哮喘大鼠外周血单个核细胞CD40、CD40L表达和CD40L单克隆抗体对Th1、Th2细胞因子生成的影响

目的 研究哮喘大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)表面CD40、CD40L表速和CD40L单克隆抗体(CD40L McAb)对其细胞因子生成的影响.方法 应用流式细胞仪检测哮喘大鼠PBMCs表面CD40和CD40L表达;RT-PCR检测哮喘大鼠PBMCsCD40和CD40L mRNA表达;CD40L McAb处理哮喘大鼠PBMCs,ELISA检测细胞培养上清中IL-4、IFN-γ含量.结果 和正常大鼠相比,哮喘大鼠PBMCs CD40、CD40L表达增高(P＜0.05);哮喘大鼠PBMCs经CD40L McAb处理后,和未处理组相比,IL-4水平明显降低(P＜0.05),IL-4/IFN-γ比值明显降低(P＜0.05).结论 哮喘大鼠PBMCs存在CD10、CD40L高表达,CD40L McAb可以降低IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值.     

免疫增强型肠内营养对重症急性胰腺炎大鼠炎症反应和免疫功能的影响

目的 探讨免疫增强型肠内营养对重症急性胰腺炎大鼠炎症反应和免疫功能的影响。方法 采用牛磺胆酸钠逆行注射法建立重症急性胰腺炎模型，将60只建模成功的胰腺炎大鼠分为全肠外营养组（TPN组）、普通肠内营养组（EN组）和免疫增强型肠内营养组（SEN组），每组20只。肠外营养和肠内营养分别采用经右颈内静脉插管输液和经胃造口空肠上段给液的方式。各组自建模成功后均应用乙酸奥曲肽皮下注射做基础治疗。于第24小时，第4、7、14天分别收集血液标本，测定血浆细胞因子TNF-α、IL-10及外周血中的CD3＋、CD4＋、CD8＋淋巴细胞亚群。并于建模前取10只大鼠测定血清淀粉酶，作为正常对照，建模后24小时，第3、5、7、9、11、14天检测各组血清淀粉酶。结果 （1）建模24小时，3组动物血浆TNF-α水平均相对较高，而IL-10处于相对较低水平；第4天时，3组TNF-α均明显下降，而IL-10浓度升高并达到最高水平，此时3组间的TNF-α和IL-10水平差异均无显著性（P〉0．05）；第7天和第14天时，3组的TNF-α和IL-10均呈不同程度下降趋势，其中SEN组TNF-α和IL-10水平明显低于TPN组和EN组（P〈0．05），而后两组间差异无显著性（P〉0．05）。（2）建模24小时，3组的CD3＋、CD4＋和CD4＋／CD8＋均升高；第7天和第14天时SEN组的CD3＋、CD4＋和CD4＋／CD8＋均明显高于TPN组和EN组（P〈0．05），但CD8＋变化不大。（3）建模24小时，3组血淀粉酶明显升高，此后均逐渐下降；第7天时，SEN组的血淀粉酶达正常范围，而TPN组和EN组的血淀粉酶在第9天才接近正常水平。SEN组14天死亡率明显低于TPN组和EN组（P〈0．05）。结论 免疫增强型肠内营养能有效调节重症急性胰腺炎大鼠细胞因子水平，增强免疫功能，缩短病程，降低死亡率。     

胃癌患者营养状况与小肠二肽转运载体1蛋白表达的相关性

目的　研究不同营养状态胃癌患者的小肠二肽转运载体1(PEPT1)蛋白表达,探讨其可能的调控机制。方法　以60例胃癌患者为研究对象,根据营养风险筛查2002（NRS 2002）评分分为有营养风险组（NRS 2002评分≥3分,n=18）及无营养风险组（NRS 2002评分＜3分,n=42）。术中取小肠黏膜标本,Western blot法检测小肠PEPT1蛋白表达。酶联免疫吸附法检测两组胃癌患者血清肿瘤坏死因子（TNF）-α的浓度。对Caco-2细胞采用不同浓度TNF-α（20、50、100 μg/L）处理,于不同时点（24、48、72 h）采用Western blot法检测Caco-2细胞PEPT1蛋白表达水平。结果　有营养风险组小肠PEPT1表达和血清TNF-α浓度均显著高于无营养风险组（0.63比0.23,P=0.000; 0.23 μg/L比0.17 μg/L,P=0.001）。在Caco-2细胞模型中,不同浓度TNF-α（20、50、100 μg/L）处理24 h后的PEPT1表达显著高于空白组（0.68比0.54,P=0.005;0.72比0.54,P=0.001;0.78比0.54,P=0.000）;TNF-α 50 μg/L处理不同时间（24、48、72 h）的Caco-2细胞PEPT1表达显著高于空白组（0.57比0.52,P=0.004;0.75比0.52,P=0.000;0.77比0.52,P=0.000）。结论　有营养风险的胃癌患者小肠PEPT1蛋白表达增加,其机制可能与TNF-α调控作用有关。     

肺结核患者外周血T细胞活化亚群和细胞因子的变化

目的应用流式细胞术检测结核患者外周血单个核细胞经结核杆菌特异性蛋白刺激前后T细胞表面活化标记以及细胞因子的变化,以探讨其在肺结核发病过程中的意义。方法选择203例结核患者为疾病组,按照痰涂片结果分为涂阳结核组(123例)和涂阴结核组(80例),选择同期的健康人群作为对照组,采用流式细胞技术对其外周血PBMC中的T细胞表面活化标记以及细胞因子进行检测分析。结果结核病组的CD3~+CD25~+、CD4~+CD25~+、CD25~+、CD8~+HLA-DR~+、CD3~+HLA-DR~+、CD8~+CD38~+、CD38~+、CD4~+IFN-γ~+、CD4~+TNF-α~+T细胞的表达与对照组相比显著升高,并且CD4~+TNF-α~+T细胞在涂阳结核组的百分率显著高于涂阴结核组(P0.05)。结论结核患者体内存在异常活化的淋巴细胞亚群,检测T淋巴细胞表面活化标记及分泌的细胞因子有助于评估结核患者的免疫功能。     

短发夹状RNA介导TNF-α基因沉默及抑制细胞凋亡的作用

目的探讨特异性的短发夹状RNA（shRNA）沉默肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因及抑制细胞凋亡的作用效果。方法构建针对大鼠TNF-α基因编码区的短发夹状RNA真核表达载体质粒pRNAT-U6.1-TNF-αshRNA,采用电穿孔的方法转染RK3E细胞,经G418筛选后,形成稳定的表达TNF-αshRNA的细胞系。实验分为3组,⑴正常对照组：未转染的RK3E细胞;⑵阴性对照组：转染空载体pRNAT-U6.1的RK3E细胞系;⑶实验组：转染TNF-αshRNA的RK3E细胞系。经脂多糖（LPS）孵育12h后,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR检测mRNA的表达。结果成功构建大鼠TNF-α基因的短发夹状RNA真核表达载体质粒pRNAT-U6.1-TNF-αshRNA;经LPS刺激后,与正常对照组和阴性对照组相比,实验组的细胞凋亡率显著降低（P〈0.01）,TNF-α的mRNA含量显著降低（P〈0.05）。结论针对TNF-α的特异性短发夹RNA可以明显引起靶基因的沉默,进而抑制LPS诱导的RK3E细胞凋亡。     

脂肪源性干细胞体外分离培养及平滑肌细胞诱导的实验研究

目的探讨大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs)体外培养及诱导分化成为平滑肌细胞的可行性。方法取SD大鼠双侧腹股沟脂肪组织,酶消化法分离,体外扩增ADSCs,流式细胞仪检测ADSCs表面标志物表达及细胞周期。取第3代生长期的细胞,分别用一定浓度的维生素C、地塞米松、肝素诱导分化并培养2周,倒置相差显微镜观察细胞生长情况和形态变化,在诱导28 d左右取对照组及诱导组细胞,采用免疫荧光法及Western Blot半定量检测平滑肌α-肌动蛋白(SMA-α)表达,采用荧光半定量PCR法检测SMA-αmRNA水平。结果培养的ADSCs呈多层生长,形态多为梭形。流式细胞仪检测细胞表面标志物CD105、CD29、CD44呈阳性表达,HLA-DR、v WF、CD34呈阴性表达;细胞周期结果显示细胞为二倍体。处于生长对数期的细胞加入诱导剂诱导后细胞多为短梭形,有胞浆突起,细胞核明显,有部分细胞出现多核,相邻细胞相互融合,有向相同方向生长的趋势。免疫荧光结果显示SMA-α呈阳性表达,Western Blot结果显示SMA-α在诱导组相对含量高。荧光半定量PCR结果显示诱导组的SMA-α高表达。结论由脂肪组织分离培养的ADSCs具有干细胞特性。ADSCs在体外一定条件下可诱导分化成平滑肌细胞。     

五苓散对脑出血大鼠TNF-α表达的影响

目的研究大鼠实验性脑出血后血肿周围肿瘤坏死因子-α（TNF-a）表达及五苓散汤剂对TNF-α影响。方法采用自体不凝血注入大鼠尾状核制备脑出血模型，免疫组化染色法检测脑组织TNF-α表达。结果脑出血后6小时血肿周围脑组织TNF-α始表达，48小时达高峰，7天显著下降；五苓散组与模型组之间有显著差异（均P〈0．05）。而TNF-α的表达与脑含水量之间存在正相关（P〈0．05）。结论TNF-α与了脑出血继发性脑组织损伤，并与损伤程度存在相关性，五苓散可能通过减轻脑水肿，减少TNF-α的产生发挥脑保护作用.     

肝硬化患者血CD14~+CD16~+单核细胞分泌TNF-α、IL-10功能的研究

[目的]研究分析肝硬化患者外周血CD14+CD16+单核细胞分泌TNF-α、IL-10的功能特点。[方法]采用流式细胞术检测不同浓度的LPS刺激外周血单核细胞分泌细胞因子TNF-α及IL-10水平。[结果]肝硬化患者外周血单核细胞分泌TNF-α水平增加,失代偿期肝硬化组TNF-α、IL-10的水平随着LPS浓度的增加升高不明显。[结论]肝硬化患者肝脏储备功能越差,则CD14+CD16+单核细胞频率越高,促炎因子增加,其频率及生物学功能与病情的严重性有密切关系。     

谷氨酰胺对内毒素诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞TNF-α表达和NF-κB活化的影响

目的:探讨Gln对内毒素(LPS)诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞肿瘤坏死凶子(TNF)-α表达和NF-κB活性的影响. 方法:原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,分为0、0.5、2.0、10.0 mmol/L Gin及10 mmol/L Gin、空白对照共六个组,作用8 h后,前四组1μg/mL LPS刺激24 h.用ELISA法测定细胞上清TNF- α的水平,电泳迁移率改变试验(EMSA)检测细胞内NF-κB活性. 结果:Gln预处理可降低LPS诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞TNF-α的表达,并且其作用呈剂量依赖性,在10 mmol/L浓度最为显著;Gln预处理对NF-κB活性有明显地抑制作用. 结论:Gin预处理可抑制NF-κB活性,并降低LPS诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞TNF-α的表达,从而起到免疫调节的作用.     

血管紧张素转化酶抑制剂对大鼠树突状细胞功能的影响

目的研究动脉粥样硬化(AS)大鼠树突状细胞(DC)的功能状态及血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)的影响。方法大鼠30只分组饲养后,分离外周血单个核细胞(PBMC),在含粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)培养条件下制备DC。用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子CD86(B7-2)的表达,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC对同种异体T淋巴细胞的刺激能力。酶联免疫吸附法(ELISA)测定MLR上清液中细胞因子水平。结果与正常对照组比较,AS大鼠DC表面CD86的表达明显增高,对T淋巴细胞刺激的能力增强,致炎细胞因子(IL-1β、TNF-а)分泌增多。与AS组相比较,AS应用依那普利组的DC表面CD86的表达明显降低,对T淋巴细胞刺激的能力下降,致炎细胞因子(IL-1β、TNF-а)分泌减少。结论AS大鼠DC处于激活状态,DC可能参与了AS的发病。ACEI对大鼠DC功能有明显的抑制作用,可能是其抗AS的作用机制之一。     

CD151基因对血管内皮细胞表面整合素α3β1／α6β1表达的影响

目的研究重组腺相关病毒介导的CD151基因转染人脐静脉内皮细胞（HUVECs）对整合素α3β1／α6β1表达的影响。方法包装携带CD151、CD151-QRD和CD151-ARSA的重组腺相关病毒,转染HUVECs细胞,用Western Blot和流式细胞仪检测HUVECs细胞CD151及整合素a3131／a6131的表达。结果CD-51组及其各突变体组的CD151表达均明显高于对照组（P〈0．01）,但3组间互相比较CD151蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。Western Blot及流式细胞仪检测显示CDl51组α3、α6及β1的表达明显高于对照组、CD151-QRD组和CD151-ARSA组（P〈0．05）,其余各组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD151基因转染能促进整合素α3β1／α6β1的蛋白表达,其机制可能与CD151胞外大环QRD194-196。“及C末端囊泡运输基序YRSL”。。。有关。     

PM_(2.5)对Wistar大鼠肺组织中HMGB1、TNF-α、IL-6表达的影响

目的观察气管滴注不同浓度大气细颗粒物(PM2.5)混悬液对Wistar大鼠肺组织中高迁移率蛋白(HMGB1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)表达的影响,为进一步探求中医防治雾霾伤肺的有效方药提供客观依据。方法采用便携式大气细颗粒物PM2.5采样器收集武汉工业区大气中的PM2.5,染毒前用生理盐水配制成所需浓度的PM2.5混悬液。将40只健康SPF级雄性Wistar大鼠随机分为空白组、生理盐水组、PM2.5低、中、高浓度组(PM2.5混悬液的浓度分别为1、3、10 mg/m L)。检测大鼠肺组织中HMGB1、TNF-α、IL-6的表达水平。结果 PM2.5低浓度组、PM2.5中浓度组、PM2.5高浓度组的HMGB1、TNF-α、IL-6表达水平均高于空白组和生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.01)。进一步经LST-t检验,在HMGB1、TNF-α的表达方面,PM2.5低、中浓度组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组与PM2.5高浓度组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);在IL-6的表达方面,PM2.5低浓度组与PM2.5中、高浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.05);PM2.5中浓度组与PM2.5高浓度组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论随着PM2.5浓度的增加,染毒组大鼠肺组织中HMGB1、TNF-α和IL-6的表达水平均显著增高,肺组织中HMGB1、TNF-α和IL-6的表达有望作为雾霾致大鼠肺损伤的生物学指标。     

大鼠骨髓来源树突状细胞的体外诱导扩增及其功能鉴定

目的探讨体外诱导和扩增大鼠骨髓来源树突状细胞（DC）的方法，并观察其表型及功能特性。方法取得大鼠骨髓细胞后，去除红细胞，加入重组大鼠粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（rrGM-CSF）、重组大鼠白细胞介素4（rrIL-4）培养2周；在光镜和扫描电镜下观察培养DC的形态学特征，流式细胞仪检测DC表面MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达水平，混合淋巴细胞反应检测其刺激同种T细胞增殖能力。结果细胞培养8d后，经倒置显微镜和电镜观察DC出现典型形态，培养6d的DC具有不成熟表型，流式细胞仪检测MHC-Ⅱ为（29．03±4．39）％、CD80为（21．98±7．08）％，CD86为（25．94±6．80）％，刺激同种T细胞增殖能力极低，而培养12dDC的MHC-Ⅱ为（74．05±5．97）％、CD80为（79．85±6．53）％，CD86为（81．00±7．47）％，刺激同种T细胞增殖能力明显增强。结论大鼠骨髓来源干细胞可经联合应用细胞因子诱导培养为具有典型形态特征及功能的DC，为进一步研究其在移植免疫学中的应用奠定基础。     

n-3多不饱和脂肪酸对急性胰腺炎大鼠炎性细胞因子表达的调控作用

目的:评价添加鱼油的EN对急性胰腺炎(AP)大鼠炎性反应及免疫功能的影响.方法:70只大鼠随机分为四组,分别为无胰腺炎(对照)组、胰腺炎-普通EN组,胰腺炎-玉米油组和胰腺炎-鱼油组.建立AP模型,术后第7天检测外周血中CD4 、CD8 细胞占总淋巴细胞的比例及CD4 /CD8 比值,TNF-α、IL-10浓度和IL-10/TNF-α变化.结果:鱼油组AP大鼠TNF-α、IL-10浓度较其他组明显降低,且下调IL-10/TNF-α比值,CD4 /CD8 比值明显升高.结论:添加鱼油的EN液对减轻AP大鼠的炎性反应,调节其免疫功能方面优于其他组营养成分.     

骨髓间充质干细胞移植在肺气肿大鼠模型肺组织内定植研究

目的：观察骨髓间充质干细胞移植在肺气肿大鼠模型肺组织内的定植情况。方法：选择健康SD大鼠34只,按随机数字表法分为MSCs干预组（A组,10只,慢阻肺大鼠,尾静脉输注MSC 1×106个/mL）,肺气肿模型组（B组,10只,慢阻肺大鼠,尾静脉输注等体积PBS）及MSC对照组（C组,10只,正常大鼠,尾静脉输注MSCs 1×106个/mL）,正常对照组（D组,4只,正常大鼠,尾静脉输注等体积PBS）,采用烟熏法复制大鼠肺气肿模型。全骨髓培养法体外培养扩增雄性SD大鼠来源的MSCs,经GFP标记细胞后将其经尾静脉注入肺气肿模型SD大鼠体内,24 h内处死大鼠,取肺组织迅速冰冻切片,共聚焦激光显微镜下观察观察转染GPF的间充质干细胞在大鼠肺内定植情况。结果：成功培养具有分化潜能的骨髓间充质干细胞,MSCs传至第4代时有99.5%表达CD44、99.6%表达CD29等间充质干细胞表面标志,仅有0.4%表达CD34、1.0%表达CD45单核细胞以及造血干细胞表型;成功复制大鼠肺气肿模型,香烟烟雾暴露组（A、B组）平均肺泡间隔为（119.0±26.2）μm,高于对照组（C、D组）的（89.8±17.3）μm,差异有统计学意义（P〈0.05）;平均肺泡数为（173.9±68.3）个/mm2低于对照组的（280.3±104.0）个/mm2,差异有统计学意义（P〈0.05）;显微共聚焦发现MSCs经尾静脉注入大鼠体内24 h后可见A组大鼠肺组织内转染绿色荧光蛋白质粒的MSCs,而B组、C组及D组均未见转染荧光。结论：骨髓间充质干细胞经尾静脉输注入后可在肺气肿模型大鼠肺内定植,为MSCs治疗慢阻肺可能提供理论依据。     

大鼠平滑肌细胞和平滑肌祖细胞的体外培养及二者间表型转化的初步研究

目的探讨体外分离培养大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）和平滑肌祖细胞（SPC）的方法,并初步比较不同培养条件下大鼠SPC对VSMC表型转化的影响。方法原代培养细胞,通过蛋白印迹实验fWesternBlot）检测平滑肌α-肌动蛋白（α-SMA）鉴定VSMC,SPC培养后经流式细胞术鉴定分选贴壁细胞CD14和CD105双阳性表达细胞继续培养为SPC,通过SPC与VSMC共培养以及利用Transwell装置条件培养、空白对照3种条件干预后,应用WesternBlot法分别测定三组骨桥蛋白水平变化．以检测并初步比较不同条件下SPC对VSMC表型转化的影响。结果两种细胞分别原代培养后,WesternBlot鉴定VSMC,结果显示α-SMA表达呈阳性;鉴定SPC免疫细胞化学染色α-SMA表达呈阳性,且流式细胞仪分析显示CD14和CD105呈双阳性表达。与空白对照相比,两种细胞共同培养和条件培养时VSMC表达骨桥蛋白水平明显升高,共同培养较条件培养骨桥蛋白水平升高效果更为明显。结论SPC对VSMC的表型由收缩型向合成型转变具有一定作用,SPC通过直接作用与旁分泌作用不同程度地增强了VSMC的表型转化;对比发现。两细胞直接接触培养时VSMC表型转化的影响更为明显（P〈0．05）。     

多不饱和二十二碳六烯酸对白细胞介素-2α受体的抑制作用

目的:研究多不饱和二十二碳六烯酸(DHA)可通过改变IL-2α受体在细胞膜亚区域的分布和免疫抑制调节. 方法:用DHA(22:6)处理Jurkat E6-1 T 细胞,硬脂酸(18:0)处理作为阴性对照. 应用流式细胞仪检测DHA对T细胞表面分子CD25(IL-2Rα)表达的抑制作用.超速离心分离T细胞膜脂肪微区域,应用蛋白印迹法分析检测IL-2Rα所在的T细胞膜亚区域组分,与硬脂酸处理相比较,分析DHA处理对T细胞膜不同亚区域IL-2Rα分布的影响. 结果:流式细胞仪检测表明,对照组75 μmol/L硬脂酸处理,检测到细胞表面CD25阳性表达细胞率为40.14%,75 μmol/L DHA 处理T细胞,细胞表面CD25阳性表达细胞率为19.28%,DHA可抑制T细胞表面分子CD25的表达.蛋白印迹法分析确定IL-2Rα存在于rafts组分中,DHA处理使部分IL-2Rα从膜rafts区域移位到可溶膜区域. 结论:膜脂肪微区域为IL-2受体信号转导的功能性亚区域,DHA通过调节IL-2Rα在膜脂肪微区域的分布, 使部分IL-2Rα从功能性rafts区域移位到非功能性可溶膜区域,而产生免疫抑制作用.     

花生四烯酸体外刺激血小板活化的初步研究

目的:初步研究花生四烯酸(AA)体外刺激血小板活化的作用条件。方法:利用Beckman-Coulter EPICS-XL型流式细胞仪分析10名健康体检者的血小板分别在不同浓度的AA(终浓度为0.25、0.50、1.00、2.50、5.00 g/L)体外活化不同时间(1、2、5、10、20 min)后血小板P-选择素的阳性表达百分数(CD62p%)、平均荧光强度(CD62p-MFI)及其两者的乘积(CD62p%×CD62p-MFI)。结果:1%多聚甲醛(PFA)固定后血小板CD62p%的表达在45 min内无显著性变化(P>0.05);不同浓度AA刺激血小板2 min后,0.25、0.50、1.00、2.50 g/L浓度组的CD62p%和CD62p%×CD62p-MFI随AA浓度的升高而逐渐升高,5.00 g/L浓度组CD62p%和CD62p%×CD62p-MFI反而下降(P<0.01或P<0.05);血小板CD62p%和CD62p%×CD62p-MFI在2.50 g/L浓度的AA分别活化1、2、5 min的结果无显著性差异,而10、20 min组其结果随AA作用时间的延长而逐渐降低(P<0.01或P<0.05)。结论:AA体外活化血小板后CD62p表达的增高与AA的浓度和活化时间有关,其作用条件以2.50 g/L浓度的AA活化1~5 min为佳,且1%PFA固定血小板CD62p%表达的稳定性至少可达45 min。     

免疫抑制状态下内毒素血症模型小鼠急性肺损伤及其机理研究

目的本研究在建立免疫抑制小鼠内毒素血症模型的基础上,观察机体肺损伤的现象以及发生机制。方法免疫抑制小鼠内毒素血症模型建立,选取Blb/c小鼠,腹腔内注射甲基强的松龙30 mg/kg连续3 d,随后静脉注射内毒素,10 mg/kg剂量,于注射后26、h时点取血浆,在此基础上,50只小鼠分为免疫抑制内毒素血症模型组（模型组）以及甲基强的松龙对照组（激素组）与空白对照组,检测指标分别：①肺部病理学改变,采用HE染色;②肺组织细胞因子表达检测：分别用免疫组化与ELISA检测肺组织中TNF-α与IL-10表达水平;采用免疫组化检测肺组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达情况,肺组织一氧化氮（NO）水平采用化学比色法检测;③是采用化学比色法与ELISA检测血浆一氧化氮、TNF-α、INF-γ、IL-10等细胞因子水平。结果免疫抑制小鼠内毒素血症模型小鼠出现急性肺损伤的病理改变,TNF-α、IL-10与iNOS在肺间质浸润的炎性细胞中阳性表达;在2 h与6 h时点,肺组织与血浆TNF-α与NO的水平明显高于激素组与空白组（P〈0.05）;在6 h时点,模型组小鼠肺组织与血浆IL-10的水平明显高于激素组与空白组（P〈0.05）。结论免疫抑制内毒素血症模型小鼠急性肺损伤与机体巨噬细胞过度活化而释放大量炎性细胞因子有关。     

蠲痛饮对大鼠子宫内膜异位症TNF-α、IL-1β和ICAM-1影响

目的:探讨蠲痛饮对大鼠子宫内膜异位症血清和腹腔液中细胞因子IL-1β、TNF-0[以及异位内膜ICAM-1表达影响.方法:采用SD大鼠自体移植建立EMS大鼠模型,将60只大鼠随机分为正常组、模型组、蠲痛饮低剂量组、中剂量组、高剂量组、丹那唑组6组,持续用药28天,Elisa法检测TNF-α、IL-1β含量以及S-P法检测ICAM-1的表达.结果:模型组腹腔液和血清IL-1β、TNF-α含量以及异位内膜ICAM-1表达明显高于正常组,蠲痛饮能显著减低内异症大鼠血清及腹腔液中IL-1β、TNF-α含量和减少异位内膜组织ICAM-1表达(P＜0.05).结论:子宫内膜异位症的发病与细胞因子IL-1β,TNF-α以及异位内膜ICAM-1异常表达有关.蠲痛饮通过抑制炎症因子IL-1β、TNF-α的分泌改善全身和局部免疫水平,抑制异位子宫内膜的黏附而达到治疗目的.