在肌腱损伤动物模型修复过程中BFGF和Ⅰ型胶原蛋白表达的特征

【目的】 研究证实肌腱损伤修复过程中病灶区病理学变化及BFGF和Ⅰ型胶原蛋白在肌腱损伤修复过程中的作用【方法】 构建Leghorn鸡屈趾肌腱损伤修复模型,借助体视学,生物力学以及免疫组化进行探察和评价,实验数据利用SPSS10.0软件统计处理【结果】 ①肌腱粘连程度和抗张力强度分别随损伤修复时间的延长逐渐增加,第6周组明显高于其它时间组(P < 0.001),而且各时间组均与对照组之间存在显著统计学差异(P < 0.001);②组织病理学检测显示病灶区出现大量炎症细胞和肌腱细胞,除第6周组外,其它时间组肌腱细胞和巨噬细胞的数量均高于对照组(P < 0.05),同时显示肌腱细胞数量的峰值出现于第2周(P < 0.001),而巨噬细胞数量在各时间组之间无统计学差异(P > 0.05)?③免疫组化探测显示BFGF阳性细胞数量及Ⅰ型胶原蛋白的表达在各时间组均高于对照组(P < 0.05);而且在第2周组显著高于其它时间组(P < 0.001)【结论】肌腱损伤修复过程中肌腱粘连程度和抗张力强度的变化与损伤修复时间正相关,病灶区组织病理学变化?BFGF和Ⅰ型胶原蛋白表达的高峰出现于第2周,提示BFGF和Ⅰ型胶原蛋白牵涉到损伤肌腱的修复过程     

兔跟腱修复过程中胰岛素样生长因子-Ⅰ的表达

目的：观察肌腱修复过程中胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）在肌腱内及肌腱周围组织中表达的变化规律,探讨IGF-Ⅰ在肌腱修复过程中的作用.方法：利用免疫组织化学及原位杂交方法检测兔跟腱修复过程中跟腱内及跟腱周围组织中IGF-Ⅰ蛋白及IGF-Ⅰ mRNA变化情况.结果：跟腱损伤后第4 d跟腱周围即出现IGF-Ⅰ蛋白和mRNA的强烈表达,随后开始逐渐下降;在跟腱内第4 d出现IGF-Ⅰ蛋白和mRNA的表达增加,第28 d达到峰值.IGF-Ⅰ蛋白和mRNA的表达呈正相关（r=0.984,P＜0.05）.结论：肌腱损伤修复过程中肌腱内及肌腱周围组织中均存在内源性IGF-Ⅰ表达,肌腱周围组织中IGF-Ⅰ表达出现早且强度大.     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠肩袖撕裂重建术后早期腱－骨界面愈合的影响

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）对大鼠肩袖撕裂重建术后早期腱－骨界面的修复效果。方法45只Wistar大鼠随机分为高剂量组、低剂量组和空白组,每组15只。取双侧肩袖,大结节止点处横断撕裂冈上肌腱全层,重建肩袖止点原位缝合（双排固定法）,高、低剂量组在腱－骨界面分别一次性注射以纤维蛋白胶为载体的BFGF缓释体50、10μg,空白组除手术外不给予任何干预措施。术后1、2、3周处死动物,取冈上肌腱为标本进行免疫组化和生物力学分析。结果镜下见高剂量组术后3周时Sharpey′s纤维显著增多,胶原纤维长入腱－骨界面。3组腱－骨界面最大抗拉强度和冈上肌腱术侧／健侧最大载荷百分比随时间延长呈升高趋势（ P＜0．05）。高剂量组术后各时间点腱－骨界面最大抗拉强度、冈上肌腱术侧／健侧最大载荷百分比均显著高于低剂量组及空白组（P＜0．05）,术后1、3周腱－骨界面最大横断面面积均显著大于低剂量组及空白组（P＜0．05）,术后2周腱－骨界面刚度均高于低剂量组及空白组（ P＜0．05）。低剂量组术后各时间点腱－骨界面最大抗拉强度、冈上肌腱术侧／健侧最大载荷百分比均显著高于空白组（P＜0．05）,术后3周腱－骨界面最大横断面面积显著大于空白组（P＜0．05）,术后2周腱－骨界面刚度显著高于空白组（P＜0．05）。结论高剂量BFGF可诱导断面再生成直接止点的复杂结构,促进肩袖损伤的愈合,在肩袖损伤修复早期效果较佳,而低剂量BFGF可以起到肌腱修复的作用,在临床有一定的应用价值。     

延迟Ⅰ期修复手部肌腱损伤15例效果分析

探讨延迟Ⅰ期修复手部肌腱损伤的效果,使肌腱得到早期有效修复。手外伤中合并肌腱损伤的病例较多见,有时往往合并在全身多发损伤中,但是由于各种原因,无法进行Ⅰ期肌腱修复,部分病例在伤后1d~10d内进行修复,即所谓的延迟Ⅰ期修复[1]。肌腱修复手术一旦感染将导致肌腱修复失败,为了避免感染,临床上往往在2周左右等伤口愈合后,皮肤条件适宜时再修复肌腱。我们认为这样做时间相对较长,肌腱回缩较多,托延愈合时间。只要条件许可对肌腱损伤应尽早修复。我们自2004年7月至2007年8月对15例肌腱损伤采用延迟Ⅰ期修复,取得了满意的效果。     

电针内关穴对异丙肾上腺素致心肌缺血大鼠的影响

【摘要】 目的 探讨采用不可逆电穿孔法消融对同种异体肌腱移植修复兔肌腱缺损的可行性及消融术后组织转归情况。方法 将新西兰大白兔112只随机分为自体肌腱移植组（A组）28只,深低温冷冻同种异体肌腱移植组（B组）28只,不可逆电穿孔消融法（IRE）灭活同种异体肌腱移植组（C组）28只和假手术对照组（D组）28只。各组制备动物后肢第3趾深屈肌腱缺损模型,并采用处理后的肌腱修复缺损;分别于术后1、4、8、12周取材行微血管定量、组织学观察及生物力学测试。 结果 术后各组移植肌腱直径比较均无统计学意义（P > 005）。组织学观察提示B组修复再生速度较慢,表现为成纤维细胞爬行替代及微血管再生能力均低于A、C组。微血管灌注观察提示：微血管有效灌注面积在术后1周时A、B、C组显著低于D组（P < 005）,术后4、8、12周时B组显著低于A、C、D组（P< 005）,且8周时A、C组显著高于D组（P < 005）。生物力学测试提示：B、D组比较移植肌腱最大载荷及硬度仅在术后4周时差异有统计学意义（P< 005）,其余时间点各组间比较差异均无统计学意义（P > 005）。各时间点各组移植肌腱破损形变比较,差异均无统计学意义（P > 005）。 结论 采用IRE灭活的同种异体肌腱修复兔肌腱缺损切实可行,术后移植肌腱组织形态及生物力学性能恢复与自体肌腱移植组无显著差异。     

羊膜细胞Ⅰ型胶原蛋白支架复合物用于修复胎膜破口的研究

目的 探讨羊膜细胞I型胶原蛋白支架复合物用于修复胎膜破口的可行性.方法 将人羊膜间质细胞接种在I型胶原蛋白三维基质中,人羊膜上皮细胞接种在基质的表面,构建羊膜细胞/Ⅰ型胶原蛋白支架复合物以模拟人体羊膜组织结构.DAPI标记三维基质中的细胞核以计数羊膜细胞在三维培养第2,8天的细胞数量.动态测定羊膜细胞/Ⅰ型胶原蛋白复合物体积.培养含有不同数量羊膜间质细胞的羊膜细胞/I型胶原蛋白支架复合物,15 d后检测抗张强度.结果 第2天和第8天的细胞数目分别是(121±5)/cm2和(124±4)/cm2(P>0.05).第5天时,I型胶蛋白的面积为原体积的45%,第10天时约为15%,第15天时约为原14%,羊膜间质细胞的存在对于Ⅰ型胶原蛋白基质具有重新塑形的作用(P<0.01),羊膜间质细胞可以导致I型胶原蛋白的收缩,抑肽酶和GM6001也不能抑制这种收缩.羊膜细胞/Ⅰ型胶原蛋白复合物抗张强度随人羊膜间质细胞数量的增多而增强(P<0.01).结论 羊膜细胞/Ⅰ型胶原蛋白支架复合物有望成为修复胎膜破口的材料.     

组织工程化软骨对兔膝关节全层软骨缺损的修复效果

目的 观察同种异体软骨细胞复合人胎盘Ⅰ型胶原蛋白海绵对兔膝关节股骨髁间窝全层软骨缺损的修复效果.方法取2周龄新西兰兔软骨细胞体外培养传代,选择生长状态相对较好的第2代细胞作为种子细胞,并与人胎盘Ⅰ型胶原蛋白海绵复合.取雄性8月龄新西兰兔54只,制作股骨髁间窝全层软骨缺损模型,随机分为3组：分别为对照组、种子细胞组及种子细胞＋支架材料组.后两组分别植入相应成分.于术后12周、24周、36周分别取其膝关节,观察修复效果. 结果 术后12周种子细胞组缺损区可见少量白色半透明组织覆盖,组织结构粗糙,可见多数针尖样结构;复合支架材料组表面相对光滑,亦可见半透明白色组织形成.24周,种子细胞组缺损区可见较多白色组织形成,透明度较前降低,呈半软骨半纤维样组织;复合支架材料组修复明显较种子细胞组快,表面光滑,呈半透明状覆盖于缺损区,与周围组织有较好吻合,但仍未完全修复软骨缺损.36周,种子细胞组可见更多白色组织覆盖,透明度较前更低;复合支架材料组则修复完好,高度基本与周围组织平齐,呈半透明样软骨组织.空白对照组随着时间的推移,呈现不同程度的纤维组织样修复. 结论 关节软骨自身修复能力有限,只能实现纤维样修复;软骨细胞可部分修复关节软骨缺损,但随着修复时间的推移,逐渐去分化而出现纤维样改变;而软骨细胞复合Ⅰ型胶原蛋白海绵则可以较好地修复关节软骨缺损,且随着时间的延长,关节软骨可基本实现完全修复.     

玻璃化保存对兔肌腱组织形态学观察

【目的】探讨玻璃化保存法对兔肌腱组织形态学的影响。【方法】取24条新西兰纯种大白兔胫前肌肌腱作为实验对象,随机分为3组,每组8条肌腱：未处理（A）组,“两步法”深低温冷冻保存组（B）组,玻璃化保存（C）组。透射电镜观察肌腱组织细胞的形态,台盼蓝染色法检测胫前肌腱细胞存活率。【结果】A组与C组电镜观察结果类似,细胞的结构形态未见明显改变,B组肌腱组织微观结构损伤明显,经统计学处理,胫前肌腱细胞存活率：C组（89．4±3．7）％与A组（93．3±1．7）％无统计学意义（P〉0．05）,与B组（74．3±4．8）％比较有统计学意义（P〈0．05）。【结论】与“两步法”深低温冷冻保存法相比,玻璃化保存法对细胞损伤小,保存效果较好,随着冷冻保护剂的改进,玻璃化保存法保存肌腱具有良好的发展前景。     

盆底功能障碍性疾病患者宫颈组织Ⅰ型胶原蛋白及MMP1-mRNA的表达

目的研究女性盆底功能障碍疾病（pelvic floor dysfunction,PFD）患者的宫颈组织中胶原蛋白Ⅰ型的含量变化及影响胶原蛋白Ⅰ型的细胞外基质（extracellular matrix,ECM）金属蛋白酶（MMP1）的表达。方法应用ELISA和RT-PCR两种方法,分别从蛋白水平和核酸水平测定胶原蛋白Ⅰ型的含量变化及影响蛋白代谢的基质金属蛋白酶（MMP1）的mRNA表达。结果PFD组宫颈组织胶原Ⅰ型含量下降,与正常对照组比较,有显著性差异（P〈0.01）;PFD组宫颈间质中MMP1-mRNA表达增强,与对照组比较具有显著性差异（P〈0.001）;分析宫颈胶原蛋白Ⅰ型与MMP1-mRNA表达的相关性,两者成负相关（r=-0.493,P〈0.05）。说明PFD患者其宫颈组织Ⅰ型胶原蛋白的降低与MMP1对其降解增加有关。结论PFD患者宫颈组织Ⅰ型胶原蛋白的减少,MMP1的表达增加,表明PED患者宫颈组织Ⅰ型胶原蛋白含量的减少与MMP1增加有关,与本身合成量无关;宫颈组织胶原蛋白含量减少和代谢异常可以用于判断女性盆底组织的支持状况,预防PFD的发生。     

碱性成纤维细胞生长因子在治疗吸入性损伤中的疗效观察

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）对吸入性损伤后气道粘膜及肺泡上皮的修复作用。方法：依据纤支镜结果将中、重度吸入性损伤分别随机分为BFGF治疗组与对照组。在相应时段进行纤支镜支气管肺泡灌洗术,摄像记录纤支镜所见及检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白质含量、胶体渗透压（COP）与细胞分类计数。结果：在中、重度吸入性损伤中,其气道修复时间BFGF治疗组比对照组平均提前4．5天与3．3天;发生出血、气管支气管狭窄等并发症的机率平均降低64．65及31．9％。BFGF治疗组的BALF中总蛋白（TP）、白蛋白（ALb）、COP以及细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞数量均比对照组明显降低（P＜0．05）。结论：BFGF治疗中、重度吸入性损伤,能促进气道粘膜及肺泡上皮的修复。     

动脉损伤后Ⅰ型胶原蛋白基因表达在再狭窄形成中的时相性变化

目的：探讨细胞外基质在再狭窄形成过程中的演变及其作用。方法：应用Northern blots，原位杂交及组织形态学方法检测细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原蛋白基因在动脉扣伤前及损伤后1、2、4的表达，并通过组织形态学方法观察新生内膜中胶原成分的沉积。结果：Ⅰ型胶原蛋白基因表达在损伤后1周即有明显增高，2周时达到高峰。4周仍维持在较高水平，且新生内膜中有相当高比例的胶原成分。结论：胶原蛋白参与新生内膜及再狭窄形成的主要病理过程。     

蚕丝-PLGA复合工程支架在大鼠肌腱损伤中的修复作用

目的:探讨蚕丝-PLGA复合材料制备的工程支架用于大鼠肌腱损伤中的修复作用。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组各24只。两组均行肌腱损伤手术造模。造模后,实验组在跟腱离断后将蚕丝-PLGA支架植入大鼠肌肉,然后采用缝合线缝合皮肤;对照组在跟腱离断后,仅用缝合线进行皮肤切口的缝合。分别于术后1、2、3、4周进行取材,对各组大鼠进行大体观察、组织学评价,采用免疫组化法检测胶原蛋白Ⅲ的表达,并进行生物力学测试。结果:造模后1 d,两组小鼠均恢复自主进食,能够正常走动跳跃,行为未受影响,但均存在不同程度摄食减少,所有大鼠术后均未见红肿感染。HE染色组织学评价显示,实验组术后3周及4周肌腱胶原纤维排列整齐且致密,并且胶原蛋白Ⅲ表达较高,而对照组肌腱胶原纤维排列无规则,且比较松散。与对照组比较,实验组术后2、3、4周胶原蛋白Ⅲ表达均增高(P<0.05),肌腱最大拉力载荷均增大(P<0.05)。结论:蚕丝-PLGA复合工程支架对肌腱损伤修复具有促进作用,能够提高胶原蛋白Ⅲ的表达,增强生物力学特性。     

rhIGF-Ⅰ在肌腱修复术中的应用及生物力学研究

目的研究重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ（rhIGF-Ⅰ）在肌腱修复术后的作用。方法将48只来亨鸡随机分为两组,实验组24只,在吻合口处滴加rhIGF-Ⅰ,对照组24只,于第三趾屈肌腱切断修复术后在吻合口处滴加生理盐水。分别于第3、5、8、12周时切取吻合段肌腱行大体观察及生物力学测试。另取6只作为未手术组,取其第三趾肌腱不行特殊处理即行生物力学测试。结果术后实验组和对照组的肌腱最大抗拉力较未手术组均明显降低,实验组最大抗拉力、最大延伸率均高于对照组,实验组肌腱模拟主动屈曲度比对照组降低。结论局部滴加rhIGF-Ⅰ可以促进肌腱内在性愈合。     

丹参酮IIA对跟腱损伤模型大鼠肌腱粘连的预防作用研究

目的 研究丹参酮IIA对肌腱粘连的预防作用和对肌腱愈合的影响。方法 将20只跟腱损伤大鼠随机分为实验组和对照组各10只，其中实验组局部注射丹参酮IIA注射液0.2ml，对照组注射等量生理盐水。通过大体解剖观察及组织学评价比较两组的肌腱粘连和愈合情况。结果 两组大鼠肌腱均顺利愈合。肌腱粘连评分显示实验组较对照组肌腱粘连少，程度轻，两者具有统计学差异[（2.9±0.7）分比（4.0±1.6）分，P＜0.05]。组织学观察显示实验组肌腱损伤处炎性细胞浸润少，胶原纤维和成纤维细胞增生比对照组少，排列较规则。结论 丹参酮IIA可以减少肌腱损伤术后的粘连，且对肌腱愈合无负面影响。     

RNA干扰抑制大鼠肌腱细胞中V型胶原基因的表达

目的：利用RNA干扰技术（RNAi）下调肌腱细胞中V型胶原蛋白的表达,拟为后续探讨V型胶原在损伤肌腱修复过程中的作用提供可行的试验方法。方法：分别设计干扰大鼠V型胶原[COL5（1）2（2）]两个亚基COL5 1和COL5 2表达的siRNA序列,转染大鼠肌腱细胞。通过实时荧光定量PCR和免疫荧光法检测V型胶原在基因和蛋白水平的表达。结果：转染特定的siRNA后,V型胶原两个亚基的基因表达被抑制约70%,蛋白表达也被明显抑制。结论：RNAi法可有效地抑制大鼠肌腱细胞中V型胶原的基因和蛋白水平表达。为进一步研究V型胶原在肌腱损伤修复过程中的作用提供了可行的试验方法。     

改良式Bunnell法修复肌腱的实验研究和临床应用

目的：探讨改良式Bunnell法修复肌腱损伤的生物力学特性和临床效果。方法：将新鲜成年猪后足20只，随机分成4组，解剖游离第2、3趾深屈肌腱，取其远端10cm，第一组双“十”字缝合法，第2组行Kessler法，第3组行Bunnel法，第4组行改良式Bunnell法。用自制力学测定仪测量每组缝合方法3mm，间歇形成的负荷，并进行统计处理。1997年8月至1999年1月用改良式Bunnell法修复手肌腱损伤，随访3－9个月，经TAM法评定。结果：改良式Bunnell法的3mm间歇形成的负荷最大，与其它方法比较统计学差异有显性意义（P＜0．05）。TAM法评定优良率达94％。结论：改良式Bunnell法缝合肌腱具有较强的抗张强度。临床应用效果满意，操作简单，值得推广应用。     

基于肌腱重塑途径探讨富血小板血浆对兔肩损伤模型修复的机制

目的:基于腱性组织修复与细胞机制重塑不可分理论,采用兔肩损伤模型探讨富血小板血浆(PRP)调控基质重塑对肩袖损伤模型肌腱修复的可能效果,为PRP治疗肩袖损伤非手术治疗及肌腱修复机制进一步奠定基础.方法:对照组造模成功大白兔6只不予处理(空白组);PRP组取造模成功大白兔6只给予1 ml PRP关节腔注射,8周后检查;P...     

修复手部屈肌腱损伤52例临床分析

1 临床资料1） 一般资料：本院自1996～1999年收治手外伤病人共80例，男52例，女28例。年龄18～60岁。锐性损伤61例96指，钝性损伤19例26指，计80例122指。其中Ⅰ区15指，Ⅱ区31指，Ⅲ区20指，Ⅳ区24指，Ⅴ区32指。损伤程度：Ⅰ级-清洁创口，单纯皮肤肌腱裂伤33指；Ⅱ级-Ⅰ级伴有血管神经损伤40指；Ⅲ级-肌腱横断，伴有骨或关节损伤28指；Ⅳ-肌腱横断，伴有其他复合组织损伤21指。损伤手指：拇指16指，食指41指，中指22指，环指21指，小指22指。2） 治疗方法和结果：“8”字缝合42指，kessler缝合58指，显微外科修复8指，肌腱移植14指，皆注…     

纤维蛋白为载体的BMP-4/7对骨质疏松性骨缺损愈合过程的影响

目的观察以纤维蛋白为载体的骨形态发生蛋白4/7(BMP-4/7)对骨质疏松性椎体骨缺损愈合中Ⅰ型骨胶原蛋白的影响,探讨局部应用BMP-4/7+纤维蛋白复合物治疗骨质疏松性椎体骨缺损的可行性。方法将84只大鼠依据随机数字法分为4组,每组21只。A组:骨质疏松性骨缺损+(BMP-4/7 24μg+纤维蛋白20 mg);B组:骨质疏松性骨缺损+胎牛血清; C组:正常骨质骨缺损+(BMP-4/7 24μg+纤维蛋白20 mg); D组:正常骨质骨缺损+胎牛血清。于骨缺损建模后1、2、4、5、8、12周采用免疫印迹法测定各组椎骨结痂中Ⅰ型骨胶原蛋白的含量;同时在4、8、12、16周检测骨密度和生物学力学特征,综合判断局部骨愈合情况。结果在4、5、8、12周时,B组和D组Ⅰ型骨胶原蛋白含量低于A组,C组均高于B组,D组低于C组(P <0. 05),A组与C组比较差异无统计学意义(P> 0. 05),D组高于B组(P <0. 05)。第8周、12周、16周时,B组和D组骨密度低于A组,C组高于B组,D组低于C组(P <0. 05),A组与C组比较差异无统计学意义(P> 0. 05),D组高于B组(P <0. 05)。第8周、12周、16周时,B组和D组的最大载荷量、最大应变力、弹性模量低于A组,C组均高于B组,D组低于C组(P <0. 05),A组与C组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05),D组高于B组(P <0. 05)。A组、B组、C组和D组的Ⅰ型骨胶原蛋白含量与最大载荷量、最大应变量、弹性模量均呈正相关(P <0. 05)。结论局部应用以纤维蛋白为载体的BMP-4/7能明显增加大鼠骨质疏松性椎体骨缺损愈合过程中局部Ⅰ型骨胶原蛋白含量,改善局部骨质生物学性能。     

屈指肌腱修复术后的动力牵引治疗

采用动力牵引治疗屈指肌腱修复术后患者２５例（实验组）。实验组术后第１天开始在保护下主动伸指被动屈指活动。结果：实验组的手功能理想恢复率为９２％，显著高于对照组（传统治疗组）的８％（Ｐ＜０．０１），粘连率为８％，显著低于对照组的７５％（Ｐ＜０．０１）。结果提示：该方法简单易行，疗效显著，适于临床推广应用。