苄基异喹啉类化合物对钙调素和磷酸二酯酶相互作用的研究

钙调素(CaM)拮抗剂是研究CaM生理功能的良好工具,也是探讨药物作用机理和开发新药的重要监察器。已报道粉防己碱是一种CaM拮抗剂。我们合成并测定了一些苄基异喹     

钙调素拮抗剂对非酶体系中羟自由基水平影响的研究

研究了钙调素拮抗剂(Calmodulin Antagonist,简写CaM A)与抗坏血酸体系产生的羟自由基(~.OH)的相互作用。结果显示,小檗胺(E_0)及其衍生物(E_5、E_6)、蝙蝠葛碱(D_1)及氯丙嗪(CPZ)在高浓度时均有清除~.OH的作用;除E_0和CPZ外,其它药物在低浓度均可促进~.OH的生成。研究表明,研究钙调素(CaM)与自由基的相互关系时,在合理的浓度范围内使用CaM A作为研究手段是可行的。     

O-甲基蝙蝠葛碱和蝙蝠葛碱抗实验性心律失常的比较

O-甲基蝙蝠葛碱(O-Methel dauricine,OMD)为蝙蝠葛碱(Dauricine,Dan)的烃化衍生物。我室对Dau系列衍生物进行实验研究时发现,OMD抗实验性心律失常与母体化合物不同。本文旨在研究OMD的抗心律失常作用,并与Dau比较。     

桥本甲状腺炎与甲亢患者抗钙调素自身抗体的检测和意义

自人脑提取钙调素(CaM)包被聚苯乙烯反应板,建立了检测抗 CaM 自身抗体的 ELISA 法。100例正常对照血清中抗 CaM 水平(?)±s)为7.56±2.68U/ml,以≥(?)+3s(15.60U/ml)为阳性。25例桥本甲状腺炎(HT)和34例甲亢患者分别为59.07±98.45U/ml 和37.76±84.66U/ml,其抗 CaM 水平与阳性率(分别为60.0%与47.1%)均显著高于正常人。患者抗 CaM 水平个体差异较大,与抗甲状腺球蛋白、抗甲状腺微粒体自身抗体无相关性。     

自身化学离子化/傅里叶变换质谱法研究蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱及其衍生物的结构

采用自身化学离子化/傅里叶变换质谱(SCI/FTMS)技术研究了蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱及这二个化合物的9个衍生物,由[M 1]准分子离子峰和特征碎片峰的质谱数据鉴定了这些衍生物的结构。     

钙调素特异性免疫复合物的测定与意义

钙调素(Calmodulin,CaM)是一种多功能调节蛋白,与免疫功能有密切关系。很多自身免疫性疾病患者体内存在抗 CaM 自身抗体。我们用免疫电镜技术证实,该抗体可进入活的淋巴细胞,并对其功能产生影响。本项研究旨在证实除游离抗 CaM 外,患者体内还可能存在与 CaM 结合的抗 CaM,即CaM 特异性免疫复合物(CaM-IC)。现将研究结果报告如下。     

猪眼晶体钙结合蛋白的分离、纯化及其性质的研究

用疏水性苯基琼脂糖、Sephacryl S—200和DEAE纤维素柱层析从猪眼晶体中提纯了五种钙结合蛋白(CaBP)。DEAE纤维素柱采用了两种不同梯度的洗脱体系。纯化的CaBP的分子量子别为11,000、12,000、18,000、72,000和87,000,故分别称之为CaBP_(11)、CaBP_(12)、CaM、CaBP_(72)和CaBP_(87)。在SDS—PAGE中,除CaBP_(72)显示出三条不同区带外,其他均为单一区带。晶体CaM对环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)的刺激作用与牛脑和猪脑CaM相同。CaBP_(11);CaBP_(12)对CaBP_(72)抗体的交叉反应率小于0.1％,但CaBP_(11)和CaBP_(12)的混合物与CaBP_(72)抗体的交叉反应率明显增加。晶体CaM可与兔抗猪脑CaM抗体1:1结合。     

抗钙调素抗体进入中性粒细胞后对其吞噬杀菌功能的影响

以往的研究已证实,抗 CaM 自身抗体在体外进入人的活淋巴细胞后能发挥类似CaM 拮抗剂的作用。本研究旨在探讨抗CaM 对正常人中性粒细胞(NTL)的穿入及对其吞噬、杀菌功能的影响。材料与方法(一)中性粒细胞悬液将不含抗 CaM     

蝙蝠葛碱衍生物D3对呼吸的影响及抗吗啡,甲苯噻嗪抑制呼吸的效果

蝙蝠葛碱衍生物D_3 3 mg/kg iv引起麻醉大鼠呼吸频率加快,PNAP、IcEMAP幅度增大;2 mg/kg iv也使麻醉猫呼吸加快,每分通气量增加,并能分别部分对抗吗啡和甲苯噻嗪所致的呼吸抑制。等剂量蝙蝠葛碱对麻醉大鼠的呼吸兴奋不明显,但降低吗啡抑制呼吸后的死亡率有同等效果。D_3的呼吸兴奋作用可能与丙酰基取代了蝙蝠葛碱羟基中的氢、提高了分子的疏水性和增强了对钙调素的抑制活性有关,其药理机制尚待进一步探讨。     

香茶菜甲素酯对依赖钙调素的环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用

香茶菜甲素酯是香茶菜甲素的一种新的衍生物。研究发现该化合物能明显抑制CaM激活的PDE活性,其IC_(50)为75μmol/L。抑制动力学测定表明它以非竞争方式拮抗CaM对PDE的活化。CaM荧光测定显示,香茶菜甲素酯可以降低ca~(2+)诱导的CaM酪氨酸荧光强度,提示它可能通过改变Ca~(2+)—CaM构象而抑制CaM—PDE。     

钙调蛋白抑制剂(氯丙嗪)增敏热化疗的动物实验研究

本文介绍了钙调蛋白抑制剂(氯丙嗪)增敏热化疗治疗恶性肿瘤的动物实验。结果表明:单纯加热治疗对S180的生长有一定的抑制作用;氯丙嗪联合热化疗疗效明显优予热化疗,实验还探讨了氯丙嗪在热化疗前或后及前后均使用及使用长短的意义,结果显示疗效按前后处理、后处理、前处理逐步降低,作用时间长疗效增加。作者复习了有关文献认为,前处理仅为相加作用,后处理有增敏作用,前后同时处理则综合了这两方面的作用。氯丙嗪对热化疗的增敏作用是明显的,可望用于恶性肿瘤的综合治疗。     

癫痫患者血小板中钙调素含量的测定及其临床意义

用ＥＬＩＳＡ法测定了癫痫和其它神经精神病患者血小板中钙调素的含量。大发作及混合发作癫痫、视觉性癫痫、其它神经精神病患者（对照组）血小板中钙调素含量分别为７．５９±２．８３、３．３３±１．１１和２．７５±１．１４ｕｇ／ｍｇ蛋白（Ｘ±Ｓ）。大发作及混合发作癫痫与视觉性癫痫和对照组相比其钙调素含量均显著增高（Ｐ＜０．０１），而视觉性癫痫与对照组相比则无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示血小板中钙调素含量的测定可作为大发作及混合发作癫痫的辅助诊断。     

豚鼠耳蜗螺旋神经节钙调素的分布

观察正常豚鼠耳蜗螺旋神经节钙调素的分布，因为作为真核细胞中最重要的Ｃａ＾２＋受体－－钙调素在听觉径路上的分布和功能尚未见报道。     

兔网织红细胞钙调蛋白含量及阿片肽对兔网织红细胞膜钙调蛋白活性的影响

用以激活环核苷酸磷酸二酯酶活性为基础的钙调蛋白(Calmodulin CaM)活性测定法,测定正常兔红细胞及兔网织红细胞CaM含量及阿片肽类对兔网织红细胞膜CaM活性的影响。发现无论在网织细胞或其细胞膜CaM含量均明显高于正常红细胞;β-内啡肽和强啡肽对兔网织细胞膜CaM活性有显著的抑制作用,这种作用并不为纳洛酮或其化合物Mr2266所拮抗,也不受钙离子浓度增加的影响,但可被外源性CaM所翻转。推论兔网织细胞膜CaM是β-内啡肽和强啡肽作用环节之一.     

百合知母汤对抑郁症大鼠海马组织钙调蛋白信号通路中关键分子水平的影响及其抗抑郁机制

目的：研究百合知母汤的抗抑郁作用及其对抑郁症大鼠海马组织钙调蛋白（CaM）信号通路中关键分子CaM、钙调蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）和cAMP反应元件结合蛋白（CREB）表达的影响,探讨百合知母汤的抗抑郁机制。方法：50只大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药氟西汀组和百合知母汤低、高剂量组,每组10只;除对照组外,其余各组大鼠采用慢性轻度不可预见性温和刺激结合孤养方法制备抑郁症模型,共计21d;对照组、模型组大鼠给予生理盐水,其余各组大鼠分别灌胃给予氟西汀（1.8 mg·kg^-1）和百合知母汤（1.5、3.0 g·kg^-1）,共计28 d。分别采用Morris水迷宫实验、敞箱实验和强迫游泳实验检测各组大鼠学习记忆功能、自主活动能力及5 min内不动时间。采用尼氏染色观察大鼠海马神经元的损伤及修复状况。分别采用Westernblotting法和RT-PCR法检测大鼠海马组织CaM、CaMKⅡ蛋白和CREBmRNA的表达水平。结果：与模型组比较,百合知母汤组和氟西汀组大鼠在Morris水迷宫平台象限的总时间、总路程和穿越平台的次数增加（P < 0.05或P < 0.01）,第一次穿越平台的用时缩短（P < 0.01）,敞箱实验总得分增加（P < 0.01）,强迫游泳实验中5 min内的不动时间缩短（P < 0.05或P < 0.01）;与氟西汀组比较,百合知母汤高剂量组大鼠游泳实验中5 min内不动时间缩短（P < 0.05）。尼氏染色,与模型组比较,氟西汀组及百合知母汤低、高剂量组大鼠海马神经元的损伤得到改善。Western blotting法检测,与模型组比较,百合知母汤组大鼠海马组织中CaM和CaMKⅡ蛋白表达水平升高（P < 0.05或P < 0.01）;RT-PCR法检测,与模型组比较,氟西汀组及百合知母汤组大鼠海马组织中CREBmRNA表达水平明显升高（P < 0.05或P < 0.01）。结论：百合知母汤有抗抑郁作用,能改善抑郁症大鼠海马神经元的损伤,其作用机制与提高抑郁症大鼠海马组织CaM信号转导通路中的CaM、CaMKⅡ和CREB等关键分子表达水平有关联。     

冠心病患者血小板功能和血小板钙调素含量的变化

检测了20例冠心病患者的血小板钙调素含量及血小板部分功能,发现冠心病患者血小板钙调素含量较对照组明显降低,而血小板活性则较对照组明显增高。结果提示,钙调素的含量变化有可能在冠心病的发病过程中起着重要作用。     

钙调素mRNA和蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨钙调素(CaM)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平及其临床意义.方法采用原位杂交及免疫组织化学技术检测CaM在64例非小细胞肺癌标本中的表达.结果在NSCLC中CaM mRNA及CaM蛋白表达检测结果基本一致.CaM mRNA的阳性表达率为60.4%(39/64),而CaM蛋白为65.6%(42/64);低分化的肿瘤标本中CaM mRNA阳性表达率(70.0%,21/30)显著高于中高分化的肿瘤标本(45.3%,15/34);Ⅲ～Ⅳ期CaM mRNA阳性表达率(81.8%,27/33)显著高于Ⅰ～Ⅱ期(51.6%,16/31);有淋巴结转移的CaM mRNA阳性表达率(64.0%,25/39)显著高于无淋巴结转移的肿瘤标本(28.0%,7/25).CaM的表达与患者性别、年龄及组织学类型无明显关系.结论 CaM在非小细胞肺癌中有着较高的表达率,且与肿瘤的分化程度、临床分期及淋巴结转移有一定的关系,提示钙调素表达的增高可能在促进肺癌的浸润转移中起重要作用.     

内毒素对内皮细胞钙,钙—钙调蛋白复合物的影响

本实验对内毒素(ET)作用前、后的传代内皮细胞(EC)的钙含量和钙-钙调蛋白复合物进行了定量及半定量测定。旨在探索ET对EC内钙含量和钙-钙调蛋白复合物的影响及其在治疗学上的意义。结果显示,ET能促使钙-钙调蛋白复合物解离;能使EC内钙含量显著性增加。     

钙调素在格列美脲促进正常大鼠骨骼肌细胞糖原合成中的作用

目的探讨钙调素(CaM)在格列美脲(GM)促进正常大鼠骨骼肌糖原合成中的作用。方法分离大鼠骨骼肌并进行体外培养,将细胞分成含胰岛素和不含胰岛素两大组,每组又分成含CaM拮抗剂R24571和不含R24571两亚组,各亚组分别设对照,给予不同浓度GM(0.01、0.10、1.00、10.00μmol/L)孵育4h后进行细胞CaM活性和糖原含量测定。结果在胰岛素存在下,加入GM后,CaM活性和糖原含量都明显升高(P<0.05),且在一定浓度范围内随着GM浓度升高而升高;加入R24571后,CaM活性明显受抑,糖原含量明显下降(P<0.05)。在无胰岛素存在下,加入GM后,CaM活性明显升高且在一定范围内随GM浓度升高而升高,糖原含量无明显变化(P>0.05)。结论CaM在GM促进胰岛素介导的骨骼肌糖原合成中起重要作用。