)与假手术组相比,模型组大鼠脑组织中星形胶质细胞足突水肿面积明显增加,星形胶质细胞和血管内皮细胞结构明显被破坏,AQP4、VEGF蛋白表达升高(P 0. 05);与模型组相比,醒脑静组大鼠脑出血后脑组织水肿减轻,星形胶质细胞以及血管内皮细胞的结构有所改善,AQP4、VEGF蛋白表达显著降低(P 0. 05)。(3)与假手术组相比,模型组大鼠脑组织Occludin、ZO-1表达降低(P 0. 05);与模型组相比,醒脑静组大鼠脑组织Occludin、ZO-1蛋白表达升高(P 0. 05)。结论 醒脑静注射液可通过减轻星形胶质细胞足突水肿,改善血脑屏障结构和相关蛋白表达,降低血脑屏障通透性可能是其减缓脑出血后脑组织损伤的作用机制。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠水通道蛋白-4的调节作用

目的:探讨电针、脑水肿和水通道蛋白-4(AQP4)之间的变化关系。方法:选用健康SD雄性大鼠,阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO),制作缺血性脑水肿模型。动物分为正常对照组、模型组和电针处理组,每组大鼠36只。电针处理组电针“水沟”“百会”穴,0.8-1.0mA,疏密波,电针30min。用CV染色法测定脑水肿肿胀率,用IgG免疫组化法测定脑组织中的IgG来反映血脑屏障(BBB)的通透性,采用免疫组化和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别观察AQP4蛋白和mRNA在脑组织中表达的变化。结果:MCAO12h后,模型组脑水肿所引起的缺血侧脑半球开始肿胀,IgG开始外渗,AQP4蛋白和mRNA的表达开始上升,随着梗塞时间的延长,肿胀和外渗逐渐加重,AQP4的表达进一步增多,在72h均达到高峰。而电针能够明显减轻脑水肿所引起的缺血侧脑半球的肿胀,减少IgG外渗,降低AQP4蛋白和mRNA的表达。结论:电针可减轻脑缺血后脑水肿肿胀率,同时改善BBB的损伤程度。电针的这种保护作用可能与AQP4表达下调有一定的关系。     

“活血开窍汤”对MCAO模型大鼠血脑屏障通透性的时效性影响

[目的]探讨"活血开窍汤"不同给药时间对大脑中动脉梗死(MCAO)模型大鼠神经功能恢复及血脑屏障的时效性影响。[方法]将48只MCAO模型Wistar大鼠随机分为模型组及活血开窍汤治疗组(Ⅰ组:造模后2 h给药组;Ⅱ组:造模后24 h给药组;Ⅲ组:造模后48 h给药组),每组12只,另有12只大鼠作为假手术组。采用Zealonga评分法观察各组大鼠神经功能缺损情况,取材前2 h于尾静脉注射伊文思蓝(EB)溶液以观察各组大鼠血脑屏障(BBB)的通透性,免疫组化法观察各组大鼠脑组织Claudin-5蛋白含量情况。[结果]各治疗组大鼠神经功能较模型组均有改善,且差异具有统计学意义(P0.05)。活血开窍汤Ⅱ、Ⅲ组大鼠脑缺血侧纹状体EB含量低于模型对照组(P0.05),Claudin-5蛋白含量相对较高(P0.05)。而活血开窍汤Ⅰ组与模型对照组相比,活血开窍汤Ⅱ组与Ⅲ组相比,差异均无统计学意义(P0.05)。[结论]活血开窍汤可通过减轻BBB通透性,减少Claudin-5蛋白的破坏从而保护MCAO大鼠血脑屏障,但在急性期对BBB的保护作用并不十分明显,且尚不能证明在非急性期越早给予活血开窍汤对BBB的保护作用就越显著。     

补阳还五汤联合间充质干细胞移植对脑缺血再灌注损伤大鼠bFGF mRNA表达的影响

目的探讨补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血损伤的神经保护机制。方法将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、MSCs移植组(MSCs组)、补阳还五汤联合MSCs移植组(联合组),每组12只。建立局灶性脑缺血再灌注模型,MSCs组、联合组从尾静脉注入MSCs,联合组并给予补阳还五汤,给药10天后检测碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达情况。结果 MSCs组与联合组均能上调大鼠脑组织bFGFmRNA表达水平,与模型组和假手术组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),联合组表达明显高于MSCs组(P<0.05)。结论补阳还五汤联合MSCs移植能通过上调脑组织bFGFmRNA表达水平,促进内源性神经营养因子bFGF基因表达而起对脑缺血再灌注损伤起保护作用。     

针刺配合推拿治疗痛经33例

痛经是指妇人在行经前后或月经期,出现周期性小腹疼痛或痛引腰骶、甚则剧痛难忍,或伴有手足厥冷、面色苍白、身冷汗出等证.在临床上笔者采用针刺配合推拿治疗本病33例,取得了较好的疗效,现总结如下:     

针药并用治疗痛风28例

痛风是一组嘌呤代谢紊乱所引起的疾病，因为嘌呤代谢的终末产物是尿酸，若尿酸生成增多或排泄减少，导致血液中尿酸浓度增加，引起高尿酸血症伴痛风性急性关节炎反复发作，过多的尿酸沉积可形成痛风石，并引起关节软骨的退行性病变，发展成为足母趾、跖趾关节僵肿畸形。近年来，由于人们生活水准不断提高，痛风的发病率逐年增多，笔者采用针药并用治疗痛风获得满意疗效，现报告如下。     

针药结合治疗偏头痛临床疗效观察

偏头痛是临床常见的自觉症状，是一类有家族发病倾向的周期性发作疾病，发病率高，易于反复。临床主要表现为发作性偏侧搏动性头痛，伴恶心、呕吐、出汗等症状。近年来笔者依据裘昌林主任医师的临床经验采用针刺与中药结合治疗偏头痛6l例，取得颇好疗效，现报告如下。     

针刺中药并用治疗贫血45例

目的:观察针刺配合中药治疗贫血的疗效.方法:随机抽取单纯中药组,张针刺中药并用组各45例,进行疗效分析.结果:针药并用组临床显效率37.8%,总有效率93.4%,单用中药组显效率22.2%,总有效率68.9%,针药并用组总有效率明显优于单纯中药组(P＜0.05).结论:针刺中药并用治疗贫血,优于单纯中药治疗.     

针药结合治疗冠心病心绞痛35例

冠心病心绞痛是心内科的常见病、多发病,临床多以心前区闷痛为主。笔者采用针药并用治疗冠心病心绞痛取得满意疗效,现报道如下。1临床资料1·1一般资料69例患者均为住院患者,其中男性36例,女性33例;年龄最小39岁,最大75岁;平均年龄61岁。将患者随机分为针刺加药物组35例,其中男     

针刺配合牵引治疗颈椎病120例

目的：寻找治疗颈椎病的有效方法。方法：将240例颈椎病患者按就诊时间随机分为2组，即针牵组采用针刺加牵引治疗；针刺组采用单纯的针刺治疗。结果：两组的总有效率分别为100％和77．6％，经统计学处理，针牵组疗效明显优于针刺组（P〈0．01）。结论：针刺配合牵引治疗颈椎病具有协同作用。     

针刺火罐综合疗法治疗少儿咳嗽100例

咳嗽是少儿肺部疾患中的一种常见证候，好发于春秋两季，由于少儿年龄小、体质弱，抵抗力比较低，易患外感咳嗽。笔者采用针刺火罐综合疗法治疗本病，取得了满意的治疗效果。现汇报如下。     

针刺联合牵引治疗颈椎病39例

目的:观察针刺穴位联合颈椎牵引治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法:选取2012年5月—2014年6月本院78例颈椎病患者为研究对象,随机分为对照组和观察组各39例。观察组患者采用针刺穴位联合颈椎牵引治疗,对照组患者采用常规针刺穴位治疗,10 d为1个疗程,两组患者均治疗3个疗程,观察治疗后两组患者临床疗效,治疗前后症状积分、血清TNF-α水平。结果:观察组有效率为94.87%,对照组有效率为82.05%,两组有效率比较有统计学差异(χ2=6.2158,P0.05);两组患者治疗后SF-MPQ评分、TNF-α水平均显著降低(P0.05),但组间比较无统计学意义(P0.05)。结论:针刺结合牵引治疗神经根型颈椎病疗效显著。     

针刺配合推拿治疗乳癖42例

乳癖是指妇女乳房部常见的慢性良性肿块,以乳房肿块和胀痛为主症,常见于青壮年妇女,相当于现代医学"乳腺小叶增生".在临床上笔者采用针刺配合推拿疗法治疗本病42例,取得较好疗效,现报道如下.     

通窍鼻炎颗粒联合布地奈德治疗鼻窦炎97例

目的:观察通窍鼻炎颗粒联合布地奈德治疗鼻窦炎的临床疗效。方法:选取鼻窦炎患者194例,按照随机数字表法分为联合组和常规组,每组97例。常规组给予布地奈德治疗,联合组在常规组治疗的基础上给予通窍鼻炎颗粒治疗。结果:联合组治疗后VAS评分均优于常规组(P0.05);两组治疗后IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、TNF-ɑ均低于治疗前(P0.05),且联合组IL-10、TNF-ɑ优于常规组(P0.05);联合组有效率为95.88%,常规组有效率为85.57%,联合组优于常规组(P0.05)。结论:通窍鼻炎颗粒联合布地奈德治疗鼻窦炎临床疗效显著。