中药复方对戊四氮致痫大鼠海马PKCα表达的干预作用

目的：观察戊四氮（PTZ）致痫大鼠海马神经元PKCα表达以及中药复方AAP的影响。方法：健康成年雄性Wistar大鼠,随机分为6组（n=24）：正常组（Normal）;②模型组（PTZ）;③中药大剂量组（AAPl）、④中药中剂量组（AAPm）、⑤中药小剂量组（AAPs）、⑥西药丙戊酸钠组（VPA）。复制戊四氮致痫大鼠模型,于致痫后12h、2天、5天、7天相应时间点取材,制备脑标本;免疫组化技术检测海马神经元PKCα表达。结果：正常组海马内PKCα阳性细胞表达较少;与正常组相比,模型组大鼠海马PKCα阳性细胞表达增加（P〈0.05）,差异显著;与模型组比较,中药AAPl、AAPm、AAPs各组PKCα阳性表达减少;7天,与模型组及VPA组相比,中药AAPl、AAPm、AAPs各组PKCα阳性表达降低,P〈0.05,差异显著。与PTZ组相比,VPA组海马CA3区PKCα阳性表达无显著差异（P〉0.05）。结论：PKCα在PTZ致痫大鼠海马中表达增强,可能在癫痫发作中起作用;中药复方AAP可降低致痫大鼠海马PKCα表达,有一定脑保护作用。     

抗痫方对癫痫模型大鼠海马神经元γ-氨基丁酸A受体α1表达的影响

目的:观察抗痫方对戊四氮致痫大鼠海马神经元γ-氨基丁酸A受体α1(GABAARα1)表达的影响。方法:120只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、抗痫方大剂量组、小剂量组和丙戊酸钠组,每组24只。对照组和模型组分别给予生理盐水每日4 ml/kg灌胃;抗痫方各组分别给予大、小剂量(10.26 g/kg、5.13 g/kg)灌胃,西药组给予丙戊酸钠每日20 mg/kg灌胃,每日1次,连续7 d。造模第1天,除对照组外,其余各组大鼠均腹腔注射戊四氮(PTZ)75 mg/kg,复制急性癫痫模型;于致痫后12 h、2 d、5 d、7 d相应时间点取材,制备脑标本,免疫组化检测大鼠海马GABAARα1表达。结果:与对照组比较,模型组GABAARα1免疫反应阳性表达减少(P<0.05);与模型组比较,抗痫方大、小剂量组GABAARα1阳性表达增加(P<0.05)。结论:抗痫方可提高GABAARα1表达,降低神经元兴奋性,有脑保护作用。     

天麻素对戊四氮致痫大鼠的脑保护作用

目的：探讨天麻素对戊四氮致痫大鼠的神经元、星形胶质细胞和血管内皮的保护作用。方法：Wistar大鼠,随机分成5组,对照组,戊四氮（PTZ）致痫组,丙戊酸钠（VPA）干预组,小剂量天麻素（Gs）干预组和大剂量天麻素（Gb）干预组。每组分4个时间点：12小时、48小时、5天和7天。HE染色观察海马区组织学改变,免疫组化检测海马区的GFAP和CD34变化。结果：除对照组无痫样发作外,其余各组全部出现Racine分级Ⅳ-Ⅴ级痫样的发作。HE染色示PTZ组海马区神经元及血管内皮细胞变性、坏死显著;VIA组和天麻素组损害较轻。免疫组化结果显示PTZ纽GFAP染色在海马区和血管有高表达,5天达高峰;CD34表达水平在48小时以内较低,5天达高峰;与VPA组、Gs组和Gb组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：天麻素能减轻戊四氮致痫大鼠海马区神经元、星形胶质细胞和血管内皮细胞的损伤,从多个层面保护脑组织,减轻由癫痫导致的损伤。     

抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠行为的影响及其对海马神经元的保护作用。方法观察模型组、抗痫煎剂低剂量组、抗痫煎剂高剂量组、丙戊酸钠组的大鼠痫性发作,采用免疫组化染色法观察Bcl-2蛋白的表达。结果抗痫煎剂高剂量组、丙戊酸钠组与模型组相比,癫痫发作潜伏期差异有统计学意义。抗痫煎剂低、高剂量组、丙戊酸钠组较模型组Bcl-2细胞增多。结论抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠模型海马神经元有一定的保护作用。     

康痫丸对致痫大鼠行为及病理学影响

目的 探讨康痫丸治疗原发性癫痫的作用机制.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、癫痫模型组、丙戊酸钠组、康痫丸组,每组10只.采用戊四氮(PTZ)亚惊厥剂量造模.观察药物处理后致痫大鼠癫痫发作行为的改变,大脑海马和皮层病理形态学改变.结果 康痫丸能延长癫痫发作潜伏时间并缩短惊厥时间.改善行为学异常状态,与癫痫模型组比较均有显著性差异;癫痫模型组出现以神经元变性甚至细胞坏死为主的病理变化,康痫丸变性、坏死神经元百分比明显低于模型组.结论 康痫丸可减轻致痫大鼠异常行为发作程度,减轻致痫大鼠的神经元损伤.     

痫愈痊颗粒对戊四氮致痫大鼠海马Glu,GABA含量的影响

目的:观察痫愈痊颗粒对戊四氮致痫大鼠海马谷氨酸(Glu),γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响,探讨痫愈痊颗粒治疗癫痫的机制。方法:将70只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、丙戊酸钠组(200 mg·kg-1)、痫愈痊颗粒低、高剂量组(586,1 172 mg·kg-1),采用亚惊厥剂量戊四氮(PTZ)ip建立癫痫大鼠模型,在造模同时即开始给药,共28 d。行为学观察后取海马组织,采用高效液相色谱-四级杆离子阱串联质谱仪检测海马中Glu,GABA的含量。结果:59只大鼠进入结果分析,与模型组比较,痫愈痊颗粒与丙戊酸钠干预后发作潜伏期延长、惊厥持续时间缩短(P0.01);惊厥持续时间高剂量组优于低剂量组(P0.05)。模型组与正常组相比,海马Glu含量明显上升,GABA含量明显下降(P0.01);与模型组比较,痫愈痊颗粒高、低剂量组和丙戊酸钠组可明显降低海马Glu含量,升高GABA含量(P0.05,P0.01)。结论:采用亚惊厥剂量PTZ能够建立癫痫大鼠模型;痫愈痊颗粒抗癫痫机制可能与其降低海马Glu含量,增加GABA含量有关。     

抗痫灵对戊四氮致痫大鼠脑电图及脑组织病理形态学的影响

目的:通过观察中药复方抗痫灵对戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑电图及脑组织病理形态学的影响,探讨其抗痫的作用机制。方法:采用光镜及尼氏体染色的方法观察大鼠脑组织的病理形态学变化。结果:经中药复方抗痫灵治疗6周后,戊四氮致痫大鼠海马区神经元的变性、坏死均不同程度的减轻。结论:中药复方抗痫灵能够不同程度减缓癫痫发病过程中海马区神经元的变性、坏死,从而减少癫痫的发作次数及发作症状。     

中药复方抗痫灵对戊四氮致痫大鼠脑组织海马凋亡相关因子C-fos蛋白表达的影响

目的:观察中药复方抗痫灵对戊四氮致痫大鼠海马组织中C-fos蛋白表达水平的影响,探讨中药复方抗痫灵治疗癫痫的可能作用机制。方法:将90只Wistar大鼠随机分成空白对照组(10只),戊四氮(PTZ)腹腔注射(ip)法造模组(80只)。将戊四氮所诱导成功的癫痫大鼠随机分成5组,分别为癫痫模型组,丙戊酸钠治疗组,抗痫灵低剂量治疗组,抗痫灵中剂量治疗组,抗痫灵高剂量治疗组。观察大鼠痫性发作时,空白组、模型组及治疗各组大鼠行为,并采用免疫组化方法检测大鼠脑组织中海马C-fos蛋白表达,采用实时荧光定量(Real time PCR)方法检测大鼠海马组织中C-fos mRNA的相对表达。结果:各治疗组大鼠C-fos蛋白阳性目标面密度值较模型组均显著降低,差异具有统计学意义(P0.01),但均未达到空白组水平(P0.01);西药组和中药中剂量组的阳性目标面密度值与其他各组相比差异具有统计学意义(P0.05);各治疗组之间相比差异无统计学意义(P0.05),模型组大鼠海马中C-fos mRNA表达较模型组均显著降低,差异具有统计学意义(P0.05),但均未达到空白组水平(P0.01)。结论:中药复方抗痫灵对癫痫病的抗痫作用可能是通过降低癫痫大鼠大脑内C-fos的水平从而抑制神经元细胞的凋亡而达到抗癫痫作用的。     

石菖蒲及其有效成分α-细辛醚对癫痫幼鼠脑海马神经元凋亡的影响

目的探讨石菖蒲及其有效成分α-细辛醚对戊四氮(PTZ)诱发的幼鼠癫痫发作所激发的海马区神经元凋亡的影响。方法利用光电镜技术观察癫痫幼鼠海马神经元的病理改变,TUNEL法检测凋亡细胞,免疫组织化学法检测Bax和Bcl-2的表达情况。结果致痫对照组癫痫幼鼠海马CA1和CA3区大量神经元凋亡;药物治疗后凋亡细胞数明显减少(P<0.01);PTZ致痫各组幼鼠海马CA1和CA3区Bcl-2和Bax阳性细胞数量较正常对照组均有明显增加(P<0.01)。其中,苯巴比妥钠组、石菖蒲组、α-细辛醚组Bcl-2阳性细胞数量增加较致痫对照组显著(P<0.01);Bax阳性细胞数量各致痫组之间无显著性差异。正常对照组Bcl-2/Bax的值约为6.0;致痫对照组约为0.7;其余3组均约为1.0。结论石菖蒲和α-细辛醚可能通过增强Bcl-2表达,抑制幼鼠癫痫发作激发的海马神经元凋亡。     

抗痫灵对癫痫大鼠脑电图及海马NMDAR1表达的影响

目的:观察中药复方抗痫灵对戊四氮点燃癫痫大鼠模型脑电图及海马NMDAR1表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠60只,体质量180～220g,随机分成空白组、模型组、抗痫灵高、中、低剂量组、丙戊酸钠(VPA)组各10只。点燃后各组大鼠描记脑电图,低温条件下迅速断头取脑,用免疫印迹(Westernblot)方法观察各实验组大鼠海马的NMDAR1活性变化。结果:抗痫灵组、丙戊酸钠组、模型组阳性细胞表达与空白组相比有显著性差异(P0.05),抗痫灵组显著低于模型组(P0.01)。结论:抗痫灵对戊四氮点燃大鼠癫痫发作有显著对抗作用,其作用机制可能与其降低模型大鼠海马NMDAR1活性有关。     

礞石滚痰汤对戊四氮致痫小鼠惊厥行为及脑电图的影响

目的观察礞石滚痰汤对戊四氮(PTZ)致痫小鼠惊厥行为和额叶皮层电活动的改变。方法腹腔注射PTZ 45mg/(kg·d)建立癫痫动物模型,将制备成功的小鼠随机分为4组:模型组(B)、礞石滚痰汤低(C)、高(D)剂量组、丙戊酸钠(VPA)组(E),每组各10只,另设空白对照组(A)10只。模型组给予生理盐水灌胃,C组、D组、E组分别给予礞石滚痰汤低、高剂量及丙戊酸钠等不同因素灌胃处理。给药10d后,除空白对照组外,各组小鼠再次腹腔注射PTZ 45mg/(kg·d),观察动物行为的改变,同时利用脑立体定位仪记录各组癫痫小鼠脑部单侧额叶皮质的脑电变化。结果行为学观察显示,与模型组比较,药物治疗组小鼠癫痫发作的潜伏期延长(P0.05),1h强直-阵挛发作的次数减少(P0.05),发作持续时间缩短(P0.05)。脑电图结果显示,与模型组比较,药物治疗组能有效抑制小鼠痫性放电。结论礞石滚痰汤能有效抑制戊四氮致痫小鼠惊厥行为发作和额叶皮层的异常放电。     

电针“太阳”透“百会”对PTZ致痫大鼠海马pCREB及NSE的影响

摘要：目的：观察电针透刺“太阳”透“百会”对戊四氮( PTZ) 致痫大鼠行为学、海马内pCREB及NSE表达情况,探讨其抗痫的机制。方法：采用随机分组将32只大鼠动物分成空白组、模型组、西药组及电针透穴组,每组各8只。除空白组外,采用戊四氮（PTZ）腹腔注射将其余24只大鼠制备为癫痫模型。记录各组大鼠一般状态、行为学改变等情况,免疫组化法及Western-blot检测海马组织pCREB及NSE表达变化情况。结果：模型组、西药组及电针透穴组与空白组比较,体质量明显降低;模型组大鼠海马组织的pCREB及NSE阳性细胞数及细胞核蛋白浓度明显升高,具有显著性差异(P＜0.05);与模型组比较,西药组、电针透穴组大鼠的体质量均明显增加、痫性发作潜伏期延长、高等级痫性发作减少,差异具有显著性差异(P＜0.05);与模型组比较,电针透穴组pCREB及NSE阳性细胞数及细胞核蛋白浓度明显降低,具有显著性差异(P＜0.05)。结论：头部电针透穴可改善PTZ致痫大鼠一般状态,减轻痫性发作,延长发作潜伏期,可降低海马组织pCREB及NSE表达,其抗痫机制可能通过减轻神经元损伤实现。     

针刺对戊四氮致痫大鼠抗癫痫机制的研究

目的:探讨针刺对戊四氮(PTZ)致痫大鼠抗癫痫的作用机制.方法:将实验大鼠分为NS组、PTZ组和针刺组,造模后观察各组大鼠癫痫发作的行为学表现,采用免疫组化法检测大脑皮质及海马caspase-3在36 h和72 h时间点免疫反应性,采用半定量RT-PCR法检测海马bcl-2、bax蛋白表达.结果:针刺组大鼠癫痫发作较P...     

康痫丸对致痫大鼠氨基酸递质的影响

目的 从脑内氨基酸类递质角度探讨康痫丸治疗原发性癫痫的作用机制.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、癫痫模型组、丙戊酸钠组、康痈丸组,每组10只.用戊四氮(PTZ)亚惊厥剂量造模.通过免疫组化观察药物处理后致痫大鼠海马CA1、CA3、齿状回和顶叶大脑皮层的γ-氨基丁酸((GABA)、谷氨酸(Glu)表达强度.结果 PTZ致痫后,大鼠海马及皮层GABA阳性细胞数及光密度减少,而Glu阳性细胞数及光密度增加,提示PTZ同时影响脑内GABA和Glu的代谢,证实了GABA及Glu与癫痫的相互关系.采用康痫丸抗癫痫,动物海马、皮层GABA阳性细胞数及光密度增加.而Glu阳性细胞数及光密度减少.结论 康痫丸降低脑内Glu,升高GABA水平可能是其发挥抗癫痫作用的机制之一.     

针刺结合抗痫灵对癫痫大鼠海马GABA_AR的影响

目的：通过针刺结合抗痫灵对戊四氮诱导的大鼠癫痫模型的实验研究,探讨针刺结合抗痫灵的抗癫痫作用及其机制。方法：采用戊四氮（PTZ）诱导癫痫大鼠模型,实验动物分为模型组和针刺结合抗痫灵处理组、抗痫灵处理组、丙戊酸钠（VPA）处理组、实验空白对照组。于癫痫发作24 h后断头取脑,用免疫印迹（Western blot）法检测GABAAR在大鼠海马变化。结果：抗痫灵处理组、针刺结合抗痫灵组和VPA处理组癫痫发作程度及海马区GABAAR蛋白阳性目标面密度值均显高于模型组（P〈0.05）,低于空白组（P〈0.01）。结论：针刺结合抗痫灵处理较抗痫灵处理能有效地减少癫痫发作,可使GABAAR蛋白增加从而抑制癫痫发作。     

柴贝止痫汤调控P38MAPK通路改善难治性癫痫大鼠行为学及对海马神经元超微结构的影响

目的：探讨柴贝止痫汤是否通过调控P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)通路改善难治性癫痫大鼠行为学及海马神经元超微结构。方法：SPF级SD大鼠通过注射海人酸建立癫痫模型。按照Racine分级法判断癫痫发作级别,Ⅳ级以上的大鼠记为建模成功,将癫痫建模成功大鼠每日灌胃125 mg/kg卡马西平,连续治疗28 d。观察大鼠若出现Ⅰ级以上癫痫发作且脑电图异常(频率大于20 Hz或波幅大于80μV)即纳入难治性癫痫。将难治性癫痫建模成功大鼠随机分为5组：模型组、卡马西平(125 mg/kg)组及柴贝止痫汤高(32 g/kg)、中(16 g/kg)、低(8 g/kg)剂量组,另设假手术组。各给药组灌胃给药,模型组和假手术组灌胃相应体积生理盐水,1次/d,连续给药2个月。治疗前后观察大鼠癫痫发作次数、持续时间和发作级别;HE染色观察大鼠海马组织病理变化;透射电镜观察大鼠海马神经元超微结构;TUNEL法检测大鼠海马CA3区神经元凋亡;RT-qPCR检测大鼠海马CA3区组织中P38MAPK、C-myc mRNA表达;Western Blot检测大鼠海马CA3区组织中P38MAPK、p-P38MAPK...     

中药补脑止痫散对癫痫大鼠海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响

目的 通过观察中药补脑止痫散对戊四氮化学点燃癫痫模型大鼠海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响,探讨补脑止痫散治疗癫痫的相关机制.方法 从78只正常Wistar大鼠中随机选取10只列为正常组,剩余68只大鼠腹腔注射戊四氮制作癫痫点燃模型,再随机选取50只造模成功大鼠随机分为5组:模型组、丙戊酸钠组、补脑止痫散高剂量组、补脑止痫散中剂量组和补脑止痫散低剂量组,每组10只.用免疫组化法检测药物治疗各组大鼠与正常组和模型组比较海马中神经元凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白表达的变化.结果 各治疗组大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值与模型组相比分别出现明显降低和升高(P<0.05),而补脑止痫散低剂量组大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值改变不明显(P>0.05),并且补脑止痫散高剂量组和中剂量组比较,以及此二组与丙戊酸钠组相比大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值改变均无明显差异(P>0.05).结论 中药补脑止痫散高、中剂量能调整癫痫患者海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白的表达,从而抑制癫痫发作.     

同病异治复方对戊四氮慢性点燃大鼠痫性发作的影响

目的:研究癫痫"从肝论治"、"从痰论治"的复方柴胡疏肝汤及定痫丸对戊四氮(PTZ)慢性点燃大鼠痫性发作的影响。方法:建立大鼠PTZ慢性点燃的癫痫模型,选取完全点燃大鼠随机分为4组,即生理盐水组(A组)、丙戊酸钠组(B组)、定痫丸组(C组)、柴胡疏肝汤组(D组),连续灌胃给药28天,于给药第7、14、21及28天观察大鼠阵发性痉挛发作潜伏期、痫性发作级别以及强直性惊厥发生率。结果:C组与D组在各用药时间点均能不同程度延长PTZ慢性点燃大鼠的阵发性痉挛发作潜伏期,与A组相比有显著性差异(P0.05或P0.01),与B组作用相当(P0.05),而C组与D组无显著性差异(P0.05)。结论:癫痫"从肝论治"的复方柴胡疏肝汤、"从痰论治"的复方定痫丸均能明显抑制PTZ致痫大鼠的痫性发作,有明显的抗癫痫作用,但两复方在时效关系中可能存在差异。     

愈痫灵颗粒对戊四氮致痫大鼠海马神经生长因子与认知功能的影响

目的 :探讨愈痫灵颗粒对痫性大鼠海马区神经生长因子(nerve growth factor, NGF)及认知功能的影响。 方法 :选取150只清洁级SD大鼠,随机选取10只作为正常组;其余动物用戊四氮(PTZ)造模。将符合模型标准的大鼠随机分为4组,ig给药,即愈痫灵颗粒组、丙戊酸钠组、拉莫三嗪组给药剂量分别为810 mg ·kg^-1,122 mg ·kg^-1,10.1 mg ·kg^-1,模型组、正常组每天给予同等体积蒸馏水。每天1次,连续给药28 d后,用开场实验(open field test)测定大鼠认知功能变化,采用免疫组织化学方法观察NGF的表达。 结果 :与模型组相比,愈痫灵颗粒能显著提高戊四氮致痫大鼠的开场实验成绩,差异有显著统计学意义( P <0.01);愈痫灵颗粒能提高NGF阳性细胞平均灰度值和降低NGF阳性细胞平均吸光度,差异有显著统计学意义( P <0.01)。 结论 :降低致痫大鼠海马区NGF的表达是愈痫灵颗粒改善戊四氮致痫大鼠认知功能的可能机制之一。     

银杏叶提取物对戊四氮诱导大鼠癫痫发作和Cav3．2表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（GBE）对戊四氮（PTZ）慢性致痫大鼠模型癫痫发作的影响及脑保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组：PTZ致痫组、PTZ＋丙戊酸（VPA）组、PTZ＋VPA＋GBE组、生理盐水（NS）对照组,每组10只,观察各组大鼠的行为学、脑电图（EEG）、电迷宫正确率和颞叶海马T型ca2＋通道Car3．2表达变化。结果PTZ＋VPA组、PTZ＋VPA＋GBE组和NS组发作级别为0-Ⅱ级,EEG正常或少量棘慢波,EEG总功率差值及颞叶海马Cav3．2水平较PIE组显著降低,差别有统计学意义（P〈0．05）;相比于PTZ＋VPA组,PTZ＋VPA＋GBE组颞叶海马Cav3．2表达明显减少,差别有统计学意义（P〈0．05）。结论GBE能降低Car3．2水平,显著降低癫痫大鼠发作级别、减少脑部异常放电和改善认知功能,有辅助抗癫痫和脑保护作用。