基于Nrf2/Keap1信号通路探讨金盏银盘水提液对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠抗氧化应激作用

目的 探究金盏银盘Bidens biternata(Lour.)Merr.&Sherff.水提液对四氯化碳诱导的急性肝损伤改善作用及其机制。方法 将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟素（0.15 g/kg）组和金盏银盘低、高剂量（3.9、7.8 g/kg）组,每组12只。各组小鼠连续ig给予相应药物7 d,末次给药后除对照组外均ip 0.4%四氯化碳构建急性肝损伤小鼠模型。24 h后收集小鼠血清及肝脏组织。用生化试剂盒检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量,并取肝组织匀浆检测谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。采用苏木精–伊红染色（HE）切片观察小鼠肝脏病理变化。Western blotting测定肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、抗体Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白的表达情况。结果 与模型组比较,金盏银盘水提液组小鼠组织病理学观察发现肝脏炎症细胞浸润明显减少,血清AST、ALT、MDA水平降低,血清SOD和肝组织GSH-Px活性...     

药物转运体表观遗传调控机制的研究进展

药物转运体在体内药物吸收、分布和排泄过程中发挥着重要的作用。转运体在各组织器官的分布和表达受到表观遗传修饰调控,导致某些药物体内处置过程出现明显的个体差异。随着表观遗传学的发展,基于表观遗传修饰（如DNA甲基化、组蛋白修饰、microRNA干预等）调控药物转运体的相关研究越来越多。对表观遗传调控药物转运体研究进行综述。     

肿瘤的表观遗传治疗研究进展

表观遗传修饰主要有DNA甲基化和以组蛋白修饰为特征的染色质重塑.异常的表观遗传修饰会导致肿瘤发生,因此异常修饰位点可能成为肿瘤治疗的新靶点.本文将对表观遗传修饰与肿瘤发生的关系以及肿瘤的表观遗传治疗的研究进展作一综述.     

胞磷胆碱对脑出血小鼠Keap1/Nrf2/ARE信号通路的影响

目的 基于Kelch样ECH关联蛋白1/核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Keap1/Nrf2/ARE)信号通路探讨康复训练联合胞磷胆碱对小鼠脑出血模型的神经保护作用及潜在作用机制。方法 将C57BL/6雄性小鼠采用随机数字表法分为假手术组(假手术处理)、模型组(用Ⅶ型胶原酶右侧尾壳核脑出血模型)、胞磷胆碱组(模型+胞磷胆碱64 mg·kg^-1)、康复训练组(康复训练)及联合组(模型+康复训练+胞磷胆碱64 mg·kg^-1)。观察脑出血小鼠改良神经损害程度评分(mNSS),用比色法检测脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的表达,用蛋白质印迹法和逆转录-定量聚合酶链反应检测脑组织Keap1、Nrf2、血红素氧合酶-1 (HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白和mRNA的表达。结果 假手术组、模型组、胞磷胆碱组、康复训练组及联合组mNSS评分分别为0、(1.56±0.73)、(1.00±0.00)、(0.78±0.44)和(0.67±0.50)分,MDA水平分别为(6.93±0.92)、(22.97±0....     

香豆素调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路对过氧化氢诱导的人卵巢颗粒细胞氧化损伤的保护作用

目的 探讨香豆素调节Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对过氧化氢(H₂O₂)诱导的人卵巢颗粒细胞氧化损伤的改善作用。方法 将人卵巢颗粒细胞株COV434分为空白组(正常培养)、模型组(0.5 mmol·L^-1 H₂O₂)、香豆素组(0.5 mmol·L^-1 H₂O₂+320μmol·L^-1香豆素)、抑制药组(0.5 mmol·L^-1 H₂O₂+10μmol·L^-1 Keap1/Nrf2/ARE通路抑制药compound 20c)、联合组(0.5 mmol·L^-1 H₂O₂+320μmol·L^-1香豆素+10μmol·L^-1...     

山茶油调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路对老年痴呆大鼠氧化应激损伤的影响

目的 探讨山茶油调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对老年痴呆(AD)大鼠氧化应激损伤的影响。方法 将大鼠随机分为空白组、AD组、山茶油低、中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组。空白组大鼠灌胃大豆油(1 ml/kg),模型组大鼠灌胃AlCl₃(110 mg/kg)+大豆油(1 ml/kg);山茶油低、中、高剂量组大鼠分别灌胃AlCl₃(110 mg/kg)+山茶油(1 ml/kg、2 ml/kg、4 ml/kg);盐酸多奈哌齐组大鼠灌胃AlCl₃(110 mg/kg)+盐酸多奈哌齐(1.75 mg/kg)。Morris水迷宫实验及跳台实验检测大鼠学习和记忆能力；苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织病理学变化；试剂盒检测大鼠脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性；Western blot检测大鼠脑组织中Keap1、N...     

基于表观遗传调控的中药防治类风湿关节炎作用机制研究进展

表观遗传修饰(epigenetic modifications)代表了调节基因表达的重要机制,使人体能够适应不断变化的环境。应用表观遗传学修饰研究方法是自身免疫疾病机制研究的前沿领域,类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是自身免疫性疾病研究领域的难点之一,其病因不明,发病机制复杂,至今仍然缺乏理想的治疗药物与方法。中医药治疗RA具有独特优势,新近研究发现中药单体成分和复方通过作用于表观遗传修饰而治疗RA。该文拟对表观遗传学在RA发生、发展中的机制,以及中药通过调控表观遗传防治RA的作用进行综述,以期为中药治疗RA临床疗效及其作用机制研究提供新的思路。     

高血压表观遗传药理学研究进展

伴随着遗传药理学的发展,人们逐渐认识到基因多态性不能完全解释降压药物疗效的个体差异。在分子水平上,高血压药物相关代谢酶、受体、转运体都受到基因表达调控的影响,并在降压疗效差异中起着重要的作用。因此,从表观遗传学的角度研究遗传因素与降压药物之间的关系,将有助于更好地解释临床上药物反应产生的个体差异。本文综述总结了DNA甲基化、组蛋白修饰和microRNAS等表观遗传调控方式对高血压相关药物编码基因的影响。     

纳米材料表观遗传学效应的研究进展

随着纳米科技的发展和纳米材料的广泛应用,人们暴露于纳米材料的机会日益增多,对其所引起的表观遗传学效应的研究也逐渐增多。纳米材料介导的体外表观遗传学效应与其种类、性质和处理条件等有关。纳米银可使细胞基因组整体甲基化水平升高且具有浓度效应关系;氧化锌、氧化钛和结晶型二氧化硅纳米颗粒会降低基因组整体甲基化水平;碳纳米管(NT)仅发现有特异基因甲基化作用。同时,DNA甲基化酶的水平也受纳米材料影响。纳米材料介导的组蛋白修饰作用多为乙酰化和磷酸化,并受到其电荷和存在状态(晶体,非晶体)的影响。对于纳米材料诱导的微RNA(miRNA)表达变化的研究,多采用高通量方法,差异表达的miRNA结果异质性大,且会受到纳米材料粒径、表面电荷、处理时间和浓度的影响。在体实验仅有纳米材料介导的甲基化和miRNA表达水平相关的研究,且多为长期重复暴露实验,除与体外实验结果相似外,还发现了纳米材料所致甲基化水平改变具有可逆性和组织特异性,对幼龄大鼠和(或)小鼠的效应更强。尽管近年来发表了许多有关纳米材料表观遗传学效应的研究,但有些结果还不确定,其是否具有可遗传性仍有待研究。本文综述了纳米材料对DNA甲基化、组蛋白修饰和miRNA表达水平的影响,希望能为纳米材料表观遗传学效应的研究提供参考。     

Keap1-Nrf2-ARE信号通路及其激活剂的研究进展

Keap1-Nrf2-ARE信号通路是细胞防御氧化应激损伤的最重要机制之一。许多具有解毒、抗氧化防御功能的蛋白质,其转录调控都依赖于Nrf2信号通路的激活。研究表明,Nrf2信号通路已成为氧化应激相关疾病(神经退行性疾病、癌症、心血管系统疾病、代谢和炎症等疾病)预防和治疗的靶点。因此,Nrf2信号通路的激活剂在多种氧化应激诱发的疾病方面都表现出良好的预防及治疗作用,发现及研究Nrf2信号通路的激活剂已越来越受到研究者们的重视。该文概述了Keap1-Nrf2-ARE通路的作用机制,并阐述了Keap1-Nrf2-ARE信号通路小分子激活剂的研究进展。     

癌症预防中的Keap1-Nrf2-ARE通路

癌症的治疗至今仍未取得重大进展,因此做好癌症的预防工作就尤为关键。目前有很多自然物质（如从植物中提取的抗氧化剂）或化学合成物质（如添加在食品中的抗氧化剂）被用来预防癌症。最近发现,有些癌症预防物是通过诱导二相抗氧化酶来清除体内的致癌物质或其它毒物,而且这种诱导作用是通过Keap1-Nrf2-ARE信号通路。因此,对这一通路的了解有利于拓展癌症的研究及预防。     

Targeting the cell signaling pathway Keap1-Nrf2 as a therapeutic strategy for adenocarcinomas of the lung

Introduction: Kelch-like ECH associated protein 1/Nuclear factor erythroid 2-like factor 2 (Keap1-Nrf2) signaling plays a pivotal role in response to oxidative stress in lung cancer. Mutations in KEAP1/NFE2L2 genes always cause persistent Nrf2 activation in lung cancer cells that confer therapeutic resistance and aggressive tumorigenic activity, dictating either poor prognosis or short duration of response to chemotherapy in clinical observations.

Areas covered: We provide a review of the mechanisms underlying the regulation of Keap1-Nrf2 at different stages, including genetic mutations, epigenetic modifications, translational/post-translational alterations, and protein–protein interactions. Based on the current knowledge, we discuss the possibilities of intervening Keap1-Nrf2 in lung adenocarcinoma as a therapeutic target.

Expert opinion: It is prevalently conceived that Keap1-Nrf2 signaling plays different roles at diverse stages of cancer. Although various Nrf2 or Keap1 inhibitors have been reported during the last decades, none of these inhibitors are currently under clinical studies or in clinical applications, suggesting that sole inhibition of Nrf2 might not be sufficient to suppress tumor growth. On the basis of current studies, we suggest that the rational combination of Nrf2 suppression with chemical agents which cause enhanced oxidative imbalance or abnormal metabolism would be promising in the treatment of lung adenocarcinoma.     

粪菌移植对内毒素诱导的急性肺损伤大鼠Keap1-Nrf2/ARE信号通路的影响

目的　探索Keap1-Nrf2/ARE信号通路在粪菌移植（FMT）干预内毒素诱导的大鼠急性肺损伤（ALI）中的作用。方法　将15只健康成年雄性SD大鼠根据随机数字表法分为对照组（NS组）、模型组（LPS组）、干预组（FMT组）,每组5只。LPS组和FMT组通过腹腔注射脂多糖（LPS,5 mg/kg）制备大鼠ALI模型,NS组注射等体积生理盐水,ALI模型完成24 h后,FMT组给予自制粪菌液灌胃（10 mL/kg,2次/d,连续2 d）,NS组和LPS组灌胃等体积生理盐水。FMT干预结束24 h后收集各组腹主动脉血、肺组织及新鲜粪便标本,检测动脉血氧分压［p（O）2］、肺湿/干质量比（W/D）,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、蛋白质羰基（PCO）水平,粪便进行肠道菌群测序,HE染色观察肺组织形态学变化并进行肺损伤病理学评分,免疫组化检测肺组织中核因子E2相关因子（Nrf2）的表达,蛋白免疫印迹法检测血红素氧合酶-1（HO-1）和Nrf2蛋白表达。结果　LPS组大鼠肺W/D、肺损伤病理评分高于NS组,而p（O）2低于NS组;LPS组血清中SOD含量低于NS组,血清中MDA、PCO含量及肺组织中Nrf2、HO-1蛋白表达均高于NS组（均P＜0.05）。与LPS组相比,FMT组大鼠肺W/D、病理学评分降低,p（O）2升高;血清中SOD水平增高,MDA、PCO水平降低;Nrf2、HO-1蛋白在肺组织中的表达均进一步增加（均P＜0.05）。LPS组肠道菌群Beta多样性与NS组及FMT组相比显示出差异性,其乳酸杆菌科和消化链球菌科减少,紫单胞菌科明显增多。FMT组肠道菌群Alpha多样性及Beta多样性均与NS组相似。结论　FMT可能通过调节肠道菌群影响Keap1-Nrf2/ARE信号通路,增强抗氧化应激反应,减少氧化损伤相关产物的产生,从而改善LPS诱导的大鼠ALI。     

表观遗传调控在心肌缺血作用机制中的研究进展

随着现代生活方式的转变,缺血性心脏病已成为全球心血管疾病患者的主流死亡因素。迅速恢复血流灌注是治疗心肌缺血的重要途径,然而血流再灌注会诱发心肌梗死,甚至会引起无法逆转的心肌细胞死亡,因此寻找新的途径治疗心肌缺血迫在眉睫。DNA甲基化、组蛋白乙酰化与非编码RNA等表观遗传调控是后基因时代的重点研究对象,越来越多的证据表明表观遗传学调控直接影响心脏的发育,参与多种缺血性心脏病的发生与发展过程,对心肌缺血的诊断和治疗具有重要意义。对近年来DNA甲基化、组蛋白乙酰化与非编码RNA在心肌缺血中的作用机制做一综述。     

Kinetic analyses of Keap1-Nrf2 interaction and determination of the minimal Nrf2 peptide sequence required for Keap1 binding using surface plasmon resonance

The Keap1-Nrf2 interaction plays important roles in regulation of Nrf2 activity and induction of chemopreventive enzymes. To better understand the interaction and to determine the minimal Nrf2 sequence required for Keap1 binding, we synthesized a series of Nrf2 peptides containing ETGE motif and determined their binding affinities to the Kelch domain of Keap1 in solution using a surface plasmon resonance-based competition assay. The equilibrium dissociation constant for the interaction between 16mer Nrf2 peptide and Keap1 Kelch domain in solution (K(solution)(D)) was found to be 23.9 nM, which is 10× lower than the surface binding constant (K(surface)(D)) of 252 nM obtained for the direct binding of Keap1 Kelch domain to the immobilized 16mer Nrf2 peptide on a surface plasmon resonance sensor chip surface. The binding affinity of Nrf2 peptides to Keap1 Kelch domain was not lost until after deletion of eight residues from the N-terminus of the 16mer Nrf2 peptide. The 9mer Nrf2 peptide has a moderate binding affinity with a (K(solution)(D)) of 352 nM and the affinity was increased 15× upon removal of the positive charge at the peptide N-terminus by acetylation. These results suggest that the minimal Nrf2 peptide sequence required for Keap1 binding is the 9mer sequence of LDEETGEFL.