尼可地尔对体外培养乳鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

目的:为了研究尼可地尔(nicorandil,Nic)抗心律失常的作用机制.方法:体外培养乳鼠心肌细胞并观察Nic对培养心肌细胞自发性搏动频率及动作电位的影响.结果:Nic能使体外培养乳鼠心肌细胞自发性搏动频率下降.Nic 60 μmol L~(-1)对CaCl_21 mmol L~(-1)及异丙肾上腺素2 μmol L~(-1)增加的细胞搏动率有抑制作用.Nic 32和160 μmol L~(-1)能使动作电位幅度(APA)及最大上升速率(V_(max))明显下降,使动作电位时程(APD_(50),APD_(90))缩短,搏动周期(SCL)显著延长.结论:Nic的抗心律失常机制与其对心肌细胞的直接作用有关.     

索他洛尔对培养乳鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

观察了索他洛尔对培养乳鼠心肌细胞的作用，索他洛尔３－３００μｍｏｌＬ－１引起心肌细胞簇搏动频率浓度依赖性减小，３和３０μｍｏｌＬ－１能部分对抗乌头碱的正性频率作用，３０μｍｏｌＬ－１也能部分对抗毒毛花苷Ｇ的正性频率作用，索他洛尔３和３０μｍｏｌＬ－１延长５０％和９０％动作电位时程和搏动周期长度．结果提示，索他洛尔的抗心律失常作用与抑制Ｋ＋外流有关，也可能抑制Ｎａ＋内流．     

索他洛尔对培养乳鼠心肌细胞的自发性搏动及动作电位的…

观察了索他洛尔对培养乳鼠心肌细胞的作用索他洛尔３－３００μｍｏｌ．Ｌ＾－１引起民细胞簇搏动频率浓度依赖性减小，３和３０μｍｏｌ．Ｌ＾－１能部分对抗乌头碱的正性频率作用，３０μｍｏｌ．Ｌ＾－１能部分对抗乌头碱的正性频率作用，３０μｍｏｌ．Ｌ＾－１也能部分对抗毒毛花苷Ｇ的正性频率作用，索他洛尔３和３０μｍｏｌ．Ｌ＾－１延长５０％和９０％动作电位时程和搏劝周期长度。     

乙胺噻嗪对培养乳鼠心肌细胞电生理特性的影响

目的　探讨乙胺噻嗪抗心律失常作用是否与抑制慢反应心肌细胞有关。方法　在体外培养大白鼠乳鼠心室肌细胞 ,采用显微镜直接观察和细胞内动作电位记录方法 ,研究乙胺噻嗪对这种慢反应心肌细胞的自律性、传导性和动作电位时程等电生理参数的影响。结果　 0 1～ 5 0 μmol·L-1剂量依赖性抑制细胞自发性搏动频率 ,最大抑制率为 5 2 % ,半效抑制浓度为 0 17μmol·L-1;乙胺噻嗪作用心肌细胞后15～ 30min ,对搏动频率的抑制作用开始达稳态 ;2 5 μmol·L-1乙胺噻嗪负性频率作用达稳态时 ,部分对抗了 2mmol·L-1氯化钙和 1μmol·L-1异丙肾上腺素的正性频率作用 ,完全对抗了 0 2mg·L-1乌头碱的正性频率作用 ;0 3、0 9、2 5μmol·L-1乙胺噻嗪剂量依赖性抑制细胞动作电位参数APA、OS、Vmax、SP4和MDP ,剂量依赖性延长动作电位周期长度SCL ,0 9、2 5 μmol·L-1略延长APD90 。结论　乙胺噻嗪对慢反应心肌细胞的自律性和传导有明显抑制作用、略延长动作电位时程 ,乙胺噻嗪对慢反应心肌细胞自律性的抑制可能与抑制Ca2 + 和Na+ ,特别是Na+ 的作用有关     

基于实时细胞分析技术的乌头碱致心律失常体外评价技术研究

目的以乌头碱为工具药,建立基于实时细胞分析(real-time cell analysis, RTCA Cardio)系统的体外心律失常检测技术,为抗心律失常药物的研发提供可靠方法。方法利用八导生理记录仪从整体动物水平检测乌头碱对实验大鼠心律的影响;体外培养心肌细胞,首先利用RTCA方法考察心肌细胞的接种密度,利用RTCA Cardio系统监测乌头碱对心肌细胞搏动的影响,分析细胞的CI值、细胞搏动频率、振幅、不规则性节律等。结果八导生理记录仪检测50 mg·g~(-1)乌头碱对整体动物的影响结果发现乌头碱可诱发室速、室颤、RR间期缩短以及心率增加等心律失常的表现;RTCA Cardio系统显示2～8μmol·L~(-1)乌头碱可呈剂量依赖性的导致心肌细胞搏动频率增加、搏动幅度降低、搏动状态异常等心律失常现象。结论 RTCA Cardio系统可以快速、敏感、准确检测乌头碱诱导的心肌细胞心律失常现象,为抗心律失常药物的研发提供了方法学参考。     

雷尼替丁对体外培养乳鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

本实验以培养大白鼠乳鼠心肌细胞为模型,观察了雷尼替丁对培养心肌细胞自发性搏动频率及动作电位的影响.结果表明:雷尼替丁1～100μmol·L~(-1)对正常心肌细胞搏动频率影响不大,但100μmol·L~(-1)可以阻止组胺10μmol·L~(-1)引起的心肌细胞搏动频率的增快,而对异丙肾上腺素2μmol·L~(-1)引起的心肌细胞搏动频率无明显抑制作用.组胺10μmol·L~(-1)可以使心肌细胞动作电位的APA,V_(max)及OS明显增高,APD_(50)和APD_(90)明显延长,SCL明显缩短.雷尼替丁100μmol·L~(-1)可以抑制此反应.以上结果,说明雷尼替丁对组胺增高所致的心律失常可能有防治作用.     

基于实时细胞分析系统的速效救心丸抗心律失常作用研究

目的 利用实时细胞分析（RTCA）Cardio系统,通过体外细胞实验及整体动物实验评价速效救心丸抗心律失常作用。方法 培养原代大鼠乳鼠心肌细胞,接种于E-Plate Cardio 96,分析3 600/孔、20 000/孔以及90 000/孔接种浓度心肌细胞的细胞指数（CI）和搏动图形;MTT法检测速效救心丸（10、20、40、80、160 μg/mL）对原代心肌细胞活力的影响;考察速效救心丸（160 μg/mL）对乌头碱（8 μmol/L）诱发心律失常的心肌细胞搏动频率、搏动幅度的影响;舌下iv乌头碱50 μg/kg制备大鼠心律失常模型,利用八导生理记录仪观察速效救心丸（54、270 mg/kg）对Ⅱ导联心电图的影响。结果 20 000/孔为最佳接种浓度,CI值在观察时间内成对数生长,细胞形成同步搏动,波形正常且持续时间长;在10～160μg/mL浓度范围内,速效救心丸对心肌细胞活力均没有明显影响。RTCA Cardio系统检测结果显示,与模型组比较,速效救心丸能显著降低心肌细胞搏动速率（P<0.01）、显著增加心肌细胞的搏动幅度（P<0.01）。动物实验发现,速效救心丸能有效对抗乌头碱诱导的心律失常、改善乌头碱对实验动物RR间期的抑制作用和对心率的促进作用、降低乌头碱诱导的室颤发生率（P<0.01、0.001）。结论 RTCA Cardio系统能实现对心肌细胞的实时监测,可以检测心肌细胞的搏动情况;速效救心丸能有效对抗乌头碱诱导的心律失常。     

尼可地尔对体外培养乳鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

为了研究研究尼可地尔（ｎｉｃｏｒａｎｄｉｌ，Ｎｉｃ）抗心律失常的作用机制。体外培养乳鼠心肌细胞并观察Ｎｉｃ对培养心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响。Ｎｉｃ能使体外培养乳鼠心肌细胞自发性搏动下降。Ｎｉｃ６０μｍｏｌＬ＾－１对ＣａＣｌ２１ｍｍｏｌＬ＾－１及异丙肾上腺素２μｍｏｌＬ＾－１增加的细胞搏动率有抑制作用。     

血管紧张素Ⅱ及牛磺酸对体外培养乳鼠肥大心肌细胞心律失常发生的作用

在培养72h的乳鼠心肌细胞,血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AgnⅡ)1,10,100和1000nmol·L^-1时,可浓度依赖性地增加细胞搏动频率;而牛磺酸5,10和20mmol·L^-1不影响心肌细胞搏动频率,但能浓度依赖性地拮抗AngⅡ100nmol·L^-1加快心肌细胞搏动频率的作用。AngⅡ100nmol·L^-1连续作用7d引起的培养乳鼠肥大心肌细胞搏动频率加快,动作电位APA升高,APD₅₀和APD90延长,SCL缩短;哇巴因50nmol·L^-1诱发的心肌细胞搏动节律失常发生率高于常规培养组。牛磺酸20mmol·L^-1可抑制AngⅡ引起的上述改变,并降低哇巴因诱发的心律失常发生率。     

血管紧张素Ⅱ及牛磺酸对体外培养乳鼠肥大心肌细胞心律失常发生的作用

在培养７２ｈ的乳鼠心肌细胞，血管紧张素Ⅱ（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡ，ＡｇｎⅡ）１，１０，１００和１０００ｎｍｏｌ·Ｌ－１时，可浓度依赖性地增加细胞搏动频率；而牛磺酸５，１０和２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１不影响心肌细胞搏动频率，但能浓度依赖性地拮抗ＡｎｇⅡ１００ｎｍｏｌ·Ｌ－１加快心肌细胞搏动频率的作用。ＡｎｇⅡ１００ｎｍｏｌ·Ｌ－１连续作用７ｄ引起的培养乳鼠肥大心肌细胞搏动频率加快，动作电位ＡＰＡ升高，ＡＰＤ５０和ＡＰＤ９０延长，ＳＣＬ缩短；哇巴因５０ｎｍｏｌ·Ｌ－１诱发的心肌细胞搏动节律失常发生率高于常规培养组。牛磺酸２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１可抑制ＡｎｇⅡ引起的上述改变，并降低哇巴因诱发的心律失常发生率。     

吗啡加快体外培养乳鼠心肌细胞的搏动频率

10~(-8)mol/L、5.5×10~(-8)mol/L、10~(-7)mol/L的硫酸吗啡使体外培养的乳鼠心肌细胞搏动频率分别增加9%、32%和81%。具有量效关系。纳络酮(10~(-5)mol/L)能完全取消吗啡的此种作用。而普萘洛尔(10~(-5)mol/L)却不影响吗啡的作用。这一结果提示吗啡可直接加快心肌细胞的搏动频率,可能是通过激动吗啡受体而作用的     

丹皮酚对体外培养乳鼠心肌细胞~(45)Ca摄取的影响

通过测定体外培养乳鼠心肌细胞~(45)Ca摄取及其搏动频率的变化,观察丹皮酚对心肌细胞Ca~(2+)内流的影响。结果50～400μg/ml的丹皮酚,能显著降低心肌细胞搏动频率,对心肌细胞快相(5min)和慢相(120min)~(45)Ca摄取均有显著抑制作用,且400μg/ml丹皮酚与10μmol/L的维拉帕米的作用相似。提示丹皮酚能抑制心肌细胞的Ca~(2+)内流,可能与阻滞慢钙通道有关。     

INCREASED Na+/H+ EXCHANGE ACTIVITY IN VASCULAR SMOOTH MUSCLE CELLS OF SPONTANEOUSLY HYPERTENSIVE RATS AND POSSIBLE INVOLVEMENT OF PROTEIN KINASE C

1. Na+ influx into cultured vascular smooth muscle cells (VSMC) obtained from spontaneously hypertensive rats (SHR) and from Wistar-Kyoto rats (WKY) was measured. Na+ influx via the Na+/H+ exchange system was measured as the rate of 22Na+ influx into cultured VSMC sensitive to ethylisopropylamiloride (EIPA), a specific inhibitor of the exchange system. 2. The total 22Na+ influx rate in SHR was significantly higher than in WKY (6.08 +/- 0.16 vs 4.13 +/- 0.09 nmol/min per mg protein; P less than 0.001; n = 14). The EIPA (1 X 10(-4) mol/L)-sensitive 22Na+ influx rate in SHR was significantly higher than that in WKY (4.32 +/- 0.27 vs 2.17 +/- 0.14 nmol/min per mg protein; P less than 0.001; n = 14). There was no difference in EIPA-insensitive 22Na+ influx between SHR and WKY. The EIPA-sensitive 22Na+ influx rate into VSMC was significantly decreased in SHR but not in WKY by the addition of 1 X 10(-4) mol/L 1-(5-isoquinoline-sulfonyl)-methylpiperazine (H-7), an inhibitor of protein kinase C (PK-C). 3. These results suggest that the increase in Na+ influx in SHR may be due to elevation of the Na+/H+ exchange activity, and possible involvement of PK-C in the increased Na+/H+ exchange activity in VSMC from SHR.     

甲状旁腺素对心肌细胞Ca~(2+)跨膜转运的影响

应用放射性同位素~(45)Ca示踪技术观察了牛甲状旁腺素_(1-34)活性片段(bPTH_(1-34))对培养乳鼠心肌细胞钙离子(Ca~(2+))跨膜转运的影响.并且镜检了细胞的搏动频率和采用蛋白质竞争结合法检测了胞内cAMP的含量。结果表明:bPTH_(1-34)(1×10~(-7)mol·L~(-1))显著增加静息细胞的搏动频率.明显增高细胞cAMP的含量.并且显著增加静息、高K~+去极化及NA受体兴奋状态细胞的外Ca~(2+)内流.同时抑制胞内Ca~(2+)外排。提示其强心与细胞内Ca~(2+)升高的机理之一.可能与细胞内cAMP升高有关。     

再灌注早期给予5-N,N二甲基氨氯吡咪对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制研究

目的探讨再灌注早期给予20μmol/L5-N,N二甲基氨氯吡咪(DMA)减轻心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法采用Langendorff法建立离体大鼠心肌缺血再灌注模型,全心缺血45min后,再灌注30min,在再灌注初始5min期间给予药物干预[空白对照;20μmol/LDMA组;低浓度(0.5mmol/L)氨氯吡咪组;高浓度(2.0mmol/L)氨氯吡咪组],其中20μmol/LDMA可以抑制Na+/H+交换,激动Na+/Ca2+交换;低浓度氨氯吡咪主要抑制Na+/H+交换;高浓度氨氯吡咪同时抑制Na+/H+交换和Na+/Ca2+交换。观察不同的药物对离体灌流心脏再灌注期间血流动力学指标(LVSP-LVDP,+dp/dtmax,-dp/dtmax)的影响,同时观察再灌注期间冠状动脉流出液中肌酸激酶(CK)的活性变化。结果与对照组相比,3个药物干预组对再灌后各项血流动力学指标的恢复均有明显的促进作用;流出液中CK的活性较对照组也明显下降。但是再灌注30min后3个给药组血流动力学指标以及流出液中CK的活性差异无统计学意义。结论20μmol/LDMA可明显减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制主要是通过抑制Na+/H+交换来发挥其作用,与它对Na+/Ca2+交换的激动作用关系不大。     

ACTIONS OF THE SLOW CHANNEL ACTIVATOR, BAY-K-8644, ON THE ELECTRICAL ACTIVITY OF 3-DAY-OLD EMBRYONIC CHICK HEARTS

In order to assess the effects of Bay-K-8644 on electrical activities of young embryonic chick hearts in which the rising phase of the action potential (AP) depends on tetrodotoxin-insensitive slow Na+ currents, slow AP were recorded in spontaneously beating 3-day-old embryonic chick hearts. Bay-K-8644(10(-6) mol/l) caused increases in the maximum rate of rise, amplitude, and duration of the slow AP; there was a slow increase in the spontaneous firing rate. Thus, Bay-K-8644 stimulates Na+ influx through TTX-insensitive slow channels.     

尼莫地平对离体豚鼠左心房的抑制作用及其机理探讨

尼莫地平(50μmol/L)明显减低豚鼠左心室收缩幅度,其强度与戊脉安(25μmol/L)相当;明显抑制正阶梯现象,但不象戊脉安那样使其翻转成负阶梯现象;明显抑制静息后增强效应;逆转或预防哇巴因诱发的心律失常。以上结果提示尼莫地平既能减少胞外Ca~(2+)通过Ca~(2+)通道内流,又能减少胞内贮Ca~(2+)释放。     

褪黑素对谷氨酸所致大鼠神经细胞Ca~(2+)内流的影响

目的 :研究褪黑素对谷氨酸引起的神经细胞Ca2 +内流的抑制作用。方法 :用Ca2 +敏感荧光指示剂Fura -2/AM负载大鼠脑细胞 ,测定神经细胞内游离Ca2 +浓度。结果 :谷氨酸500μmol/L可促进Ca2 +内流 ,显著增加细胞内游离Ca2 +浓度 (P<0. 01) ;应用褪黑素10 -5mol/L后可显著抑制Ca2 +内流 ,降低细胞内游离Ca2 +浓度 (P<0. 01)。结论 :褪黑素可通过抑制谷氨酸引起的Ca2 +内流保护神经细胞。     

顺铂对结直肠癌细胞增殖及侵袭能力的影响

【摘要】目的 探讨顺铂对人结直肠癌细胞SW480增殖及侵袭力的影响。方法 以SW480细胞为研究对象,设定未经处理的SW480细胞为对照组,给予不同浓度顺铂进行不同时间干预,应用MTT法、Transwell侵袭小室、定磷法检测SW480细胞的增殖、侵袭力及Na + -K + -ATP酶活性。结果 生理浓度顺铂（70μmol/L）在48h即可抑制SW480 细胞的增殖,与72和96h相比抑制率差异无统计学意义;70μmol/L顺铂处理48h时,即可降低穿越Matrigel膜基质的细胞数;分别采用17.5、35、70和140µmol/L4个梯度浓度的顺铂作用于SW480细胞48h后,35、70和140µmol/L组细胞中Na + -K + -ATP酶活性均显著升高,且顺铂浓度达70µmol/L时Na + -K + -ATP酶即可达到较高活性。结论 Na + - K + -ATP酶活性的降低可能导致对结直肠癌细胞增殖和侵袭能力调节作用减弱,可能与结直肠癌细胞SW480耐顺铂有关。