石斛合剂含药血清对高糖诱导小鼠足细胞损伤的保护作用

目的：探讨石斛合剂含药血清对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及作用机制。方法：体外培养小鼠肾小球足细胞(MPC5),筛选高糖造模浓度和时间及石斛合剂含药血清最佳给药浓度;将细胞分为正常组(5.5 mmol·L^-1葡萄糖+10%空白血清)、模型组(30 mmol·L^-1葡萄糖+10%空白血清)、石斛合剂含药血清组(30 mmol·L^-1葡萄糖+10%石斛合剂含药血清),铁死亡抑制剂(Fer-1)组(30 mmol·L^-1葡萄糖+10%空白血清+1μmol·L^-1 Fer-1)。采用试剂盒检测细胞中Fe²⁺、乳酸脱氢酶(LDH)水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞谷胱甘肽(GSH)、过氧化脂质(LPO)含量;荧光探针检测活性氧(ROS)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测足细胞中肾母细胞瘤基因-1(WT-1)、结蛋白(Desmin)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4) m RNA表达水平...     

糖肾宁对高糖诱导的足细胞损伤模型Rho/ROCK通路的影响

目的：基于Rho/ROCK信号通路研究中药糖肾宁对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。方法：高糖培养足细胞,以不同药物分组干预足细胞24 h,用罗丹明染色的鬼笔环肽法检测足细胞骨架,细胞免疫荧光检测足细胞标志蛋白Nephrin,Western Blotting检测RhoA、ROCK1、Nephrin蛋白的表达。比较不同药物或药物浓度对高糖诱导足细胞损伤模型的影响。结果：糖肾宁可改善足细胞骨架结构,下调高糖诱导的足细胞损伤模型中异常升高的RhoA和ROCK1蛋白表达,上调Nephrin表达。结论：中药糖肾宁可抑制高糖诱导的足细胞损伤模型RhoA/ROCK1信号通路,减轻足细胞骨架重构,改善足细胞损伤。     

固本化瘀通络法对糖尿病肾病炎症因子的影响

目的观察中药固本化瘀通络法对糖尿病肾病(DN)患者的蛋白尿及相关炎症因子的影响,从而改善DN患者病情,延缓疾病进展。方法选择2015年6月—2016年6月在成都中医药大学附属医院肾病科住院和门诊的DN患者共76例,根据Mogensen诊断分期标准,将纳入患者分为两组(DN1:Mogensen III期;DN2:Mogensen IV期)。所有患者在常规治疗基础上,均使用中药固本化瘀通络方治疗12周,观察治疗前后DN患者肾功能、24小时尿蛋白定量及超敏C反应蛋白(hs CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果治疗前DN2组的hs CRP、IL-6、TNF-α水平明显高于DN1组(P0.05),与治疗前比较,两组治疗后的炎症因子水平均明显降低(P0.05),两组患者经治疗后蛋白尿均明显减少,DN2组经治疗后肾功能有所改善,相关分析发现蛋白尿水平与hs CRP、IL-6水平正相关。结论中药固本化瘀通络法可抑制糖尿病肾病患者的炎症因子水平,改善体内的慢性炎症状态,从而减少蛋白尿、改善肾功能,延缓肾脏病情进展。     

黄芪多糖及丹酚酸对高糖诱导小鼠足细胞凋亡的影响

目的观察黄芪多糖与丹酚酸对高糖诱导的小鼠足细胞凋亡的影响。方法采用小鼠足细胞株,通过温度选择的培养方法诱导足细胞分化,分为正常对照组（5mmol/L）、甘露醇高渗对照组、高糖组、高糖＋黄芪多糖组、高糖＋丹酚酸组,分别于干预3h、6h、12h和24h后收集细胞;采用Annexin V-FITC和PI双染方法,用流式细胞仪观察各组足细胞的凋亡率。结果高糖组各时间点足细胞细胞凋亡率均高于同期正常对照组与高渗对照组（P〈0.01）;高糖＋黄芪多糖组、高糖＋丹酚酸组各时间点足细胞凋亡率均较高糖组降低（P〈0.05,P〈0.01）;高糖＋黄芪多糖组与高糖＋丹酚酸组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论高糖可诱导足细胞凋亡,黄芪多糖与丹酚酸对高糖诱导的足细胞凋亡均有抑制作用。     

黄芪甲苷抑制高糖诱导的足细胞凋亡作用及机制

目的：探讨黄芪甲苷（AS-IV）对高糖诱导的足细胞凋亡的作用及其机制。方法：条件性永生的小鼠足细胞分为正常糖组（NG）、高糖组（HG）、甘露醇高渗对照组（MA）及HG＋不同剂量（10、50、100 μg/mL）黄芪甲苷干预组（AS-IV）。流式细胞仪及Hoechst染色检测细胞凋亡;荧光探针CM-H2-DCF-DA标记细胞检测活性氧（ROS）水平;Western印迹检测足细胞p38-MAPK活性。结果：高糖促进足细胞ROS的产生并引起足细胞凋亡,AS-IV明显抑制高糖诱导的ROS的产生及足细胞凋亡,且呈剂量依赖关系。此外,高糖激活p38-MAPK信号通路,AS-IV呈剂量依赖性抑制p38-MAPK活性。结论： AS-IV能减少高糖所致的足细胞凋亡,其机制可能与AS-IV抗氧化及抑制p38-MAPK活化密切相关。     

白藜芦醇对高糖诱导足细胞损伤的改善作用及机制探讨

[目的]观察白藜芦醇(RSV)对高糖诱导足细胞凋亡的影响及作用机制。[方法]采用体外高糖诱导作为足细胞损伤模型,细胞分为3组:对照组为5 mmol/L低糖培养液(LG);模型组为30 mmol/L高糖培养液(HG);RSV干预组:HG+5μmol/L RSV;HG+10μmol/L RSV,培养48 h后采用流式细胞术检测足细胞的凋亡情况;DHE探针观察细胞内活性氧自由基(ROS)生成;激光共聚焦检测线粒体膜电位及线粒体内ROS合成;Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、caspase 9的表达情况。[结果]与HG组相比,RSV可呈剂量依赖性的抑制高糖诱导的足细胞凋亡;荧光探针结果显示,RSV干预后细胞内及线粒体ROS生成明显低于HG组;JC-1染色显示,与HG组相比,RSV干预可显著提高线粒体膜电位;Western blot结果显示,随RSV干预浓度的提高,caspase 3、caspase 9表达水平明显下调,差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]RSV呈浓度依赖性的抑制高糖诱导的足细胞凋亡,其保护作用可能与抑制氧化应激,改善线粒体功能障碍相关。     

保肾通络方含药血清对高糖培养下足细胞p38通路及凋亡的作用研究

目的探讨保肾通络方含药血清对于高糖培养下足细胞p38通路及凋亡的作用。方法足细胞分为正常对照组、高糖组、保肾通络方含药血清低、中、高剂量组。CCK-8法检测各组足细胞活力,WB检测足细胞P-p38及p38蛋白表达,免疫荧光、RT-PCR检测足细胞凋亡相关蛋白caspase-3蛋白及mRNA表达,Hochest33258染色检测足细胞凋亡情况。结果与正常对照组相比,高糖组足细胞活力明显降低(P <0.05),与高糖组相比,保肾通络方含药血清组细胞活力明显升高(P <0.05)。与正常对照组相比,高糖组足细胞P-p38蛋白表达明显上调(P <0.05),与高糖组相比,保肾通络方含药血清组P-p38蛋白表达明显下调(P <0.05)。与正常对照组相比,高糖组足细胞caspase-3蛋白及mRNA表达明显上调(P <0.05),与高糖组相比,保肾通络方含药血清组足细胞caspase-3蛋白及mRNA表达明显下调(P <0.05)。与正常对照组比较,高糖组足细胞凋亡数目明显升高(P <0.05),与高糖组比较,保肾通络方含药血清组足细胞凋亡数目明显降低(...     

化瘀明目方含药血清对高糖诱导的HRMECs功能紊乱模型血管形成的作用及机制研究

目的 探究化瘀明目方含药血清对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞（Human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs）血管形成的影响及可能机制。方法 CCK-8法筛选合适的糖浓度和含药血清体积分数,建立单纯高糖因素诱导的HRMECs功能紊乱模型。将HRMECs分为6组,正常对照组予以正常ECM培养基（含5.5 mmol·L-1葡萄糖）+10%空白血清;甘露醇对照组、模型组在正常对照组基础上分别加入19.5 mmol·L-1甘露醇、19.5 mmol·L-1D-葡萄糖;化瘀明目方低、中、高剂量组在模型组基础上分别加入10%低、中、高剂量含药血清（不加空白血清）。克隆实验检测细胞集落形成数,Transwell实验检测细胞迁移数,管腔形成实验检测细胞成管数,免疫荧光实验、Western Blot实验和RT-PCR实验检测第八因子（FactorⅧ）、血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)、细胞分化因子（CD34）、血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白及mRNA表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组能够促...     

清热益气化瘀通络方对糖尿病肾病大鼠足细胞表型转化的作用

目的探讨清热益气化瘀通络方对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞表型转化即上皮-间质细胞转分化的作用。方法将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、糖尿病肾病组、清热益气化瘀通络组、厄贝沙坦组,每组10只。除正常组大鼠外,其余组大鼠均采用腹腔注射链脲佐菌素方法制作DN模型。造模成功后,清热益气化瘀通络组和厄贝沙坦组给予相应药物灌胃,正常组和糖尿病肾病组给予等量生理盐水灌胃,均连续12周。灌胃结束后,检测各组大鼠血糖、血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白定量,应用实时定量RT-PCR法检测肾皮质中Wilms肿瘤抑制因子(WT1)、钙黏蛋白(P-Cadherin)、结蛋白(desmin)mRNA表达情况。结果实验结束时,各造模组的血糖水平均明显高于正常组(P均0.05),但各造模组间血糖水平比较差异均无统计学意义(P均0.05);各造模组的24 h尿蛋白定量也均明显高于正常组(P均0.05),但厄贝沙坦组和清热益气化瘀通络组24 h尿蛋白定量均明显低于糖尿病肾病组(P均0.05),且清热益气化瘀通络组明显低于厄贝沙坦组(P均0.05)。WT1 mRNA表达(2-△Ct)及相对定量(2-△△Ct)结果显示从高到低依次为正常组、厄贝沙坦组、清热益气化瘀通络组、糖尿病肾病组,但4组间比较差异均无统计学意义(P均0.05);正常组、厄贝沙坦组、清热益气化瘀通络组P-Cadherin mRNA表达(2-△Ct)及相对定量(2-△△Ct)均明显高于糖尿病肾病组(P均0.05),desmin mRNA表达(2-△Ct)及相对定量(2-△△Ct)均明显低于糖尿病肾病组(P均0.05),但3组间比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论清热益气化瘀通络方可增加足细胞P-Cadherin表达而降低desmin表达,具有拮抗糖尿病肾病大鼠足细胞表型转化的作用。     

藻黄合剂含药血清对高糖环境下人肾小球系膜细胞MCP-1表达的影响

目的:观察藻黄合剂(ZHM)对高糖环境下人肾小球系膜细胞(HMC)单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响,探讨其在糖尿病肾脏疾病(DKD)防治中的意义。方法:体外培养HMC并鉴定,血清药理学方法制备ZHM低、中、高剂量组,空白对照组及海昆肾喜阳性对照组大鼠含药血清,10%各组含药血清培养基分别孵育高糖作用下HMC 48h,另设低糖组作为空白对照。ELISA法和RT-PCR技术分别检测各组系膜细胞MCP-1蛋白及mRNA表达情况。结果:MCP-1蛋白及mRNA表达量在高糖组较低糖组明显升高(P<0.01);ZHM中、高剂量组MCP-1蛋白及mRNA表达量均低于高糖组,且具有剂量依赖性;ZHM中、高剂量组与海昆肾喜组比MCP-1蛋白及mRNA表达差异无统计学意义。结论:高糖可诱导HMC中MCP-1表达,而ZHM可通过抑制高糖条件下HMC中MCP-1蛋白及mRNA表达,发挥对DKD的防治作用。     

间断高浓度葡萄糖对雪旺细胞的损伤机制及丹参酚酸B的保护作用

目的:研究间断高浓度葡萄糖对体外培养大鼠雪旺细胞(SCs)损伤机制及丹参酚酸B(Sal B)干预作用。方法:原代培养大鼠SCs,将其分为正常组、稳定性高糖组、间断高浓度葡萄糖组、渗透压对照组及间断高浓度葡萄糖加不同浓度Sal B(25,50,100μmol·L-1)处理组。流式细胞仪检测细胞凋亡,DHE探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,JC-1探针检测线粒体膜电位(MMP)变化,ELISA法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)含量。实时荧光定量PCR检测B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达;Western blot(蛋白印迹)法检测Bcl-2,Bax,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达。结果:与正常组及稳定性高糖组相比,间断高浓度葡萄糖明显提高了SCs内ROS水平(P<0.01),增加了8-OHd G的生成(P<0.01),降低了MMP(P<0.05,P<0.01),下调SCs内Bcl-2蛋白及mRNA的表达(P<0.01),上调Bax蛋白及mRNA的表达(P<0.01),促进了Caspase-3及PARP的活化(P<0.01),并增加了SCs的凋亡(P<0.01)。不同浓度的Sal B可以降低间断高浓度葡萄糖所导致的SCs内ROS及8-OHd G浓度的增高(P<0.01),提高MMP(P<0.01),上调Bcl-2蛋白及mRNA的表达(P<0.05,P<0.01),下调Bax蛋白及其mRNA的表达(P<0.01),降低了PARP及caspase-3的活化(P<0.01),抑制了SCs凋亡(P<0.01)。结论:间断高浓度葡萄糖对SCs的损伤作用比稳定性高糖更为明显,Sal B可以抑制间断高浓度葡萄糖所致的SCs损伤。     

小青龙汤含药血清对内皮素-1诱导的气道平滑肌细胞增殖作用的影响

目的:观察小青龙汤含药血清对内皮素-1(ET-1)诱导的气道平滑肌细胞(ASMC)增殖作用的影响。方法:实验分6组,正常组(10%正常对照组血清)、模型组(ET-1加10%正常对照组血清)、小青龙汤高剂量组(ET-1加10%小青龙汤高剂量组血清)、小青龙汤中剂量(ET-1加10%小青龙汤中剂量组血清)、小青龙汤低剂量组(ET-1加10%小青龙汤低剂量组血清)、地塞米松组(ET-1加10%地塞米松组血清),每组8孔。采用MTT比色法检测ASMC 24h、48h、72h增殖情况。结果:与模型组比较,小青龙汤低剂量组含药血清各期及中剂量组24h、72h对ASMC增殖均有显著性差异(P<0.05);小青龙汤高剂量组各期、中剂量组48h及地塞米松组各期均有极显著性差异(P<0.01)。结论:小青龙汤药物血清能有效抑制ET-1诱导的ASMC增殖作用,可知抑制哮喘大鼠平滑肌增殖是小青龙汤影响哮喘大鼠气道重建的途径之一。     

金丝桃苷对高糖诱导视网膜周细胞损伤的保护作用

目的 探讨金丝桃苷对高糖诱导视网膜周细胞（RPCs）损伤的保护作用，并对其可能机制做出初步探索。方法 将RPCs正常培养传代后接种至细胞培养板，按不同处理分为5组：正常葡萄糖（NG）组（葡萄糖5 mmol/L）、高糖（HG）组（葡萄糖20 mmol/L）、甘露醇（MT）组（葡萄糖5 mmol/L、渗透压20 mmol/L）、高糖+低浓度金丝桃苷（HG+L-HY）组（葡萄糖20 mmol/L、金丝桃苷100μg/mL）、高糖+高浓度金丝桃苷（HG+H-HY）组（葡萄糖20 mmol/L、金丝桃苷400μg/mL）。培育相应时间后，CCK-8法检测各组RPCs活性，Annexin V/PI及TUNEL法检测RPCs凋亡率，Real-time PCR及Western Blot法检测RPCs中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)、Gasdermin-D蛋白-N(GSDMD-N)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-18(IL-18)mRNA及蛋白表达水平。结果 与NG组比较，HG组RPCs活性降低，凋亡率升高（P<0.01）,NLRP3、c...     

槲皮素对高糖损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:研究槲皮素对高糖损伤血管内皮细胞(VECs)的保护作用。方法:实验分对照组,损伤组和槲皮素保护组。用含10 mg/ml葡萄糖、20％胎牛血清的DMEM培养基离体培养 VECs。MTT比色法测细胞存活数量,荧光分光光度法测细胞释放一氧化氮(NO)量及细胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成量,分光光度法测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量。结果:10~(-2)、10~(-3)、10~(-4)、10~(-5)mg/ml槲皮素可促进高糖损伤的VECs增殖,10~(-2)、10~(-3) mg/ml槲皮素,可抑制高糖损伤的VECs释放LDH,减少MDA生成量,促进其释放NO。结论:槲皮素对高糖损伤VECs有保护作用。     

糖肾平胶囊通过PI3K/Akt信号通路干预高糖+LPS诱导足细胞凋亡的机制

目的:观察糖肾平对高糖环境下脂多糖(LPS)对足细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:利用雄性Wistar大鼠,分别用糖肾平小、中、大剂量(0. 525,1. 05,2. 1 g·kg-1),厄贝沙坦(17. 5 mg·kg-1)灌胃给药,制备相应药物血清。采用高糖,LPS体外刺激大鼠足细胞建立模型。并分为正常组(5%正常大鼠血清),高糖组(5%模型大鼠血清+4. 5‰葡萄糖),高糖+LPS组(5%模型大鼠血清+4. 5‰葡萄糖+LPS 1 mg·L-1),厄贝沙坦组(5%厄贝沙坦组大鼠血清+4. 5‰葡萄糖+LPS1 mg·L-1),糖肾平小剂量组(5%糖肾平小剂量大鼠血清+4. 5‰葡萄糖+LPS 1 mg·L-1),中剂量组(5%糖肾平中剂量大鼠血清+4. 5‰葡萄糖+LPS 1 mg·L-1),大剂量组(5%糖肾平大剂量大鼠血清+4. 5‰葡萄糖+LPS 1 mg·L-1)。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测足细胞中CD2相关蛋白(CD2AP),nephrin和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号转导通路中关键因子的蛋白和mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,高糖组和高糖+LPS组足细胞nephrin,CD2AP,PI3K,Akt蛋白及mRNA表达明显减少(P 0. 05,P 0. 01); B淋巴细胞瘤-2相关凋亡蛋白(Bad蛋白)及mRNA表达明显增加(P 0. 05,P 0. 01)。与高糖+LPS组比较,厄贝沙坦组足细胞CD2AP,PI3K,Akt蛋白及mRNA表达明显增加(P 0. 05,P 0. 01); nephrin mRNA表达增加; Bad蛋白及mRNA蛋白表达减少。糖肾平各组足细胞CD2AP,PI3K,Akt蛋白及mRNA表达明显增加(P 0. 05,P 0. 01); Bad蛋白及mRNA蛋白表达减少(P 0. 05,P 0. 01)。结论:糖肾平维持足细胞裂孔隔膜蛋白稳定表达,保护肾小球滤过屏障,同时进一步激活PI3K/Akt信号通路,抑制足细胞凋亡;是其多靶点防治糖尿病肾病的作用机制之一。     

抵当陷胸汤对高糖诱导心肌微血管内皮细胞损伤的影响

目的：基于高糖诱导的心肌微血管内皮细胞(CMECs)模型,观察抵当陷胸汤对其损伤的影响,并探讨其相关作用机制。方法：采用体外培养大鼠原代心肌细胞,给予33 mmol·L-1葡萄糖造模,造模成功后随机分为模型组(葡萄糖终浓度为33 mmol·L^-1)、正常组、抵当陷胸汤低剂量组(葡萄糖+5%抵当陷胸汤含药血清)、抵当陷胸汤中剂量组(葡萄糖+10%抵当陷胸汤含药血清)、抵当陷胸汤高剂量组(葡萄糖+20%抵当陷胸汤含药血清)和阿拉氯胺(ALT-711)组(葡萄糖+10%ALT-711含药血清)。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测含药血清对CMECs增殖的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组c-Jun mRNA相对表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化蛋白质酪氨酸激酶1(p-JAK1)、磷酸化信号转导和转录激活因子1(p-STAT1)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)蛋白的表达水平。结果：与正常组比较,模型组细胞中c-Jun mRNA、p-JAK1、p-STAT1及TGF-...     

益气养阴化瘀通络汤治疗儿童糖尿病性视网膜病变36例

目的观察自拟益气养阴化瘀通络汤治疗儿童糖尿病性视网膜病变的临床疗效。方法选取72例儿童糖尿病性视网膜病变患者按入院顺序随机分为两组各36例,对照组患者口服羟苯磺酸钙胶囊与甲钴胺片,观察组患者服用自拟益气养阴化瘀通络汤,方剂基本组方：枸杞子、麦冬、山药、黄芪各20g,党参、玉竹、丹参、葛根各15g,茜草、白术、鸡内金各10g,黄连3g。加减方：阴虚火旺加龟甲20g,地骨皮与玄参各10g。两组患者在上述治疗基础上均积极治疗基础疾病及儿童糖尿病其他并发症,疗程2周,连续治疗2～3个疗程。治疗前后均进行眼底检查及视力检查,依据《实用眼科学》提出的评定标准对两组患者进行疗效评定。根据《中医眼科学》提出的评价标准对两组患者进行中医证候疗效评定。在两组患者治疗过程中,详细记录患者不良反应发生情况。结果两组患者综合疗效评定结果显示,观察组患者治疗总有效率为94.44%,对照组患者治疗总有效率为77.78%,观察组疗效明显优于对照组（P〈0.05）。两组患者中医证候疗效比较结果显示,观察组患者治疗总有效率为97.22%,对照组患者治疗总有效率为75.00%,观察组疗效明显优于对照组（P〈0.05）。观察组患者2例（5.56%）患者恶心、呕吐,1例（2.78%）患者轻微腹痛;对照组患者2例（5.56%）恶心,1例（2.78%）食欲下降,两组患者不良反应无显著差异（P驦0.05）。结论对儿童糖尿病性视网膜病变患者采用自拟益气养阴化瘀通络汤治疗,疗效显著,优于常规西医治疗,且不良反应发生率低,值得推广应用。     

氧化苦参碱对高糖引起的H9C2细胞氧化应激损伤的影响

目的:研究氧化苦参碱对高糖诱导H9C2细胞氧化应激损伤的保护机制。方法:分组培养H9C2心肌细胞并分为空白组,高糖组,氧化苦参碱低、高剂量组(50,100 mg·L^-1),阳性药维生素E组(1×10^-4 mol·L^-1),甘露醇等渗组。通过乳酸脱氢酶外漏法检测细胞损伤,检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量变化,通过荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量和细胞线粒体功能的完整性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组细胞内MDA,ROS含量,Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而SOD活性、线粒体膜电位和Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与高糖组比较,氧化苦参碱显著降低乳酸脱氢酶的外泄、显著抑制细胞内ROS的产生(P<0.01),明显降低MDA的含量和Bax蛋白的表达(P<0.05),增加SOD活性、线粒体膜电位和Bcl-2蛋白的表达(P<0.01)。结论:氧化苦参碱通过改善线粒体功能来调节氧化应激从而抑制由高糖引起的H9C2心肌细胞凋亡。     

复方丹参对自由基致大鼠离体心脏损伤的保护作用

目的:观察对家兔灌胃给予复方丹参后,其含药血清对大鼠离体灌流心脏内外源性自由基所致心肌损伤的保护作用。方法:家兔每日2次灌胃给予复方丹参5mL/kg,连续3天,末次给药后60min取血,分离血清。将含药血清加到Langendorff法灌流的离体心脏,记录左室内压(LVP)、左室内压最大上升速率(+dp/dmt ax)、左室舒张末压(LVEDP)、心率(HR),定时收集冠脉流出液测定冠脉流量(CF)和肌酸激酶(CK)活性,再灌结束时测定心肌组织中丙二醛(MDA)含量。结果:以含0.25μmol/L 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)或0.06μmol/L次黄嘌呤(HX)和2.0μ/L黄嘌呤氧化酶(XO)的K-H液灌流心脏10min,可显著降低LVP、+dp/dtm ax,升高LVEDP,增加CK和MDA释放;预先用含药血清灌流心脏10min,可显著改善DPPH或HX+XO所致心功能损伤,减少CK和MDA释放。结论:含复方丹参血清对DP-PH或HX+XO诱导内外源性自由基所致心肌损伤具有明显保护作用。