反义BCR-ABL寡核苷酸对化疗药物体外净化白血病细胞的增强效应

目的研究反义寡核苷酸对化疗药物阿霉素（ＡＤＭ）、足叶乙甙（ＶＰ－１６）及阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）体外抑制Ｋ５６２细胞克隆形成的影响，并探讨其可能的作用机制。方法体外甲基纤维素半固体培养观察各处理组Ｋ５６２细胞的克隆形成，流式细胞仪评价细胞的凋亡状况。结果实验浓度下单独应用ＡＤＭ、ＶＰ－１６或Ａｒａ－Ｃ，Ｋ５６２细胞集落存活率分别为４１．４１％、５０．２８％及５２．０８％，先用反义寡核苷酸ＡＳ－ｂ３ａ２处理，再用上述３种化疗药物，集落存活率则分别为１５．２０％、１９．７７％及２１．３２％（Ｐ＜０．０１）；单独应用ＡＳ－ｂ３ａ２，Ｋ５６２集落存活率为３９．３１％，流式细胞仪检测到ＡＳ－ｂ３ａ２处理后的Ｋ５６２凋亡细胞比例为２７．２％，联用ＡＤＭ后凋亡细胞比例为４６．２０％，而未处理组仅为７．４％。结论实验结果提示，反义ＢＣＲ－ＡＢＬ寡核苷酸ＡＳ－ｂ３ａ２能增强化疗药物ＡＤＭ、ＶＰ－１６或Ａｒａ－Ｃ对Ｋ５６２细胞克隆形成的抑制作用，其作用可能在于增强化疗药物体外诱导Ｋ５６２细胞的凋亡。     

LDL—ACM复合物对白血病细胞株K562的抑制效应

以低密度脂蛋白（ＬＤＬ）为化疗药物阿克拉霉素（ＡＣＭ）的载体，用游离ＡＣＭ为对照，体外观察ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物对慢性急变细胞株Ｋ５６２的细胞毒作用及影响因素。结果显示：１．Ｋ５６２细胞对ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物在开始３０ｍｉｎ摄取较快，以后速度逐渐减慢；２；细胞对复合物的摄取较游离ＡＣＭ明显增多，３。过量的天然ＬＤＬ、肝素及低温均可使细胞对复合物的摄取明显减少，而过量ＨＤＬ则无影响，去脂蛋白血清予刺激     

CD_3AK与LAK细胞生物活性比较和治疗恶性胸水的疗效评价

采用正常人外周血单个核细胞，经ＣＤ＿３单克隆抗体预刺激后，加入白细胞介索２继续激活的ＣＤ＿３ＡＫ细胞与常规ＬＡＫ细胞的生物活性进行比较。发现ＣＤ＿３ＡＫ细胞的体外增殖能力、存活时间和细胞毒活性明显高于ＬＡＫ细胞。细胞免疫表型分析见比值高于ＬＡＫ，而低于ＬＡＫ。每疗程１．０×１０￣（１０）～１．６×１０￣（１０）细胞数目联合白细胞介素２胸腔输注治疗３０例恶性胸水，疗效显着，患者的免疫功能改善。认为ＣＤ＿３ＡＫ细胞是一种非ＮＫ型高效、低毒的抗肿瘤杀伤细胞，有着广泛的临床应用价值。     

放线菌素D不能抑制α-双炔失碳酯诱导的白血病K562细胞凋亡

目的：研究放线菌素Ｄ（ＡｃｔＤ）对α－双炔失碳酯（α－ａｎｏｒｄｒｉｎ，ＡＮＯ）诱导的人白血病Ｋ５６２细胞凋亡的影响。方法：用光学显微镜观察细胞形态学变化；用流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳分别检测ＤＮＡ含量和ＤＮＡ断裂。结果：ＡＮＯ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理人白血病Ｋ５６２细胞２４ｈ引起大约１０％Ｋ５６２细胞产生凋亡。同时加入ＲＮＡ合成抑制剂ＡｃｔＤ０．００５μｍｏｌ·Ｌ－１不能抑制ＡＮＯ诱导的凋亡，相反地，ＡｃｔＤ加强ＡＮＯ的这一作用，使凋亡细胞从１０％上升到２０％。ＡｃｔＤ０．５μｍｏｌ·Ｌ－１本身可诱导约３２％的Ｋ５６２细胞凋亡。Ｓ期细胞对ＡＮＯ诱导的凋亡较敏感，而ＡｃｔＤ则较易诱导Ｓ期和Ｇ２－Ｍ期细胞凋亡。结论：ＡＮＯ诱导的Ｋ５６２细胞凋亡不依赖于新的ＲＮＡ合成。     

去甲斑螯素诱导K562细胞凋亡的影响

目的：探讨去甲斑蝥素（ＮＣＦＤ）对人白血病细胞株Ｋ５６２细胞增殖的抑制作用。方法：用流式细胞仪测定ＮＣＰＤ对Ｋ５６２细胞体外培养过程中细胞毒性、雕恨及细胞周期的影响。结果：ＮＣＴＤ对Ｋ５６２细胞有较强的增殖抑制使用。在作用２４小时后达到凋亡到凋亡高峰;２４小时各浓度ＮＣＰＤ作用后,Ｇ１期细胞百分数均减少,Ｓ期与Ｃ２＋Ｍ期阻滞现象。结论ＮＣＰＤ可诱导Ｋ５６２细胞凋亡,抑制瘤细胞分裂增殖,且有明显的时     

静脉注射免疫球蛋白治疗川崎病机理：对细胞凋亡的探讨

本文通过观察静脉注射球蛋白对急性期川崎病患儿外周血淋巴细胞凋亡的影响, 治疗机理。方法本组观察２６例ＫＤ患儿和２０例健康对照外周血单个核细胞经ａｎｔｉ－ＣＤ单抗刺激培养不同时间后计数凋亡细胞百分率和ＤＮＡ片断分析,及ＰＨＡ放 淋巴细胞增殖反应及ＩＬ－６水平。     

A—LAK,CD3—AK细胞体外对人小细胞肺癌细胞株的杀伤实验研究

目的：通过体外杀伤实验,比较ＬＡＫ,Ａ－ＬＡＫ,ＣＤ３ＡＫ细胞对人小细胞肺癌细胞株ＬＥＰＴ－ｓｍｌ的杀伤活性。方法：利用脐带血制备ＬＡＫ,Ａ－ＬＡＫ,ＣＤ３３ＡＫ细胞,观察其增殖、细胞表面ＩＬ－２Ｒ表达、细胞表型改变及对ＬＥＰＴ－ｓｍｌ细胞的细胞毒作用。结果：Ａ－ＬＡＫ,ＣＤ３ＡＫ比ＬＡＫ细胞具有更强的增殖能力的抗瘤活性。结论：Ａ－ＬＡＫ,ＣＤ３ＡＫ具有增殖能力和肿瘤杀伤能力强的优点,临床应用潜力     

环孢素抑制CD8+T细胞释放SCD8的实验研究

目的：探讨环孢素对ＣＤ８＾＋Ｔ细胞释放可溶性ＣＤ８（ＳＣＤ８）的影响。方法：在不同浓度的环孢素存在下，用ＰＨＡ刺激正常人淋巴细胞，然后用酶免疫测定法测定培养上清液的ＳＣＤ８浓度。结果：单加ＰＨＡ组的淋巴细胞在培养第３天后ＳＣＤ８显著增高，环孢素＋ＰＨＡ组在培养５ｄ后上清液中的ＳＣＤ８虽增加趋势，但不及加ＰＨＡ组显著（Ｐ〈０．０５），而且当环孢素浓度增至２５μｇ／ｍｌ时，培养上清液中的ＳＣＤ８减少不     

柔红霉素-白蛋白交联物逆转多药耐药KB/VCR细胞株对柔红霉素的耐药性

将柔红霉素（Ｄａｕ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）交联，以克服耐长春新碱（ＶＣＲ）的ＫＢ细胞株（ＫＢ／ＶＣＲ）对Ｄａｕ的耐药性．Ｄａｕ抑制ＫＢ和ＫＢ／ＶＣＲ细胞生长的ＩＣ５０分别为３．３μｇＬ－１和０．２６ｍｇＬ－１．ＫＢ／ＶＣＲ细胞对Ｄａｕ的耐药性是ＫＢ细胞的７９倍．反转录聚合酶链式反应结果显示，ＫＢ／ＶＣＲ细胞有很高水平的ｍｄｒ－１基因表达．Ｄａｕ－ＢＳＡ交联物和Ｄａｕ杀伤ＫＢ／ＶＣＲ细胞的ＥＣ５０分别是１２μｇＬ－１（指其中Ｄａｕ含量）和０．２４ｍｇＬ－１，即Ｄａｕ－ＢＳＡ对ＫＢ／ＶＣＲ细胞的细胞毒作用是Ｄａｕ的２０倍．药物蓄积实验显示，使用Ｄａｕ－ＢＳＡ时，ＫＢ／ＶＣＲ细胞内Ｄａｕ蓄积量较使用Ｄａｕ者增加１．４倍（２４ｈ时）；药物外排实验显示，加入Ｄａｕ时，Ｄａｕ迅速从ＫＢ／ＶＣＲ细胞排出，而使用Ｄａｕ－ＢＳＡ时Ｄａｕ能在ＫＢ／ＶＣＲ细胞内长时间维持较高浓度．结果提示，Ｄａｕ与ＢＳＡ交联后，能克服多药耐药细胞对Ｄａｕ的耐药性．     

变活霉素诱导人红白血病细胞K－562向红系方向分化作用的研究

新蒽环类抗生素变活霉素由五种组分组成：变活霉素Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ和７－脱氧变活霉酮Ａ。变活霉素各组分体外抑制人红白血病Ｋ－５６２细胞生长和诱导其分化活性各不相同。经联苯胺染色，变活霉素Ｃ诱导后Ｋ－５６２细胞血红蛋白表达百分率为８６％。联苯胺染色阳性细胞最大值出现在第五或第六天；去除药物后，分化细胞为部分可逆性；诱导细胞失去在软琼脂上克隆生长的能力。与其它已知蒽环类抗生素比较，变活霉素Ｃ的促分化动力学变化与阿霉素、表阿霉素和柔红霉素相似。但变活霉素Ｃ较阿克拉霉素Ａ促分化活性要强。构效关系研究表明，蒽环类抗生素的促分化活性与蒽环上Ｃ＿３、Ｃ＿１１或Ｃ＿９或Ｃ＿１０位的取代基以及Ｃ＿７位的取代糖有很大关系。     

MTX—右旋糖酐偶联物的合成及其对K562细胞的敏感性初探

用溴化氰活化右旋糖酐（Ｔ－７７）后,通过６－氨基己酸间隔桥,用水溶性碳二亚胺（ＥＤＣ）法将抗癌药甲胺喋呤（ＭＴＸ）与糖基相偶联,合成ＭＴＸ－右旋糖酐偶联物（ＭＴＸ－Ｄ）。细胞凋 灾光染色（ＡＦＳ）法检测该偶联物ＭＴＸ－Ｄ对人白血病Ｋ５６２细胞的敏感性,结果该偶联物对Ｋ５６２细胞凋亡有诱导作用和影响其生长周期的作用。     

静脉注射免疫球蛋白治疗儿童川崎病临床和实验观察

目的:通过观察静脉注射免疫球蛋白(ＩＶＩＧ)对急性期川崎病(ＫＤ)患儿外周血淋巴细胞凋亡的影响,进一步探讨ＩＶＩＧ的治疗机制。方法:观察 ２６例ＫＤ患儿和 ２０例对照组外周血单核细胞(ＰＢＭＣ)经ａｎｔｉ－ＣＤ３单抗刺激培养不同时间后凋亡细胞百分率计数并进行 ＤＮＡ片断分析,观察植物血凝素(ＰＨＡ)诱导的淋巴细胞增殖反应和白细胞介素 ６(ＩＬ－６)水平。结果:ＫＤ患儿ＰＢＭＣ体外培养上清ＩＬ－６水平较对照组明显升高(Ｐ＜０．０１),ＩＶＩＧ治疗后,ＫＤ患儿ＰＢＭＣ产生ＩＬ－６水平明显降低,外周血淋巴细胞凋亡细胞百分率提高,片断ＤＡＮ出现时间提前,与治疗前比较差异显著(Ｐ＜０．０５)。同时与单用阿斯匹林组比较,临床症状改善,淋巴细胞增殖活性降低(Ｐ＜０．０１)。结论:ＩＶＩＧ治疗ＫＤ的机制可能部分归于逆转被抑制的淋巴细胞凋亡。     

原发性肝癌患者对自体肝癌细胞株的细胞免疫学反应

应用体外培养的自体肝癌细胞ＨＣＣ－Ａ１作靶细胞，研究自体的ＮＫ细胞，ＬＡＫ细胞，ＣＴＬ细胞对体外自体肿瘤细胞的杀伤活性。结果表明：ＮＫ细胞和ＬＡＫ细胞对自体ＨＣＣ－Ａ１细胞的敏感性与异种肿瘤细胞株Ｋ５６２，Ｒａｊｉ及异体肝癌细胞株Ｈ７７０４，Ｈ７７２１无明显差异，用体外ＭＬＴＣ诱导的初级ＣＴＬ作效应细胞，其细胞毒活性有显著性产加，但对自体ＨＣＣ－Ａ１与其他靶细胞间无特异性，经体外连志５轮ＭＬＴＣ     

α-Anordrin- induced apoptosis of leukemia K562 cells is not prevented by cicloheximide

研究蛋白质合成抑制剂环己米特（ｃｉｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ，Ｃｉｃ）对α双炔失碳酯（αａｎｏｒｄｒｉｎ，Ａｎｏ）诱导的白血病Ｋ５６２细胞凋亡的影响．方法：荧光显微镜观察形态学变化；流式细胞仪检测ＤＮＡ含量；琼脂糖凝胶电泳分析ＤＮＡ断裂．结果：Ａｎｏ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理Ｋ５６２细胞２４小时诱导细胞凋亡．Ｃｉｃ１μｍｏｌ·Ｌ－１共同处理不能减弱或延缓Ａｎｏ的这一作用．相反，Ｃｉｃ明显增强Ａｎｏ诱导的细胞凋亡．Ｃｉｃ１００μｍｏｌ·Ｌ－１本身诱导２５％Ｋ５６２细胞凋亡．结论：Ａｎｏ诱导的Ｋ５６２细胞凋亡不依赖于新的蛋白质合成．     

IL-2基因转移对CD3AK细胞生物学功能的影响研究

白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )是Ｔ细胞活化分泌 ,能与Ｔ细胞上ＩＬ 2Ｒ结合后 ,增强Ｔ细胞增殖的一种重要的细胞因子。ＣＤ3ＡＫ细胞是利用抗ＣＤ3单克隆抗体与ＴＣＲ/ＣＤ3 复合体的结合 ,同时提供少量外源ＩＬ 2 ,激活产生的具有细胞毒效应的杀伤细胞 ,常用于过继免疫治疗。临床资料表明体内使用外源性ＩＬ 2常导致毒副作用。能否利用基因转移技术将ＩＬ 2基因导入ＣＤ3ＡＫ细胞 ,使其表达并维持ＣＤ3ＡＫ的活化状态呢 ?抗ＣＤ3ＭｃＡｂ活化的Ｔ细胞作为逆转录病毒载体的受体细胞 ,已有应用于ＩＬ 1 β基因转移研究的报道。本实验利用逆转录病…     

轻稀土元素抑癌作用机理研究

以体外培养的人胃癌细胞ＰＡＭＣ８２和人白血病细胞Ｋ５６２为研究对象，观察了轻稀土元素对癌细胞在软琼脂中生长能力、细胞骨架微管和微丝、钙调素水平及相关抑癌基因表达的影响。轻稀土元素可使癌细胞微管结构发生类似正常细胞的转变，在软琼脂中的生长能力下降，癌细胞内钙调素水平下降，抑癌基因ｐ５３、ｐ１６和ｐ２１表达水平上升。     

胃肠癌患者LAK细胞回输前后外周血T淋巴细胞及其亚群分析

本文应用ＭｃＡｂ－Ａ－Ｅ花环试验对３２例胃癌及直／结肠癌患者ＬＡＫ细胞／ｒＩＬ－２治疗前后外周血Ｔ淋巴细胞及其亚群进行检测。结果显示，胃癌患者治疗前与正常对照相比，ＣＤ２＾＋、ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋细胞和ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值均显著降低（Ｐ〈０．０１）；直／结肠癌患者ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋细胞明显降低（Ｐ〈０．０１），ＣＤ８＾＋细胞和ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值降低（Ｐ〈０．０５）；治疗后与治疗     

MDR细胞株K562r细胞内药物积聚的恢复并不代表其抗药性的逆转

本文探讨细胞内药物积聚与细胞抗药性的相关性。ＭＴＴ法揭示Ｋ５６２ｒ细胞对Ｄｏｘ，Ｅｐｉ，Ｄａｕ及此三药混合物的ＩＣ５０分别比Ｋ５６２细胞提高２２，１６，１０及２０倍。Ｋ５６２ｒ细胞分别与Ｄｏｘ，Ｅｐｉ或Ｄａｕ温育１ｈ，其细胞内药混合物温育１ｈ，二者细胞内药物积聚除３个例外均无显著差异，提示Ｋ５６２ｒ细胞内药物积聚与其药敏无相关性。     

CD＿3AK细胞腹腔输注治疗晚期癌性腹水

应用ＣＤ＿３单克隆抗体（ＣＤ＿３ＭｃＡｂ）激活的淋巴细胞──ＣＤ＿３ＡＫ细胞，腹腔输注治疗晚期癌性腹水３２例。发现ＣＤ＿３ＡＫ细胞的扩增快，杀伤力强。每疗程输入９．０×１０￣９～１．２×１０￣（１０）（平均９．６×１０￣９）的ＣＤ＿３ＡＫ细胞数，能有效地消除晚期癌性腹水，减轻疼痛，增强局部免疫机制，提高晚期癌症病人的生存质量。认为：作为一种新的抗肿瘤生物过继免疫疗法，ＣＤ＿３ＡＫ细胞腹腔输注治疗晚期癌性腹水有着独到之功。     

复方青癌灵口服液对人白血病、肺癌、胃癌细胞等作用的研究

复方青癌灵口服液是由于青蒿等六种中药通过提取制成的复方中药制剂,实验表明本制剂作用于咽癌Ｈｅｐ－２、胃癌ＭＧＣ－８０３、肺癌ＡＧＺＹ－８３ａ、人白血病Ｋ５６２、ＮＢ４进行细胞形态学、药物反应曲线、流式细胞仪检测,结果表明：复方青癌灵口服液对Ｋ５６２、ＮＧＣ－８０３、ＡＧＺＹ－８３ａ有增殖抑制作用及诱导凋亡作用。对ＮＢ４有抑制作用,对Ｈｅｐ－２细胞不敏感。