三氟化硼三乙醇胺对家兔肾损害的研究

3个实验组家兔按等比级数为2的不同剂量喂饲三氟化硼三乙醇胺(TFA),隔日1次,共3个月,可引起血清尿素氮和Mg~++含量增高,肾小管上皮细胞浊肿,水变性,细胞内酸性磷酸酶活性增高,碱性磷酸酶及琥珀酸脱氢酶活性明显降低。肾小管上皮细胞基底膜增厚,其皱褶间隙扩张,细胞内粗面内质网扩张,线粒体肿胀,次级溶酶体增加。结果提示TFA对肾小管上皮细胞的代谢有干扰作用。     

猕猴早期内毒素血症肾脏内选择素的变化

目的 :研究选择素在猕猴早期内毒素血症肾脏内变化。方法 :将 11只猕猴随机分成 2组 :对照组 5只 ,静脉注射生理盐水 ;内毒素组 6只 ,静脉注射脂多糖 ,剂量为 2 .8mg·kg- 1 。内毒素攻击后 12 0min ,处死动物 ,光镜观察肾脏标本及行选择素免疫组织化学 (免疫组化 )检测。结果 :组织学显示 ,肾髓质、皮质结构完整 ,肾小球结构完好。免疫组化显示 ,内毒素组动物中 ,P 选择素在肾小球血管内和肾小管周围均有表达 ,有血细胞沉积 ;在肾小球的血管内见血细胞聚集附着管壁 ,L 选择素呈丝网状分布于血细胞之间。对照组无明显病变。结论 :在内毒素休克早期肾脏内发生损伤 ,选择素介导的血管损伤发挥了重要的作用。     

缺氧小鼠肾组织结构的变化

目的:通过观测缺氧后小鼠肾组织形态结构、碱性磷酸酶的量的变化,探讨不同缺氧状态下对肾脏结构和功能的影响.方法:用小鼠制作间歇性重复缺氧模型后,在不同时间点取小鼠肾组织分别作HE染色、过碘酸雪夫氏反应(PAS染色)和碱性磷酸酶染色法操作.结果:缺氧即时处理组肾实质内毛细血管扩张充血,碱性磷酸酶含量增加.但在缺氧延时处理组小鼠由于近曲小管受到损伤,其肾组织切片碱性磷酸酶染色变浅淡.该组近曲小管上皮细胞肿胀,出现颗粒变性.肾小体系膜区增宽,系膜细胞及基质增生.肾实质及肾间质血管扩张充血,间质水肿,中性粒细胞浸润.结论:缺氧时可导致小鼠近曲小管上皮细胞碱性磷酸酶含量增加,但其碱性磷酸酶染色强度随着缺氧时间的延长、近曲小管损伤的加重而成反比变化.     

庆大霉素肾中毒大鼠肾皮质线粒体,溶酶体损伤机理的研究

采用庆大霉素（ＧＭ）肾中毒大鼠模型，观察肾皮质线粒体、溶酶体膜流动性及其标志酶玻珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性的变化以及形态学改变。ＧＭ组０．５ｈ，线粒体、溶酶体膜流动性非常显著下降，并随时间进行性下降；ＳＤＨ及ＡＣＰ酶活性亦同时发生相应变化；电镜下，ＧＭ组０．５ｈ，近端肾小管上皮细胞未见明显异常，１ｈ后线粒体及溶酶体出现明显损伤征象。结果提示，ＧＭ肾中毒时，肾皮质线粒体、溶酶体膜流动下降是其肾毒性发病机理的重要环节。     

吸烟对家兔巨噬细胞溶酶体酸性磷酸酶的影响

本文通过体内外实验观察了吸烟对家兔肺巨噬细胞溶酶体酸性磷酸酶的影响。结果表明:体外香烟烟雾凝聚物具有直接抑制肺巨噬细胞溶酶体酸性磷酸酶活性的作用(1mg组P<0.01),而慢性香烟烟雾吸入会导致肺巨噬细胞溶酶体酸性磷酸酶活性的升高(P<0.01)。溶酶体酸性磷酸酶释放的明显增加是引起肺损伤导致肺气肿的重要环节。     

新生猪肾近曲小管上皮细胞的体外培养与鉴定

目的　分离新生猪肾小管上皮细胞进行体外培养 ,为研究围生期肾小管上皮细胞生物学行为特征提供理论基础。方法　采用机械分散结合 型胶原酶 (0 .5 g/ L)消化的方法纯化肾小管片段 ,选择含 10 %的 FCS低糖DMEM培养基 ,置于 5 %CO2 ,37℃孵箱培养。 0 .2 5 %胰蛋白酶用于肾小管上皮细胞纯化和传代培养。应用细胞形态学 (光镜和电镜 )、免疫细胞化学 (Pan CK和 CK18单抗 )和酶组织化学 (酸性磷酸酶和碱性磷酸酶 )方法进行肾近曲小管上皮细胞鉴定 ;用流式细胞术做细胞纯度鉴定。结果　出生 12～ 2 4小时的新生猪肾小球直径为 5 0～ 70 μm,出生5～ 6天的肾小球直径为 70～ 98μm。新生猪肾近曲小管上皮细胞体外培养对葡萄糖的需求量不高。培养成功并传 6～8代 ,肾小管上皮细胞纯度达 95 %～ 98%。综合形态学、免疫细胞化学和酶组织化学结果 ,支持细胞来源于肾单位的近曲小管。结论　采用机械分散 -酶消化纯化肾小管 ,0 .2 5 %胰蛋白酶纯化肾小管上皮细胞及低糖 DMEM培养新生猪肾近曲小管的方法是可行的。     

肾综合征出血热可溶性免疫复合物引起动物组织细胞脂褐素增多

目的：确定肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome，HFRS)可溶性免疫复合物(IC)注射入动物体内后，组织细胞的组织化学和超微结构的改变．方法：用HFRS病毒抗原和相应抗体在体外制备成可溶性IC，经尾静脉注射入正常BALB／c小鼠体内，采用苏丹黑、PAS染色观察脂褐素、糖原在实验动物肝脏和肾脏的组织分布，用电镜观察亚微结构改变．结果：随IC注射后取材时间延长，小鼠肝肾细胞胞质内脂褐素逐渐增多．PAS染色显示肝细胞中含有许多糖原，呈紫红色颗粒状，在肝细胞分布不均，IC注射后24h，主要分布于肝细胞周边部，靠近血窦；96～120h，主要见于肝细胞胞质空泡状结构的周围，呈细颗粒状．肝细胞胞质淡染，空泡化，细胞表面微绒毛减少或消失，有髓鞘样结构形成．细胞内溶酶体增多．溶酶体包括含有网状颗粒状物质的透明溶酶体和含大量糖原颗粒的溶酶体．肾小球血管系膜增宽，肾小管上皮细胞出现空泡，部分肾小管的几乎所有上皮细胞都出现空泡．细胞内溶酶体增多．除与肝细胞中相似的透明溶酶体外，还可见致密型溶酶体，含髓鞘样结构的溶酶体和不规则或有角的溶酶体．在IC注射后的24h，肾小管上皮细胞未见明显此种溶酶体出现，但在IC注射48h后的肾小管上皮细胞的近基底面则出现较多此类溶酶体．肾小球变化不明显．结论：HFRS病毒抗原和相应抗体在体外制备的可溶性IC，注射入正常BALB／c小鼠体内后，引起组织细胞溶酶体增生，在消化水解IC的同时，残留的成分使细胞内脂褐素(残余体)增多．糖原分布发生改变．     

缺血预处理对大鼠肾脏组织中钠钾腺苷三磷酸酶和钙腺苷三磷酸酶活性的影响

[目的 ]探讨缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用 .[方法 ]观察不同处理组中肾脏缺血再灌注 0 ,2 ,6h时的钠钾 腺苷三磷酸酶和钙 腺苷三磷酸酶活性和病理组织学变化 .[结果 ]肾脏缺血预处理减轻缺血再灌注损伤所致的肾脏组织中钠钾 腺苷三磷酸酶和降低钙 腺苷三磷酸酶活性 ,使肾小管上皮细胞变性损伤明显减轻 .[结论 ]缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤有保护作用 ,其机制与能量代谢的改善有关 .     

2型糖尿病db/db小鼠肾脏动态病理特点

目的：探讨2型糖尿病db/db小鼠肾脏动态病理特点,阐明其糖尿病肾病的发生发展机制,为糖尿病肾脏并发症的研究提供实验依据。方法：选取SPF级7~8周龄雄性db/db小鼠（模型组）和同龄雄性db/m小鼠（正常组）各16只,分别于8、16和32周龄时检测2组小鼠体质量和空腹血糖（FBG）水平,每组各处死小鼠8只,取肾组织行HE和Masson染色观察其病理形态表现,电镜下观察其超微结构。结果：与正常组比较,模型组小鼠8、16和32周龄时体质量增大（P<0.01）,FBG水平明显升高（P<0.01）,双肾指数明显降低（P<0.01）;32周时模型组小鼠双肾指数明显低于16周时（P<0.05）。HE和Masson染色,16周龄时模型组小鼠肾组织可见明显病理改变,主要是肾小球体积增大和肾小管上皮细胞明显水肿;32周龄时病变明显加重,肾组织中可见大量蓝染胶原物质。电镜观察,16周龄时模型组小鼠肾组织以肾小球基底增厚、足突融合、肾小管上皮细胞线粒体数目减少及形态肿胀为主;32周龄时病变明显加重,可见大量胶原纤维。结论：16周龄糖尿病db/db小鼠肾脏有明显病理改变,主要是肾小球基底增厚、足突融合,32周龄时小鼠肾组织呈明显纤维化。     

大鼠阿霉素肾病超微结构转变过程实验研究

目的探讨单侧肾切除加重复注射阿霉素制作的大鼠局灶节段性肾小球硬化动物模型肾脏超微结构的变化过程,为采用阿霉素肾病模型提供实验基础。方法2个月龄雌性SD大鼠38只,随机分为对照组(18只)和阿霉素肾病组(ADR组,20只)。ADR组大鼠先行右肾切除,其后第1周和第2周分别给予阿霉素5mg/kg和3mg/kg尾静脉注射,对照组行假手术和等量生理盐水静脉注射。在切肾后第4、8、16周收集血标本测定血肌酐(Scr)和尿液测定24h尿蛋白定量,各时间点处死6只大鼠取其残肾行光镜组织病理学观察及电镜超微结构观察。结果ADR组Scr和尿蛋白在各时间点均较对照组显著升高(P<0.05);ADR组大鼠肾脏组织病理损害进行性发展,在第16周时形成FSGS改变;电镜下早期以肾小球足细胞广泛融合为主,在第8周时有少部分修复,16周时出现肾小球硬化;肾小管上皮细胞主要表现为大量线粒体肿胀和空泡变损伤。结论单侧肾切除加重复注射阿霉素可成功诱导局灶节段性肾小球硬化大鼠动物模型,其超微结构变化包括肾小球和肾小管双重损伤,若干预需早期进行。     

乳腺良,恶性病变酶活性的超微结构研究

应用超微结构酶组织化学技术对乳腺良、恶性病变中３种细胞器标志酶进行定位观察。结果表明：乳腺癌组织内葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）活性显著高于正常乳腺组织和良性病变，而碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性则降低；乳腺癌间质中ＡＬＰａｓｅ活性明显增强；电镜显示：Ｇ－６－Ｐａｓｅ分布于癌细胞的内质网和核膜上，ＡＣＰａｓｅ恒定的出现于细胞核内的异染色质和核仁丝上，ＡＬＰａｓｅ分布于正常乳腺组织的肌上皮和腺上皮细胞的胞膜上。本文对上述酶活性变化的临床生物学意义进行了讨论。     

肾脂肪囊内注射黄芪对内毒素休克所致急性肾衰竭大鼠的防治作用

目的：观察肾脂肪囊内应用黄芪注射液对内毒素休克所致急性肾衰竭的影响。方法：雄性SD大鼠随机分为4组：对照组、大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)组、黄芪静脉给药组及黄芪肾脂肪囊给药组，测定各组相应时间点的平均动脉压(MAP)、肌酐清除率(Ccr)以及尿量(UV)，并观察各组大鼠光镜下肾小管的病理改变。结果：LPS组大鼠MAP、Ccr及UV显著降低，肾脏病理显示肾小管上皮细胞混浊肿胀；静脉给药组上述指标轻微改善，与LPS组相比仅UV有显著差异，肾脏病理改善较轻；肾脂肪囊给药组Ccr及UV改善明显，尤以12h和16h为著。结论：应用黄芪有利于纠正内毒素休克,改善肾功能，减轻肾脏病理损害。相对于静脉给药，对肾脏保护效果更明显,有可能成为临床治疗内毒素休克及急性肾衰竭的一个新手段和给药途径。     

细脚拟青霉对小鼠血清及肝,脾,肾组织酸性磷酸酶活力的影响

本文观察了细脚拟青霉菌丝体水煎剂对正常及环磷酰胺所致免疫抑制小鼠血清及肝、脾、肾组织中酸性磷酸酶活力的影响作用。结果表明：细脚拟青霉水煎剂给小鼠灌胃２１天后，小鼠血清中酸性磷酸酶活力无显著改变，正常小鼠脾组织酸性磷酸酶活力显著提高，对环磷酰胺所致小鼠肝、脾、肾组织酸性磷酸酶活力下降具有非常显著的抑制作用。提示：细脚拟青霉对免疫抑制小鼠脏器组织内的酸性磷酸酶活力具有调节作用。     

人参皂苷对内毒素休克大鼠诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：制作大鼠动物模型，了解人参皂苷对内毒素休克大鼠诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的影响。方法：SD大鼠60只，分为对照组、脂多糖组（LPS组）和人参皂苷组，观察脂多糖组和人参皂苷组大鼠血清及肾组织iNOS的变化。结果：与对照组比较，LPS组大鼠腹腔注射LPS后，血iNOS、肾组织iNOS显著增高；人参皂苷组与对照组比较，血iNOS、肾组织iNOS显著增高，但与LPS组比较，血、肾组织iNOS增高较少。结论：人参皂苷对内毒素休克大鼠具有保护作用，至少部分是通过影响诱导型一氧化氮合酶来实现的。     

机械压力对兔髁突软骨碱性磷酸酶活性及细胞增殖的影响

目的：探讨不同作用时间及不同液压力值对髁突软骨细胞碱性磷酸酶活性及细胞增殖的影响．方法：消化法培养2wk新西兰白兔的髁突软骨细胞，用自行设计制作的可控液压细胞加载装置在30，60，90kPa压强下加载60，360，720min，用酶动力学方法检测细胞ALP活性，MTT法检测细胞增殖水平．结果：正常髁突软骨细胞随体外培养时间的延长，ALP活性持续增加．30kPa组ALP活性与相应时间点的对照组相比无显差别，但在加压720min后细胞增殖显受到抑制；60kPa组在加压至360min时ALP活性较对照组显升高，同时细胞增殖速率显降低；90kPa组从加压60min起ALP活性就有显升高，但当加力时间延长至720min时，ALP活性反而稍有下降，但仍明显高于对照组，该组持续受压360min及720min细胞的细胞增殖速率均较对照组显降低．结论：60kPa持续加压360min或90kPa持续加压60min以上可使髁突软骨细胞的ALP活性显升高，而细胞增殖受到抑制．     

内毒素对大鼠肾微血管超微结构损害及活血化瘀药的作用

目的：探讨内毒素对肾微血管的损伤及活血化瘀药的保护作用。方法：选健康Wistar大鼠（180-220g)40只，随机均分为正常对照组（NS），模型组（LPS），地塞米松组（Dex)和活血化瘀药组（AMRS）。电镜观察肾小管周微血管内皮细胞的超微结构变化。并比较其变化的程度。结果：LPS组肾微血管损伤比Dex组和AMRS组更为严重，内皮细胞功能不良，溶解，消失，细胞间间隙扩大，Dex组的病变，较LPS组明显减轻，AMRS组的微血管内皮细胞超微结构趋于正常，内皮细胞的病变最为轻微。结论：LPS对肾微血管内皮细胞的损伤是严重的，活血化瘀药对内毒素休克中的大鼠肾微血管内皮细胞具有保护作用。     

破坏肾淋巴循环对犬自体移植肾组织学的影响

目的 :破坏肾淋巴循环对犬自体移植肾组织学的影响 .方法 :成年健康家犬 17只 ,体质量 12～ 2 1kg ,2只用于预实验 ,15只用于实验 ,术后均健康成活 ,并按期取材检查 ,分别于术后 8,12 ,2 1d处死 ,观察移植肾 (左肾 )和对照肾(右肾 )的大体情况 ,并从移植肾和对照肾的皮质和髓质分别切取标本 ,用 4 0 g·L-1甲醛固定 ,石蜡包埋切片 ,HE染色 ;电镜标本用戊二醛和锇酸双固定 ,Epon812包埋 ,超薄切片 ,铅铀双重染色 ,H 5 0 0透射电镜观察 .结果 :移植肾周围组织广泛水肿、粘连 ,随着术后时间的延长水肿减轻而粘连加重 ;吻合血管及输尿管通畅 ,无吻合口狭窄及肾盂、输尿管积水 ,约2 1d消失 .8d起移植肾肾皮质内还偶见脂肪变性、少量蛋白和细胞管型 ,极少数肾小球萎缩 ,少部分肾小球呈代偿性肥大 .电镜下对照肾和移植肾肾小球结构基本无异常 ,均可见近曲小管上皮细胞肿胀、表面微绒毛排列紊乱、胞质内空泡增多、线粒体嵴模糊、溶酶体明显增多 ,远曲小管与集合管可见部分细胞坏死 ,于 12d开始逐渐减轻 .结论 :单纯淋巴因素对自体肾移植肾脏的组织学影响是很小     

家兔视网膜色素上皮移植细胞ACP酶的功能研究

将长耳白兔视网膜色素上皮细胞（ＲＰＥ）悬液植入到青紫蓝兔视网膜下腔，然后移植细胞的结构及酸性磷酸酶（ＡＣＰ）的活性恢复过程进行了动态观察分析，包括用直接检眼镜、透射电镜、酶组织化学及计算机图像分析系统等方法与手段。结果：移植细胞的超微结构及毗邻关系在术后第１４ｄ恢复正常，ＡＣＰ酶的活性在术后第３ｄ开始恢复，第７ｄ恢复加速，第２１ｄ恢复正常。提示：移植的ＲＰＥ细胞能够成活，其结构的恢复先于功能恢复，并能代替原位细胞执行生理功能。     

IL-1beta induces alkaline phosphatase in human phagocytes

BACKGROUND: Alkaline phosphatase (ALPase) is found in blood plasma or serum and leukocytes and regulates intercellular processes, maintaining phosphoryl metabolites in a steady state, as well as synthesizing and hydrolyzing phosphate esters on membranes. ALPase supervises the active transport of inorganic phosphates, fats, proteins, carbohydrates and the sodium/potassium pump mechanisms. The formed elements of blood such as polymorphonuclear (PMNs) leucocytes, macrophages (MP) and some lymphocytes are high in ALPase concentrations. METHODS: In this study we have tested whether the interleukin-1 receptor antagonist (IL-lra) could influence ALPase generation in IL-1beta or lipopolysaccharide (LPS)-stimulated neutrophils and MP. Human neutrophils were isolated from heparin-anticoagulated blood drawn from healthy individuals by centrifugation in a two-step gradient, Ficoll-Hypaque. ALPase activity was assessed spectrophotometrically in test tubes containing isolated neutrophils and adherence PBMCs treated with LPS, IL-1beta and IL-1ra, alone or in combination. RESULTS: IL-lbeta or LPS enhanced ALPase in both PMNs and MP, whereas IL-1ra could not inhibit ALPase activity. We performed time course experiments at 0 min, 5 min, 1 h, 24 h, and 43 h (LPS 20 microg/mL, IL-1beta 10 ng/mL). No significant increase in ALPase activity was seen until 1 h; however, there was a rapid rise over the next few hours. In another set of experiments using IL-1ra (500 ng/mL), there was no difference between treated cells and control cells. The combination of IL-1beta plus IL-1ra did not reduce the ability of IL-1beta to induce ALPase activity. CONCLUSIONS: These data suggest that IL-1beta stimulates ALPase through other mechanisms than the release of arachidonic acid products, which are inhibited by IL-lra.     

扶肾胶囊防治肾小球高血液动力学损伤的机理

目的:研究具有温阳益阴、泻浊活血作用的扶肾胶囊对肾小球高血液动力学病理损伤的防治作用.方法:选取Wistar大鼠40只,雌雄各半,体重(100±15) g.造模方法参照Jane Boudet氏法改制.随机分为模型对照组、空白对照组、扶肾胶囊组.除空白对照组外,每组灌饲相应药物.给药时间60 d.结果:肾皮质电灼所致的大鼠慢性肾功能衰竭模型存在明显的肾小球高血液动力学病理损伤,表现为除Scr、BUN升高外,具备电灼肾宽、厚明显增加、肾小球局灶或节段性硬化.相间以肾小球代偿肥大,24 h尿蛋白排泄率亦显著增加等病理特点.而扶肾胶囊治疗组大鼠,其肾功能明显改善(Scr、BUN下降具统计学差异)的同时,24 h尿蛋白排泄率、肾小球总硬化率、毛细血管丛塌陷率、小球肥大率、平均肾小球直径和平均肾小球内细胞数均显著下降.结论:扶肾胶囊有防治慢性肾功能衰竭时存在的肾小球高血液动力学病理损伤的作用.