人衰老成纤维细胞c—myc原癌基因的损伤修复

目的；观察人衰老成纤维细胞特异因基ｃ－ｍｙｃ的损伤修复，方法采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法。结果；衰老细胞能有效地修复ｃ－ｍｙｃ基因。结论；衰老细胞有效地修复对细胞存亡至关重要的基因。     

人衰老成纤维细胞c-fos基因对DNaseⅠ的敏感性分析

目的：研究人衰老成纤维细胞c-fos基因染色质结构状态。方法：DNaseⅠ敏感性分析法。结果：衰老细胞c-fos基因在表皮生长因子（EGF）诱导后对DNaseⅠ的敏感性无明显变化，而年轻细胞对DNaseⅠ的敏感性显著升高。结论：衰老细胞的c-fos基因可能在异染色质上，处于关闭状态，因而不易为EGF所诱导。     

衰老机制的分子水平研究进展

衰老机制复杂,涉及面广,对衰老机制的研究始终是生命科学领域中最基本、最关键的问题。有关衰老的学说繁多,但迄今为止没有一种学说能完全阐释衰老的机制。近年来,随着现代遗传学、细胞生物学、分子生物学等边缘学科的飞速发展,对衰老机制的研究越来越趋向于分子水平。现主要从端粒与端粒酶、衰老与长寿基因、DNA修复能力、线粒体DNA损伤几个方面与细胞衰老的关系进行阐述。     

细胞衰老与相关基因的关系

衰老是细胞的重要生命现象之一,主要受遗传与环境两个反面的影响、对细胞衰老相关基因的研究,可了解细胞衰老的分子机制,可揭示细胞衰老相关基因间相互作用及在衰老过程中的调节、损伤、应激、修复等内在联系,为老年病,细胞癌变、器官移植等提供了新的研究途径.     

衰老细胞的PDGF基因表达

细胞丧失生长能力是细胞衰老的特征 ,故了解控制细胞生长的基因有助于了解衰老的机理。生长因子是一类能与靶细胞受体特异性结合 ,通过自分泌或内分泌方式调节细胞增殖和分化 ,具有广泛生物学作用的多肽或小分子蛋白质 ,参与胚胎发育、组织的损伤修复、肿瘤的发生发展和免疫系统的调节 ,有关衰老细胞中生长因子基因表达变化的研究尚不多。本文就细胞衰老过程中衰老细胞的血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)基因表达的变化作一综述。ＰＤＧＦ是一强有力的致分裂剂和趋化因子。因最初发现于血小板的α一颗粒而得名[1] 。由于后来发现ＰＤＧＦ能由许…     

衰老的分子基因水平研究

衰老不能抗拒,但能延缓。揭开衰老之谜,科学地提出抗衰老对策,已经成为倍受关注的科学前沿。近年的研究已经进入分子基因水平,细胞中是否存在调控衰老进程与寿限的“长寿基因”与“衰老基因”,分离、克隆衰老相关基因,弄清其功能、调控、影响因素是国际上目前探索的热点。本文简要地就此作一综述。     

p53信号通路与肿瘤关系的研究进展

在人体正常细胞的活动中,p53(mtp53)基因通过参与诱导细胞周期阻滞、促进细胞凋亡和DNA的修复等,发挥着避免受损DNA堆积、维持基因组的稳定及调节细胞的分化与衰老等功能活动。2000年,Vogelstein和Levine等学者提出了p53基因网络的概念,认为许多基因形成网络协同调节细胞的生命活动,不应该孤立地观察单个基因的生物学功能[1]。迄今,p53基因信号通路中经研究并报道的基     

单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对肺腺癌细胞杀伤作用探讨

目的：探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因转染联合抗病毒药物更昔洛韦（GCV）对人肺腺癌细胞系的杀伤作用。方法：应用基因工程技术构建了携带单纯疮疹病毒胸苷激酶（HSV-tk）基因的逆转录病毒重组体pLXSN-tk，通过脂质体法转染PA317细胞，G418筛选出产重组病毒颗粒的生产细胞PA317-tk细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HSV-tk/GCV系统对人肺腺部细胞系GLC-82的生长抑制率。结果：重组逆转录病毒载体能有效地将HSV-tk基因导入GLC-82细胞系内并使其获得对GCV的敏感性。结论：肺腺癌细胞转染HSV-tk基因后，能有效地被GCV杀死。     

人衰老成纤维细胞c—fos基因对DNasiⅠ的敏感性分析

研究人衰老成纤维细胞ｃ－ｆｏｓ基因染色质结构状态。ＤＮａｓｅⅠ敏感性分析法。结果衰老胞胞ｃ－ｆｏｓ基因在表皮生长因子诱导后对ＤＮａｓｅⅠ的敏感性无明显变化，而年轻细胞对ＤＮａｓｅⅠ的敏感性显著升高。结论：衰老细胞的ｃ－ｆｏｓ基因可能在异染色质上，和于半闭状态，因而不易为ＥＧＦ所诱导。     

补肾延缓衰老--从单基因到多基因的调控研究

为从基因水平研究补肾疗法延缓衰老的效果和机理．列举补肾方(右归丸、补肾益寿胶囊)对老年大鼠T细胞凋亡及其相关基因(Fas、FasL)．和促凋亡、抗凋亡基因mRNA．T细胞Caspase8、Caspase3活性等的影响．并与桃红四物汤比较：以及补肾益寿胶囊对老年人T细胞凋亡和促凋亡基因mRNA的影响。结果：补肾方能有效降低老年大鼠和老年人T细胞的过度凋亡。而这种作用是补肾方对各个相关基因综合调控的结果。为肾本质和中药延缓衰老的研究提出了新的思路。     

自发性高血压大鼠左心室癌基因c－myc的表达

探讨在体情况下癌基因ｃ－ｍｙｃ与心肌肥厚的关系，研究已有心肌肥厚雄性４０周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和年龄、性别相配的Ｗｉｓｔａｒ京都种（ＷＫＹ）大鼠左心室ｃ－ｍｙｃ基因表达变化。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的结果显示ＳＨＲ左室肌ｃ－ｍｙｃ表达量明显比ＷＫＹ高。左室增强的ｃ－ｍｙｃ表达可能在ＳＨＲ左室肥厚形成中起重要作用。     

c-myc反义寡核苷酸对HL-60细胞增殖及c-myc基因表达的影响

目的：观察c-myc基因反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞增殖及c-myc基因表达的抑制作用．探讨ASODN作为药物进行白血病基因治疗的可行性、方法：应用c-myc反义寡核苷酸封闭HL-60细胞c-myc基因、RTPCR方法检测该基因表达抑制情况．流式细胞仪进行细胞周期分析,倒置显微镜观察细胞形态变化．绘制细胞生长曲线,MTT法检测细胞增殖状态。结果：c-myc基因反义寡核苷酸转染HL-60细胞后,c-myc基因表达明显受抑;S期细胞比值由55.6％降至16．7％;细胞生长受抑,增殖能力减弱,其抑制作用具有序列特异性及剂量依赖性。结论c-myc基因反义寡核苷酸对HKL-60细胞增殖及c-myc基因的表达具有明显的抑制作用,有望成为抑制白血病细胞增殖的核酸药物。     

INCREASED EXPRESSION OF PDGF AND C－MYC GENES IN LUNGS AND PULMONARY ARTERIES OF PULMONARY HYPERTENSIVE RATS INDUCED BY HYPOXI

ＩＮＣＲＥＡＳＥＤＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦＰＤＧＦＡＮＤＣ－ＭＹＣＧＥＮＥＳＩＮＬＵＮＧＳＡＮＤＰＵＬＭＯＮＡＲＹＡＲＴＥＲＩＥＳＯＦＰＵＬＭＯＮＡＲＹＨＹＰＥＲＴＥＮＳＩＶＥＲＡＴＳＩＮＤＵＣＥＤＢＹＨＹＰＯＸＩＡ￥ＣａｉＹｉｎｇｎｉａｎ；（蔡英年...     

c-myc在结直肠癌良恶性病变中的表达

目的 :探讨癌基因c -myc的表达与结直肠癌恶性转化、恶性演进的关系及其对结直肠癌生物学行为的影响。方法 :用免疫组化LSAB(Labelledstreptavidinbiotinmethod)技术检测 6 7例结直肠癌、2 2例管状腺瘤、10例绒毛状腺瘤、2 3例正常黏膜c -myc基因产物。结果 :结直肠癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、正常黏膜c -myc的阳性表达率分别是 6 7.2 % (45 / 6 0 ) ,5 0 % (5 / 10 ) ,2 2 .7% (5 / 2 2 )和 17.4 % (4/ 2 3) ,组间差别有非常显著性意义 (P <0 .0 1) ;管状腺瘤、管状腺瘤伴不典型性增生、管状腺瘤恶变c -myc的阳性表达率分别是 0 (0 /12 ) ,5 0 % (5 / 10 )和 75 % (6 / 8) ,组间差别有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。结论 :c -myc可能参与结直肠黏膜的增殖与癌变过程。     

胰岛素降低STZ诱导的短期糖尿病大鼠心肌原癌基因c-myc的表达

目的观察原癌基因c-myc在糖尿病大鼠心肌肥大中的表达及胰岛素对其干预作用.方法腹腔注射链脲菌素60 mg·kg-1诱导大鼠糖尿病模型,1、3及7天时分别测定其血糖及体重情况.第3天时提取左心室总RNA,采用PT-PCR法测定原癌基因c-myc的表达.结果正常组大鼠的平均血糖水平为5.55±1.23 mmol·L-1,糖尿病组大鼠在腹腔注射链脲菌素后1、3、7天其血糖水平分别为21.92±6.94 mmol·L-1、26.42±1.82 mmol·L-1、28.98±7.27 mmol·L-1,胰岛素预处理组大鼠在腹腔注射链脲菌素后1、3、7天其血糖水平分别为16.59±1.13 mmol·L-1、18.34±1.82 mmol·L-1、17.77±1.22 mmol·L-1.3天时糖尿病组大鼠原癌基因c-myc的表达量是对照组的4倍,胰岛素预处理可以显著抑制c-myc原癌基因的表达.结论糖尿病大鼠的心肌肥大与c-myc原癌基因的过多表达有关,胰岛素预处理可抑制c-myc原癌基因的表达.     

p62~(c-myc)癌基因产物在胃癌及癌前病变组织中的表达

应用抗c－myc原癌基因蛋白（p62c－myc）的单抗,采用免疫组化ABC法对正常胃粘膜、胃粘膜异型增生及胃癌进行标记,发现正常胃粘膜腺体颈部偶见弱阳性表达,而胃粘膜异型增生则有较高的表达率,轻、中、重度异型增生的表达率分别为70％、100％及71．4％,三者之间无显著性意义。早期及进展期胃癌的表达率分别为38．9％和73．3％,两者相比有显著性差异（P＜0．05）。本研究结果提示p62c－myc可能参与正常胃粘膜的增殖过程,与胃癌的发生有一定关系,此基因蛋白的表达有可能作为判断胃粘膜早期癌变及胃癌生物学行为的一个有用指标。     

c－Ha－ras and c－myc antisense oligodeoxynucleotides inhibit the proliferation and DNA synthesis in human gastric carcinoma cel

ｃ－Ｈａ－ｒａｓａｎｄｃ－ｍｙｃａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄＤＮＡｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅｓＤｅｎｇＪｉａｎｂ...     

c-Ha-ras和c-myc反义寡聚脱氧核苷酸对人胃癌细胞生长增殖的影响

作者观察了人工合成的反义c-Ha-ras和 c-myc寡聚脱氧核昔酸(ASO-r,ASO-m)对两株胃癌细胞中Ha-ras癌基因表达和细胞生长增殖的影响。观察到ASO-r能显著抑制MGc-803细胞P21蛋白合成(作用12 h抑制率达48.10％,P<0.01),同时对其DNA合成和细胞增殖也有较显著的抑制作用(抑制率分别为76.79％,55.61％,P<0.05)。ASO-r对SGc-7901细胞的DNA合成和细胞增殖也有类似的抑制作用(抑制率分别为76.78％,62.02％,P<0.05)。ASO-m对两株细胞的细胞增殖和SGc-7901细胞DNA合成均无明显影响,仅对MGc-803细胞的DNA合成有抑制作用(抑制率为71.37％,P<0.05)。结果表明:ASO-r能够阻断c-Ha-ras癌基因表达,并抑制胃癌细胞生长增殖;c-Ha-ras癌基因可能是维持胃癌细胞恶性生长表型的主要因素。     

病理性瘢痕中c-myc原癌基因的表达

目的探讨原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达与病理性瘢痕形成的相关性。方法应用免疫组化ＳＰ法检测ｃ－ｍｙｃ蛋白在增生 性瘢痕、瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的表达和分布,并用图像定量分析比较其差异。结果在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的 成纤维细胞中ｃ－ｍｙｃ蛋白呈强阳性表达,与正常皮肤对照组均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论增生性瘢痕与瘢痕疙瘩中 ｃ－ｍｙｃ蛋白表达升高提示存在ｃ－ｍｙｃ原癌基因的激活,ｃ－ｍｙｃ原癌基因可能参与了成纤维细胞的分化增殖、胶原合成与 降解以及对细胞因子的调控,并导致瘢痕增生。     

C－myc基因外显子1导入并稳定高效表达的细胞株的建立

将ｃ－ｍｙｃ外显子１的ＤＮＡ片段，插入带有ｎｅｏ基因的真核细胞表达载体ｐＲＣ／ＣＭＶ，运用电穿孔基因导入法将此构建好的重组质粒导入Ｈｅｌａ细胞。在抗Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ的Ｈｅｌ３细胞抽提物中经免疫印迹技术检测，发现一条分子量约为３２ＫＤ的蛋白带，从而实现了ｃ－ｍｙｃ外显子１在真核细胞中高效、稳定地表达，为进一步研究ｃ－ｍｙｃ外显子１的生理功能打下基础。