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1.
培养含A蛋白葡萄球菌的培养基国外常用的为CCY(Casein Casein Yeast)培养基,由于该培养基营养物成分要求进口及一定牌号,且价格昂贵,一般实验室往往不易得到,故国内目前已有多种培养基处方推荐。本文就培养基不同基础营养成分(肉浸液、肉浸膏液、不同牌号的蛋白胨)对含A蛋白葡萄球菌生长的影响进行探讨。材料与方法一、菌株:含A蛋白丰富的金黄色葡萄球菌 相似文献
2.
目的:提高酶联免疫吸附测定(ELISA)方法的灵敏度。方法:将聚苯乙烯微孔板(PS)经过紫外线(UV)辐照后,用葡萄球菌A蛋白(SPA)预包被,再应用生物素-链霉亲和素(BSA)反应建立双抗体夹心ELISA。结果:检测低限为1.95ng/ml,方法的批内变异分别为7.96%和8.63%。结论:为菌体蛋白的测定提供了一种新的方法。 相似文献
3.
近年来,国外在检测血小板表面相关IgG(PAIgG)的技术方面有很大进展,采用的方法很多。我们利用葡萄球菌蛋白A能和IgG结合的特性,应用~(125)Ⅰ标记葡萄球菌蛋白A(简称~(125)Ⅰ-SPA)的方法检测血小板表面相关IgG,并观察了正常人59例和各种疾 相似文献
4.
《中国医学创新》2019,(18)
目的:研究Eravacycline体外诱导金黄色葡萄球菌耐药菌株的核糖体30S亚基16S rRNA基因和核糖体蛋白变异特点,阐明金黄色葡萄球菌Eravacycline耐药机制。方法:选择3株金黄色葡萄球菌株,采用Eravacycline不同压力浓度下逐渐诱导Eravacycline耐药金黄色葡萄球菌耐药菌株,挑取诱导菌株单克隆,采用琼脂平板稀释法测定母株及诱导系列的Tigecycline和Eravacycline的MIC值;通过PCR扩增其5个拷贝的16S rRNA基因(RR1-RR5)和30S核糖体蛋白基因,将诱导的Eravacycline耐药株扩增产物测序后与母株序列比较,获得该基因片段突变位点。结果:经过体外Eravacycline不同浓度梯度多步诱导共挑取6株Eravacycline耐药菌株,这些菌株的Tigecycline和Eravacycline的MIC值范围分别为8～16μg/mL和32～64μg/mL。16S rRNA基因PCR测序分析提示该基因的主要突变位点分别为RR1(T170G)、RR2(A1124G,G77A)、RR3(C810T)、RR4(G185A,G1036A),30S亚基核糖体蛋白S3蛋白没有突变,30S亚基核糖体蛋白S10基因多个位点突变。结论:金黄色葡萄球菌Eravacycline诱导耐药后可导致Tigecycline和Eravacycline的交叉耐药及16S rRNA基因和30S亚基核糖体蛋白S10位点突变。 相似文献
5.
近年来利用葡萄球菌表面 A 蛋白的 FC受体与抗体结合,进行协同凝集试验,在细菌学和免疫学领域中的应用日益广泛。此项工作中之含 A 蛋白的葡萄球菌稳定液是试验成败的关键之一。我们利用实验室已有的,着色的免疫皂土与葡萄球菌 A 蛋白上的 FC受体结合而发生凝集的这一现象,将其用来定量检测 A 蛋白。经试验,方法简便,结果稳定可靠,有一定的实用意义,特摘要报告如下: 相似文献
6.
国外对金黄色葡萄球菌A蛋白(SpA)及其应用,已进行了广泛的研究。我们从收集到的金黄色葡萄球菌中,选出了含有丰富A蛋白的Z_5和No.1800株及不含A蛋白的Z_(12)株,经特异性抗体标记后的协同凝集反应,证明Z_5和No.1800株结合IgG的效果良好,可以替代国外标准株Cowan Ⅰ,而Z_(12)株因不含A蛋白,不能结合IgG,故可替代国外标准株Wood 46。Z_5和No.1800株及Z_(12)株的建立为开展SpA在免疫学方面的研究提供了必要条件。 相似文献
7.
目的:制备金黄色葡萄球菌肠毒素A( SEA) 多克隆抗体并用金黄色葡萄球菌野生株对其进行验证,
为进一步研究SEA 在金黄色葡萄球菌致病机制中的作用提供基础。方法: PCＲ 方法扩增肠毒素A 基因( sea) ,
构建原核表达载体pET 30 a /sea,经PCＲ 方法和测序鉴定后,阳性表达载体转化大肠杆菌表达宿主菌DH 5α,表
达产物用十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS－PAGE) 和蛋白质印迹法( Western Bloting,WB) 分析鉴定。
蛋白经纯化后作为免疫原免疫新西兰大白兔,得到抗血清并纯化,采用sea 基因阳性的金黄色葡萄球菌野生株S
8 和S 23 株的菌体蛋白进行鉴定。结果: pET 30 a /sea 重组表达载体构建成功,目的蛋白在构建的原核表达系统
中可实现高表达,纯化后得到高纯度的SEA 蛋白,经临床分离金黄色葡萄球菌S 8 和S 23 株菌体蛋白验证,证实
得到理想的兔抗SEA 多克隆抗体。结论:通过基因重组技术,金黄色葡萄球菌SEA 蛋白在构建的原核表达系统
中得以成功表达,并获得了高纯度的目的蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究金黄色葡萄球菌肠毒素A 蛋白的
生物学活性及抗体的保护作用奠定了基础。 相似文献
为进一步研究SEA 在金黄色葡萄球菌致病机制中的作用提供基础。方法: PCＲ 方法扩增肠毒素A 基因( sea) ,
构建原核表达载体pET 30 a /sea,经PCＲ 方法和测序鉴定后,阳性表达载体转化大肠杆菌表达宿主菌DH 5α,表
达产物用十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS－PAGE) 和蛋白质印迹法( Western Bloting,WB) 分析鉴定。
蛋白经纯化后作为免疫原免疫新西兰大白兔,得到抗血清并纯化,采用sea 基因阳性的金黄色葡萄球菌野生株S
8 和S 23 株的菌体蛋白进行鉴定。结果: pET 30 a /sea 重组表达载体构建成功,目的蛋白在构建的原核表达系统
中可实现高表达,纯化后得到高纯度的SEA 蛋白,经临床分离金黄色葡萄球菌S 8 和S 23 株菌体蛋白验证,证实
得到理想的兔抗SEA 多克隆抗体。结论:通过基因重组技术,金黄色葡萄球菌SEA 蛋白在构建的原核表达系统
中得以成功表达,并获得了高纯度的目的蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究金黄色葡萄球菌肠毒素A 蛋白的
生物学活性及抗体的保护作用奠定了基础。 相似文献
8.
目的:构建由端粒酶启动子(hTERT)调控的携带超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcus aureus enterotoxin A,SEA)基因的选择性复制重组腺病毒.方法:应用酶切、连接方法将hTERT连接于腺病毒穿梭质粒E1A和E1B序列之前调控E1A和E1B蛋白的表达,CMV启动子和SV40分别... 相似文献
9.
A蛋白(Protein A简称SPA)产生于金黄色葡萄球菌细胞壁,它能和数种哺乳类IgG的Fc段高度特异性亲和,是藉助于两个结合点与IgG相结合。由于A蛋白能 相似文献
10.
11.
目的分析葡萄球菌蛋白A胶体金(SPA-CG)分子的特征性构象特点,探讨其作为原子力显微镜观测原位标记物的可行性。方法应用原子力显微镜扫描生理状态下分布在云母表面的葡萄球菌蛋白A胶体金分子,并进行结构分析及理论计算。结果极少数平卧的SPA-CG呈中部球形隆起,两端长短不一的弯曲棒状肽链环抱球形隆起的独特结构,形成反"C"字形结构,球形隆起直径为单个胶体金直径的3~4倍;极少数SPA-CG呈逗号样;绝大多数SPA-CG呈一侧面稍凹的椭球形结构,结构稳定、均一,长径为(40.88±1.58)nm,宽径为(20.82±0.68)nm,高度(Z轴)为(10.51±0.28)nm。结论单个胶体金标记的葡萄球菌蛋白A分子具有独特、稳定、均一的特征性构象,可作为原子力显微术观测的原位标记物。 相似文献
12.
目的:制备量子点与葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A,SPA)的偶联物,探究偶联反应的最佳条件.方法:采用"经典注入法"制备碲化镉量子点,使用1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS)作为偶联剂用于偶联量子点和SPA,采用单因素考察法,分别探究... 相似文献
13.
任新国 《安徽医科大学学报》1987,(4)
葡萄球菌 A 蛋白(StaphylococcalProteinA,SPA)是一种从金黄色葡萄球菌细胞壁分离出来的蛋白成份,具有广泛的用途。近年来国内外许多学者用它治疗肿瘤,取得了一定的经验,为肿瘤病的治疗开辟了新的领域。本文综合近年来的有关文献扼要介绍如下。某些实验和临床报道Harper 用纯品 SPA 直接静脉灌 相似文献
14.
目的:研究泻心汤对表皮葡萄球菌的抑菌效果及观察泻心汤对表皮葡萄球菌所致兔胫骨骨感染的治疗效果。方法:1.将直径5mm的圆形无菌滤纸片浸入无菌的泻心汤中浸透后,置入均匀涂有1.5×106 CFU/ml表皮葡萄球菌的Mueller-Hinton(MH)琼脂培养皿中,置37℃温箱培养24h,取出,观察抑菌效果,并测量抑菌圈大小。继续置37℃培养箱培养,于不同时相点测量抑菌圈大小,检测其对表皮葡萄球菌的抑制作用;2.制备新西兰大白兔胫骨中段表皮葡萄球菌骨感染模型,动物分组及给药,通过白细胞(WBC)、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)和HE染色等不同时相点的数据检测泻心汤治疗兔胫骨骨感染的抗感染效果。结果:实验A组、实验B组与实验C组之间有非常显著性差异(P<0.01);实验B组与实验A组有差异,统计学无意义(P>0.05)。结论:中药方剂-泻心汤体内体外实验均对表皮葡萄球菌有明显的抑菌效果。 相似文献
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16.
<正> 近年来,含A蛋白的金黄色葡萄球菌已广泛地应用于免疫学的研究中。Olgen(1975)等先后应用流脑抗血清标记金黄色葡萄球菌(SPA),进行协同凝集(Coagglutination. COA)试验,对脑膜炎双球菌(脑球)进行分群,检测流脑患者脑脊液(CSF)中的可溶性抗原获得成功。国内这方面的资料报道不多。本文研制A、B、C群脑球SPA试剂,检测流脑患者C、S、F和血清中的可溶性抗原,早期快速诊断流脑,并与对流免疫电泳(CIE)进行比较,以评定协同凝集试验的实用价值。材料与方法一、10%金黄色葡萄球菌稳定液用国际标准菌株Cowan Ⅰ株(NCTC 8530,检定所菌种号26111),参照Kronvall的方法制备,置4℃冰箱保存备用。二、脑球抗血清A群脑球抗血清应用北京卫生部药品生物制品检定所A群脑球标准菌株(菌种号29019)免疫家兔制备,效价为1:1280;B、C群脑球诊断血清系检定所冻干制剂,效价分别为1:320,1:640。 相似文献
17.
本文应用美国O(?)tho-mune公司的OKT系列单克隆抗体:T_4(T辅助细胞,T_H)和T_8(T抑制细胞,Ts或Lcu-2a)。采用SPA(金黄色葡萄球菌蛋白A)间接花环法,检测正常人和慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的外周血T淋巴细胞亚群, 相似文献
18.
目的 探讨骨科创伤患者伤口分离的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的分子特征及耐药性，分析患者伤口SA的分子分型、毒力基因及耐药性，为防治患者伤口SA感染提供参考依据。方法 选取2020年1月—2022年6月苏州大学附属无锡九院128例骨科创伤患者伤口分离的SA，采用PCR鉴别耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA)，再分析多位点序列(Multilocus Sequence Typing,MLST)、金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A,spa)、葡萄球菌盒式染色体(staphylococcal chromosomal cassette mec,SCCmec)、附属调节基因(accessory gene regulatory,agr)的分子分型及毒力基因、耐药性。结果 分离的128株SA中，MRSA有7... 相似文献
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