HPLC-MS/MS测定鱼腥草和复方鱼腥草合剂中马兜铃酸类化合物含量

目的 建立HPLC-MS/MS同时测定鱼腥草药材和复方鱼腥草合剂中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ和马兜铃内酰胺Ⅰ含量的方法。方法 采用Phenomenex Kinetex C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm);流动相为乙腈和0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温为30℃;采用电喷雾离子源,以多反应离子监测模式进行质谱检测。结果 马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ和马兜铃内酰胺Ⅰ分别在11.91～1 985 ng·mL^-1(r=0.995 3)、 16.87～2 812 ng·mL^-1(r=0.995 7)和3.404～567.4 ng·mL^-1 (r=0.996 6)内有良好的线性关系。各化合物平均回收率为85%～111%,RSD为0.2%～6.7%。马兜铃酸Ⅰ检测限为2.395 ng·mL^-1、定量限为7.984 ng·mL^-1;马兜铃酸Ⅱ检测限为3.389 ng·mL^-1,定量限为10.50 ng·mL<...     

HPLC-MS/MS检测尿液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮

目的:建立尿液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。方法:用含内标双苯戊二氨酯(SKF_525A)的乙腈提取含有甲卡西酮及卡西酮的尿液,经0.22μm微孔有机滤膜过滤,HPLC-MS/MS检测。采用ZORBAX SB-C₁₈色谱柱(50 mm×4.6 mm, 1.8μm),以0.2%甲酸乙腈液和0.2%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温23℃,电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)检测。结果:甲卡西酮质量浓度在0.2～3 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,线性方程为Y=0.000 688X+0.000 51(r~2=0.999 1),检测限为0.1 ng·mL^-1,定量限为0.2 ng·mL^-1;卡西酮质量浓度在0.5～3 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,线性方程为Y=0.000 687X+0.000 175(r~2=0.99...     

HPLC法测定格列美脲中间体的有关物质

目的:建立HPLC法测定格列美脲原料药中间体的有关物质。方法:采用五氟苯基键合硅胶(150 mm×4.6 mm, 2.7μm)色谱柱,以磷酸二氢铵缓冲溶液-乙腈为流动相,等度洗脱,流速0.5 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长225 nm。结果:格列美脲中间体与4个已知杂质A～D色谱峰均能良好分离,并分别在0.008～6.024μg·mL^-1(r=0.999 9)、0.005～6.013μg·mL^-1(r=0.999 6)、0.011～5.987μg·mL^-1(r=0.999 8)、0.012～6.045μg·mL^-1(r=0.999 8)、0.029～5.989μg·mL^-1(r=0.999 6)范围内线性关系良好(n=6)。格列美脲中间体、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D的定量限分别为8.3、5.0、10.6、11.9、29.4 ng·mL^-1;杂质A～D平均回收率(n=9)分别为107.0%、100.0%、98.0%、101....     

GC-MS/MS法测定5种中药材中100种有机磷农药的残留量

目的 采用GC-MS/MS法测定菊花、金银花、黄芪、枸杞和西洋参等中药材中100种有机磷农药的残留量。方法 样品用1%乙酸浸泡后,用乙腈提取,净化管净化,于反应监测模式下检测,基质匹配内标法定量。结果 100种有机磷农药的线性范围为10～300 ng·mL^-1(r²为0.9967～0.9999),加样回收率为61.2%～119.8%,RSD为0.58%～9.92%(n=6),定量限为5.0～10.0μg·kg^-1;46批次药材中,共检出7种有机磷农药,其中,22批药材检出毒死蜱,2批药材中检出甲基异柳磷和甲拌磷砜。结论 所用方法灵敏快捷、结果稳定可靠,可用于中药材中有机磷类农药的快速检测。     

UPLC-MS/MS法检测人体毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬

目的:建立一种准确、快速检测毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法。方法:用含内标双苯戊二氨酯(SKF_525A)的甲醇溶液提取含有右美沙芬及其代谢物的毛发,经0.22μm微孔有机滤膜过滤,UPLC-MS/MS检测。采用ACQUITY UPLC HSS T3超高液相色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以0.2%甲酸(10 mmol·L^-1甲酸铵)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温为室温。采用电喷雾离子源,正离子多反应模式检测。结果:右美沙芬和去甲右美沙芬质量浓度均在1～100 ng·mL^-1范围内线性响应良好,线性方程分别为Y=1.349 49X-0.020 80 (r=0.998 8)和Y=0.775 10X-0.013 87 (r=0.999 1),检测限和定量限均分别为0.01 ng·mL^-1和0.025 ng·mL^-1,平均回收率在97.0%～104.8%...     

气相色谱-质谱联用法测定福多司坦原料药中的四种遗传毒性杂质

目的 建立气相色谱-质谱联用(GC-MS)法同时测定福多司坦原料药中四种遗传毒性杂质3-氯-1-丙醇、1,3-二氯丙烷、3-氯丙酸乙酯和氯丙基羟丙基醚。方法 以氯苯为内标物，采用Agilent J&W VF-WAXms色谱柱(30 m×0.25 mm, 0.5μm),程序升温；离子源温度230℃,四极杆温度150℃,进样口温度220℃,流速1.0 mL·min^-1,分流比2∶1;在离子选择(SIM)模式下，监控m/z 58.1、76.0、91.0、58.1和107.9离子进行检测。结果 3-氯-1-丙醇、1,3-二氯丙烷、3-氯丙酸乙酯和氯丙基羟丙基醚四种杂质分别在0.000 9～0.882 0μg·mL^-1、0.002 2～0.874 0μg·mL^-1、0.009 0～0.892 0μg·mL^-1和0.016 6～0.830 0μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(R²≥0.999 9,n=5),检测限为0.264 0～4.980 ng·mL     

HPLC法检测依折麦布中的有关物质

目的:建立采用高效液相色谱法测定依折麦布有关物质。方法:采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5.0μm)色谱柱,以0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-乙腈-四氢呋喃(60∶20∶20)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长232 nm,进样体积20μL。结果:依折麦布峰与各杂质峰分离良好;依折麦布峰与杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E与杂质F的线性范围分别为0.409～4.090μg·mL^-1(r=0.995 0)、0.402～4.020μg·mL^-1(r=0.998 1)、0.408～4.080μg·mL^-1(r=0.999 1)、0.411～4.110μg·mL^-1(r=0.999 3)、0.4050～4.050μg·mL^-1(r=0.998 1)、0.541～5.41μg·mL^-1(r=0.998 5)、0.657～6.57μg...     

HPLC法同时测定五维赖氨酸口服溶液中4种水溶性主成分的含量

目的:建立直接同时测定五维赖氨酸口服溶液中盐酸赖氨酸和三种水溶性维生素含量的RP-HPLC法。方法:采用Phenomenex Gemini C₁₈ 100A(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱，以0.03 mol·L^-1磷酸二氢铵溶液(pH 3.0)-甲醇(98∶2)为流动相，检测波长为205 nm,流速1.0 mL·min^-1。结果:盐酸赖氨酸、维生素C、维生素B₆和烟酰胺分别在30.56～488.9μg·mL^-1(r=1.000 0)、24.86～397.8μg·mL^-1(r=0.999 8)、1.018～16.29μg·mL^-1(r=1.000 0)、10.72～171.5μg·mL^-1(r=0.999 0)范围内与峰面积呈良好的线性关系；定量限分别为10.39、0.466 1、0.092 79、0.136 2 ng;平均回收率分别为100.6%、98.5%、98.0%、99.2%,RSD分别为0...     

固相萃取-同位素内标-GC-MS/MS法测定根及根茎类中药材中18个多环芳烃残留量

目的:建立了固相萃取-同位素内标-GC-MS/MS法测定根及根茎类中药材中18个多环芳烃的残留量,为评价根及根茎类中药材安全性提供有效分析手段。方法:采用氘代多环芳烃同位素内标,药材以乙腈提取,经C₁₈固相萃取小柱净化后,采用GC-MS/MS测定,色谱柱为DM-17ms(30 m×0.25 mm, 0.25μm),程序升温,以多反应检测模式进行检测。结果:18个典型多环芳烃在2～50 ng·mL^-1内线性关系良好;在2～50μg·kg^-1内的平均回收率为63.8%～118.0%,RSD为0.45%～19.0%(n=3);方法定量限为0.5～1μg·kg^-1。结论:本方法操作简便,专属性强,灵敏度高,可满足根及根茎类中药材中18个典型多环芳烃残留的定量检测工作。     

HPLC测定抑郁症大鼠脑脊液与血浆中的7种氨基酸

目的 采用RP-HPLC-FLD同时测定抑郁大鼠血浆与脑脊液中7种氨基酸的含量。方法 以邻苯二甲醛为柱前衍生化试剂,高丝氨酸为内标,采用C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为50 mmol·L^-1乙酸钠-甲醇,荧光检测激发与发射波长分别为340、455 nm,柱温35℃,流速1.0 mL·min^-1。结果 7种氨基酸在0.05～10μg·mL^-1与峰面积比值的线性关系良好(r≥0.9998);定量限为6～50 ng·mL^-1,检测限为2～15 ng·mL^-1;质控样品脑脊液中的RSD小于8.68%;血浆中的RSD小于8.55%;7种氨基酸的相对回收率为90.10%～110.73%,提取回收率为72.60%～96.91%;样品24 h内基本稳定。结论 所用方法简便、可靠、灵敏度高,可用于测定大鼠血浆及脑脊液中氨基酸的含量。     

液液萃取/GC-MS法测定硫酸软骨素钠原料中的基因毒杂质N-亚硝基二甲胺与N-亚硝基二乙胺

目的:建立一种液液萃取法,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,测定硫酸软骨素钠原料中的基因毒杂质N-亚硝基二甲胺(NDMA)与N-亚硝基二乙胺(NDEA)。方法:采用Thermo TG-WAXMS色谱柱(30 m×0.25 mm, 0.25μm);柱温在40℃保持1 min,以25℃·min^-1升至240℃,保持2 min;进样口温度为220℃;载气为高纯氦,流速为1.0 mL·min^-1。质谱的离子源为EI源;电子能量为70 eV;离子源温度为280℃;传输线温度为240℃;进样量为1μL。结果:NDMA的检测限为0.64 ng·mL^-1,在4～16 ng·mL^-1范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数r为0.999 3。NDEA的检测限为0.176 ng·mL^-1,在1.1～4.4 ng·mL^-1范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数r为0.999 6。硫酸软骨素钠中均未检出NDMA与NDEA。结论:该法操作简便,专属性强,可以用于硫...     

HPLC法测定肝素钠注射液中6种抑菌剂

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定肝素钠注射液中苯酚、苯甲醇、三氯叔丁醇、羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯6种抑菌剂。方法 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,流动相A为水,流动相B为甲醇,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为220 nm及256 nm,柱温30℃。结果 苯酚、苯甲醇、羟苯甲酯、羟苯乙酯、三氯叔丁醇、羟苯丙酯分别在25.00～400.06μg·mL^-1(r=1.000 0)、104.49～1 671.88μg·mL^-1(r=0.999 9)、30.65～490.4μg·mL^-1(r=0.999 9)、5.36～85.81μg·mL^-1(r=0.999 9)、49.60～793.54μg·mL^-1(r=0.999 9)、5.03～80.45μg·mL^-1(r=1.000 0)内线性关系良好,平均回收率分别为100.3%、...     

Captiva EMR-Lipid技术结合UPLC-Q-TOF/MS测定压片糖果中非法添加的美托拉宗

目的 建立一种超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)分析方法对压片糖果中的非法添加药物美托拉宗进行快速筛查与定量检测。方法 使用乙腈提取待测组分,Captiva EMR-Lipid净化柱进行净化,经Agilent RRHD Eclipse Plus C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,运用UPLC-Q-TOF/MS的Targeted MS/MS模式进行检测分析。结果 美托拉宗在浓度范围50～1 000 ng·mL^-1内线性良好(r=0.999 0);检测限为1.0μg·g^-1;定量限为2.5μg·g^-1,平均回收率为98.15%,RSD为2.2%(n=18)。结论 该方法具有操作简易快速、定性定量准确等特点,能应用于日常样品的检验检测。     

红花黄色素对非霍奇金淋巴瘤的作用与机制

目的 研究红花黄色素调节Wnt/β-catenin信号通路对非霍奇金淋巴瘤(NHL)增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法 体外培养Raji细胞,随机分为对照组(常规培养)、红花黄色素组(30μg·mL^-1红花黄色素)、氯化锂组(20 mmol·L^-1 LiCl)、红花黄色素+LiCl组(30μg·mL^-1红花黄色素+20 mmol·L^-1 LiCl)。检测各组细胞Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达、细胞增殖、凋亡、细胞周期分布、凋亡及细胞周期相关蛋白表达。裸鼠右前腋皮下接种Raji细胞构建NHL移植瘤模型,随机分为Nu-对照组、Nu-红花黄色素(7.5 mg·kg^-1红花黄色素LiCl)组、Nu-LiCl(1 mg·kg^-1红花黄色素LiCl)组、Nu-红花黄色素(7.5 mg·kg^-1红花黄色素LiCl)+LiCl(1 mg·kg^-1红花黄色素LiCl)组,以红花黄色素和LiCl分组处理后,检测各组裸鼠肿瘤...     

HS-GC-MS/MS测定富马酸丙酚替诺福韦中微量的基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺

目的 采用顶空进样气相色谱三重四级杆质谱联用(HS-GC-MS/MS)法测定富马酸丙酚替诺福韦中微量的基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺(NDMA)。方法 采用三重四极杆GC-MS/MS,Agilent VF-WAX ms(30 m×0.25 mm,1μm)色谱柱,载气：氦气;恒流模式1.0 mL·min^-1;程序升温,进样口温度230℃,顶空温度130℃;质谱采用电子轰击电离源(EI),电离能量为70 eV,离子源温度230℃,多反应监测(MRM)模式进行检测,溶剂为N-甲基吡咯烷酮(NMP)。进行专属性、系统适用性、检测限与定量限、线性与范围、准确度、精密度、溶液稳定性、耐用性考察。结果 NDMA与相邻色谱峰之间分离效果良好;NDMA在7.0～105.0 ng·mL^-1线性关系良好,检测限为3.5 ng·mL^-1,定量限为7.0 ng·mL^-1;NDMA低、中、高质量浓度(56、70、84 ng·mL^-1)回收率为95.6%～109.3%,RSD为4.0%(n=9);重复性试验N...     

肾上腺素注射液中肾上腺素磺化物的HPLC检测方法研究

本研究建立高效液相色谱法,用于肾上腺素注射液中肾上腺素磺化物(杂质F)的测定。采用AQUASIL C18色谱柱(100 mm×4.6 mm, 3μm),流动相A为磷酸二氢钾溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱,进样量40μL,检测波长为210 nm,柱温25℃,分析时间40 min。结果表明,肾上腺素磺化物(杂质F)在0.520～12.480μg·mL^-1质量浓度内与峰面积呈良好的线性关系, R²=0.999 8;平均回收率为103.04%, RSD为2.00%;肾上腺素磺化物的最小检测限为0.104μg·mL^-1,定量限为0.520μg·mL^-1。该检测方法准确度和精密度高,灵敏度好,可用于肾上腺素注射液中肾上腺素磺化物的分析测定,提高肾上腺素相关产品的质量标准。     

苍术麸炒前后吡咯里西啶生物碱含量变化研究

目的：建立苍术中吡咯里西啶生物碱(PAs)的含量测定方法,考察麸炒前后5个PAs的变化规律。方法：采用UPLC-MS/MS法进行含量测定,采用ACQUITY UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(体积比为11∶89),恒流洗脱,流速0.30 mL·min^-1,进样体积1μL;电喷雾离子源,正离子多反应监测模式,以标准曲线法计算含量。结果：3批苍术经过麸炒后,PAs总量从188.74～254.64μg·kg^-1下降到101.74～135.36μg·kg^-1;野百合碱从25.35～52.18μg·kg^-1下降到23.25～37.41μg·kg^-1;氮氧化野百合碱从25.12～40.22μg·kg^-1下降到6.98～18.23μg·kg^-1;克氏千里光碱从11.64～36.25μg·kg^-1下降到3.64～12.85μg·kg^-1;...     

HPLC法同时测定蟾酥中11个蟾毒配基成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定蟾酥中11个蟾毒配基成分(伪异沙蟾毒精、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、脂蟾毒精、南美蟾毒精、蟾毒灵、脂蟾毒配基和华蟾酥毒基)的含量。方法:采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱(150 mm×3.0 mm 2.7μm),以0.3%乙酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为296 nm。结果:11个蟾毒配基成分的线性范围分别为2.024～20.24μg·mL^-1(r=0.999 8)、18.44～184.4μg·mL^-1(r=0.999 9)、12.40～124.0μg·mL^-1(r=0.999 5)、3.720～37.20μg·mL^-1(r=0.999 5)、10.28～102.8μg·mL^-1(r=0.999 8)、22.16～221.6μg·mL^-1(r=...     

HPLC-ELSD法同时测定棕榈酸帕利哌酮注射剂中聚山梨酯20和聚乙二醇4000的含量

目的:建立HPLC-ELSD法同时测定棕榈酸帕利哌酮注射液中聚山梨酯(polysorbate, Tween)20和聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)4000的含量。方法:采用TSK gel 3000 PWxl (7.8 mm×300 mm)色谱柱,以20 mmol·L^-1的乙酸铵水溶液-乙腈(60∶40)为流动相,流速为0.6 mL·min^-1,柱温25℃,进样量20μL;采用蒸发光散射检测器(ELSD),雾化器温度与漂移管温度均为50℃,气体流速2.0 L·min^-1(0℃,1atm)。结果:PEG4000在0.3～0.75 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 4;Tween 20在0.12～0.3 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 6;PEG4000的检测限为0.02 mg·mL^-1,定量限为0.03 mg·mL^-1;Tween 20的检测限为0.05 mg·mL^-...     

雷公藤多苷对人支气管上皮细胞16HBE凋亡和炎症因子释放的影响

目的 研究雷公藤多苷对屋尘螨抗原Derp1诱导的人支气管上皮细胞16HBE凋亡和炎症因子释放的影响。方法 人支气管上皮细胞16HBE分成对照组、Derp1组（屋尘螨抗原Derp1处理）、实验-5μg·mL^-1组(5μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1组(10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1+pcDNA组(转染pcDNA,10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)、实验-10μg·mL^-1+pcDNA-高迁移率族蛋白B1（HMGB1）组(转染pcDNA-HMGB1,10μg·mL^-1雷公藤多苷和屋尘螨抗原Derp1处理)。用蛋白质印迹法检测HMGB1、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达,用流式细胞术检测细胞凋亡,用酶联免疫吸附法检测培养液上清液中白细胞介素-6（IL-6）、肿...