顺铂诱导人卵巢癌细胞系HO—8910细胞凋亡

探讨顺铂对卵巢癌细胞凋亡的诱导作用，以揭示顺铂治疗卵巢癌的作用机理。方法：选用不同剂量顺铂与人卵巢癌细胞系ＨＯ－８９１０共同孵育不同时间后，应用光镜、电镜进行形态学观察。提取细胞ＤＮＡ经琼脂糖凝胶是民泳分析电泳带。结论：顺铂可通过诱导人卵巢癌细胞系 ＨＯ－８９１０发生细胞凋亡达到消灭肿瘤细胞的目的。     

常规化疗药物诱导卵巢癌OVCAR-3细胞凋亡特点的分析

目的：观察抗卵巢癌药物顺铂、紫杉醇和阿霉素对卵巢癌细胞系ＯＶＣＡＲ－３体外生长和生存的影响并分析由它们所致的细胞死亡性质。方法：采用细胞形态学观察、细胞动力学检测及ＤＮＡ片段化分析等细胞和分子生物学方法,研究化疗药物对卵巢癌细胞的凋亡诱导作用。结果：上述药物在抑制ＯＶＣＡＲ－３细胞生长的同时可不同程度地诱导细胞凋亡。其中,紫杉醇诱导细胞凋亡的能力最强;较低剂量紫杉醇（１０＾－８Ｍ）和顺铂（２μｇ／     

流式细胞术检测化疗前后卵巢癌细胞凋亡的临床意义

目的：探讨化疗前后卵巢癌细胞及外周血淋巴细胞凋亡的因子Ｆａｓ、Ａｐｏ２．７的含量及其临床意义。方法：从７５例化疗前后卵巢癌患者的腹水中提取富含癌细胞的悬液,用Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＴＴＣ／ＰＩ双染法分辨凋亡的亡细胞及坏死细胞及坏死细胞,并以两种凋亡因子克隆抗体Ｆａｓ和Ａｐｏ２．７标记上述细胞,均用流式细胞仪检测。结果：化疗后卵巢癌细胞凋亡率显著高于化疗前的临床疗效好,反之疗效差,被Ｆａｓ及Ａｐｏ２     

抗肿瘤药物与卵巢癌细胞凋亡

细胞调亡（Apoptosis,APO）存在于正常的胚胎发育过程中，是机体保持组织同一性的方式之一。近年来的研究表明，APO也存在于肿瘤的生物学领域内，并且已知几乎所有的抗肿瘤药物均能诱导敏感细胞的APO，且认为其本质就是诱导肿瘤细胞的调亡，而不是以前所公认的细胞坏死[1]。为此本文简要综述抗肿瘤药物与卵巢癌APO的关系及其基因调控。一、卯巢与卵巢癌的APO有作者发现不同发育阶段的正常卵泡并没有出现APO，但发育过程中印泡的闭锁是以APO的形式进行，并且其过程受促性腺激素和性腺激素的调控，雌激素促进卵泡的生长分化，阻止凋…     

丁酸钠诱导卵巢癌3AO细胞凋亡的研究

 目的　探讨丁酸钠 (NaB)诱导卵巢癌细胞株 3AO凋亡的机制。方法　以不同浓度的NaB对体外培养的 3AO细胞进行作用 ,通过光镜和DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡发生与药物剂量和作用时间的关系 ,进而选取 4mmol/LNaB作用 72h的 3AO细胞为实验组 ,应用流式细胞技术分析Fas/FasL、bcl 2 /Bax表达和线粒体跨膜电位的变化 ,透射电镜观察内质网形态的变化。结果　 4mmol/LNaB作用72h ,光镜下可见 3AO细胞出现凋亡改变 ,DNA琼脂糖凝胶电泳中出现典型的DNAladder,线粒体跨膜电位降低 ,内质网肿胀 ,bcl 2表达降低 ,Bax表达升高 ,而Fas/FasL无明显改变。结论　NaB可能通过线粒体通路和内质网通路诱导 3AO细胞凋亡 ,bcl 2 /Bax起着重要的调控作用。     

益气养阴方诱导急性白血病细胞凋亡的实验研究

目的：观察益气养阴方诱导急性白血病模型小鼠细胞凋亡的作用。探讨益气养阴方治疗急性白血病的作用机制。方法：以L7212白血病小鼠为研究对象，用益气养阴方浓缩液给小鼠灌胃8d后处死，利用光学显微镜，DNA琼脂糖凝胶电泳等手段观察益气养阴方对急性白血病的作用。结果：形态学观察可见细胞凋亡特征，DNA琼脂糖凝胶电泳图谱显示细胞凋亡现象。结论：本研究提示诱导白血病细胞凋亡是益气养阴方治疗急性白血病的重要机制之一。     

三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡机制的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (arsenictrioxide ,As2 O3 )诱导人卵巢癌细胞株 3AO细胞凋亡的机制。方法 :以人卵巢癌细胞株 3AO细胞为体外实验对象。通过台盼蓝染色法 ,测定不同浓度As2 O3 作用不同时间对 3AO细胞的生长抑制率 ;采用流式细胞仪检测法 ,通过碘化丙啶 (PI) /罗丹明 12 3(Rho damine12 3,Rh12 3)双重染色测定 3AO细胞线粒体跨膜电位 (△Ψm) ;通过吖啶橙染色 ,荧光显微镜观察As2 O3 作用后 3AO细胞的形态变化。结果 :As2 O3 对 3AO细胞的生长具有明显的抑制作用 ,且具有时间与剂量依赖性 (P <0 0 5 ) ;3 0 μmol/L的As2 O3 作用 4 8h后 3AO细胞中PI- Rh12 3- 细胞与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;As2 O3 作用后 ,3AO细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。结论 :As2 O3 通过诱导凋亡来抑制人卵巢癌细胞株细胞的生长 ,其机制与线粒体跨膜电位△Ψm下降有关。     

内源性一氧化氮在5—氟尿嘧啶诱导人肝癌细胞凋亡过程中的作用

目的:观察内源性NO在5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导人肝癌细胞凋亡中的作用,为进一步研究5-FU的作用机理和提高5-FU的临床疗效寻找辅剂。方法:人肝癌细胞Bel-7402按常规条件培养于含10%小牛血清且无L-精氨酸(L-Arg)的DMEM培养液中。在5-FU作用下,采用免疫组化法观察诱生型一氧化氮合酶的表达情况,并在其底物L-Arg存在的前提下,采用酶法测定硝酸盐/亚硝酸盐量,反映NO的生成,并证明它的作用。用电镜观察凋亡细胞的形态,流式细胞仪进行凋亡细胞的定量。用L-Arg的竞争性拮抗剂L-NAME(Nω-nitro-L-Argininemethylester)对研究结果进行验证。应用高清晰度病理彩色图文分析系统对免疫组化结果进行光密度定量分析。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果:在5-FU的作用下,诱生型一氧化氮合酶表达增强(5-FU组0.16870±0.01968,对照组0.10490±0.01266,P<0.05),在其底物L-Arg存在的前提下,内源性NO的浓度为(73.0±10.2)μmol/L,有显著性提高(P<0.05);人肝癌Bel-7402细胞株的凋亡率明显增高(17.85±0.78)%,细胞坏死率和残渣率减少犤分别为(32.99±0.83)%,(3.18±1.01)%犦,与5-FU组相比P<0.05,有统计学意义。L-NAME能够拮抗内源性NO的作用。结论:内源性NO参与5-FU诱导肝癌细胞凋亡。5-FU通过诱导诱生型一氧     

顺铂诱导人卵巢癌细胞系HO-8910细胞凋亡

[目的]探讨顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡作用的机制.[方法]应用不同浓度顺铂处理卵巢癌HO-8910细胞,于不同时间收集细胞,分别进行倒置显微镜观察活细胞,Gimsa染色观察细胞形态改变并计数凋亡率,琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解情况,SP免疫组化染色观察凋亡过程中p53蛋白的表达情况.部分涂片还使用了TUNEL染色计数凋亡细胞,并与Gimsa染色计数的凋亡细胞数作比较.[结果]在顺铂作用下,卵巢癌HO-8910细胞呈现典型的凋亡细胞形态学改变,如细胞核固缩、染色体凝聚、有凋亡小体形成,细胞DNA电泳呈梯形带,凋亡率及凋亡相关蛋白p53表达阳性率随着药物作用时间延长及药物浓度增大而升高,且二者呈正相关.TUNEL染色计数的凋亡细胞个数明显高于Gimsa染色.[结论]顺铂可以通过诱导卵巢癌细胞系HO-8910细胞凋亡而发挥其抗肿瘤功效,且为p53依赖性细胞凋亡过程.     

氨氯吡咪诱导卵巢癌细胞凋亡

目的 观察利尿药氨氯吡咪诱导卵巢癌细胞凋亡及其可能的机理。方法 用光镜及荧光显微镜从形态上了解凋亡的发生,用琼旨糖凝胶电泳进一步检测发生凋亡的特征性ＤＮＡ降解。流式细胞术定量分析用不同剂量氨氯吡咪处理的卵巢癌细胞诱导的凋亡发生率。同时检测被处理细胞细胞内ｐＨ。结果 氨氯吡咪处理的卵巢癌细胞在形态学上显示出凋亡细胞的特征,琼脂糖凝胶电泳显示特征性ＤＮＡ阶梯图。流式细胞术检测表明,０．０１￣５μｍｏｌ     

吉非替尼与紫杉醇联合对卵巢癌细胞凋亡影响的观察

目的:探讨吉非替尼联合紫杉醇诱导人卵巢癌细胞凋亡的影响。方法:吉非替尼单独或联合紫杉醇作用卵巢癌HO8910细胞,以蛋白质印迹法检测EGFR下游信号磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和细胞核增殖抗原(PCNA),以MTT法检测细胞增殖率,FCM法检测细胞周期分布和凋亡。结果:吉非替尼单用在0.25～4.00μmol/L浓度范围内呈浓度依赖性抑制卵巢癌HO8910细胞增殖,1.0μmol/L浓度单独作用24h则细胞周期主要分布于G1期,p-Akt、p-ERK和PCNA蛋白水平下降,72h时细胞凋亡增加,与对照组比较,差异均有统计学意义,P<0.05。吉非替尼与紫杉醇合用不仅能更显著的抑制细胞增殖,而且凋亡细胞显著增加(P<0.05),与对应浓度单用紫杉醇比较,差异均有统计学意义,P<0.05。结论:吉非替尼与紫杉醇合用能显著抑制卵巢癌HO8910细胞增殖、诱导凋亡,两种药物合用具有协同作用。     

双环铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用

[目的]探讨双环铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用并初步探索其凋亡机制。[方法]MTT法观察双环铂对A2780细胞增殖的抑制作用,荧光显微镜观察细胞形态学变化．多参数流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡率,并测定caspase-3的活性变化及easpase抑制剂对细胞存活率的影响。[结果]双环铂可抑制A2780细胞的增殖,IC50 332．9±26．31μmol／L。双环铂剂量为1×IC50 2×IC50、4×IC50时,诱导A2780细胞凋亡率分别为18．5％±5．4％、39．7％±6．0％和63．7％±3．4％,呈明显的剂量依赖性。经双环铂作用后漂浮细胞呈现典型凋亡细胞形态学改变。casDase-3活性随着细胞凋亡率增加而增加,泛caspase抑制剂z-VADfmk部分抑制细胞死亡。[结论]双环铂可体外诱导A2780细胞凋亡,其凋亡途径存在caspase依赖性及可能存在非caspase依赖性途径。     

顺铂诱导人肝癌细胞凋亡机理研究

顺铂是多种化疗方案的核心药物,在对人卵巢癌细胞和大鼠肝癌细胞的研究中,发现其具有诱导凋亡的作用。本实验从细胞形态、ＤＮＡ裂解片段、细胞周期、ＤＮＡ断裂点末端标记,凋亡相关基因观察顺铂诱导人肝癌细胞凋亡的作用机理。1　材料与方法1.1　细胞培养及药物人肝癌细胞ＳＭＭＣ-7721,引自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库。在含10%小牛血清的ＲＰＭＩ-1640培养基(Ｇｉｂｃｏ产品),37℃,5%ＣＯ2条件下培养。顺氯氨铂(ｃｉｓｐｌａｔｉｎ,ＤＤＰ齐鲁制药厂出品,批号:960601),用含10%正常大鼠血清的ＲＰＭＩ-1640培养液配制,ＤＤＰ终…     

康莱特诱导HL60细胞凋亡的实验研究

目的 探讨康莱特诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制。方法 应用形态学、流式细胞术、DNA凝胶电泳、Annexin V标记等方法检测细胞凋亡的发生,应用RT－PCR检测凋亡相关基因Fas、bcl-2、c-myc表达的变化。结果 康莱特对人早幼粒白血病细胞系HL60细胞的生长有明显的抑制作用,并诱导肿瘤细胞发生凋亡;细胞固缩,核染色质聚集或断裂;DNA凝胶电泳显示清晰的DAN Ladder;流式细胞术检测在G1期之前出现sud-G1峰,凋亡率最高为12．05％;Annexin V标记的方法检测凋亡时发现坏死和凋亡共存。在HL60凋亡过程中,凋亡相关基因Fas转录水平比用药前增强,c-myc和bcl－2含量变化不大。结论 除了坏死,凋亡也是康莱特抑制之一。康莱特诱导HL60细胞凋亡主要与促进Fas基因表达有关。     

康莱特注射液诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的：探讨康莱特注射液诱导人肝癌细胞凋亡的作用。为康莱特注射液治疗肝癌提供理论依据。方法：采用免疫组织化学及透射电镜技术观察康莱特注射液对肝癌细胞凋亡的影响。结果：肝癌细胞经康莱特注射液培养24h后,其凋亡的百分率明显高于对照组和空白组,有显著性差异（P＜0．05）,且组织细胞凋亡在50％以上者占44．12％（15／34）,而对照组及空白组无1例凋亡超过50％;电镜相可见较为典型的细胞凋亡的形态学变化,细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,凋亡小体形成等。结论：康莱特注射液能诱导肝癌细胞发生凋亡;诱导细胞凋亡可是康莱特注射液治疗作用的重要机制。     

TRAIL与卡铂联合诱导卵巢癌细胞凋亡的研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）与卡铂（CBP）联合应用对体外培养的卵巢A2780细胞的生物学效应及其作用机制。方法采用MTT法、流式细胞术，检测体外培养的A2780细胞在卡铂和TRAIL共同作用下的细胞增殖抑制效应以及细胞凋亡程度，应用半定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测TRAIL受体的mRNA表达水平。结果A2780细胞对TRAIL敏感，TRAIL与卡铂联合用药对细胞的增殖抑制呈现高效协同作用，与单独用药组比较有显著性差异（P〈0．05）；流式细胞术分析协同性杀伤作用主要由于TRAIL和CBP联合诱导细胞凋亡引起；RT—PCR法检测结果显示A2780细胞在TRAIL与卡铂联合用药后均表现死亡受体DR4、DR5表达水平上调和诱骗受体DcR1、DcR2表达水平下调。结论在体外TRAIL与化疗药物联用能明显抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，卡铂能明显增强TRAIL对肿瘤细胞的敏感性，其诱导机制可能与死亡受体DR4、DR5表达水平上调和诱骗受体DcR1、DcR2表达水平下调相关。     

三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3)诱导人卵巢癌细胞株3AO细胞凋亡的机制。方法：以人卵巢癌细胞株3AO细胞为体外实验对象。通过台盼蓝染色法，测定不同浓度As2O3作用不同时间对3AO细胞的生长抑制率；采用流式细胞仪检测法，通过碘化丙（PI）／罗丹明123（Rhodammine 123,Rh123)双重染色测定3AO细胞线粒体跨膜电位（△ψm) ；通过吖啶橙染色，荧光显微镜观察As2O3作用后3AO细胞的形态变化。结果：As2O3对3AO细胞的生长具有明显的抑制作用，且具有时间与剂量依赖性（P＜0．05）；3.0μmol/L的As2O3作用48h后3AO细胞中PI－Rh123^-细胞与对照组相比，差异有显著性（P＜0．05）；As2O3作用后，3AO细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。结论：As2O3通过诱导凋亡来抑制人卵巢癌细胞株细胞的生长，其机制与线粒体跨膜电位△ψm下降有关。     

肿瘤坏死因子—α诱导人胃癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人胃癌细胞的作用及规律。方法 用不同浓度的TNF-α作用于胃癌细胞，48小时后，观察细胞生长和凋亡的情况。结果 加入不同浓度的TNF-α后，胃癌细胞的生长出现不同程度的抑制和凋亡，且TNF-α的浓度愈高，细胞相对抑制愈高。结论 TNF-α能诱导胃癌细胞凋亡，抑制细胞生长，并在一定的范围内存在剂量效应关系。