乙型肝炎病毒A～D基因型及B1、B2、C1和C2基因亚型巢式聚合酶链反应分型法的建立

目的 建立检测乙型肝炎病毒(HBV)基因型和亚型特异性巢式聚合酶链反应(nPCR)分型法.方法 用DNAStar软件比较分析GenBank中登录的A～H 8种基因型HBV全基因组序列,用Primer Premier 5.0软件进行引物设计,建立nPCR分型法.该法在第一轮扩增基础上,第二轮分为3步扩增:第一步用Mix A扩增,检测B、D基因型和C1、C2亚型;第二步用Mix B扩增,检测A基因型;第三步用Mix C扩增,检测B1和B2亚型.应用该法检测68份慢性HBV感染者的血清样本,并从中随机选取15份样本的PCR产物直接测序,以验证该法的准确性.结果 该法检测68份慢性HBV感染者血清样本中,23.53%(16/68)为B2亚型,11.76%(8/68)为C1亚型,48.53%(33/68)为C2亚型,1.47%(1/68)为D型,11.76%(8/68)为B2C2混合型,1.47%(1/68)为C2D混合型,1.47%(1/68)为B2C1D混合型.随机选取15份样本测序分型,结果 与PCR法一致.结论 nPCR分型法简单快速,具有较高的灵敏度和特异度,可检测A～D基因型和B1、B2、C1、C2亚型.     

兰州地区乙型肝炎病毒相关肝癌患者中病毒基因型分布特征

目的 了解中国兰州地区HBV相关肝癌患者中病毒基因型分布特征,探讨HBV基因型及其亚型与HCC之间的相关性.方法 筛选兰州地区慢性HBV感染者包括慢性乙型肝炎组(CHB组)、乙型肝炎肝硬化(LC组)和乙型肝炎相关性HCC(HCC组)共142份血清样本,其中HBeAg阳性62份,HBeAg阴性80份.对各组进行HBV DNA的提取及HBV基因组S基因的PCR扩增和测序.将测序后得到的前S/S基因序列引入NCBI的在线病毒基因分型工具来确定HBV基因型.然后采用MEGA4软件构建系统进化树进行HBV基因亚型分析.结果 慢性乙型肝炎组C基因型19份,其中C1亚型9份,C2亚型10份,B基因型17份,均为B2亚型,B型C型混合型2份,D基因型6份,均为D2亚型;乙型肝炎肝硬化组C基因型26份,其中C1亚型9份,C2亚型17份,B基因型8份,均为B2亚型,D基因型2份,均为D2亚型;乙型肝炎相关性HCC组C基因型23份,C1亚型5份,C2亚型18份,B基因型6份,均为B2亚型,B型C型混合型1份,D基因型2份,均为D2亚型.HBV基因C2亚型在慢性乙型肝炎组、乙型肝炎肝硬化组、乙型肝炎相关性HCC组中的分布差异有统计学意义(x2=10.498,P均＜0.05).结论 兰州地区HBV感染者中基因型有B型、C型、D型及B型C型混合型.其中B基因型均为B2亚型,C基因型中检出C1、C2亚型,D基因型均为D2亚型.HCC患者和LC患者的C型检出率均显著高于CHB组,C基因型与较为严重的肝病(LC和HCC)有关.     

四川遂宁地区居民乙肝病毒基因型别分析

目的了解遂宁地区人群乙型肝炎病毒(HBV)基因型及血清亚型流行特征。方法在遂宁6个县级行政区域内共采集血清样本1 468人份筛出HBsAg检测阳性的血清样本,用巢氏PCR法扩增提取HBV DNA S区,根据PCR产物基因测序结果对样本HBV进行基因分型。结果测出基因序列118例HBsAg阳性标本中,B基因型40例(33.89%),C基因型73例(61.86%),D基因型5例(4.23%),未发现BCD以外的其他基因型。42份(35.59%)血清亚型分型为adr型,76份(64.41%)为adw型。结论遂宁地区乙肝病毒基因型别以B、C为主要基因型,其中C型基因占优势,存在少量D基因型。血清亚型的分布以adr\adw亚型为主,其中adw亚型占优势。     

武汉地区263例乙型肝炎患者HBV分型及耐药分析

目的应用基因测序技术检测武汉地区慢性乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒(HBV)基因型并分析其耐药情况。方法收集2015年1月—2016年12月武汉大学人民医院感染科263例乙型肝炎病毒基因(HBV-DNA)阳性的慢性乙型肝炎患者血浆标本,通过Sanger测序法测定HBV P基因RT区的基因序列,与NCBI genebank数据库中HBV基因型数据进行比对,分析患者HBV基因型。同时分析P基因RT区的突变位点和耐药情况。结果共检测出5种HBV基因型,分别是B型181例(68.82%),C型76例(28.90%),D型3例(1.14%),B/C混合型1例(0.38%)和B/F/G混合型2例(0.76%)。共检出耐药株109例(41.44%),HBV B基因型耐药突变发生率高于C基因型,以L180M+M204V/I和M204V/I耐药模式最为常见。结论武汉地区HBV基因型以B型为主,其次为C型;耐药形式复杂多样,耐药发生率与基因型别存在一定关系。     

单纯乙型肝炎疫苗免疫后表面抗原携带者“a”决定簇基因变异的分子流行病学特征

目的　了解单纯乙型肝炎疫苗免疫失败后表面抗原 ( HBs Ag)携带者和未免疫携带者 HBs Ag基因变异的流行特点及乙型肝炎病毒 ( HBV)基因型和血清亚型的分布特点。　方法　应用直接测序和基因序列特异固相聚合酶链反应( SS- SPPCR)方法 ,分别检测 69例单纯乙型肝炎疫苗免疫后携带者和 83例未免疫携带者 ,乙型肝炎病毒 HBs Ag“a”决定簇氨基酸的变异及 HBV基因型和血清亚型的分布。　结果　 HBV基因型 B、C和 D均存在 ,其中 B和 C为优势基因型 ;血清亚型 adr、adw2、avr、ayw1、ayw2和 ayw3均存在 ,其中 adr和 adw2为优势血清亚型。直接测序检测的乙型肝炎疫苗免疫后携带者 HBs Ag“a”决定簇氨基酸变异率明显高于未免疫携带者对照 ,变异率分别为 3 1.9% ( 2 2 / 69)和 8.4 % ( 7/ 83 )。14 5、12 6和 13 3位是最常见的氨基酸变异点。应用更为敏感的 SS- SPPCR法分别检测 14 5和 12 6位氨基酸点突变的变异率 ,各组间差别不明显。经直接测序法检测 ,免疫后携带者基因变异危险度 ( OR)是未免疫携带者的 5 .1倍。按基因型和血清亚型分层分析 ,基因型 B和 adw2血清亚型携带者受免疫后出现基因变异的危险度明显高于未免疫携带者 ,分别为3 1.7和 2 8.9。　结论　接种乙型肝炎疫苗者可引起表面抗原基因的免疫逃避     

儿童乙型肝炎病毒携带者HBV基因型分析

目的检测温州地区儿童乙型肝炎病毒携带者HBV基因型和Ba／Bj亚型的分布，及其与病毒复制水平的关系。方法采用实时荧光PCR技术进行HBV基因分型和HBVDNA定量，对鉴定为B基因型标本，采用PCR-RFLP结合PCR产物直接序列测定其基因亚型（Ba／Bj）。结果温州地区儿童乙型肝炎病毒携带者HBV基因型B、C、B＋C混合型和D型分别占43．92％、53．44％、1．59％和1．06％；C基因型的HBVDNA含量与B基因型之间差异无统计学意义（P2〉0．05）；83例B基因型HBV均为Ba亚型，未发现Bj亚型。结论温州地区儿童乙型肝炎病毒携带者HBV基因型主要为c基因型和B基因型，B基因型HBV主要为Ba亚型。     

中国15个民族HBV基因型及基因亚型分布特征分析

目的 了解我国不同民族人群感染HBV的基因型及基因亚型分布特征。方法 利用多阶段分层整群随机抽样结合系统抽样的方法从2020年全国乙型肝炎血清流行病学调查HBsAg阳性样本库中抽取样本,利用巢式PCR扩增阳性样本HBV S区基因,构建系统发育树分析判定HBV基因型和亚型,结合社会人口学资料进行综合分析。结果 成功扩增15个民族的1 539份样本,检出B、C、D、I型和C/D重组型5种基因型。B型占比较高的民族包括汉（74.52%,623/836）、壮（49.28%,34/69）、彝（53.19%,25/47）、苗（94.12%,32/34）和布依族（81.48%,22/27）;C型占比较高的民族为瑶族（70.91%,39/55）;D型占比较高的民族为维吾尔族（83.78%,31/37）;C/D重组型占比较高的民族为藏族（92.35%,326/353）;检出I型11例中,8例来自于壮族。除藏族外,各民族的B型中B2亚型均>80.00%;在C型中,C2亚型占比较高的民族包括汉、藏、彝、维吾尔、蒙古、满、回和苗族8个民族,C5亚型占比较高的民族包括壮（55.56%,15/27）和瑶族（84.62%,33/39）;在D型中,彝族均为D3亚型,维吾尔和哈萨克族均为D1亚型。C/D1和C/D2亚型在藏族占比分别为43.06%（152/353）和49.29%（174/353）。I型均为I1亚型。结论 我国15个民族中发现HBV 5种基因型和15种基因亚型,不同民族的HBV基因型和基因亚型分布差异明显。     

长春地区乙型肝炎病毒基因分型与肝病发病关系的研究

目的了解长春地区乙型肝炎(乙肝)患者基因型特点及与肝炎严重程度、疾病转归的关系,以指导临床对疾病进展的判断和指导临床用药。方法选择216例乙肝病毒(HBV)阳性肝炎患者,年龄33-87岁,平均(60．5±11．4)岁。病变程度的判断根据2000年《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准。应用巢式聚合酶链反应方法(nPCR)扩增HBV S基因组序列,用第二轮PCR产物直接进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析;然后用HBV S基因扩增产物采用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测序,将所得到的核苷酸序列及推测的相应氨基酸序列通过DNASIS软件处理,并与GenBank中已发表的HBV中国株及国外株进行同源性比较以确定HBV的基因型,证明用S基因序列的RFLP法HBV分型结果与用全基因组序列的基因分析是一致的。表明S基因序列RFLP法的基因分型结果与S基因测序分型结果是一致的。结果216例HBV DNA阳性标本中单基因型分别检测出A、B、C、D四种,其中单基因型中A型有1例(0．46％),B型有19例(8．8％),C型有175例(81．02％),D型有21例(9．72％)。86例HBV DNA阳性住院患者标本中,C型为感染的主要基因型,69例(80．23％)。B型次之,9例(10．47％)。6例原发性肝癌均为C型;20例肝炎后肝硬化的患者中有17例(85．0％)为C型。结论长春地区HBV基因型仍以C型为主(81．02％),B、D型次之(分别是8．8％和9．72％)。同时结果显示长春地区HBV感染有基因多样性趋势,表现在检测出了A单基因型。肝癌、肝硬化与C基因型HBV的相关性最大。C基因型HBV DNA拷贝数较非C基因型高,提示与HBV DNA在C型患者体内长期存在有关。HBV病毒载量与肝脏病变严重程度的关系无统计学意义。     

HBV基因型与慢性乙型肝炎疾病谱的关系

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基因型与慢性乙型肝炎疾病谱相关性。方法　用S基因聚合酶链式反应 -限制片段长度多态性 (PCR -RFLP)的基因型分型方法对广东地区HBV感染者中无症状携带者 (AsC)组 80例和肝硬化组 (LC) 12 0例血清标本分型 ,比较两组基因型分布的异同。结果　基因型在AsC组分布 :B型 45 0 % ( 3 7/ 80 ) ;C型 3 3 75 % ( 2 6/ 80 ) ;D基因型 2 1 2 5 % ( 17/80 ) ;LC组HBV基因型分布B型 3 2 5 % ( 3 9/ 12 0 ) ;C型 65 8% ( 79/ 12 0 ) ;D基因型 1 6% ( 2 / 12 0 )。广州地区未发现A、E和F基因型 ,基因型在两组中的分布均与e抗原状态无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;ASC与LC组两组间基因型的分布有显著性差异 ( χ2 =3 1 92 4,P=0 0 0 0 )。结论　可初步认为广东地区HBV感染者以B和C型为优势基因型 ,AsC组中以B型为优势基因型 ,感染HBVD基因型病情轻 ,感染HBVC基因型病情更易于加重。     

慢性乙型肝炎患者YMDD自然变异的检测

[目的]检测未接受抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者HBV基因型及其YMDD变异的情况。[方法]选择慢性乙型肝炎患者中未接受抗病毒治疗的54例为研究对象,应用PCR荧光分子信标探针检测技术及PCR微板核酸杂交-ELISA技术进行HBV YMDD变异株及HBV基因分型检测。[结果]①54例未接受抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者HBV基因型以C、B、D亚型多见,分别占44.4%(24/54),22.2%(12/54),14.8%(8/54)。其中检测出YMDD变异阳性10例,变异率为18.5%(10/54);不同基因型YMDD变异率差异无统计学意义。②YMDD变异者与未变异者肝脏转氨酶检测值比较差异无统计学意义[ALT为(276.91±78.23)U/L比(255.72±70.20)U/L,AST为(237.44±73.25)U/L比(248.76±69.08)U/L,P均﹥0.05]。[结论]唐山地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型以C、B、D亚型多见,并存在天然YMDD变异株;发生YMDD变异者肝脏损害未加重。     

Genotyping and molecular characterization of hepatitis B virus in liver disease patients in Kenya

Hepatitis B virus (HBV) genotypes are important in both the clinical manifestation of disease and treatment response. Although Kenya belongs to the African Region (AFR-E) characterized by high mortality and hyperendemicity of HBV, there is a paucity of HBV genotyping data. The aim of this study was to molecularly characterize the basic core promoter/precore (BCP/PC) and complete surface (S) regions of HBV isolated from 61 HBsAg-positive liver disease patients attending Kenyatta National Hospital in Nairobi. HBsAg, HBeAg and viral loads were determined. HBV DNA was amplified and sequenced from 58/61 patients. In addition to the complete genome of two isolates, the BCP/PC and the complete S regions of 43 and 38 isolates, respectively were sequenced. Following phylogenetic analysis of the S region, 38 isolates clustered with subgenotype A1, whereas two isolates clustered with genotype D, one with subgenotype D1 and another as an outlier of the clade containing subgenotype D6 and the D/E recombinant. When the complete genome of the latter isolate was sequenced it clustered with D6. The majority of isolates belonged to serological subtype adw2 and only four to ayw2. Three distinct groups of subgenotype A1, distinguished by different amino acid motifs, circulate in Kenya: two in the African cluster and a monophyletic clade in the “Asian” cluster. HBeAg-negativity was a result of G1896A in genotype D isolates, whereas in subgenotype A1, the HBeAg-negativity was a result of mutations in the Kozak region (1809–1812) or precore start codon (1814–1816). Mutations at positions 1762 and 1764 occurred more frequently in HCC patients (p < 0.05). In conclusion, subgenotypes A1, D1 and D6 circulate in liver disease patients in Kenya, with A1 predominating.     

Molecular epidemiology of hepatitis B virus in Misiones,Argentina

Hepatitis B virus (HBV) infection is a major public health problem worldwide. The aims of this study were to describe the molecular epidemiology of HBV in the Province of Misiones, Argentina and estimate the phylodynamic of the main groups in a Bayesian coalescent framework. To this end, partial or complete genome sequences were obtained from 52 blood donor candidates.The phylogenetic analysis based on partial sequences of S/P region showed a predominance of genotype D (65.4%), followed by genotype F (30.8%) and genotype A as a minority (3.8%). At subgenotype level, the circulation of subgenotypes D3 (42.3%), D2 (13.5%), F1b (11.5%) and F4 (9.6%) was mainly identified.The Bayesian coalescent analysis of 29 complete genome sequences for the main groups revealed that the subgenotypes D2 and D3 had several introductions to the region, with ancestors dating back from 1921 to 1969 and diversification events until the late ‘70s. The genotype F in Misiones has a more recent history; subgenotype F4 isolates were intermixed with sequences from Argentina and neighboring countries and only one significant cluster dated back in 1994 was observed. Subgenotype F1b isolates exhibited low genetic distance and formed a closely related monophyletic cluster, suggesting a very recent introduction.In conclusion, the phylogenetic and coalescent analyses showed that the European genotype D has a higher circulation, a longer history of diversification and may be responsible for the largest proportion of chronic HBV infections in the Province of Misiones. Genotype F, especially subgenotype F1b, had a more recent introduction and its diversification in the last 20 years might be related to its involvement in new transmission events.     

乙型肝炎病毒B基因亚型检测及临床意义

目的 探讨乙型肝炎病毒B基因型亚型分布特征及其与临床病情的相关性.方法 采用巢式聚合酶链反应(nest PCR)扩增乙型肝炎病毒preC/C基因区DNA片段,用末端标记方法对PCR产物标记并直接测序,测序结果和GeneBank中登录的标准序列相比较.结果 35例B基因型乙肝病毒感染者均为Ba亚型,未发现Bj亚型.结论 江苏常州地区的B基因型乙肝病毒均为Ba亚型.     

我国2015-2017年急性乙型肝炎病例HBV基因型分布特征分析

目的分析我国急性乙型肝炎(乙肝)病例HBV基因型流行病学分布特征。方法收集2015-2017年中国疾病预防控制信息系统报告的急性乙肝病例620例, 通过巢式PCR扩增获得全长HBV基因组, 构建系统发育树确定HBV基因型, 结合基础资料分析HBV基因型的分布情况。结果在620例急性乙肝病例中, 成功分型519例(83.71%, 519/620), 包括A型(0.19%, 1/519)、B型(27.17%, 141/519)、C型(62.04%, 322/519)、D型(9.06%, 47/519)、I型(0.77%, 4/519)和CD重组型(0.77%, 4/519);2个主要的基因亚型为B2(95.03%, 134/141)和C2(72.67%, 234/322)。基因型在我国7个地区分布不同, C型在东北(94.55%, 52/55)、华北(93.85%, 61/65)、华东(78.87%, 56/71)和华南地区(58.14%, 50/86)的比例较高, B型在华中(58.07%, 36/62)和西南(52.94%, 45/85)地区的比例较高, 西北地区的D型(48.42%,...     

拉米夫定早期疗效与乙型肝炎病毒基因型的关系

目的研究拉米夫定早期疗效与乙型肝炎病毒(HBV)基因型的关系。方法选取2001至2002年拉米夫定治疗12个月的595例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,分别对HBV基因型和DNA(HBVDNA)、HBeAg／抗HBe及治疗12个月后的酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(YMDD)变异进行检测,应用SPSS软件分析数据。结果595例慢性乙型肝炎患者中,A型8例(1．4％),B型53例(8．9％),C型360例(60．5％),BC混合型112例(18．8％),AC混合型14例(2．4％),AB混合型15例(2．5％),ABC混合型6例(1．0％),未分型者27例。拉米夫定治疗12个月后HBVDNA阴转率：B型87．2％,C型89．51％,BC型93．04％,三者比较,差异无统计学意义;HBeAg血清转换率：B型11．65％,C型20．64％,BC混合型18．57％,三者比较,差异无统计学意义;治疗12个月时HBVDNA出现反跳的病例中,69例发生了YMDD变异,其中C型46例(15．38％),B型9例(16．98％),BC混合型14例(13．86％),差异无统计学意义。结论拉米夫定早期疗效与HBV基因型、HBeAg血清转换率、HBVDNA水平及YMDD变异未见直接关系。     

100例乙型肝炎病毒基因分型的探讨

目的:为了解宁波及毗邻地区乙型肝炎患者HBV基因型分布、优势型与临床的相关性。方法:选择宁波及毗邻地区HBV DNA阳性的HBV感染者100例,应用基因芯片对其进行基因分型,其中7例优势基因型进行S基因序列同源性测序复核。结果:100例HBV阳性的血清标本分型率为96.0%,其中B基因型36例(37.5%),C基因型47例(48.9%),BC混合基因型11例(11.5%)及BCD混合基因型2例(2.1%),未分出型的4例。乙型肝炎感染者检出的基因型以B、C型为主;重型肝炎与肝癌组中C型检出率分别为60%和55%,明显高于其他基因型(P<0.05),B、C基因型与HBV DNA拷贝数、丙氨酸氨基转移酶水平及总胆红素在统计学上无显著差异(P>0.05)。结论:基因芯片分型方法可应用于HBV基因的分型。宁波及毗邻地区的HBV基因型以B、C为优势基因型,重型肝炎和肝癌患者检出的基因型多为C型,提示C基因型患者预后较差。     

浙东地区乙型肝炎病毒基因型分布及临床意义

目的：了解浙江东部地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布、优势型及其与临床的相关性。方法：选择浙江东部地区HBVDNA阳性的HBV感染者100例，应用基因芯片对其进行基因分型，其中对7例优势基因型进行S基因序列同源性测序复核。结果：100例HBV阳性的血清标本分型率为96．0％，其中B基因型36例（36．0％），C基因型47例（47．0％），BC混合基因型11例（11．0％）及BCD混合基因型2例（2．0％），未分出型的4例（4．0％）。基因芯片分型与S基因序列同源性测序分型结果一致，乙型肝炎感染者检出的基因型以C、B型为主；重型肝炎与肝癌组中c型检出率分别为60％和55％，明显高于其他基因型（P〈0．05），C、B基因型与HBVDNA拷贝数、丙氨酸氨基转移酶水平及总胆红素在统计学上无显著差异（P〉0．05）。结论：HBV的基因型存在地区性差异，浙江东部地区的优势基因型为c、B型，与以往报道的结论不太一致。不同临床肝炎型与基因型存在一定的相关性，主要表现为重型肝炎和肝癌患者检出的基因型多为C型，提示C基因型患者预后较差。基因芯片分型方法可应用于HBV基因的分型，方便、快速。     

福建省部分地区乙型肝炎病毒基因型分布及其临床意义

目的首次调查福建省5个地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布状况,并探讨HBV基因型与HBV相关肝病临床的可能相关性.方法收集福州市、厦门市、泉州市、三明市、莆田市等地区慢性HBV感染者的血清,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测HBV基因型,应用多因素logistic回归分析、对应分析研究HBV基因型与临床的相关性.结果 431例HBV DNA阳性血清中基因B型275例(63.8%),C型100例(23.2%),D型及其混合型共51例(11.8%),未见A、E、F型.多因素logistic回归分析显示,泉州和三明地区HBV基因B型所占比例显著高于福州地区(P=0.002;P=0.006);无症状携带者、慢性肝炎、重型肝炎组都是以基因B型为主要基因型;基因C型在肝硬化中所占比例(47.0%)显著高于无症状携带者(14.5%)和重型肝炎组(14.7%)(P=0.009;P＜0.001);基因B型的e抗原阳性率(52.4%)显著低于C型(56.0%)(P=0.008);基因D型患者e抗原阳性率(30.8%)也低于C型(P=0.051).对应分析表明原发性肝癌(HCC)与基因D型及其混合型关系密切.结论 (1)福建省HBV感染以基因B型为主,其次是C型,也存在基因D型的流行.(2)福建省部分地区基因型B和C的分布可能存在差异.(3)基因B型在年轻患者中可能与重型肝炎的发展有关;基因C型在年长患者中可能更易导致肝硬化.(4)基因D型与HCC可能有一定的相关性,值得进一步研究.     

Genotype determination in Moroccan hepatitis B chronic carriers

BACKGROUND: In Morocco, chronic liver disease related to hepatitis B virus (HBV) is a public health burden. Treatment of chronic hepatitis B is often complicated by the appearance of escape mutants after treatment with nucleoside analogs, especially with genotypes responsible for the more severe form of the disease. OBJECTIVES: In the present study we investigate the prevalence of the different HBV genotypes in Morocco since no previous careful study has been attempted. METHODS: Epidemiological data from 91 chronically infected patients (45 women and 46 men) were collected prospectively. Sera were tested for anti-HBc IgG, HBeAg, anti-HBe antibody and liver enzymes. Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) analysis was confirmed by subsequent sequencing of the pre-S and S region of the viral genome in order to determine which HBV genotypes were prevalent among Moroccan patients. RESULTS: The mean age was 41+/-12.4 years. Ten patients (11%) were positive for hepatitis B e antigen (HBeAg) and 81 (89%) were positive for anti-HBe antibodies. By the RLFP method, genotype D, pattern D2, was found in the 77 cases where HBV was successfully amplified. Phylogenetic analysis based on pre-S/S sequences revealed that genotype D in Morocco differed from others D strains subgenotypes (D1, D2, D3 and D4). In addition, the pre-core mutant defined as HBeAg-negative/anti-HBe-positive and HBV DNA positive was detected in 86% of cases. CONCLUSIONS: Our results clearly show that genotype D and pre-core mutant are highly prevalent in Morocco.