冬虫夏草对梗阻性肾病大鼠肾间质表皮生长因子及转化生长因子-β1表达的影响

目的探讨冬虫夏草对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用及可能机制。方法将大鼠分成3组:假手术组(SOR组)、单侧输尿管梗阻手术组(UUO组)和冬虫夏草治疗组(CST组)。无菌条件下UUO组及CST组均进行左侧输尿管结扎手术,而SOR组仅分离左侧输尿管但不结扎及剪断输尿管。于手术当天开始CST组予冬虫夏草菌粉,SOR组及UUO组予蒸馏水,均每天一次性灌胃。于术后第7、14、21、28天分别检测血尿素氮、血肌酐;梗阻肾组织行HE染色,ELISA测定表皮生长因子-β1(EGF)及Western blot检测转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果 3组大鼠的血尿素氮、血肌酐值于各时间点的差异无统计学意义(P>0.05);CST组HE染色见肾间质纤维化程度较UUO组减轻;CST组肾组织TGF-β1的表达明显低于UUO组(P<0.05),EGF的表达明显高于UUO组(P<0.05)。结论冬虫夏草可能通过调节TGF-β1及EGF的表达而减轻输尿管梗阻引起的肾间质纤维化。     

维甲酸对UUO大鼠肾组织RANTES表达及炎症反应的影响

目的 探讨维甲酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织RANTES表达及肾组织炎症反应的影响.方法 成年清洁级雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组(S组),UUO组(U组)和治疗组(T组),每组15只.假手术组行左输尿管游离,不结扎.UUO组和治疗组行左输尿管结扎.治疗组术后每天给予5mg/kg全反式维甲酸(ATRA)皮下注射,假手术组和UUO组注射同体积溶剂.于术后第3、7、14天观察肾小管损害、肾间质炎性细胞浸润程度,免疫组化和RT-PCR法观察病变肾组织趋化因子RANTES及其受体CCR5和TGF-β1表达.结果 与UUO组相比,治疗组肾间质炎性细胞浸润和肾小管损害程度显著减轻(P＜0.05),肾组织RANTES、CCR5和TGF-β1表达显著降低(P＜0.01).结论 维甲酸能减少UUO大鼠肾间质炎性细胞浸润、减轻肾小管损害,抑制RANTES、CCR5和TGF-β1表达,从而减轻肾脏炎症反应和纤维化.     

肾康注射液对梗阻性大鼠肾间质NF-KB和TGF-β1表达影响的研究

目的 研究肾康注射液对梗阻性大鼠肾间质NF-KB和TGF-β1的表达情况的影响,为临床用药提供依据.方法 采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型,将Wistar大鼠72只随机分为三组假手术组、模型组和治疗组.于术后第5天、第10天、第15天,处死各组大鼠8只,在光镜下观察肾脏组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾小管间质中NF-KB和TGF-β1的表达情况.结果 同模型组相比,治疗组可明显降低NF-KB和TGF-β1在肾间质中的表达.结论 肾康注射液可通过降低NF-KB和TGF-β1在肾间质中的表达,抑制肾间质纤维化,从而具有延缓慢性肾功能衰竭的作用.     

罗格列酮对单侧输尿管梗阻大鼠CTGF和TGF-β1表达的影响

目的 探讨过氧化物酶体增生物激活受体-γ激动剂-罗格列酮对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质转化生长因子β1(TGF-β1)结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 将30只雌性Wistar大鼠随机等分成罗格列酮治疗组、模型组和假手术组.对治疗组、模型组行单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻动物模型.术后第21 天取3组术侧肾组织做HE和Masson染色观察肾组织病理改变,同时用免疫组化方法检测TGF-β1和CTGF在肾组织的表达水平.结果 罗格列酮可显著下调TGF-β1和CTGF的表达,改善了肾脏病理改变.结论 罗格列酮可下调UUO肾间质中TGF-β1和CTGF的表达,对UUO所致的肾间质纤维化的形成有抑制作用.     

小鼠肾间质纤维化动物模型的实验探索与研究

目的：观察单侧输尿管结扎（UUO）小鼠模型中肾脏的各项病理改变,肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的变化,探讨单侧输尿管结扎建立小鼠肾间质纤维化模型的可行性。方法：小鼠随机分为假手术组（SOR）和UUO组。随机选取各组中的7只小鼠分别于单侧输尿管结扎术后5d、8d、11d、13d、15d、18d和21d处死,收集双侧肾组织进行相应检测分析。结果：U-UO组术后第5天,肾脏组织出现早期纤维化的病理改变。随着梗阻时间延长,小管间质纤维化程度逐渐加重。术后第18天,病变最典型。结论：单侧输尿管结扎能建立理想的小鼠肾间质纤维化动物模型。     

傣药雅盼对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1/Smads信号转导通路的影响

目的 观察傣药雅盼对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠转化生长因子(TGF)-β1/Smads信号转导通路的影响,从而探讨该药对肾间质纤维化抑制作用的可能机制.方法 120只雄性大鼠行单侧输尿管结扎建立UUO大鼠模型,生理盐水灌胃或给药28 d后收集血清检测尿素氮(BUN)、肌酐(Scr),处死大鼠,取其肾组织行HE染色和Masson染色,免疫组织化学法检测TGF-β1、Smad2、Smad7在肾组织的表达;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测mRNA的表达;Western blot检测蛋白表达.结果 傣药雅盼各剂量组能降低大鼠BUN、Scr水平,并减轻肾小管-间质炎性细胞及肾间质纤维化程度,同时使TGF-β1、Smad2 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05),而Smad7 mRNA和蛋白表达下调(P＜0.05).结论 傣药雅盼备浓度组均可以在一定程度抑制Smad2 mRNA的表达,上调Smad7 mRNA的表达,通过干预TGF-β1/Smads信号转导通路抑制了TGF-β1在肾组织的表达从而对UUO大鼠肾间质纤维化.     

肾康注射液对梗阻性大鼠肾间质NF-КB和TGF-β1表达影响的研究

目的研究肾康注射液对梗阻性大鼠肾间质NF-КB和TGF-β1的表达情况的影响,为临床用药提供依据。方法采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型,将Wistar大鼠72只随机分为三组:假手术组、模型组和治疗组。于术后第5天、第10天、第15天,处死各组大鼠8只,在光镜下观察肾脏组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾小管间质中NF-КB和TGF-β1的表达情况。结果同模型组相比,治疗组可明显降低NF-КB和TGF-β1在肾间质中的表达。结论肾康注射液可通过降低NF-КB和TGF-β1在肾间质中的表达,抑制肾间质纤维化,从而具有延缓慢性肾功能衰竭的作用。     

p21与TGF-β在大鼠肾间质纤维化模型中的表达

目的：探讨p21及TGF-β在肾间质纤维化中的作用及其可能的调控机制。方法：将SD大鼠随机分为假手术组（SOR组）和单侧输尿管结扎组（UUO组）。HE染色观察2组大鼠术后第7,14和21天肾小管间质的形态学改变;用RT—PCR法检测肾皮质p21mRNA和TGF-βmRNA的变化。结果-在UUO大鼠模型早期,肾皮质p21mRNA和TGF-βmRNA的表达即有明显增高,与SOR组大鼠比较,差异有显著性（分别P〈0．01及P〈0．05）,随着梗阻时间的延长,p21和TGF-β的表达逐渐增强（P〈0．05）,并且UUO组大鼠各时间点p21和TGF-β的表达呈正相关（各时间点分别为r=0．745、0．700、0．662,P〈0．05）。结论：p21可能参与了单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化的发病过程,TGF-β可能参与介导了p21在肾皮质表达的调控。     

黄芪山甲拆方益气活血组对肾间质纤维化动物模型实验研究

目的观察黄芪山甲方拆方益气活血组抗单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾间质纤维化的作用机制。方法采用UUO雄性大鼠21只,随机分为7组:假手术组、模型组、益气活血组。术后14天观察血肾功能指标、光镜肾脏病理改变及TGF-β1、FN的表达。结果 (1)与假手术组比较,治疗后模型组、益气活血组各项观察指标均有明显差异(P0.05)。(2)益气活血组治疗后血尿素氮及血肌酐指标同时下降,肾间质纤维化评分及TGF-β1、FN的表达均下调,与模型组比较有明显差异(P0.05)。结论黄芪山甲方中益气活血组可以改善大鼠肾功能,延缓肾脏间质纤维化病理改变进程以及下调肾组织TGF-β1、FN的蛋白表达。     

缬沙坦对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾间质纤维化作用

目的 研究血管紧张素Ⅱ型受体拮抗剂缬沙坦对单侧输尿管梗阻(UUO) 模型大鼠肾间质纤维化进程的作用.方法 健康 Wistar大鼠单侧输尿管结扎制备UUO模型,并分为模型组(n=18)、缬沙坦组(n=18,30 mg·kg-1·d-1 灌胃);以切开腹腔并游离左侧输尿管但不结扎和剪断大鼠作为对照组(n=12).分别于术后3、10、20 d处死大鼠,全自动生化仪检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平,免疫组织化学方法 检测肾组织骨桥蛋白(OPN)的表达,RT-PCR方法 检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1) mRNA的表达.结果 与对照组相比,模型组和缬沙坦组Scr及BUN自术后第10天起均显著上升(F=11.75～40.83,q=3.32～11.87,P<0.05);术后第3天模型组OPN及TGF-β1 mRNA表达均上调,缬沙坦组OPN自第3天亦显著增加,但TGF-β1 mRNA的表达自第10天起才显著增加(F=11.70～231.51,q=4.74～30.42,P<0.05、0.01).与模型组比较,缬沙坦组术后第3天OPN表达无显著差异,但TGF-β1 mRNA表达显著降低(q=3.92～15.11,P<0.05).结论 OPN、TGF-β1参与了肾间质纤维化的进展;缬沙坦可能通过抑制OPN及TGF-β1的表达抑制UUO大鼠肾间质纤维化进程,延缓肾损害进展.     

银杏叶对肾间质纤维化防治作用的实验研究

目的观察银杏叶对肾间质纤维化的防治作用及其效果。方法45只雄性SD大鼠随机分为3组,假手术组、模型组和治疗组,每组15只动物。治疗组在单侧输尿管结扎(unilated ureteral obstruction,UUO)基础上给予银杏叶(300 mg/kg.d-1)灌胃治疗,1次/d;模型组在UUO基础上给予生理盐水灌胃;对照组除不结扎输尿管外,其余同模型组。分别于实验第3、7、14 d分批处死大鼠,每次处死5只。对大鼠结扎侧肾组织进行形态学和免疫组织化学观察。采用HE、Masson两种染色观察梗阻侧肾组织病理学的改变,采用免疫组织化学的方法检测肾组织中转移生长因子-β1(transforming growth factor,βTGF-β1)、核因子kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、α-平滑肌肌动蛋白(-αsmooth muscle actin,-αSMA)的表达,采用氯胺T法测定肾组织中羟脯胺酸的含量。结果大鼠UUO术后3d,肾间质水肿,单核细胞浸润。14 d后肾小管萎缩,间质增宽,肾组织中TGF-β1、NF-κB、α-SMA的表达及肾组织中胶原蛋白含量明显增加,且随着梗阻时间延长,其阳性表达率也增加。银杏叶治疗组肾组织中TGF-β1的表达及胶原蛋白的含量较模型组明显降低,单核细胞浸润减轻,肾脏病理学明显改善。结论银杏叶能够抑制UUO大鼠肾间质炎性细胞浸润,减少肾间质胶原蛋白的含量,有防治UUO大鼠肾间质纤维化的作用。     

福辛普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的探讨福辛普利对肾间质纤维化的影响。方法采用单侧输尿管结扎法（UUO）致肾间质纤维化的动物模型,以福辛普利为阳性对照,测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平,免疫组化和原位杂交方法分别检测肾组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGF-β1mRNA）的表达。结果福辛普利能降低血Scr、BUN、AngⅡ水平,抑制α-SMA、TGF-β1mRNA表达上调,减轻肾间质纤维化程度。结论福辛普利有早期防治肾间质纤维化作用。     

通心络对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

①目的 探讨通心络对梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化的防治作用.②方法 采用单侧输尿管梗阻（UUO）诱导肾间质纤维化的动物模型,以血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（ARB）作为阳性对照.将大鼠随机分为：模型组（UUO）、通心络组、缬沙坦（ARB）组,于术后第14天处死大鼠,收集血清测定肌酐、尿素氮水平;肾组织用HE染色及免疫组化半定量检测各组肾间质的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达.③结果 通心络组、ARB组的肾小管问质TGF-β1、α-SMA的表达均明显低于UUO组;两个治疗组间比较,通心络对TGF-β1、α-SMA表达的抑制作用同于ARB组.④结论 中药通心络可减轻肾间质纤维化.     

阿利吉仑对大鼠肾纤维化TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨阿利吉仑对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用及机制。方法 24只雌性SD大鼠随机分为3组,Sham组、UUO组及aliskiren组,除Sham组外,UUO组及aliskiren组均行左侧输尿管结扎术。aliskiren组术前1 d开始灌胃给药,阿利吉伦50 mg/(kg·d),每日1次,连续2周。术后第14天处死大鼠,留取梗阻侧肾组织行HE染色和Masson染色,光镜下观察各组大鼠肾组织病理变化,免疫组化和Western印迹检测肾组织TGF-β1、Smad2和Smad7蛋白表达水平。结果阿利吉仑可明显减轻大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生及肾小管扩张和萎缩。免疫组化和Western印迹结果均显示:与Sham组相比,UUO组TGF-β1、Smad2表达明显上升,而Smad7表达明显下降(均P<0.05);与UUO组相比,aliskiren组TGF-β1、Smad2表达明显下降,Smad7表达明显上升(均P<0.05)。结论 TGF-β1/Smad信号通路与肾间质纤维化有关,阿利吉仑可抑制肾间质纤维化,其机制可能与下调TGF-β1、Smad2的表达和上调Smad7的表达有关。     

兔慢性肾功能衰竭模型的建立与评价

目的建立兔慢性肾功能衰竭模型,为干细胞移植治疗和相关研究奠定基础。方法普通级大耳白兔随机分为正常对照组和单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)组。UUO组于输尿管结扎后2、4、6、8周进行血生化肾功能指标检测,并取肾组织观察肾脏病理学改变,通过SPECT动态观察肾小球滤过率的变化,采用免疫组织化学方法观察肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况。结果①UUO组术后第2周,出现明显的血肌酐升高,尿素氮术后第8周开始升高(P0.01)。②UUO组术后第4周,肾脏组织出现了早期间质纤维化的病理改变,术后第8周肾小球开始出现硬化,间质纤维化明显,皮质明显变薄。术后第12周,肾小球硬化比例增加,肾小管玻璃样变性,间质纤维化进一步加重(P0.05)。③SPECT动态观察肾小球滤过率,UUO组第4周GFR值比正常对照组降低,到第8周时,GFR值进一步下降,结扎侧肾脏功能降低甚至丧失。④免疫组织化学染色显示,TGF-β1在术后第4、8、12周均明显增强,并且各时间点表达均有显著差异(P0.05)。结论单侧输尿管结扎法成功制作比较稳定的慢性肾功能不全模型,UUO后第8周符合肾脏间质纤维化模型标准。     

根皮素通过抑制FAK改善肾小管间质纤维化

目的 探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法 肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞及小鼠肾脏组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平,明确根皮素体内外抗肾纤维化作用;检测实验小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,分析根皮素的肾保护作用;以苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察根皮素对UUO小鼠肾脏病理学改变和胶原纤维沉积的影响;Western blot检测TGF-β1诱导的NRK-52E细胞和UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK的蛋白表达水平;通过分子对接预测根皮素与FAK蛋白的潜在结合模式和结合能力;使用FAK抑制剂PND-1186,探究根皮素改善肾间质纤维化的作用机制。结果 根皮素可逆转TGF-β1所致的肾小管上皮细胞及UUO小鼠肾组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平升高,且显著降低UUO小鼠血清中Cr、BUN水平,改善UUO小鼠肾小管扩张、炎性细胞浸润及间质胶原沉积;根皮素可以显著抑制UU...     

螺内酯与苯那普利联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏骨形态发生蛋白-7表达的影响

目的 探讨螺内酯与苯那普利联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠(UU0)肾脏骨形态发生蛋白-7(BMP-7)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为5组:单侧输尿管梗阻(UUO)组;假手术组,除不结扎离断输尿管外,其余处理同UUO组;螺内酯组,给予UUO模型大鼠螺内酯混悬液50 nag·kg-1·d-1;苯那普利组,给予苯那普利30 mg·kg-1·d-1;联合治疗组,给予螺内酯50 nag·kg-1·d-1+苯那普利30 mg·kg-1·d1.观察第14天血浆和肾组织醛固酮含量的变化及肾间质纤维化程度、BMP-7及TGF-β1,的表达.结果 ①与假手术组相比,UUO组大鼠肾间质蓝染面积显著增加(P<0.05),血浆和肾组织醛固酮含量显著增高(P值均<0.05),螺内酯、苯那普利和联合治疗组则显著低于UUO组(P值均<0.05).②与假手术组相比,UUO组的肾小管间质TGF-β1阳性面积百分比显著增高(P<0.05),BMP-7阳性面积百分比显著降低(P<0.05),螺内酯、苯那普利和联合治疗组的TGF-β1阳性面积百分比显著低于UUO组(P值均<0.05),而BMP-7阳性面积百分比则显著增加(P值均<0.05).联合治疗组与螺内酯、苯那普利组的差异均有统计学意义(P值均<0.05).结论 与单用螺内酯、苯那普利相比,两药联合应用能减轻UUO大鼠肾间质纤维化,下调TGF-β1的表达及BMP-7表达增加可能是其机制之一.     

舒洛地特抑制单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化

目的 探讨舒洛地特对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾脏间质纤维化的作用,及其对肾小管上皮-间充质转化(EMT)和肾组织Jagged-1、Noteh1表达的影响.方法 雄性CD1小鼠60只随机分为:假手术组(A组),仅行腹膜切开后缝合;对照组(B组),行单侧输尿管结扎,术后予生理盐水0.1ml/d皮下注射;低剂量治疗组(C...     

福辛普利及氯沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏TGF—β1表达的影响

目的观察福辛普利及氯沙坦对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,及其对肾间质纤维化的作用。方法UUO大鼠分别于术前1d及术后给予福辛普利(fosinopril,10mg.kg-1.d-1)、氯沙坦(losartan,50mg.kg-1.d-1)、福辛普利联合氯沙坦混悬液灌胃,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测术后第7、14天TGF-β1表达量的改变。结果与假手术组相比,UUO组及药物治疗组TGF-β1表达均增高,但UUO组显著高于各治疗组(P<0.05),且联合治疗组更低于单用药组。结论福辛普利及氯沙坦可通过下调TGF-β1表达,从而减轻UUO术后肾组织间质纤维化,且联合用药作用更优于单用药。     

槲皮素对小鼠单侧输尿管结扎致肾间质纤维化的改善作用及机制研究

目的:探讨槲皮素对小鼠单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化的改善作用及机制。方法:将48只C57/B6健康雄性小鼠随机分为四组：对照组行单侧输尿管结扎术后给予皮下注射0.9%氯化钠溶液；低剂量给药组行单侧输尿管结扎术后给予皮下注射槲皮素3 mg/(kg·d);中剂量给药组行单侧输尿管结扎术后给予皮下注射槲皮素9 mg/(kg·d);高剂量给药组行单侧输尿管结扎术后给予皮下注射槲皮素18 mg/(kg·d)。分别于术后第14天处死小鼠，取输尿管结扎侧肾组织。检测小鼠血清肌酐和尿素氮含量；肾脏组织行PAS检查损伤程度，天狼星红染色检测肾间质纤维化程度；用RT-qPCR法检测肾脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、胶原蛋白1 (COL-1)、纤连蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA相对表达量，用免疫组化检测肾组织中巨噬细胞变化，Western blot检测小鼠肾组织α-SMA、转化生长因子β₁(TGF-β₁)蛋白表达。结果:PAS染色和天狼星红染色结果表明，单侧输尿管结扎术后肾脏间质区胞外基质成分增多...