黔产莪术显微、理化特性对比研究

目的:通过对黔产莪术的显微、理化特性进行对比研究,判定黔产莪术是否符合中国药典要求,从而判定其能否作为莪术原料药材使用。方法:参照《中华人民共和国药典》2010版一部附录有关显微、薄层鉴定及吸光度、水分、灰分、浸出物、有效成分含量等检测方法进行测定。结果:黔产莪术符合广西莪术显微结构特点,吸光度高于0.45,水分少于14.0%,总灰分低于7.0%,酸不溶性灰分低于2.0%,醇溶性浸出物高于7.0%,水溶性浸出物量较醇溶性浸出物高,挥发油含量高于1.5%,姜黄素含量高于0.15 mg·g-1。结论:黔产莪术显微、理化特性符合药典规定。     

黔产莪术油对人直肠癌细胞血管生成因子表达的影响

目的:通过黔产莪术油对人直肠癌SW1463细胞血管内皮生长因子(VEGF)和趋化因子(chemokine,CXC)蛋白表达的影响,探讨莪术挥发油对肿瘤血管生成的作用机制。方法:将经水蒸气蒸馏提取的黔产莪术挥发油,配制成80,120,160,200 mg·L-1不同质量浓度,干预直肠癌SW1463细胞24 h后,倒置显微镜下观察不同浓度莪术油对直肠癌SW1463细胞的形态学影响;采用免疫细胞化学和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测直肠癌SW1463细胞中VEGF,白细胞介素-8(IL-8)和CXC趋化因子受体2(CXCR2),CXC趋化因子受体3(CXCR3)蛋白的表达。结果:经莪术油处理直肠癌SW1463细胞24 h后,与空白组比较,莪术挥发油组细胞中VEGF,IL-8,CXCR2蛋白表达量明显下调(P0.05,P0.01),莪术油能抑制肿瘤细胞中VEGF,IL-8,CXCR2蛋白的表达;莪术挥发油组细胞中CXCR3蛋白表达量明显上调(P0.05,P0.01),莪术油能促进肿瘤细胞CXCR3蛋白的表达。结论:黔产莪术油可能通过下调促血管生成相关因子的表达,上调抑制性血管生成相关趋化因子的表达,从而抑制肿瘤血管生成,起到抑制肿瘤细胞的增殖作用。     

益母草种子发芽和生活力检验方法的研究

目的:确定益母草种子的最适发芽条件及生活力的检验方法。方法:通过研究不同发芽床和发芽温度对益母草种子发芽率、发芽势及发芽指数的影响,确定益母草种子的最适发芽条件;通过研究四唑浓度、染色时间和温度对益母草种子染色着色率的影响,确定其生活力的检验方法。结果:益母草种子的发芽最适温度确定为25℃,以滤纸为发芽床较适宜;四唑染色时间5h、浓度0.2%和温度35℃是益母草种子生活力检测的适宜条件。结论:此检验方法可为益母草种子的检验规程和质量标准制定提供依据。     

黔产一枝黄花药材HPLC 指纹图谱研究

目的：建立黔产一枝黄花药材HPLC 指纹图谱。方法：采用高效液相色谱法,以Diamonsil C18（200 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为282 nm,流速1.0 mL?min-1,柱温25℃,分析了10 批不同产地一枝黄花药材指纹图谱。结果：10 批一枝黄花药材中有13个共有峰,经相似度计算,整体相似度良好。结论：该方法稳定、重复性好,可用于黔产一枝黄花药材的质量控制。     

通关藤种子质量检验方法研究

目的研究通关藤Marsdenia tenacissima种子检验方法,为制定通关藤种子检验规程及质量分级提供依据。方法以当年采收的不同产地通关藤种子为材料,参照国际植物种子检验规程和中国农作物种子检验规程,对其质量进行检验,探索通关藤种子质量检验的方法。结果通关藤种子净度分析送检样本至少900 g,实验样品至少90 g;种子千粒质量测定选用五百粒法;含水量测定选用高恒温(133±2)℃烘干法,烘干时间为6 h;发芽前自来水浸种24 h,于砂中在30℃光照条件下做发芽实验,发芽计数时间为1~8 d;生活力测定采用0.1%TTC溶液染色,于恒温35℃黑暗条件下染色3 h。结论初步建立了包括扦样、净度分析、真实性鉴定、千粒质量、发芽条件、含水量及生活力7项指标在内的通关藤种子质量检验方法。     

郁金类药材质量控制方法的研究

目的建立郁金类药材的质量控制方法.方法照中国药典2005年版一部(附录XD)挥发油测定法项下甲法测定郁金类药材的挥发油含量;采用高效液相色谱法对不同品种郁金中的吉马酮和莪术二酮总量、姜黄素进行含量测定.色谱条件吉马酮、莪术二酮总量测定的色谱条件为Kromasil ODS-1(250mm×4.6mm, 5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(7525),流速为0.8ml/min,检测波长为244nm,柱温35℃.姜黄素含量测定的色谱条件为岛津ODS (4.6mm×4150mm, 5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水-冰醋酸(50501),流速0.8ml/min,检测波长425nm,柱温30℃.结果不同品种郁金挥发油含量差异显著;吉马酮和莪术二酮总量、姜黄素含量测定方法学考查RSD值均小于2%.结论确立方法分离效果好,灵敏度高,重现性好,结果准确可靠,可作为郁金类药材质量控制的方法.     

不同处理对鱼香草种子萌发的影响

目的研究鱼香草的种子形态和不同处理对种子萌发的影响,为鱼香草人工栽培种苗培育提供科学依据。方法测定种子长宽、千粒质量,对种子设置不同温度、不同光质以及不同浓度的赤霉素(GA3)和KNO3浸种处理,观察记录种子发芽数,计算发芽率、发芽指数和活力指数。结果鱼香草种子椭圆形,长(1.77±0.01)mm,宽(1.13±0.01)mm,千粒质量(1 175.5±21.02)mg,吸水量为其风干种子质量的8.8倍;种子发芽最适宜温度为30℃;白色光照最有利于种子萌发,全黑暗最不利于种子萌发;GA3、0.25%KNO3浸种可显著提高种子发芽率、发芽指数及活力指数。结论得到鱼香草种子萌发最适宜的处理条件,对鱼香草人工栽培种苗培育具有重要指导作用。     

HPLC法测定黔产钩藤中钩藤碱及异钩藤碱含量

目的：研究建立了黔产钩藤药材中钩藤碱与异钩藤碱的含量测定方法。方法：采用HPLC法：KromosilC18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）;流动相以甲醇一0．2％氨水溶液（65：35）,流速：1．0mL·min-1,柱温：35℃;进样器温度：5℃;检测波长为245nm,结果：异钩藤碱和钩藤碱分别在0．13064～1．17576μg（r=1．0000）和0．09744～0．87696μg（r=-0．9998）范围内呈良好的线性关系。异钩藤碱平均回收率（n=6）为98．88％,RSD为O．38％：钩藤碱平均回收率（n=6）为98．28％,RSD为0．72％;结论：本检测方法快速、简便、灵敏、准确、可靠,重复性好,为黔产钩藤药材的质量控制提供了科学依据。     

黔产大菟丝子中绿原酸的定性与定量分析

目的:对黔产大菟丝子中绿原酸进行定性与定量分析。方法:采用TLC色谱法,以绿原酸为对照,建立定性鉴别方法;采用HPLC色谱法,建立其含量测定方法。结果:TLC法能很好分离各成分;高效液相色谱法绿原酸在0.0102~0.1142mg范围内与峰面积响应值呈良好的线性关系(r=0.9998),平均加样回收率为99.0%。结论:本法简便可行,重复性好,为评价大菟丝子质量提供实验依据,可用于大菟丝子药材的有效鉴别。     

连翘种子质量检验方法和分级标准研究

目的:研究连翘种子质量评价方法,为分级提供科学依据。方法:考察了连翘种子的扦样、发芽率、胚率、净度、含水量、千粒重、生活力等检验方法;对28份收集于河南、山西、陕西等连翘主产区的连翘种子质量进行检测,采用K聚类选择合适的连翘种子质量分级参数。结果:最少连翘种子用量为12.2 g,千粒重适合应用百粒法测定,粉碎高恒温(130±2)℃烘干5 h可测定含水量,连翘种子发芽不需要层积,发芽率测定时可用25℃恒温光照双层滤纸床进行。结论:依据净度、千粒重、含水量、胚率、发芽率可将连翘种子分为3级。     

温郁金不同部位的挥发油含量比较

参考药典方法测定温郁金不同部位:温莪术(主根茎)、姜黄(侧根茎)、温郁金(块根)、温郁金叶、温莪术鲜芽挥发油含量并采用高效液相色谱法测定挥发油中莪术醇含量。结果温莪术提油率和莪术醇含量均较高。而温郁金提油率虽较低,但油中莪术醇含量较高,宜研究利用。     

温郁金新品种“温郁金2号”的选育及品种特性

目的:选育温郁金优良品种。方法:采用系统选择方法从"温郁金1号"变异植株中选育出优异新品种,测定其农艺生产性状和品质特征。结果:育成温郁金新品种"温郁金2号"[浙(非)审字2015002]。经小区品比、区域试验后最终审定成为新品种。两年区域试验结果为温郁金2号各项生产指标和品质指标均优于对照,莪术、姜黄和郁金药材干品平均产量分别达4387、2481、945 kg·hm~(-2),分别比对照增产12.03%、10.38%和21.29%;生育期220~233 d;株高192.5 cm;萌发数5.6个;莪术药材中挥发油含量5.5%(m L·g~(-1)),较对照高31.11%。结论:"温郁金2号"综合性状表现优异,特别是莪术挥发油含量高,适宜在主产区推广种植。     

HPLC研究加工、贮藏过程对温郁金化学成分的影响

目的:使用高效液相色谱法对同一产地温郁金的不同加工、贮藏品中莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的含量进行考察。方法:用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1 mL.min-1;检测波长214 nm,柱温25℃,进样量10μL。结果:鲜品中莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的质量分数分别为0.001 201%,0.039 760%,0.061 458%,1.313 8%;加工品中4种成分的质量分数分别为0.000 711%,0.054 358%,0.007 630%,0.439 7%;贮藏品中4种成分的含量分别为0.001 168%,0.113 253%,0.016 493%,0.512 7%。结论:鲜温郁金中的β-榄香烯、莪术二酮和吉马酮的含量明显高于加工温郁金及贮藏一年的陈品温郁金。加工、贮藏过程对温郁金中4种指标成分的含量有一定影响。     

黔产毛郁金与姜黄的抗炎镇痛作用及急性毒性比较

目的比较黔产毛郁金根茎水提取物(AE-A)与姜黄根茎水提取物(AE-L)的抗炎、镇痛作用及急性毒性。方法采用经典的抗炎、镇痛实验及LD50测定法。结果AE-A,AE-L均能明显抑制小鼠二甲苯致耳廓肿胀及棉球肉芽肿增生,AE-A作用稍强,且ig给药4 d对幼龄小鼠免疫器官指数均没有明显影响;AE-A,AE-L均能明显抑制小鼠扭体反应,其作用强度相似。AE-A,AE-L分别以2 g/kg(相当于毛郁金干燥原生药58.8 g/kg,姜黄干燥原生药62.5 g/kg)给小鼠24h ig 3次,观察7 d,小鼠全部存活;以ip给药,小鼠LD50分别为:1.84 g/kg(相当于毛郁金干燥原生药54.24 g/kg±6.27g/kg)和1.82 g/kg(相当于姜黄干燥原生药56.88 g/kg±6.51 g/kg)。结论毛郁金抗炎作用较姜黄稍强,镇痛作用相似,毛郁金的急性毒性与姜黄相似。实验结果为毛郁金的利用提供了一定的药理学基础。     

白及种子质量检验方法研究

参照《农作物种子检验规程》对不同产地的白及种子进行质量测定,旨在为制定白及种子检验规程和质量分级标准提供依据。结果表明:白及种子采用过20目筛后进行净度分析;质量测定宜采用千粒法;水分测定采用高恒温(133±2)℃干燥法,烘干时间为3 h;发芽床选用滤纸床,发芽温度30℃较为适宜,种子萌发需要光照,发芽首末次计数时间为4~20 d;1%TTC溶液中40℃条件下,染色7 h测定生活力。     

黔产毛茛总皂苷的提取方法和工艺优选

目的:确定黔产毛茛总皂苷的最佳提取方法和工艺。方法:以黔产毛茛中总皂苷含量为评价指标,考察水、甲醇、95%乙醇三种溶媒分别采用超声、回流及微波三种提取方法对总皂苷提取率的影响,优化提取方法。单因素分析法确定乙醇体积分数、液固比和提取时间为影响因素,采用正交试验设计法安排实验,利用直观分析法结合方差分析法优选最佳提取方法的工艺参数。结果:以85%乙醇为溶媒的回流法提取效果最佳,最优工艺参数为:提取温度80℃,溶媒用量10倍,提取2次,每次2 h。结论:本方法测定结果准确、重复性好、专属性强,可为黔产毛茛药材质量控制提供理论依据。     

辽藁本种子生物学特性研究

[目的]为规范中药材种子市场,对辽藁本种子生物学特性进行研究,初步制定辽藁本种子检验方法。[方法]参照《国际种子检验规程》（ISTA1996）和GB／T3543—1995（农作物种子检验规程》,筛选适合辽藁本种子质量检验的方法。[结果]初步建立辽藁本种子质量检验方法,制定种子扦样、净度分析、发芽实验和千粒重检验方法。[结论]辽藁本科子在15℃、纸上进行发芽实验较为适宜;光照与否对辽藁本种子萌发没有显著影响活力;百粒法和千粒法均可以用来进行种子质量测定。     

夏枯草种子质量分级标准初步研究

目的:确定夏枯草种子发芽的最适条件,研究其检验方法和质量分级标准。方法:采用不同的处理方法对夏枯草种子进行发芽试验;采用风选法对种子进行分级,测定不同等级夏枯草种子的千粒重、发芽率、发芽势、含水量、色泽、种子大小等各项指标。结果:夏枯草种子发芽的最适温度为20℃;不同千粒重种子的发芽率存在显著性差异,且发芽率随着千粒重的增大而升高。结论:千粒重、发芽率、发芽势、含水量、色泽、种子大小等各项指标的测定可为制定夏枯草种子的质量分级标准提供参考依据。     

北沙参种子发芽和生活力检验方法的研究

目的：确定北沙参种子适宜的发芽和生活力的检验方法。方法：采用不同的发芽床,放置于不同的温度下培养,观察不同条件对北沙参发芽率的影响,确定适宜的发芽条件;采用四唑法（TTC）对北沙参着色率进行检验,设计不同浓度和不同温度的正交试验,通过对不同条件下北沙参染色情况的观察,确定适宜的生活力检验方法。结果：北沙参以25℃,滤纸作为发芽床为适宜发芽条件;以30℃,0．6％TYC浓度,染色时间5h为适宜的生活力检验方法。结论：通过对北沙参发芽和生活力检验方法的研究,为其种子检验规程和质量标准的制定提供依据。     

中药郁金加压浸润切片工艺研究

目的:确定郁金浸润切片的最佳工艺参数。方法:测定温郁金Curcuma wenyujin和桂郁金C.kwangsiensis水浸泡前后的药材质量变化、挥发油类成分变化、甲醇和氯仿提取物质量变化和莪术烯醇的含量变化,以确定炮制的质量控制指标;并研究了不同大小的温郁金的最短加压浸制时间和闷润时间及最佳干燥温度。结果和结论:①水浸泡过程郁金药材质量减少,挥发油类成分含量有变化,但甲醇和氯仿提取物量和有效成分莪术烯醇的含量变化不明显,因而确定以尽可能短的浸泡时间为炮制控制指标。②加压浸泡能明显缩短药材浸泡时间,加压浸泡时间与药材断面的短径相关。③郁金加压浸泡工艺为:浸泡-0.095MPa05h,014MPa10～16h,闷润36～48h,切片,室温晾干或不高于40℃烘干。