快速老化痴呆小鼠海马、皮层p130表达的增龄变化及针刺的影响

目的:观察针刺对快速老化痴呆小鼠(SAMP10,简称P10)脑中p130表达的影响,探讨针刺治疗痴呆的可能机制。方法:随机将P10分为对照组、针刺组、非穴组,同源正常老化小鼠(SAMR1,简称R1)为正常对照。针刺组采用"益气调血,扶本培元"针法(简称"气血"针法),选穴"膻中"中脘"气海"、双侧"足三里"、双侧"血海"。"血海"用捻转泻法,余穴施捻转补法,每穴30s,每天1次,第7天暂停,连续13d。运用western blotting技术,观察2、4、6、8、10、12月龄P10海马和皮层中p130表达的增龄变化,以及"气血"针法对8月龄P10海马和皮层p130表达的影响。结果:①p130表达在正常老化R1海马和皮层均随增龄呈平稳上升趋势,6月龄后与2月龄存在明显差异(P<0.05,0.01)。P10则呈波动下降趋势,海马中4月龄后表达即下降,6月龄达谷值(P<0.01),6至8月龄回升,8月龄低于2月龄水平(P<0.05),8至12月龄又下降;皮层中2至4月龄下降,4月龄后开始上升,至6月龄达峰值(P<0.01),6至8月龄下降至低谷,8至12月龄又上升,但仍停留在较低水平。②与8月龄R1相比,p130在P10海马和皮层表达分别呈上调与下调。"气血"针法具有腧穴特异性,可良性调节皮层的蛋白表达,使之接近R1水平。结论:p130表达在R1与P10同脑区间随增龄存在差异,且p130的波动期与报道的P10生物学特征出现的时间段接近。"气血"针法可良性调节8月龄P10皮层p130的表达。     

利用基因心芯片研究针刺对快速老化小鼠海马基因表达的影响

[目的]利用基因芯片技术研究“益气调血,扶本培元”针法对快速老化小鼠（SAMP10）海马基因表达的影响.[方法]选取雄性8月龄快速老化小鼠（SAMP10）（分成针刺腧穴组,针刺非穴组,对照组）和同源正常老化小鼠（SAMR1）,采用cDNA microarray技术,分析伴随快速老化SAMP10海马基因表达谱的变化以及针刺对其的影响.[结果]芯片结果显示,伴快速老化,P10海马共有7类10个基因的表达发生变化,8个基因表达下调,2个基因表达上调,施予“益气调血,扶本培元”针法后,所有与SAMP10快速老化相关基因的表达均被部分或全部的逆转,显示针刺具有特异性.[结论]“益气调血,扶本培元”针法能够良性调节脑老化相关基因的表达,并可能通过该种作用延缓脑衰老.     

针刺疗法对老年痴呆小鼠脑内p53蛋白表达的影响

目的 观察益气调血,扶本培元针刺法对老年痴呆小鼠脑内p53蛋白表达的影响。方法 选取SAMP8小鼠,分为SAMP8对照组、针刺组、非穴组,并设同源SAMR1对照组。针刺组采用益气调血,扶本培元针法,针刺膻中、中脘、气海、血海（双）、足三里（双）;非穴组取双侧胁下两个固定非经非穴点。采用Western blot法测定小鼠皮质和海马内p53蛋白表达;HE染色法观察各组小鼠海马CA1区、颞叶、枕叶神经元细胞病理形态;免疫组化法测定皮质p53阳性细胞表达情况。结果 SAMP8皮质内p53蛋白呈较高表达的状态,针刺治疗后明显下调,与SAMP8对照组差异明显（P<0.05）,与SAMR1对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）;非穴刺激对p53蛋白表达无显著影响。海马组织内,各组p53蛋白表达差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 益气调血,扶本培元针刺法能下调小鼠脑内p53蛋白表达,改善脑细胞病理形态,从而提高老年痴呆小鼠的学习记忆能力,改善其认知功能,且具有腧穴特异性。     

针刺对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8学习记忆能力的影响

目的:研究"益气调血,扶本培元"针法对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8学习记忆能力的影响。方法:选取SAMP8小鼠,分为SAMP8对照组、针刺组、非穴组,并设SAMR1对照组。针刺组采用"益气调血,扶本培元"针法,针刺膻中、中脘、气海及双侧血海、足三里;非穴组取双侧胁下两个固定非经非穴点。应用Morris水迷宫观测各组小鼠空间参考记忆能力的变化,分析针刺对SAMP8小鼠认知功能的影响。结果:"益气调血,扶本培元"针法能有效改善SAMP8小鼠的认知能力。     

针刺对快速老化小鼠SAMP10氧化应激相关基因表达的影响

【目的】探讨快速老化小鼠SAMP10脑衰老的机制，揭示“益气调血、扶本培元”针法改善SAMP10脑衰老症状的部分机制。【方法】应用cDNA阵列技术(cDNA Array)，观察快速老化小鼠SAMP10与正常老化小鼠SAMR1前脑588个基因表达的差异，同时观察“益气调血、扶本培元”针法对上述基因表达的影响。【结果】SAMP10与SAMR1相比，谷胱甘肽S转移酶、热休克蛋白86、成纤维细胞生长因子8、NF-kappa-B转录因子p65亚单位4个与氧化应激反应有关的基因表达上调，而针刺可使这些基因的表达下调。【结论】SAMP10的快速老化可能与其脑内的氧化应激水平升高有关，针刺可改善氧化应激水平进而达到延缓脑衰老的作用。     

双向电泳分析快速老化痴呆鼠脑蛋白质的异常表达及针刺的影响

目的:从整体上观察快速老化及伴随的痴呆对脑蛋白质组的影响以及针刺对其的调节作用。方法:以8月龄快速老化痴呆鼠SAMP10和同源正常老化鼠SAMR1为材料,分为P10针刺组、P10非穴组、P10对照组和R1对照组。针刺组施以“益气调血,扶本培元”针法,针刺“膻中”“中脘”“气海”“血海”“足三里”;非穴组针刺双胁下非穴固定点。双向电泳展示各组小鼠大脑蛋白图谱。结果:双向电泳显示,伴随着快速老化和痴呆,3个蛋白发生了质的变化,其中一个蛋白为P10所特有,两个为R1所特有;9个蛋白发生了量的变化,其中7个蛋白伴快速老化和痴呆高表达,2个低表达。针刺穴位具有良性调节作用,可明显改善上述某些蛋白的表达异常,减缓衰老;而非穴无特异性。结论:伴快速老化,SAMP10痴呆鼠大脑某些蛋白的表达发生了异常,针刺可改善其中某些蛋白的异常,并具有穴位特异性。     

针刺对痴呆鼠SAMP8老化体征及认知能力的影响

[目的]探讨针刺延缓衰老、改善认知的作用。[方法]将快速老化痴呆小鼠(SAMP8)及其正常同源对照小鼠(SAMR1)分为SAMR1对照组、SAMP8对照组、SAMP8针刺组和SAMP8非穴组。针刺组给予"益气调血,扶本培元"针法治疗,非穴组针刺双胁下两个固定非穴位点,其余两组给予等量的捉抓刺激,每日1次,持续15 d。采用老化度评分表评价SAMP8的衰老程度,Morris水迷宫评价动物的学习记忆能力。[结果]与SAMR1对照组相比,SAMP8各组呈现皮毛稀疏无光、眼周粗糙、行动缓慢等老化体征;其学习能力及记忆保持能力也出现明显损伤,表现为思维僵化、学习过程减慢等。针刺能明显改善SAMP8的认知能力,但对其老化症状无影响。[结论]针刺能有效改善衰老后认知功能减退,为阿尔茨海默病治疗提供了新的选择。     

利用基因芯片研究针刺对快速老化小鼠海马基因表达的影响

[目的]利用基因芯片技术研究“益气调血,扶本培元”针法对快速老化小鼠(SAMP10)海马基因表达的影响。[方法]选取雄性8月龄快速老化小鼠(SAMP10)(分成针刺腧穴组,针刺非穴组,对照组)和同源正常老化小鼠(SAMR1),采用cDNAmicroarray技术,分析伴随快速老化SAMP10海马基因表达谱的变化以及针刺对其的影响。[结果]芯片结果显示,伴快速老化,P10海马共有7类10个基因的表达发生变化,8个基因表达下调,2个基因表达上调,施予“益气调血,扶本培元”针法后,所有与SAMP10快速老化相关基因的表达均被部分或全部的逆转,显示针刺具有特异性。[结论]“益气调血,扶本培元”针法能够良性调节脑老化相关基因的表达,并可能通过该种作用延缓脑衰老。     

"益气调血,扶本培元"针法对快速老化痴呆小鼠脑组织海马细胞凋亡的影响

随着社会老龄化的加剧,老年痴呆症的发病率呈上升趋势,严重影响着患者的生存质量,给社会、家庭带来巨大的负担,已成为临床中亟待解决的难题之一。[1]临床发现,"益气调血,扶本培元"治疗本病疗效显著。[2-3]为进一步指导临床,故设计本实验,研究以快速老化痴呆鼠SAMP10为研究对象,正常老化鼠SAMR1为对照,观察小鼠脑组织海马细胞凋亡情况,探求"益气调血,扶本培元"针法治疗老年性痴呆可能的作用机制。1材料与方法1.1实验动物及分组选用健康雄性8月龄快速老化痴呆小鼠(SAMP10)30只,体质量28～32 g/只,由天津中     

针刺对多发性梗塞痴呆大鼠认知能力及脑葡萄糖转运的影响

目的：探讨针刺改善痴呆、提高学习记忆能力的机制。方法：采用多发性梗塞痴呆（MID）大鼠为模型,运用Morris水迷宫评价动物的认知能力;Western blot法测定MID大鼠海马组织葡萄糖转运蛋白（Glut）1和3的表达。结果：MID大鼠学习能力和记忆保持能力明显损伤,需要花费更多时间找到水中平台。海马Glut1和Glut3表达明显下降。针刺显著改善MID大鼠空间记忆能力,提高其思维能力和分析判断能力;针刺还促进海马Glut1和Glut3表达,且具有腧穴特异性。结论：＂益气调血,扶本培元＂针法改善认知功能作用与调节脑血流,增强葡萄糖转运代谢等过程有关。     

针刺对快速老化鼠SAMP10体温的影响

目的 探讨“益气调血，扶本培元”针法对快速老化鼠SAMP10体温的影响。方法 采用24只7月龄快速老化SAMP10雄性小鼠，随机分为气血组、非穴组、SAMP10对照组，每组8只，9只正常老化的SAMR1雄鼠作为R1正常组，于每日14：00和17：00测量两次各组小鼠腹部体温。结果 14：00时，P系各组之间体温无差异（P〉0．05）；17：00时，气血组体温低于非穴组和对照组，均表现显著差异（P〈0．05，P〈0．01）。结论 “益气凋血，扶本培元”针法能够在一定程度上调节SAMP10小鼠体温变化．抑制体温升高．从而可能有助干延缓SAMP10小鼠的寿命。     

含红芪、黄芪的益气养血汤对SAMP8小鼠免疫衰老及p38MAPK表达的影响

目的:比较含红芪和含黄芪的益气养血汤对快速老化小鼠P8(SAMP8)小鼠免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:取昆明种青龄小鼠10只为青龄鼠组,SAMP8小鼠40只随机分为4组,分别为胸腺肽组、生理盐水组、益气养血红芪组和益气养血黄芪组。分别以生理盐水,胸腺肽每日4.6 mg·kg-1,含红芪、黄芪的益气养血汤每日6 g·kg-1剂量ig小鼠,每日1次,连续ig 15次,末次ig后2 h眼球摘除取血及脾脏。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其血清白细胞介素-2(IL-2),γ干扰素(IFN-γ)含量,流式细胞术检测脾脏淋巴细胞表面CD3,CD4,CD8,CD28及CD152分子的表达情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测p38 MAPK mRNA的表达情况,蛋白质免疫印迹(Western blot)及免疫组化法检测其p38MAPK蛋白表达。结果:与青龄小鼠比较,生理盐水组SAMP8小鼠IL-2,IFN-γ含量降低,CD8,CD28分子表达降低,CD4分子表达及CD28CD152分子双阳性表达增高,p38 MAPK mRNA及蛋白表达降低(P0.05)。与生理盐水组比较,胸腺肽组及中药组均能提高SAMP8小鼠血清中IL-2,IFN-γ含量,胸腺肽组含量高于中药组,红芪组IL-2含量高于黄芪组;胸腺肽组及中药组均能提高CD28分子表达,降低CD28CD152双阳性分子表达,胸腺肽组及黄芪组双阳性表达率低于红芪组;中药组能提高SAMP8小鼠脾淋巴细胞表面CD8分子表达,且黄芪组CD8表达高于红芪组;胸腺肽组及黄芪组能降低CD4分子表达;胸腺肽组及中药组均能提高p38 MAPK mRNA表达,且胸腺肽组mRNA表达高于中药组,黄芪组高于红芪组;胸腺肽组及中药组均能提高p38MAPK蛋白含量及蛋白阳性率,且胸腺肽组优于中药组(P0.05)。结论:含红芪、黄芪的益气养血汤均能改善SAMP8小鼠的免疫衰老现象,增加p38MAPK的表达。     

针刺对快速老化小鼠SAMP10皮质衰老相关基因表达谱的影响

目的利用基因芯片技术研究“益气调血,扶本培元”针法对快速老化小鼠SAMP10皮质基因表达的影响。方法选取雄性8月龄快速老化小鼠SAMP10（分成针刺腧穴组,对照组）和同源正常老化小鼠SAMR1,采用cDNA microarray技术,分析伴随快速老化SAMP10皮质基因表达谱的变化以及针刺对其的影响。结果芯片结果显示,伴快速老化。P10皮质共有9类17个基因的表达发生变化,15个基因表达下调,2个基因表达上调,施予“益气调血,扶本培元”针法后,所有与P10快速老化相关基因的表达均被部分或全部的逆转,显示针刺具有特异性。结论“益气调血,扶本培元”针法能够良性调节脑老化相关基因的表达,并可能通过该种作用延缓脑衰老。     

针刺对快速老化脑萎缩及痴呆模型小白鼠(SAMP10)行为学影响的实验研究

[目的]研究“醒脑开窍”针法和“调补气血”针法对SAMP10行为学异常改变的影响。[方法]采用自然快速老化脑萎缩及痴呆模型小鼠SAMP10,于实验前后各进行1次穿梭箱实验 ,并记录小鼠遭受电击次数、电击时间及主动反应时间。[结果]实验前 ,6月龄P10与R1相比 ,各行为学指标均有显著性差异 (P<0.01) ;P10各组之间无显著性差异 (P>0.05) ;实验后 ,醒脑组、补气血组各项指标与P10对照组比较 ,均有明显改善 (P<0.05,或P<0.01) ,与R1比较 ,均有显著性差异 (P<0 .01) ,而两种针法间比较 ,无显著差异(P>0.05)。[结论]P10较同月龄R1学习记忆能力显著下降 ,是理想的脑萎缩及痴呆动物模型。“醒脑开窍”针法和“调补气血”针法可部分改善SAMP10的学习记忆能力     

银杏苦内酯B对重症急性胰腺炎大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶活性的影响

目的观察银杏苦内酯B(BN52021)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性的影响。方法Wistar雄性大鼠随机分为阴性对照组(NC组)、SAP模型组(SAP组)、BN52021治疗组(BN组),每组按术后不同时相点(1、2、3、6、12、24h)分为6小组,用Western blotting法分别检测胰腺组织p38MAPK表达与激活情况,同时对胰腺组织进行病理学观察和测定血清淀粉酶活性的变化。结果血清淀粉酶和病理学结果显示SAP造模成功,BN52021能降低SAP大鼠的血清淀粉酶活性,病理学评分在3、6、12h较SAP组显著降低(P<0.05);NC组在各时相点均只检测到少量磷酸化的p38MAPK,SAP组和BN组在各时相点均较NC组显著升高(P<0.05),BN组在6、12、24h较SAP组显著降低(P<0.05)。结论BN52021可部分抑制SAP大鼠胰腺组织p38MAPK的活化,从而发挥其治疗作用。     

黄葵胶囊对阿霉素肾病肾组织炎症信号通路p38MAPK的干预作用

目的:阐明黄蜀葵花(Abelmoschus manihot,AM)提取物制剂——黄葵胶囊(Huangkui capsule,HKC)调节阿霉素肾病(adriamycin-induced nephropathy,ADRN)模型p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路从而改善肾组织炎症性损伤的机制.方法:将19只SD大鼠随机分为假手术组、对照组和HKC组.对HKC组和对照组大鼠行右侧肾摘除术,并在4周内分2次经颈静脉注射阿霉素(adriamycin,ADR)建立ADRN模型.HKC组大鼠于第2次注射ADR后经灌胃给予HKC悬浊液,对照组和假手术组大鼠同时经灌胃给予蒸馏水,共干预4周.在HKC和蒸馏水干预前和干预后第1,2,3,4周末,分别称量大鼠体重,并检测24 h尿蛋白排泄量(24 h urinary protein excretion,Upro).肾摘除术后第8周末处死全部大鼠,抽取血液,摘除左肾并称重,观察血清生化指标、肾小球形态特征、肾小球α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ)表达特征、肾小球巨噬细胞(macrophage,Mφ)浸润特征等,并且检测肾组织转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1,p38MAPK,磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK,p-p38MAPK)蛋白相对表达量.结果:与对照组大鼠比较,HKC改善了模型鼠的蛋白尿和血清白蛋白(albumin,Alb),抑制了模型鼠系膜细胞(mesangial cell,MC)增殖、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)及其胶原成分沉积,减轻了肾小球α-SMA,Ⅰ型胶原表达,减轻了肾小球ED1+,ED3+浸润,下调了模型鼠肾组织TGF-β1,p-p38MAPK蛋白表达.结论:HKC在体内具有减轻肾组织炎症性损伤的作用;HKC通过下调肾组织p38MAPK信号通路中关键信号分子——p-p38MAPK的蛋白表达,干预其相关信号通路的信号转导途径,减少肾组织内TGF-β1的表达和炎症细胞的浸润、活化,从而改善肾组织的炎症性损伤.     

实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠p38的变化及益肾达络饮的影响

目的:研究中药复方益肾达络饮对PLP139-151诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢神经系统内p38的影响,探讨益肾达络饮在神经系统炎性脱髓鞘疾病中的作用机制。方法:采用免疫组化技术,测定各组小鼠中枢神经组织中p38蛋白含量。结果:p38表达正常组与模型组、激素组、中药组比较均有极显著性差异(P值均<0.01);与模型组比较,激素组有显著性差异(P<0.05),中药组有极显著性差异(P<0.01);激素组与中药组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:EAE小鼠p38表达升高,提示EAE病变过程中可能激活p38MAPK信号转导通路。醋酸泼尼松、益肾达络饮均能降低EAE小鼠中枢神经组织内p38的表达,且益肾达络饮优于醋酸泼尼松。益肾达络饮对自身免疫性脑脊髓炎小鼠保护作用可能通过下调p38,抑制p38MAPK活化,从而改善机体免疫紊乱。     

调补气血针法对SAMP10脑中枢神经递质含量影响的研究

目的 :旨在揭示调补气血针法治疗痴呆的中枢作用机制。方法 :采用HPLC -ECD法对SAMP10及SAMR1脑组织单胺类神经递质和乙酰胆碱 (Ach)含量进行测定。结果 :①SAMP10脑组织DA、5 -HT、Ach的含量显著低于SAMR1的含量 ;②调补气血针法可使脑组织降低的DA、5 -HT、Ach的含量显著提高。结论 :①SAMP10小鼠的学习、记忆障碍发病机制之一可能是脑组织Ach和单胺类神经递质的代谢异常出现了神经损害 ;②调补气血针法改善了SAMP10的学习、记忆状况