基质细胞衍生因子-1/CXCR4轴介导非霍奇金淋巴瘤肿瘤浸润的实验研究

目的探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）及其受体CXCR4在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达及其与NHL肿瘤浸润的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测淋巴结和骨髓基质细胞中SDF-1α的表达,采用流式细胞术检测淋巴结和骨髓中淋巴瘤细胞CXCR4受体的表达,并采用Tranawell微孔隔离室实验检测淋巴瘤细胞在体外向重组人SDF-1α（rhSDF-1α）的趋化反应。结果侵犯骨髓的NHL患者骨髓淋巴瘤细胞和未侵犯骨髓的NHL患者骨髓单个核细胞表面CXCR4受体的表达均明显高于正常骨髓（84．10±12．12,72．76±8．73和33．20±7．73,P〈0．01）,而NHL患者来源于淋巴结的淋巴瘤细胞CXCR4的表达亦显著高于反应性增生淋巴结炎患者（101．04±21．89V834．81±9．90,P〈0．01）。此外,被淋巴瘤侵犯的骨髓基质细胞高表达SDF-1α,而未被淋巴瘤侵犯的骨髓及正常骨髓基质细胞表达SDF-1α低下,二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;且NHL患者淋巴结基质细胞SDF-la的表达高于反应性增生淋巴结炎患者（P〈0．01）。趋化实验发现三种不同来源的NHL患者淋巴结和骨髓的单个核细胞均能向rhSDF-1α发生趋化反应,且抗CXCR4单抗可明显抑制上述细胞的迁移。结论SDF-1／CXCR4生物学轴是介导NHL肿瘤侵袭的重要机制,CXCR4在淋巴瘤细胞表面以及SDF-1在淋巴瘤转移部位的同时高表达与NHL瘤细胞的转移和浸润密切相关。     

基质细胞衍生因子1及其受体趋化因子受体4生物学轴与头颈肿瘤

许多恶性肿瘤细胞均能分泌趋化因子,其与肿瘤细胞相互作用。关于趋化因子的研究已成为肿瘤研究的热点领域之一。基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXC趋化因子受体4(CXCR4)广泛参与肿瘤的发生、增殖、侵袭、转移等过程,并可能与肿瘤的治疗、TNM分期及预后相关。但SDF-1/CXCR4生物学轴与头颈肿瘤的关系尤其是作用和机制的研究较少。近年来,SDF-1/CXCR4生物学轴与头颈肿瘤的研究逐渐成为热门,为头颈肿瘤的诊疗指出新思路。     

基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4对造血干细胞调控的研究进展

造血干细胞（hematopoietic stemccells，HSCs）通常来源于骨髓，存在于外周血及脐带血，具有较强的自我更新和分化发育能力，可以产生各种类型的血细胞。以往的基础研究和临床实践主要是将HSCs移植作为治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的有效方法。现有资料表明，HSCs移植不仅可以被认为是重塑患者造血功能与免疫功能的治疗措施，还可以成为一项全新的与组织修复相关的生物学疗法。     

基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体CXCR4的研究新进展

基质细胞衍生因子-1（Stromal cellderived factor-1,SDF-1）是新近发现的一种细胞因子,属CXC（Cys-X-Cys）类趋化蛋白,系统命名CXCL12（CXC chemokine ligand-12）,是已知唯一能与受体CXCR4结合并激活的天然趋化因子.SDF-1和CXCR4广泛地表达于多种细胞和组织中,包括免疫细胞、脑、心脏、肾、肝、肺和脾,在免疫系统、循环系统及中枢神经系统的发育中起着至关重要的作用.同时与HⅣ（Human immunodeficiency virus）感染、炎症反应、造血细胞的调控作用、肿瘤细胞的迁移等密切相关.本文就SDF-1及其受体CXCR4的研究进展作一综述.     

基质细胞衍生因子-1与趋化因子受体4在大鼠角膜移植排斥反应中的作用

目的探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）与基质细胞衍生因子-1（CXCR4）在大鼠角膜组织中的表达及其在角膜移植术后 免疫排斥反应中的作用。方法取15只Wistar大鼠作为正常对照组;取22只Wistar大鼠行自体角膜移植术作为自体组;取22只 SD大鼠与44只Wistar大鼠,以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体行穿透性角膜移植,术后随机抽取22只归入典必殊组,术眼滴 典必殊眼液（每日2次）,剩余22只归入异体组,术眼滴同等量生理盐水,共一个月。参照Larkin法对各组角膜植片进行临床评 估;分别于术后第5、9天取术眼角膜植片,行组织病理学观察、免疫组化检查、实时荧光定量PCR检测。结果自体组不发生排 斥反应,典必殊组角膜存活时间为24±0.32 d,远高于异体组10±0.36 d（P<0.001）。组织病理学检查发现异体组角膜有大量炎 性细胞浸润以及新生血管形成。SDF-1和CXCR4 mRNA在异体组角膜组织中表达水平明显升高（第5天P<0.001,第9天P< 0.01）,典必殊组较异体组明显降低。免疫组化检查发现SDF-1/CXCR4主要表达在角膜植片的上皮层与基质层,异体组角膜组 织SDF-1和CXCR4含量明显升高。结论SDF-1/CXCR4可能参与了大鼠角膜移植术后早期的排斥反应,其机制可能为SDF-1 特异性诱导CXCR4+细胞成熟和朝着排斥部位趋化,并促进角膜新生血管形成。     

删除C末端结构域的基质细胞衍生因子-1重组内质网定位片段的真核表达载体构建及其活性作用

目的：构建人基质细胞衍生因子（SDF—1）C末端a螺旋结构域缺失及嵌合内质网定位片段的SDF-1α／54／KDEL重组真核表达载体,并考察其对Molt-4细胞的影响。方法：用PCR法扩增SDF-1α／54并将其亚克隆至真核表达质粒pcDNA3．1构建成真核重组表达载体pcDNA3．1／SDF1a／54／KDEI。。脂质体法转染Cos-7细胞后用Western blot检测SDF-1α／54／KDEL的表达。电穿孔法瞬时转染Molt-4细胞,并用流式细胞仪检测CXCR4含量以及其对细胞趋化性的影响。结果：经DNA测序验证目的片段插入方向和碱基组成顺序均准确无误,Western blot证实融合蛋白能在Cos-7细胞表达。SDF-1α／54／KDEL可以显著降低胞膜表面CXCR4表达量并抑制细胞的趋化作用。结论：SDF-1α／54／KDEI,可从胞内抑制Molt-4细胞CXCR4的表达,C末端α螺旋结构域的缺失并不影响其抑制作用,推测其是决定细胞趋化作用的主要结构域。     

雷公藤内酯醇对AD细胞模型核因子κB表达的影响

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种以记忆减退、认知障碍、人格改变为临床特征的中老年中枢神经系统退变性疾病,发病机制至今尚未完全阐明。β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)沉积激活胶质细胞引发脑内炎症反应在AD的发生发展中扮演着重要角     

基质细胞衍生因子-1在视网膜培养中促进节细胞存活的研究

目的:研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在视网膜培养中对节细胞存活的影响。方法:取大鼠眼球并分离视网膜,把视网膜平铺放入培养板中培养7 d;经多聚甲醛固定后用神经细胞特异性抗体TUJ-1标记视网膜节细胞(RGCs),在荧光显微镜下观察TUJ-1阳性RGCs并计数。结果:随着浓度的增加,SDF-1可显著促进视网膜培养中节细胞的存活,阻断剂AMD3100可明显降低SDF-1的作用效果。结论:SDF-1具有促进RGCs存活的作用。     

非霍奇金淋巴瘤患者血清sICAM-1水平变化及其临床意义

非霍奇金淋巴瘤是一种常见的恶性血液系统肿瘤,一些学者证实可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)在疾病的发生、发展过程中起着极其重要的作用。sICAM-1属于免疫球蛋白超家族,主要由     

骨髓基质细胞衍生因子1及其受体在骨髓增生异常综合征患者中的表达

目的 探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)与其受体趋化因子受体CXCR4在骨髓增生异常综合征(MDS)发病中的可能作用,为MDS的治疗寻找有意义的靶点.方法 收集2006年10月至2010年6月59例MDS病例,根据国际预后积分系统(IPSS)分为低危和高危两组,分别为33例和26例,以10份正常的骨髓标本作为对照.采集骨髓标本,检测骨髓血浆中SDF-1的含量、CD34+细胞CXCR4的表达率、CD34+细胞的凋亡率及血管内皮生长因子(VEGF)在骨髓血浆中的表达.结果 SDF-1在低危组和高危组患者骨髓血浆中的含量[(2301±413)、(1173 ±501)ng/L]显著高于对照组[(689±190)ng/L,P＜0.05],低危组显著高于高危组(P＜0.05).CD34+细胞CXCR4的表达在高危组(68.1％±18.8％)显著高于低危组(21.0％±9.7％)和对照组(19.4％±5.3％)(P＜0.05),在后两组的表达率差异无统计学意义(P＞0.05).CD34+细胞的凋亡率在低危组、高危组和对照组分别为54.8％±10.2％,24.3％±7.9％,l8.5％±8.7％,前组显著高于后两组(P＜0.05).骨髓血浆中VEGF的含量在低危组、高危组、对照组分别为(286±97)、(407±168)、(157±46)ng/L,差异有统计学意义(P＜0.05).相关分析显示:低危组CD34+细胞的凋亡率与骨髓血浆SDF-1的含量呈正相关(r =0.805,P＜0.05);高危组血浆VEGF的含量与CD34+细胞CXCR4的表达呈正相关(r=0.683,P＜0.05).结论 SDF-1/CXCR4在MDS中存在异常表达,且与骨髓细胞的凋亡和血管新成具有相关性,针对该生物轴的干预可为该病的治疗提供新的靶点.     

趋化因子基质细胞衍生因子-1及其受体对胃癌腹膜转移潜能的影响

目的 探讨趋化因子基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及趋化因子受体4(CXCR4)对胃癌腹膜转移潜能的影响.方法 采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌细胞NUGC4及间皮细胞HMrSV中CXCR4和SDF-1 mRNA的表达.采用MTT实验检测NUGC4细胞增殖能力的变化,采用间皮细胞黏附实验及间皮细胞迁移实验评价体外培养的NUGC4细胞与间皮细胞发生黏附的能力及其穿越间皮细胞发生迁移的能力.通过建立裸鼠胃癌腹膜种植瘤模型,评价NUGCA细胞腹膜肿瘤生成能力及荷瘤裸鼠生存时间的变化.结果 NUGC4细胞表达较高强度的CXCR4mRNA,而间皮细胞表达高强度的SDF-1 mRNA.抗CXCR4单抗对NUGC4细胞增殖具有显著的抑制作用(P＜0.05);SDF-1可促进NUGC4细胞与间皮细胞黏附及穿越间皮细胞发生迁移,抗CXCR4单抗处理可显著抑制NUGC4细胞的黏附及迁移能力(P＜0.05).体内实验结果显示,CXCR4拮抗剂AMD3100治疗组裸鼠的平均生存时间显著长于对照组[(43.8±2.8)vs(28.2±2.5)d,P＜0.01],瘤结节数目显著低于对照组[(64.6±8.2)vs(103±12.4),P＜0.01].结论 趋化因子SDF-1及其受体CXCR4参与胃癌腹膜转移过程,与肿瘤细胞增殖、肿瘤细胞-问皮细胞问的黏附和肿瘤细胞迁移等步骤密切相关;干扰SDF-1/CXCR4生物学轴可以作为胃癌腹膜转移的潜在治疗策略.     

子宫内膜癌腺体及间质细胞中基质细胞衍生因子1及其受体CXCR4的表达

目的:检测基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXCR4 mRNA和蛋白在子宫内膜癌细胞系及组织中的表达.方法:应用免疫组织化学和RT-PCR技术,检测子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞,44例子宫内膜癌组织,26例非典型增生子宫内膜、单纯增生子宫内膜和正常子宫内膜组织中SDF-1和CXCR4 mRNA和蛋白表达水平.结果:HEC-1A和Ishikawa细胞均表达CXCR4 mRNA;Ishikawa细胞中SDF-1 mRNA弱表达,而HEC-1A细胞中SDF-1 mRNA未见表达.CXCR4和SDF-1在正常和良性病变的子宫内膜组织腺体细胞中的阳性表达率为100%,在子宫内膜癌组织的腺体细胞中的阳性表达率分别为90.9%和93.2%.各种子宫内膜组织中间质细胞CXCR4和SDF-1的表达均显著弱于腺体细胞.在子宫内膜癌腺体细胞和间质细胞中CXCR4和SDF-1的表达均显著弱于正常及良性病变者.在低分化的子宫内膜癌腺体细胞中CXCR4和SDF-1的表达弱于高分化者.结论:CXCR4和SDF-1在子宫内膜癌细胞系、子宫内膜组织及内膜癌组织中的表达存在差异,在内膜癌组织中其表达均显著弱于正常及良性病变者.     

基质细胞衍生因子-1与肺纤维化关系的初步探讨

目的探讨基质细胞衍生因子1（SDF-1）在肺纤维化中的作用。方法应用ELISA法与免疫组化法分别动态检测SDF-1和CXCR4在大鼠肺纤维化模型中的表达水平，并与肺纤维化指标作相关性分析。结果模型组SDF-1与CXCR4表达水平均明显高于对照组，差异有显著性（P〈0．05）；CXCR4与肺羟脯氨酸含量呈显著线性相关（偏相关系数r=0．885，P〈0．05），SDF-1与羟脯氨酸的相关不密切（偏相关系数r=0．589。P〉0．05）。结论SDF-1及CXCR4在大鼠肺纤维化形成过程中起重要作用。     

阻断SDF-1／CXCR4轴对多发性骨髓瘤细胞株耐药性的影响

目的探讨阻断SDF-1／CXCR4轴后多发性骨髓瘤细胞株耐药性的影响及机制。方法将耐药细胞株RPM18226／DOX和RPM18226／LP与骨髓基质细胞共培养,实验组同时加入抗CXCR4抗体12G5,未加入抗体者为对照组,测定培养细胞的上清液中的SDF-1α、IL-6、VEGF浓度。进行细胞-基质粘附试验测定实验组和对照组骨髓瘤细胞与基质细胞的粘附性;MTT比色法测定实验组和对照组对阿霉素或马法兰的敏感性。结果实验组中SDF-1α、IL-6、VEGF浓度均略高于对照组,但差异元统计学意义（P〉0．05）。实验组骨髓瘤细胞对基质细胞粘附率低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。药物敏感性检测显示实验组骨髓瘤细胞对阿霉素或马法兰敏感性高于对照组。结论阻断SDF-1／CXCR4轴后可以部分逆转多发性骨髓瘤细胞株对化疗药物的耐药性,其机制与细胞因子无关,可能与下调骨髓瘤细胞与基质细胞的粘附性有关。     

SDF-1/CXCR4 对喉癌细胞归巢的作用

目的 在体外探讨血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)、趋化因子受体(Cys-X-Cys receptor 4,CXCR4)及其配体基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)在喉癌Hep-2细胞株中的表达及其在喉癌细胞归巢中的作用. 方法 ①分别用RT-PCR及Western blot检测喉癌Hep-2细胞株中CXCR4 mRNA和蛋白的表达和重组人SDF-1与CXCR4特异性拮抗剂(AMD3100)作用前后喉癌Hep-2细胞株中VEGF-C mRNA和蛋白表达水平的变化;②用甲基噻唑基四唑(MTT比色法)测定不同浓度重组人SDF-1以及AMD3100作用前后Hep-2细胞增殖率的变化;③Transwell小室迁移及体外侵袭实验检测不同浓度重组人SDF-1以及AMD3100对Hep-2细胞趋化活性的影响. 结果 ①在mRNA以及蛋白水平,CXCR4及VEGF-C在Hep-2细胞株中均有高表达,在不同浓度重组人SDF-1(1、10、100 ng/ml)作用Hep-2细胞株24 h后,VEGF-C的表达明显上调,且有明显的剂量依赖性,并能被1 μg/ml的CXCR4的特异性拮抗剂AMD3100阻断;②与对照组(未处理的Hep-2细胞)和10 ng/ml SDF-1组比较,100 ng/ml SDF-1组有明显促进喉癌细胞增殖的作用(P<0.05),并能被1 μg/ml的AMD3100阻断;③与对照组和10 ng/ml SDF-1组比较,100 ng/ml SDF-1组同样有明显的促喉癌细胞迁移和侵袭的作用(P<0.05),同样也能被1 μg/ml的AMD3100所阻断. 结论 SDF-1/CXCR4生物轴与VEGF-C协同促进喉癌细胞归巢,可作为干预喉癌淋巴转移的新手段.     

The role of SDF-1/CXCR4 axis in ovarian cancer metastasis

This study was aimed to explore the role of stromal-derived factor 1 （SDF-1）/CXC chemokine receptor 4 （CXCR4） axis in mediating the metastasis of ovarian cancer cells through activation of extracellular signal-regulated kinase-1/2 （ERK-1/2） signaling pathway. A highly metastatic ovarian cancer cell line, SKOV3, was used in the study. Intracellular calcium mobilization was detected by using laser scanning confocal fluorescence microscopy. Western blotting was used to detect the phosphorylation of ERK1/2 in SDF-1α-treated SKOV3 cells. Adhesion capability and matrix metalloproteinase （MMP） activity of ovarian cancer cells after exposure to SDF-1 a were measured by adhesion assay and gelatin zymography. The results showed that SDF-1α induced rapid intracellular calcium mobilization in SKOV3 cells, as well as the phosphorylation of ERK-1/2. The adhesion of ovarian cancer cells to fibronectin and collagen Ⅳ was increased after SDF-1α treatment. An inhibitor of ERK-1/2 signaling, PD98059, could antagonize such effects of SDF-1α. SDF-1α could also increase the secretion of active MMP-2 and MMP-9. It was concluded that the SDF-1/CXCR4 axis played a critical role in the metastasis of human ovarian cancer by increasing the adhesion capability of cancer cells and the activity of MMP-2 and MMP-9 via ERK1/2 signaling pathway.     

依赖基质细胞衍生因子-1对心肌梗死血管生成及功能恢复的作用分析

目的：研究依赖基质细胞衍生因子‐1（SDF‐1）对心肌梗死血管生成及功能恢复的作用。方法将大鼠随机分成检测组（n＝65）和处理组（n＝64）,其中检测组在心肌梗死前后的1、2、4、7、14、28 d分别随机处死5只大鼠（梗死组）,进行SDF‐1蛋白水平测定,同时设置5只大鼠为假手术对照。处理组的64只大鼠另随机分成4个小组,每组16只：分别为梗死＋ SDF‐1组、梗死＋抗SDF‐1组、梗死＋生理盐水组、正常＋生理盐水组。对各组进行相应处理后,对比心肌梗死后的SDF‐1蛋白水平情况,对比各组骨髓间质干细胞（MSCs）归巢量及新生血管的密度水平,对比各组大鼠的心肌缩短分数（EF）和射血分数（FS）变化水平。结果梗死组的SDF‐1水平在1～7 d后显著高于假手术组,并达到峰值水平,随后逐渐下降,在14 d时恢复至正常,差异有统计学意义（P＜0．05）。经过SDF‐1处理后的组别MSCs归巢量和新生血管的密度水平显著高于其他各组,梗死＋抗SDF‐1组的水平则明显低于梗死＋生理盐水组的水平,差异有统计学意义（均 P＜0．05）。梗死＋SDF‐1组大鼠的心功能改善情况显著优于其他各组,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 SDF‐1可促使心肌梗死血管生成,改善心功能。     

温敏型水凝胶加载基质细胞衍生因子-1的骨髓内控释促进造血

目的：观察温敏型水凝胶加载基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor-1,SDF-1）的体内外释放性能及对造血组织的影响。方法：（1）体外释放：用壳聚糖/明胶/甘油磷酸钠（chitosan-gelatin-glycerol phosphate,CS/G/GP）加载经 125I标记的SDF-1并通过γ探测仪测量其体外释放率。（2）体内释放：注射该缓释系统到18只SD大鼠股骨干中,在第1~6天（每天3只）收集注射侧股骨头、股骨干、周围肌肉组织及对侧股骨头,测量其释放量。（3）骨髓造血：将10只SD大鼠随机分为2组,实验组注射0.1 ml CS/G/GP加载SDF-1入5只大鼠股骨干,对照组注射0.1 ml CS/G/GP入5只SD大鼠股骨干中。在第7天处死10只大鼠收集注射侧股骨头行活检,观察造血活跃程度。结果：根据γ探测仪测量值获得该缓释系统加载SDF-1的体外及骨髓内释放曲线。实验组骨髓造血活跃程度明显高于对照组,两组间造血面积差异有统计学意义（P<0.05）。结论：加载SDF-1的可注射温敏型水凝胶第2~5天在股骨头局部维持稳定浓度且活跃骨髓造血组织。