突触外GABAA受体的药理学及构效关系研究

GABA(γ-氨基丁酸)是脊椎动物中枢神经系统中一种重要的抑制性神经递质,主要通过作用干GABAA,GABAB和GABAC三种亚型受体发挥生理效用.突触内GABAA受体介导抑制性突触后电流是GABAA受体介导抑制性作用的理论基础,而近来,科学家们描述的一种GABAA受体介导的新型抑制作用即持续性抑制.是由于低浓度的GABA激活突触外GABAA受体引起的生理效应.突触外GABAA受体由能将生物物理学性质稳定遗传给下一代的亚基组成,在药理和功能上也区别于突触内受体相似物.这篇综述将更加全面具体的阐述重组体的性质,天然突触外GABAA受体以及其相关试剂的研究.并深入从生理学和病理学方面探讨中枢神经系统中突触外GABAA受体在GABA能抑制电流过程中的重要作用.     

GABAA受体与脑缺血

脑缺血时，由于各类氨基酸大量释放，兴奋性氨基酸(exicitatory amino acids，EAA)与抑制性氨基酸(inhibitory amino acids，IAA)间平衡破坏，是导致神经元急性和迟发性“兴奋毒”损伤的关键因素。GABAA受体作为脑内最主要的一种抑制性氨基酸神经递质受体，除通过其配体门控性Cl-通道介导     

GABAA受体的亚型以及药理学作用

增强GABA介导的突触传递是各种神经精神失常疾病的药物治疗基础.GABAA受体作为一种多能性的药物靶点表现出了不寻常的结构差异性由至少18个亚单位装配而成.然而,从功能上区分GABAA受体还有待对体内受体基因深入的了解.各种GABAA受体变构调节剂作用的证据,特别是苯二氮(艹卓)类化合物,都可以归因于将要讨论的特殊GABAA受体亚型.这些发现开辟了这类药物发展的新途径.     

GABAA受体部分介导脊髓水平5—HT的镇痛作用

本工作利用大鼠辐射热－甩尾测痛结合脊髓蛛网膜下腔注药的方法，观察了ｒ－氨基丁酸Ａ（ＧＡＢＡＡ）受体阻断剂荷包牡丹碱对５－羟色胺镇痛作用的影响。实验结果如下：（１）脊髓蛛网膜下腔０．５ｎｍｏｌ ＢＩＣ能够对注射１２０ｎｍｏｌ５－ＨＴ所引起的镇痛作用产生较迟的部分阻断作用，但这一剂量的ＢＩＣ却能完全阻断注射１ｎｍｏｌＧＡＢＡＡ受体激动剂ｍｕｓｃｉｍｏｌ所的明显强于１２０ｎｍｏｌ５－ＨＴ的镇痛作用；（２     

音乐对大鼠海马GABAA受体表达的作用

目的研究音乐刺激对海马神经元GABAA受体表达的影响.方法在大鼠生长发育的不同时期,给予音乐刺激,用免疫组织化学和PCR技术及图像分析系统定量研究音乐刺激后,大鼠海马神经元GABAA受体及其编码该受体的mRNA的表达.结果音乐刺激后,大鼠海马神经元GABAA受体免疫染色的光密度比对照组增加,在CA1区分别从对照组(32.21±4.23)增加到持续音乐组(44.72±6.21),生后音乐组(43.61±6.12),胎期音乐组(34.34±4.54);编码受体的mRNA表达相对量增加,从对照组(0.67±0.23)增加到持续音乐组(0.99±0.34),生后音乐组(0.92±0.32),胎期音乐组(0.73±0.25),这些变化以持续音乐刺激组最明显,生后音乐刺激组次之,胎期音乐刺激组和对照组最弱.结论音乐刺激能增强大鼠海马神经元GABAA受体及编码该受体的mRNA表达,其增强作用具有刺激时间依赖性关系.     

多巴胺受体的分子生物学和药理学研究进展

多巴胺受体的分子生物学和药理学研究进展唐性春综述胡刚审校（药理学教研室）关键词多巴胺受体脑分子生物学药理学中图法分类号Ｒ９７１．４多巴胺（ｄｏｐａｍｉｎｅＤＡ）是脑内一种重要的神经递质，通过其受体参予人类神经精神活动的调节。多巴胺及其受体的研究可追溯...     

音乐对大鼠海马 GABAA受体表达的作用

目的研究音乐刺激对海马神经元GABAA受体表达的影响.方法在大鼠生长发育的不同时期,给予音乐刺激,用免疫组织化学和PCR技术及图像分析系统定量研究音乐刺激后,大鼠海马神经元GABAA受体及其编码该受体的mRNA的表达.结果音乐刺激后,大鼠海马神经元GABAA受体免疫染色的光密度比对照组增加,在CA1区分别从对照组(32.21±4.23)增加到持续音乐组(44.72±6.21),生后音乐组(43.61±6.12),胎期音乐组(34.34±4.54);编码受体的mRNA表达相对量增加,从对照组(0.67±0.23)增加到持续音乐组(0.99±0.34),生后音乐组(0.92±0.32),胎期音乐组(0.73±0.25),这些变化以持续音乐刺激组最明显,生后音乐刺激组次之,胎期音乐刺激组和对照组最弱.结论音乐刺激能增强大鼠海马神经元GABAA受体及编码该受体的mRNA表达,其增强作用具有刺激时间依赖性关系.     

慢性二氧化碳潴留大鼠脑GABAA受体mRNA的变化研究

目的 观察慢性二氧化碳潴留大鼠脑组织γ－氨基丁酸Ａ型（Ｇａｍｍａ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄＡ,ＧＡＢＡＡ）受体ｍＲＮＡ的变化情况,探讨ＧＡＢＡＡ受体在呼吸衰竭中的作用。方法 建立慢性二氧化碳潴留大鼠模型,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ＥＬＩＳＡ测定不同脑区ＧＡＢＡＡ受体亚单位α１、α２,β２,γ２的变化情况。结果 ４种亚单位ｍＲＮＡ在脑干和海马区均非常显著的增高,大脑皮质显著增高,以α１、β２、     

GABAA受体激动剂和拮抗剂对大鼠梨形皮质,海马Fos表达？…

为探讨γ－氨基丁酸受体（ＧＡＢＡＡ）与癫痫发病机制之间的关系,应用免疫组化技术结合脑电图就ＧＡＢＡＡ受体激动剂蝇蕈醇对马桑内酯致痫大鼠大脑皮质,海马Ｆｏｓ表达的影响进行研究,并与ＧＡＢＡＡ受本拮抗剂荷包牡丹碱致痫大鼠的Ｆｏｓ表达进行比较。结果显示：侧脑室注射马桑内酯诱发癫痫发作后１ｈ,双侧齿状回颗粒细胞层,海马锥体细胞怪及注射侧梨形皮质有大量Ｆｏｓ阳性细胞,对侧梨形皮质未检测到Ｆｏｓ表达．;     

普鲁泊福对GABAA受体结合功能的影响

目的:观察普鲁泊福对离体小鼠脑细胞膜GABAA受体结合功能的影响.方法:采用放射配体受体结合分析法,测定普鲁泊福对小鼠脑细胞膜3H-GABA特异性结合以及GABAA受体饱和曲线的影响.结果:特异性结合试验显示,与对照组相比,10～300 μmol/L浓度组的普鲁泊福明显增强3H-GABA与脑细胞膜GABAA受体的特异性结合,并呈浓度依赖性(P<0.05),而浓度低于10 μmol/L的普鲁泊福无明显增强作用(P>0.05).GABAA受体饱和试验显示,普鲁泊福组(10 μmol/L)的饱和曲线解离常数Kd2值明显低于对照组(P<0.01),但2组的Kd1、Bmax1及Bmax2值相比无统计学差异(P>0.05).结论:临床相关浓度的普鲁泊福可显著增强内源性GABA与GABAA受体的结合功能,其主要机制是通过提高GABA低亲和力结合位点的亲和性而起作用的.     

GABAA受体拮抗剂对吸入麻醉药催眠作用的影响

目的　分析吸入麻醉药乙醚、安氟醚、异氟烷和七氟醚催眠作用与GABAA 受体的关系。方法　给小鼠分别腹腔注射麻醉剂量的乙醚、安氟醚、异氟烷、七氟醚 ,待小鼠翻正反射消失后 1min ,静脉注射一叶秋碱 5mg/kg或侧脑室注射荷包牡丹碱每只 0 .5μg /10 μl,对照组分别注射同等容积的生理盐水或人工脑脊液 ,观察并记录各组的翻正反射消失持续时间。结果　一叶秋碱和荷包牡丹碱对上述 4种麻醉药的翻正反射消失持续时间均无明显影响 (P >0 .0 5)。结论　GABAA 受体并非乙醚、安氟醚、异氟烷和七氟醚催眠作用的主要靶位     

α1—肾上腺素受体亚型药理学特性的研究进展

α1-肾上腺素受体存在多种亚型，目前已经发现的有α1A，α1B，α1D和α1L4种，近年来，分子生物学技术，放射配体结合技术的发展进一步促进了α1-肾上腺素受体亚型的研究，本将到α1-肾上腺素受体亚型的分类，药理学作用及信号转导途径等方面的研究进展作一综述。     

弓状核损毁模型大鼠海马组织中GABAA受体、NMDAR1受体、c-fos蛋白、NGF受体的表达

目的 探讨谷氨酸钠造成的下丘脑弓状核损毁模型鼠海马组织中γ-氨基丁酸(GABAA)受体、N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR1)、c-fos蛋白、神经生长因子(NGF)受体的表达.方法皮下注射谷氨酸钠建立SD新生大鼠弓状核损毁模型.正常组注射等量生理盐水作对照.GABAA受体、NMDAR1受体、c-fos蛋白、NGF受体的表达以免疫组化染色显示.结果造模组大鼠海马组织中GABAA受体、NMDAR1受体的表达均明显低于正常组,P<0.05, NGF受体的表达明显高于正常组,P<0.05,c-fos蛋白表达略高于正常组,但差异无统计学意义,P>0.1.结论谷氨酸钠损毁弓状核对大鼠海马组织中GABAA受体、NMDAR1受体、NGF受体的表达有明显影响.     

作用于GABAA受体的药物与神经可塑性

GABAA受体介导中枢神经递质GABA产生快速抑制反应,是治疗焦虑障碍、失眠和麻醉重要药物靶点。但是长期使用这些药物,可产生耐受和成瘾发生的风险。机制可能为引起大脑反馈回路的异常神经适应。目前,已证明苯二氮?类作用的突触GABAA受体和突触外GABAA受体的调节剂(THIP和神经甾体)已证明可以诱发腹侧被盖区多巴胺神经元的可塑性。此外,不同突触或突触外GABAA受体激活的数量和重复用药均与神经调节的奖励和厌恶反应（reward and aversion）相关。作用于突触和突触外GABAA受体的药物均可抑制VTA的GABAA能中间神经元,从而激活VTA区DA能神经元,由此去抑制和诱导谷氨酸能神经的突触可塑性。尽管此类药物未能改变突触棘数量,却能抑制脑代谢和基因表达,其诱导成熟神经元的神经可塑性的可能方式是：解除主要神经元抑制作用;这一观点仍有待验证。     

豚鼠脑干听觉中枢和内侧膝状体GABAA受体β亚单位的分布

目的：研究豚鼠脑干听觉中枢内侧膝状体ＧＡＢＡＡ受体β亚单位的分布。方法：采用免抗ＧＡＢＡＡ受体β亚单位血清和免疫组织化学ＡＢＣ法及葡萄糖氧化酶－ＤＡＢ－镍成色技术。     

GABAA受体激活BDNF—TrkB—ERK信号通路在脑缺血中的作用

目的探讨γ-氨基丁酸（GABA）A受体激活后在大鼠脑缺血模型中是否能通过激活BDNF—TrkB—ERK信号通路而延缓海马神经元的死亡。方法制备sD大鼠大脑四动脉结扎全脑缺血模型,采用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的d—UTP缺口末端标记（TUNEL）技术观察GABA。受体激动剂蝇蕈醇对缺血后海马神经元凋亡的影响;采用免疫印迹法检测蝇蕈醇和GABA受体的拮抗剂荷包牡丹碱对缺血后海马神经元脑源性神经营养因子（BDNF）表达和下游蛋白ERKI／2磷酸化水平的影响;采用免疫沉淀检测蝇蕈醇和荷包牡丹碱对BD—NF的受体TrkB磷酸化水平的影响。结果蝇蕈醇对缺血后海马CA1区神经元具有保护作用（P〈0．05）;而且,在缺血15min复灌1天蝇蕈醇提高了BDNF表达水平、TrkB和ERK1／2磷酸化水平（P〈0．05）,而荷包牡丹碱可以降低三者升高的水平（P〈0．05）。结论蝇蕈醇对缺血后神经元有保护作用,可能的分子机制是激活了BDNF—TrkB—ERK信号通路。     

DBS对海人酸癫痫大鼠突触外GABAA受体亚基的影响

目的研究DBS治疗对海人酸癫痫大鼠大脑中突触外GABAA受体8亚基分布与表达的影响,为癫痫的发病机制与DBS的治疗机制的研究提供参考。方法雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组、癫痫组、DBS治疗组。通过免疫组织化学方法检测突触外GABAA受体8亚基在大鼠大脑中的分布与表达量的变化。结合大鼠脑电信号的采集分析以及病理形态学观察,分析DBS在癫痫治疗中的作用以及对突触外GABAA受体8亚基的影响。结果DBS治疗组大鼠癫痫发作次数（6．01．4-4．87,n=8）明显低于癫痫对照（17．314-4．59,／7,=8）,P〈0．05;DBS治疗可有效抑制癫痫大鼠海马异常放电;DBS治疗组（463．62-I-38．41,n=8）大鼠海马神经元坏死及胶质细胞增生程度较癫痫组轻（357．12±20．50,n=8）（P〈0．05）;正常对照组大鼠脑组织突触外GABA受体8亚基主要分布在海马（IOD=30．96±2．73,／7,=8）与丘脑腹外侧核（IOD=32．85±2．35,／n=8）。癫痫组大鼠脑组织海马（IOD=12．31±1．72,n=8）及丘脑腹外侧核（IOD=22．39±1．94,n=8）突触外GABA受体8亚基表达下降。DBS治疗组的丘脑腹外侧核（IOD=35．91±3．97,n=8）,海马区（IOD=22．74±2．08,n=8）突触外GABA受体8亚基表达比癫痫组表达增高（P〈0．05）。结论丘脑底核DBS治疗可以通过改变大脑突触外GABA受体8亚基的表达,抑制癫痫大鼠海马的异常放电,减轻癫痫大鼠海马神经元病理变化,起到对癫痫的治疗作用。     

DBS对海人酸癫痫大鼠突触外GABAA受体亚基的影响

目的研究DBS治疗对海人酸癫痫大鼠大脑中突触外GABAA受体δ亚基分布与表达的影响,为癫痫的发病机制与DBS的治疗机制的研究提供参考。方法雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组、癫痫组、DBS治疗组。通过免疫组织化学方法检测突触外GABAA受体δ亚基在大鼠大脑中的分布与表达量的变化。结合大鼠脑电信号的采集分析以及病理形态学观察,分析DBS在癫痫治疗中的作用以及对突触外GABAA受体δ亚基的影响。结果 DBS治疗组大鼠癫痫发作次数(6.01±4.87,n=8)明显低于癫痫对照(17.31±4.59,n=8),P<0.05;DBS治疗可有效抑制癫痫大鼠海马异常放电;DBS治疗组(463.62±38.41,n=8)大鼠海马神经元坏死及胶质细胞增生程度较癫痫组轻(357.12±20.50,n=8)(P<0.05);正常对照组大鼠脑组织突触外GABA受体δ亚基主要分布在海马(IOD=30.96±2.73,n=8)与丘脑腹外侧核(IOD=32.85±2.35,n=8)。癫痫组大鼠脑组织海马(IOD=12.31±1.72,n=8)及丘脑腹外侧核(IOD=22.39±1.94,n=8)突触外GABA受体δ亚基表达下降。DBS治疗组的丘脑腹外侧核(IOD=35.91±3.97,n=8),海马区(IOD=22.74±2.08,n=8)突触外GABA受体δ亚基表达比癫痫组表达增高(P<0.05)。结论丘脑底核DBS治疗可以通过改变大脑突触外GABA受体δ亚基的表达,抑制癫痫大鼠海马的异常放电,减轻癫痫大鼠海马神经元病理变化,起到对癫痫的治疗作用。     

血管内皮细胞非神经性M受体药理学与疾病治疗的研究进展

血管内皮细胞上存在介导内皮依赖性血管舒张反应的血管内皮细胞非神经性毒蕈碱样受体（M受体）。对血管内皮细胞非神经性M受体亚型的定性一直存在争议。多数药理实验结果显示血管舒张反应是M3受体介导的；另外M1，M2受体也在不同组织类型的血管上介导了血管舒张反应。基因敲除小鼠的结果显示，主动脉、冠状动脉上介导舒张反应的受体以M3亚型为主；脑动脉上以M5为主。药理实验发现，介导血管舒张效应的内皮细胞非神经性M受体具有相对的组织、器官选择性和动物种属差异，与神经性M受体药理学特性有差别。激活血管内皮细胞非神经性M受体可促使内皮细胞分泌多种血管活性因子，介导血管的舒张、维持血管的正常生理状态；同时还可促进组织型纤溶酶原激活物的生成，降低多种粘附分子的分泌，产生抗动脉粥样硬化和抗血栓形成的功能。与传统药物作用机制不同。