载长春新碱长循环聚合物超声微泡造影剂的制备及性能评价

目的 制备载硫酸长春新碱的聚乳酸-乙醇酸-聚乙二醇共聚物(PLGA-PEG)超声微泡造影剂,观察微泡的一般特性及体内、外显影效果.方法 采用W/O/W复乳-溶剂挥干法制备超声微泡造影剂,正交实验设计获得最佳制备工艺,采用紫外分光光度法测定微泡的包封率和载药量,光学显微镜观察微泡形态,以马尔文激光粒径测量仪测定微泡造影剂的粒径、Zeta电位,并观察微泡在兔心腔的显影效果.结果 获得的微泡造影剂为球形,平均粒径约为1.27 μm,包封率为(37.63±0.61)%,Zeta电位为-24.88 mV,静脉注射载药微泡后,能增强兔心腔超声显影效果.结论 采用复乳-溶剂挥干法成功制备超声微泡造影剂,能增强体内外超声显影效果.     

纳米级超声造影剂制备及成像的实验研究

目的 探讨纯度较高的纳米级超声微泡造影剂的理化性质及体内成像效果.方法 机械振荡法与低速离心法结合制备纳米级微泡,观察微泡形态,检测其平均粒径,并观察其增强正常兔肝显影的情况,并与微米级微泡造影剂进行比较.结果 光镜以及透射电镜观察,微泡呈圆形,分布均匀,无聚集现象.Zeta SIZIER 3000测定微泡粒径均值为623.4 nm,微泡表面电位均值1.3 mV.注射纳米级造影剂于新西兰大白兔体内能持续增强肝的显像效果,与微米级造影剂对比无明显差异.结论 纳米级的微泡造影剂大小合理,分布均匀,显像效果强,为下一步研制小型化靶向造影剂奠定了基础.     

自制纳米级超声微泡体外基本特性和肿瘤造影增强显影的实验研究

目的 探讨自制纳米级超声微泡的体内基本特性及体内造影增强显影效果.方法 机械振荡与低速离心法结合制备纳米级微泡,并对微泡粒径大小、分布、微观形态和稳定性进行研究.同时在裸鼠肝、肾及前列腺癌皮下移植瘤进行超声造影实验,与常规微米级造影剂对比造影效果.结果 所制备的微泡形态圆整,大小均一性较好,分布均匀无聚集,平均粒径(580.6±36.3)nm.该纳米级微泡能显著增强裸鼠肝肾及皮下移植瘤显影,与常规造影剂比较,不但增强强度相当,且显影时间显著延长.结论 自制纳米级超声微泡造影剂各项物理特性符合纳米级超声造影剂的要求,体内增强效果和稳定性较强,为下一步纳米级微泡在肿瘤显像和治疗中的应用提供实验依据.     

光热型纳米金-共聚物超声造影剂的制备及其在体外和大鼠乳腺癌模型显像的实验研究

目的制备外包纳米金壳内载全氟丙烷(C_3F_8)的聚乳酸羟基乙酸(PLGA)光热型超声造影剂,观察其在体内外的超声显像效果及体外的光热效能。方法通过改进的乳化溶剂挥发法制备PLGA纳米粒子,包载C_3F_8气体后,再用种子生长法在PLGA表面形成纳米金壳,制备C_3F_8@PLGA@Au纳米粒子;检测其一般特性,采用近红外激光评估其体外光热效能;超声成像仪观察体外及大鼠乳腺癌模型成像效果。结果成功制备C_3F_8@PLGA@Au纳米粒子,该粒子的平均直径为(268.2±80.5)nm,多分散指数为0.196,Zeta电位为(-22.5±5.2)m V,无明显细胞毒性;在808 nm激光辐照下,粒子有很好的溶液光热效果;体外及大鼠乳腺癌模型超声成像实验中均有增强显像。结论成功制备了光热型纳米超声造影剂,其有良好的体外光热性能和体内外超声显像效果,可为乳腺癌诊治提供新思路。     

自制脂质纳米级超声造影剂体外基本特性和造影增强的实验研究

目的 研究自制脂质纳米级超声造影剂的体外基本特性和体内造影增强效果,为今后的靶向显像和载药治疗研究提供依据.方法 (1)造影剂复溶后观察微泡形态,检测其平均粒径,计数其浓度;(2)微泡造影剂常温放置1周、1个月和3个月后复溶,观察其基本特性改变情况;(3)观察此造影剂增强正常兔肝脏显影的情况.结果 自制脂质微泡镜下观察:形态好,粒径范围400～950 nm,平均粒径650 nm,分布均匀,微泡浓度为(3.81±0.33)×109/ml.造影剂放置1周、1个月和3个月后复溶,基本特性无明显改变;造影剂复溶后24 h内微泡能保持较高浓度.体内造影结果显示能显著增强兔肝脏血管及实质显像.结论 此脂质纳米级超声造影剂性质稳定,显像效果好,有极大的开发应用价值,值得进一步研究.     

光热型纳米金-共聚物超声造影剂的制备和体内外显像

目的 制备外包纳米金壳内载全氟丙烷(C₃F₈)的聚乳酸羟基乙酸(PLGA)光热型超声造影剂,观察其在体内外的超声显像效果及体外的光热效能。方法 通过改进的乳化溶剂挥发法制备PLGA纳米粒子,包载C₃F₈气体后,再用种子生长法在PLGA表面形成纳米金壳,制备C₃F₈@PLGA@Au纳米粒子;检测其一般特性,并用近红外激光和超声成像仪评估其体外光热效能及体内外成像效果。结果 成功制备C₃F₈@PLGA@Au纳米粒子,该粒子的平均直径为268.2±80.5 nm,分散性好,无明显细胞毒性;在808 nm激光辐照下,粒子有很好的溶液光热效果;体内外超声成像实验中均有增强显像。结论 成功制备了光热型纳米超声造影剂,其有良好的体外光热性能和体内外超声显像效果,为乳腺癌疾病诊治提供了新思路。     

纳米级超声微泡造影剂的制备及其性状的初步研究

目的制备适用于超声诊断的纳米级超声微泡造影剂,并对其性状进行初步研究。方法通过低速离心分级分离法制备纳米级的脂膜超声微泡,检测微泡大小形态、表面电位、粒径、分布,测试其与抗体结合情况,体外初步测试其增强显像效果。结果微泡呈圆形,分布均匀,粒径均值为623.4nm;微泡表面电位均值1.3mV,与抗体结合情况良好,体外初步测试能明显增强显像效果。结论通过低速离心分级分离法可以制备纯度较高的纳米级超声微泡,为超声造影剂的小型化和靶向性发展提供重要的工作平台。     

一种新型高分子聚合材料微泡超声造影剂的制备与体外显影实验

目的 探索应用人工合成高分子聚合材料制备微泡超声造影剂的方法并观察其体外显影效果.方法 采用人工合成高分子聚合物乳酸/羟基乙酸共聚物（PLGA）作为成膜材料,通过双乳化法首先制备包裹水滴的PLGA微球,再通过真空冷冻干燥使微球内的水分升华,形成空隙,然后在冷冻干燥室内缓慢冲入氟烷气体,从而制备内含氟烷气体的PLGA微泡超声造影剂高聚显.将一定浓度的高聚显溶液水囊与脱汽水水囊在体外进行超声显影实验,观察其显影效果.结果 光镜和扫描电镜观察,采用该法制备的高聚显微泡造影剂呈球形,形态规则,大小均匀,表面光滑;高聚显冻干粉复溶后分散度好;激光测径仪检测其粒径分布窄,平均粒径大小与制备过程中声振仪的设置相关;体外显影效果好.结论 采用该方法制备的PLGA微泡超声造影剂高聚显具有大小均匀、显影效果好、抗压性强等特点,同时由于其外壳材料能在体内生物降解,对人体无毒副作用,因而具有广阔的应用前景.     

聚糖纳米微泡超声造影剂的制备及其超声显影效果

目的 制备聚糖纳米微泡超声造影剂,观察其基本特征及动物超声显影效果.方法 高速剪切法制备纳米微泡超声造影剂,光学显微镜和透射电镜观察纳米微泡大小、形态,马尔文粒度分析仪测粒径分布,细胞计数板计数纳米微泡,Zeta电位仪测表面电位,对比超声观察大鼠肾、心脏超声显影效果并测量声强度.结果 纳米微泡呈空心球形结构,分散均匀,形态规则,平均粒径(617±12)nm,浓度(7.2±0.6)×109/ml,Zeta电位(52.9±1.3)mV.24 h、45 d和90d三个时间点浓度、平均粒径和表面电位无明显差异(P＞0.05).用其可使小鼠肾、心脏超声显影明显增强,最大视频强度分别达(15.6±1.1)GU、(27.3±2.5)GU,可视增强持续时间(10±2)min.结论 聚糖纳米微泡稳定性和显像效果良好,有可能成为可穿过血管内皮间隙的新一代超声造影剂.     

携抗HER-2抗体PLGA高分子纳米超声造影剂的制备及其体外寻靶实验

目的以高分子聚合物聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）为成膜材料制备携抗HER-2抗体空心纳米靶向超声造影剂,并考察其体外寻靶及显像效果。方法以樟脑为致孔剂,通过改进的双乳化溶剂挥发法制备PLGA纳米超声造影剂,利用扫描电子显微镜、透射电子显微镜及激光粒度仪对其一般特性进行表征;并用碳二亚胺法将造影剂与抗HER-2抗体耦联制备携抗HER-2抗体的PLGA靶向纳米超声造影剂,用激光共聚焦扫描显微镜对其体外寻靶能力进行初步评估,考察其体外成像效果。结果 PLGA纳米超声造影剂的平均粒径为（152.00±58.08）nm,粒子呈规则球形,大小均一,分散性好。体外寻靶实验显示,携抗HER-2抗体的PLGA靶向造影剂较多牢固地聚集到乳腺癌细胞表面。体外成像实验显示,PLGA靶向纳米超声造影剂显像呈细腻均匀的点状高回声,后方回声未见明显衰减。结论本研究成功制备了携抗HER-2抗体的PLGA靶向纳米超声造影剂,其能与HER-2受体高表达的乳腺癌细胞体外特异性靶向结合,且体外显像效果较好。     

载Fe3O4全氟溴辛烷纳米粒增强超声显像的实验研究

目的 探讨载磁性纳米材料Fe3O4颗粒的全氟溴辛烷纳米粒(Fe3O4-PFOB)增强超声显像的效果.方法 将Fe3O4-PFOB纳米粒与RAW264.7 巨噬细胞孵育30 min、1 h后,分别进行光镜及体外超声检查.12只健康SD大鼠随机分为2组,分别于注射Fe3O4-PFOB及空白PFOB纳米粒前后进行大鼠肝脏超声显像,并用DFY超声图像定量分析诊断仪评价显像效果.结果 Fe3O4-PFOB纳米粒与巨噬细胞孵育1 h后可见大量Fe3O4-PFOB纳米粒被巨噬细胞吞噬,巨噬细胞吞噬纳米粒后能够增强超声回声信号.体内显像中,与空白PFOB纳米粒相比,Fe3O4-PFOB能够更好地增强大鼠肝实质超声显像效果,而且其增强显影时间延长.结论 膜壳装载Fe3O4颗粒的Fe3O4-PFOB纳米粒能够有效增强超声显像效果,有望实现一种造影剂多种模态显像.

Abstract：

Objective To study the feasibility of the Fe3O4-loaded lipid perfluorooctylbromide nanoparticles (Fe3O4-PFOB) for enhanced ultrasound imaging.Methods The Fe3O4-PFOB nanoparticles,incubated with RAW264.7 macrophage cells,were monitored by microscope and ultrasound.Twelve SD rats were randomized into two groups,Fe3O4-PFOB group and PFOB group.Ultrasound imaging of rats' liver was performed before and after intravenous injection of the contrast agents.The liver echogenic intensity was quantified by DFY ultrasound quantified system analysis.Results Incubation of the Fe3O4-PFOB nanoparticles with macrophages resulted in the uptake of Fe3O4-PFOB by macrophages.Macrophages loaded with Fe3O4-PFOB exhibited enhanced echogenicity in vitro.In in vivo imaging,Fe3O4-PFOB produced better and prolonged ultrasound enhancement of rats' liver compared to PFOB nanoparticles.Conclusions Fe3O4-PFOB nanoparticles could enhance ultrasound imaging and may potentially serve as a multimodal probe for ultrasound,CT and MR imaging.     

对比液态氟碳脂质纳米粒与全氟丙烷脂质微泡体外显影及耐声压性

目的 与全氟丙烷（C₃F₈）脂质微泡造影剂比较,分析自制液态氟碳（PFOB）脂质纳米粒体外显影及耐声压性的优劣。方法 分别制备生物素化PFOB脂质纳米粒及生物素化C₃F₈脂质微泡,评估其稳定性,并观察其加入亲和素前后的体外显影效果。对2种造影剂在低声压（MI=0.28）及高声压（MI=0.56）环境下进行超声辐照,于辐照前及辐照10、20、30 s后观察显影情况及其差异。结果 2种造影剂加入亲和素后均发生聚集现象,粒径均较加入亲和素前明显增大（P均<0.05）;且加入亲和素前（t=16.225,P<0.001）、后2种造影剂间粒径差异均有统计学意义（t=-5.046,P<0.001）。稳定性观察期间PFOB脂质微粒内浓度无明显改变,而C₃F₈脂质微泡随放置时间延长浓度呈减低趋势。加入亲和素后,PFOB脂质纳米粒回声明显增强;C₃F₈脂质微泡加入亲和素前后显影效果均较好。低声压（MI=0.28）及高声压（MI=0.56）环境下,PFOB脂质纳米粒造影剂显影强度无明显改变,而C₃F₈脂质微泡显影强度随辐照时间延长呈减低趋势。结论 相较于C₃F₈脂质微泡,PFOB纳米脂质纳米粒造影剂粒径小、耐声压性好,更符合靶向超声造影剂的要求。     

构建新型液态氟碳壳聚糖纳米超声造影微粒

目的 构建一种新型天然高分子聚合物纳米超声造影微粒,表征其理化特征、体外显像效果及其对肿瘤细胞的结合能力和毒性。 方法 采用超声乳化法制备包裹液态氟碳PFOB的壳聚糖(CTS)纳米粒和FITC标记的壳聚糖纳米粒(FITC-CTS),表征其表面形态、粒径、Zeta电位和稳定性;评价纳米粒的体外超声显像效果,以激光共聚焦观察FITC-CTS与细胞的结合作用,流式细胞仪检测FITC-CTS对细胞的黏附比例。 结果 制备的纳米粒形态圆整,CTS纳米粒平均粒径为(248.52±7.96)nm,Zeta电位为+(29.91±0.64)mV,FITC-CTS纳米粒平均粒径为(244.83±2.72)nm,Zeta电位为+(22.21±0.53)mV。纳米粒性质稳定,在体外能增强超声显影,激光共聚焦观察到纳米粒聚集在细胞膜周围,流式细胞仪测得纳米粒对细胞的黏附比例为(45.15±8.35)%。 结论 构建的CTS纳米粒性质稳定,体外能与肿瘤细胞MCF-7紧密结合,增强超声回声。     

新型液态氟碳纳米脂质微球超声造影剂的制备及显像实验研究

目的 制备液态氟碳(perfluorooctylbromide,PFOB)纳米脂质微球并探讨其对大鼠肝脾实质的超声显像效果、安全性及相关机制.方法 采用高压均质技术制备PFOB纳米脂质微球,用透射电镜观察微球形态、分布,用激光粒度和电位分析仪测定微球粒径及表面电位.经大鼠尾静脉注射微球后行超声显像,同时监测大鼠生命体征变化.肝脾实质为感兴趣区,应用DFY超声图像定量分析系统评价造影效果,建立时间一强度曲线.大鼠肝脾冰冻切片探讨微球增强肝脾超声显像的相关机制.结果 PFOB微球为实心球形结构,粒径极小且分布均匀;造影后约10 S肝实质回声增强,达峰时间约在注射微球后3～4min,持续增强约1 h;脾实质较肝实质增强时间更长,效果更显著,第2 d仍持续增强;实验过程中大鼠生命体征未见明显变化;微球在肝脾组织内大量分布聚集可能是其增强肝脾显影的机制之一.结论 PFOB微球是一种安全有效的新型超声造影剂,有潜在的开发应用价值.     

纳米级超声分子探针的制备及其体外寻靶实验

目的制备一种新型纳米级超声分子探针,即含硫酸脑苷脂的液态氟碳纳米粒,并观察其体外寻靶能力。方法采用薄膜一超声法将硫酸脑苷脂溶入液态氟碳纳米粒的成膜材料中,制备含硫酸脑苷脂的液态氟碳纳米粒,并检测其一般性质,通过光镜和激光共聚焦显微镜观察该分子探针对人肝癌细胞HepG2的体外寻靶能力,与不含硫酸脑苷脂的普通液态氟碳纳米粒相对照。结果含硫酸脑苷脂的液态氟碳纳米粒的大小及分布与普通液态氟碳纳米粒相似。体外寻靶实验显示,此分子探针可以较多地聚集到肝癌细胞周边,并向细胞内聚集,而对照组普通液态氟碳纳米粒未见特异性结合。结论成功制备出新型纳米级超声分子探针,其在体外具有较强的寻靶能力,有望成为一种新型的多功能分子探针。     

超声介导DNA门控空心介孔二氧化硅纳米粒的药物释放

目的制备一种DNA门控的空心介孔二氧化硅纳米粒(HMSNs-DNA),观察其体外超声显像及高强度聚焦超声(HIFU)刺激触发药物释放效果。方法采用碳二亚胺法连接HMSNs和DNA制备HMSNs-DNA,检测其理化性质。体外观察HMSNs-DNA的超声成像效果。将阿霉素作为模型药物载于HMSNs-DNA纳米粒,体外运用HIFU辐照,观察其药物释放效果。结果制备的DNA门控的空心介孔二氧化硅纳米粒呈球形;随着HMSNs-DNA纳米粒浓度的增大,其超声信号强度逐渐增强;经HIFU辐照后阿霉素释放明显增强。结论成功制备DNA门控的介孔二氧化硅纳米粒,具有良好超声成像效果,并可响应HIFU刺激促发药物定位释放。     

液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂用于增强正常大鼠CT显像实验研究

目的 探讨液态氟碳(perfluorooctylbromide,PFOB)纳米脂质微球超声对比剂作为CT对比剂对正常大鼠各脏器的增强显像效果.方法 采用高压均质技术制备PFOB微球,用光镜观察微球形态、分布,用激光粒度和电位分析仪测定微球大小.分别于注入对比剂前后不同时间点对大鼠进行胸腹部CT扫描,同时监测大鼠生命体征变化.肝脾实质为感兴趣区,测量感兴趣区造影前后CT值,绘制时间-密度曲线(time-density curve,TDC).结果 PFOB微球粒径极小,分布均匀.体内造影表明,作为超声对比剂的PFOB微球也能有效增强大鼠肝、脾及脉管系统的影像密度,造影前后感兴趣区CT值差异有统计学意义(P＜0.05).脾实质较肝实质强化效果更显著,持续显影时间长达8 d.实验过程中大鼠生命体征未见明显变化.结论 PFOB微球超声对比剂可同时用于CT显像,这一多功能的对比剂将具备良好的应用前景.