红细胞生成素对高糖诱导肾小管细胞凋亡的影响

目的 探讨红细胞生成素（EPO）是否可以抑制高糖诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞凋亡及其相关机制。 方法 传代培养大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK-52E）,分为正常对照组（NC组）、渗透浓度对照组（OC组）、高糖组（HG组）、高糖+EPO 50 U/ml组（E1组）和高糖+EPO 100 U/ml组（E2组）。免疫荧光检测NRK-52E细胞有无EPO受体（EPOR）表达。Western印迹检测高糖对EPOR表达的影响。流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡指数。荧光探针CM-H2DCFDA检测细胞内活性氧（ROS）的水平。RT-PCR检测bcl-2、bax、capases-3 mRNA的表达。 结果 （1）NRK-52E细胞表达EPOR,且高糖可刺激EPOR表达增加。（2）高糖可诱导NRK-52E细胞凋亡,与葡萄糖相同渗透浓度的甘露醇不能明显诱导细胞凋亡。E1、E2组细胞早、晚期凋亡率显著低于HG组（P < 0.05）。（3）高糖刺激 NRK-52E细胞后,细胞内ROS产生增多,bcl-2 mRNA的表达下调,bax、caspase-3 mRNA的表达上调。EPO可以抑制细胞内ROS的产生,上调bcl-2 mRNA 表达,下调bax、caspase-3 mRNA 表达。 结论 EPO可能通过EPOR的介导,缓解高糖诱导的氧化应激,上调bcl-2 mRNA表达,下调bax、caspase-3 mRNA表达,抑制NRK-52E细胞凋亡。     

CD131在促红细胞生成素抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用

目的 检测大鼠肾小管上皮细胞是否表达CD131并探讨其在促红细胞生成素(EPO)抑制大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用.方法 传代培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,将NRK-52E细胞随机分为正常对照组、高糖组、高糖+EPO组、高糖+EPO+Scramble siR-NA 组、高糖+EPO+EPO受体(EPOR)siR...     

促红细胞生成素对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损伤保护作用的初步观察

目的：探讨促红细胞生成素（EPO）对马兜铃酸（AA）刺激后肾小管上皮细胞再生的影响。方法：以5、10、20雠倒AA刺激LLC—PK1细胞株，同时培养体系中加入不同浓度的EPO（5、10、20U/ml），另设对照组。各组细胞培养24h后．TUNEL法原位检测细胞凋亡情况，免疫组化检测细胞PCNA的表达。结果：TUNEL结果表明，经AA5μg／ml刺激后．核染色阳性的细胞百分比与对照组比较无明显差异，而AA10μg／ml、20μg／ml刺激后，核染色阳性的细胞百分比与对照组比较明显增加（P〈0.05）；经EPO干预后，EPO 10U/ml和EPO 20U/ml可明显降低AA10μg／ml组阳性细胞的百分比（P〈0．05）。免疫组化显示：经AA5μg／ml刺激后，细胞核PCNA阳性表达增加，而经AA10μg／ml、20μg／ml刺激后，细胞核PCNA阳性表达逐渐减弱；加入不同剂量的EPO后，AA10μg／ml组PCNA阳性细胞均增多（P〈0.05）。结论：EPO可抑制AA诱导的肾小管上皮细胞凋亡、并促进细胞的再生，这可能是EPO对马兜铃酸致肾小管上皮细胞损伤的保护机制之一，其作用机制有待进一步深入研究。     

红细胞生成素对马兜铃酸诱导肾小管上皮细胞凋亡的保护机制研究

目的探讨红细胞生成素（EPO）抑制马兜铃酸（AA）所诱导的肾小管上皮细胞（LLC—PK1）凋亡的作用机制。方法以不同浓度AA（5、10、20mg／L）刺激LLC—PK1细胞株，同时培养体系中加入不同浓度的EPO（5、10、20U／m1），另设对照组。各组细胞培养24h后，TUNEL法原位检测细胞凋亡情况；流式细胞仪检测凋亡细胞的比例；Western印迹检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白激酶（caspase）3、bcl—xL的蛋白表达。结果（1）与对照组（6．09±1．84）％相比，AA5mg／L组TUNEL阳性细胞比例增加【（9．79±2．58）％】；AA10、20mg／L阳性细胞比例显著增加[（37．67±8．23）％、（62．95±8．29）％】，与对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。AA10mg／L组细胞经EPO10、20U／ml干预后，阳性细胞比例显著下降f（22．41±3．47）％、（14．63±2．66）％，P〈0．051；AA20mg／L组细胞经不同浓度EPO干预后，阳性细胞比例无显著变化。（2）与对照组相比，AA5mg／L组细胞caspase-3的活性表达有少量增加；AA10mg／L组细胞caspase-3显著增加；而AA20mg／L组caspase-3表达降低。与AA10mg／L组相比，EPO10U／ml和EPO20U/ml干预后，细胞caspase-3的表达显著降低。（3）与对照组相比，AA5mg／L组细胞bcl—xL的表达明显增加；AA10mg／L组细胞bcl-xL表达减少；AA20mg／L组细胞bcl—xL表达显著减少。与AA10mg／L组相比，EPO5U/ml干预后，细胞bcl-xL有所增加；EPO10U／ml和EPO20U／ml干预后，细胞bcl—xL的表达显著增加。结论EPO可能通过促进抗凋亡蛋白bcl-xL的表达、抑制凋亡蛋白酶caspase-3的过高表达，从而抑制了AA诱导的肾小管上皮细胞的凋亡。     

促红细胞生成素的研究进展

本文对促红细胞生成素的生成、调节以及相关作用的研究进展进行了较为详细和系统的阐述.     

促红细胞生成素抗体相关性纯红细胞再障

本文对慢性肾功能衰竭患者应用促红细胞生成素所致促红细胞生成素抗体相关性纯红细胞再障进行综述。     

促红细胞生成素抗体相关性纯红细胞再障

本文对慢性肾功能衰竭患者应用促红细胞生成素所致促红细胞生成素抗体相关性纯红细胞再障进行综述.     

红细胞免疫与促红细胞生成素关系的研究进展

本文比较洋细地阐述了红细胞在机体免疫方面的作用,促红细胞生成素对红细胞免疫功能的影响.     

促红细胞生成素的细胞生物学特性与缺血性脑损伤

促红细胞生成素(EPO)在调节红细胞生成中发挥重要作用,长期以来广泛用于肾性贫血的治疗.近年来研究证实EPO亦具有神经营养、神经保护和调节胚胎发育的作用,其机制可能与直接抑制神经元凋亡和间接促进血管生长及新生血管的形成有关.     

ARA290抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)衍生肽ARA290对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用及其可能机制。方法采用链脲菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型。将成模大鼠随机分为4组:糖尿病模型组(DM组)皮下注射生理盐水0.5 mL,隔日1次;ARA290治疗组(DA组)皮下注射ARA290(50 U/kg),隔日1次;EPOR阻断肽+ARA290治疗组(DAEB组)皮下注射EPOR阻断肽(10μg/kg)和ARA290(50 U/kg),隔日1次;CD131阻断肽+ARA290治疗组(DACB组)皮下注射CD131阻断肽(10μg/kg)和ARA290(50 U/kg),隔日1次。同时设立正常对照组(NC组),皮下注射生理盐水0.5 mL,隔日1次。药物干预12周后检测大鼠尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)、尿N-乙酰葡萄糖苷酶(N-acetylglucosidase,NAG)、β_2微球蛋白(β_2-microglobulin,β_2-MG)、α_1微球蛋白(α_1-microglobulin,α_1-MG)、血肌酐(Scr)。肾组织切片HE染色,观察肾脏病理变化。采用免疫荧光检测肾脏EPO受体(EPO receptor,EPOR)、CD131的表达,TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组化及Western印迹检测大鼠肾脏Caspase-3表达。结果免疫荧光检测显示大鼠肾脏表达EPOR、CD131,且两者存在共定位表达;TUNEL检测显示ARA290可以抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡;免疫组化及Western印迹检测显示ARA290降低糖尿病大鼠肾脏Caspase-3表达;生化检测显示ARA290可以降低糖尿病大鼠UAER、尿NAG、β_2-MG、α_1-MG、Scr,HE染色显示ARA290可以减轻肾脏病理损伤。此外,给予糖尿病大鼠ARA290和EPOR或CD131阻断肽皮下注射后,ARA290抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡、降低早期肾脏病变指标及减轻肾脏病理损伤的作用减弱。结论大鼠肾脏表达EPOR和CD131,EPO衍生肽ARA290可通过EPOR、CD131介导抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡,发挥肾脏保护作用。     

牛磺酸减轻碘海醇诱导的人肾小管上皮细胞损伤

目的 探讨牛磺酸能否减轻碘海醇导致的HK-2细胞（人近端肾小管上皮细胞）损伤及作用机制。 方法 不同碘浓度（25、50、100、125 gI/L）的碘海醇作用HK-2细胞6 h;碘浓度为100 gI/L的碘海醇作用HK-2细胞不同时间（2 h、4 h、6 h）,观察细胞损伤程度。选用碘海醇（100 gI/L、6 h）作为刺激组,用不同浓度牛磺酸（3、12、24 mmol/L）共孵育进行干预。细胞增殖-毒性试剂盒（CCK-8）测定细胞活力。Hoechst33342染色、荧光显微镜下观察细胞凋亡形态。流式AnnexinⅤ-FITC-PI双染和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase-3）活性比色法观察细胞凋亡。Western印迹检测Bcl-2、Bax的表达。流式DCFH-DA细胞内标记法测定细胞内活性氧（ROS）。 结果 碘海醇呈碘浓度和时间依赖性诱导HK-2细胞活力下降、凋亡增加（P ＜ 0.05）。碘海醇（100 gI/L、6 h）导致HK-2细胞ROS升高（P ＜ 0.05）。牛磺酸呈浓度依赖性增加HK-2细胞活力,减轻凋亡。牛磺酸（3、12、24 mmol/L）干预组与碘海醇刺激组比较,细胞活力分别为（88.0±1.00）%、（91.33±0.58）%、（95.67±1.52）%比（76.67±1.53）%（均P ＜ 0.05）;细胞凋亡率分别为（8.84±1.75）%、（7.86±1.82）%、（6.30±1.50）%比（11.98±0.39）%（均P ＜ 0.05）;caspase-3的活性分别为（1.33±0.10）、（1.27±0.0）、（1.10±0.04）比（1.42±0.1）（均P ＜ 0.05）。牛磺酸上调HK-2细胞Bcl-2表达,降低了细胞内ROS的升高（均P ＜ 0.05）。 结论 碘海醇可致HK-2细胞凋亡增加。氧化应激参与了HK-2细胞损伤。牛磺酸通过减轻细胞内氧化应激、促进Bcl-2表达上调,减轻碘海醇诱导的HK-2细胞凋亡和损伤。     

血红素加氧酶1对白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨血红素加氧酶1（HO-1）对白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响及其可能机制。 方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）为正常对照。白蛋白对照组加去脂的小牛血清白蛋白（BSA）30 g/L共同培养。干预组先加钴卟啉（Cobalt protoporphyrin IX,CoPP,血红素加氧酶1诱导剂）5 μmol/L,0.5 h后再加入BSA 30 g/L,作用24 h。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测CoPP对BSA抑制NRK-52E细胞增殖的影响。细胞免疫荧光染色检测细胞凋亡率。RT-PCR法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax mRNA表达情况。 结果 与正常对照组比较,BSA对细胞增殖具有抑制作用并诱导细胞凋亡,差异有统计学意义（P < 0.05）,而CoPP对BSA引起的细胞毒性作用具有保护作用（P < 0.05）;BSA对照组HO-1 mRNA表达增加（0.44±0.06比0.39±0.05,P < 0.05),差异有统计学意义（P < 0.05）。CoPP预处理后,HO-1 mRNA表达（0.50±0.06）较BSA对照组增加（P < 0.05）。BSA可上调Bax mRNA表达(0.87±0.04比0.67±0.03,P < 0.05）及下调Bcl-2 mRNA的表达（0.25±0.04比0.42±0.02,P < 0.05),当加入CoPP预处理后可抑制上述改变（Bax mRNA：0.75±0.07,Bcl-2 mRNA：0.36±0.03,均P < 0.05）。 结论 BSA可显著增加细胞的凋亡率并直接调控凋亡相关蛋白mRNA的表达,CoPP可抑制上述BSA的作用。HO-1对BSA所致肾小管上皮细胞凋亡具有保护作用,可以抑制细胞凋亡。     

祖细胞样肾小管细胞在急性肾小管坏死修复中的作用

目的 观察大鼠缺血性急性肾小管坏死（ATN）后肾脏内溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）及Pax2阳性细胞的动态变化,探讨祖细胞样肾小管细胞在ATN修复过程中的作用。 方法 钳夹SD大鼠左侧肾动脉60 min后再开放血流,建立缺血性ATN模型。给予细胞分裂增殖标记物BrdU负荷,分别于术后第1、3、5、7、14、21、28天收获肾脏标本,进行BrdU和肾源性标记物Pax2免疫组织化学染色,以及BrdU和Pax2、间充质细胞标记物波形蛋白（vimentin）、细胞凋亡标记物活化caspase-3的双重染色,观察BrdU阳性细胞的数量和分布变化。 结果 ATN组术后左肾出现明显的近端肾小管上皮细胞广泛性坏死,BrdU阳性细胞明显增加,第3天达到高峰,显著高于假手术对照组和右肾（P < 0.01）。而右肾BrdU阳性细胞亦显著高于假手术对照组（P < 0.01）。双重染色显示BrdU阳性细胞同时表达Pax2和波形蛋白,但未见同时表达活化的caspase-3。 结论 大鼠在经历缺血性ATN后,肾脏内祖细胞样小管细胞被动员。其修复可能是通过逆分化、增殖和再分化过程来完成的。而细胞因子可能在这过程中起着调控作用。     

小檗碱预先给药对缺氧/复氧诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨小檗碱预先给药对缺氧/复氧诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响.方法 培养人肾小管上皮细胞(HK-2),以1×106个/ml密度接种于培养皿(2 ml/皿)和96孔培养板(200μl/孔),采用随机数字表法,将其分为4组(n=30):正常对照组(C组)、小檗碱组(B组)、缺氧/复氧组(H/R组)和缺氧/复氧+小檗碱组(H/R+B组).B组和H/R+B组加入10 μmol/L小檗碱孵育2h,随后H/R组和H/R+B组进行缺氧24h复氧3h.测定细胞活力、细胞凋亡率、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、caspase-3、活化caspase-3、细胞色素c、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达,并计算Bax表达与Bcl-2表达的比值(Bax/Bcl-2).结果 与C组比较,H/R组和H/R+B组细胞活力、SOD活性和caspase-3表达降低,细胞凋亡率、MDA浓度和Bax/Bcl-2升高,活化caspase-3、细胞色素c、GRP78和CHOP表达上调(P＜0.05),B组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与H/R组比较,H/R+B组细胞活力、SOD活性和caspase-3表达升高,细胞凋亡率、MDA浓度和Bax /Bcl-2降低,活化caspase-3、细胞色素c、GRP78和CHOP表达下调(P＜0.05).结论 小檗碱预先给药可抑制缺氧/复氧诱导人肾小管上皮细胞凋亡,其机制与抑制线粒体应激通路和内质网应激通路有关.     

异丙酚对肾小球和肾小管功能的影响

目的 研究异丙酚对肾小球、肾小管功能的影响。方法 无肾脏疾病的全麻病人２５例,随机分为异丙酚麻醉组（ｎ＝１３）和安氟醚麻醉组（ｎ＝１２）,分别于麻醉诱导前和麻醉诱导后１、２、３、２４ｈ留取血及尿标本,检测血及尿肌酐、尿素氮、β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）、以及尿白蛋白（Ａｌｂ）、免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ）、ｐＨ和尿蛋白定性等。结果 两组病人麻醉诱导后尿β２－ＭＧ、Ａｌｂ和ＩｇＧ较诱导前明显增高（Ｐ〈０．     

依达拉奉通过c-jun氨基端激酶通路和线粒体信号途径对H2O2诱导神经元凋亡的保护作用

目的 观察依达拉奉通过c-jun氨基端激酶(JNK)通路和线粒体信号途径对神经元凋亡的保护作用.方法 采用新生1dSD乳大鼠体外培养的大脑皮层神经元被随机分为空白对照组、氧化应激组(加入终质量浓度为500 μmol/L H2O2在37℃条件下进行)和依达拉奉组(提前30 min加入终质量浓度为300μmol/L的依达拉奉后加入终质量浓度为500 μmol/L H-2O2,在37℃条件下进行).免疫荧光显微镜观察神经元形态、Western blot法检测JNK、P-JNK相关蛋白表达、检测细胞色素C(Cyt-C)和线粒体形态的变化.结果 依达拉奉组中0.5h和2.0h两个样本的P-JNK/JNK比值分别为0.057和0.172,相对于氧化应激组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).在Cyt-C的检测中,依达拉奉组中0.5h和2.0h两个样本的Cyt-C分布较同时间点的氧化应激组集中,且电镜中也可见依达拉奉组(0.5h、2.0h)中线粒体损伤比同时间点的氧化应激组轻.结论 H2 O2诱导的氧化应激反应可能通过JNK通路和线粒体信号途径诱发神经元细胞的凋亡,在凋亡早期使用依达拉奉可能通过JNK通路和线粒体信号途径抑制神经元凋亡.     

Protective effect of erythropoietin pretreatment in testicular ischemia-reperfusion injury in rats

Background/Purpose

This study was designed to investigate the effects of recombinant erythropoietin (EPO), a hormone widely used for treatment of uremic anemia, in rats subjected to testicular ischemia and reperfusion (I/R).

Methods

Thirty-five male rats were divided into the following: control, sham operated, ischemia (I), I/R, and I/R + EPO groups. In the I group, 2 hours of left unilateral testicular torsion were performed, and in the I/R and I/R + EPO groups, an additional 2 hours of testicular detorsions were performed. The I/R + EPO group was pretreated intraperitoneally with EPO (500 IU/kg) before reperfusion. Testicular tissue samples were examined for biochemical and histopathologic parameters. Apoptotic cells in all testes were detected by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labeling technique and caspase 3 immunohistochemistry.

Results

At histopathologic examination, ischemic changes in primary spermatocytes were noted in all torted testes. Cellular damage and apoptosis were more severe in ischemic groups than the EPO-pretreated group. There were statistically significant differences in tissue biochemical parameters in the I and I/R groups compared with the I/R + EPO group.

Conclusions

The results of the present study suggest that EPO exerts protective effects against I/R injury via the modulation of free radical scavenger's activities, which decreases lipid peroxidation levels and attenuation of apoptosis.