卡维地洛和缬沙坦干预对高血压大鼠心肌细胞凋亡及基因表达的影响

目的:比较卡维地洛、缬沙坦及其联合干预对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞凋亡率(CMAR)、心肌细胞bcl2蛋白表达率(bcl2PER)及p53蛋白表达率(p53PER)的影响。方法:雄性SHR24只随机分为4组(均n=6),分别接受生理盐水5mL·d-1(对照组),卡维地洛(卡维地洛组),缬沙坦(缬沙坦组)和卡维地洛+缬沙坦(联合用药组)灌胃,共干预8wk。麻醉开胸,取左心室游离壁于10%甲醛溶液中固定24h,按TUNEL法及免疫组化法检测CMAR,bcl2PER及p53PER。结果:与对照组比较,其余各组CMAR及p53PER明显降低,bcl2PER明显升高(均P<0.01),但联合用药组尤为显著。结论:卡维地洛和缬沙坦联合干预对SHR的CMAR及其基因的影响优于卡维地洛或缬沙坦单独应用。     

丹参对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡及基因蛋白表达的影响

目的探讨丹参对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞凋亡及基因蛋白表达的影响。方法18只引种繁殖的雄性SHR随机分为3组,每组6只:⑴基础组:育至第8周处死;⑵丹参组:从第8周给药,丹参粉针剂1g/kg.d,腹腔注射,第18周处死;⑶对照组:用相同容量蒸馏水腹腔注射,余同丹参组。心肌细胞凋亡的检测采用TdT介导的原位末端缺口标记法(TUNEL),Bcl-2基因的蛋白表达检测采用S-P免疫组化法。比较3组间心肌细胞凋亡指数、Bcl-2蛋白阳性表达指数的差异,分析两指标间的相关性。结果与基础组比较,对照组心肌凋亡细胞明显增多(P<0.05),而Bcl-2蛋白阳性表达指数显著降低(P<0.05);丹参组较对照组心肌凋亡细胞明显减少(P<0.05),Bcl-2蛋白阳性表达指数显著升高(P<0.05),与基础组无差异。心肌细胞凋亡指数与Bcl-2蛋白阳性表达指数呈明显的负相关性(P<0.01)。结论SHR心肌细胞凋亡具有周龄的依赖性,中药丹参能显著减少SHR心肌细胞凋亡,具有明显上调Bcl-2基因蛋白表达的作用。     

氯氨酮对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡和Fas蛋白、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨氯胺酮作用下大鼠实验性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡与Fas及Bcl-2蛋白表达的变化及与心肌组织损伤的关系,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法:以穿线结扎或松扎左冠状动脉制备大鼠心肌缺血再灌注模型。32只大鼠随机分成假手术组(假手术4.5 h)、缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4 h)、低剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4h)及高剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注个4 h)。以缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡的变化,S-P免疫组化法分别检测Fas与Bcl-2蛋白水平变化,做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果:心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡指数及Fas蛋白阳性染色指数与Bcl-2蛋白阳性染色指数均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少Fas和Bcl-2蛋白阳性细胞表达;心肌缺血再灌注后心肌组织呈大小不一的灶性坏死,坏死周围有炎性细胞浸润,氯胺酮作用后坏死减轻,低剂量氯胺酮作用更明显。结论:心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡、Fas基因的蛋白与Bcl-2蛋白表达量均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少细胞Fas和Bcl-2蛋白阳性表达,从而减轻心肌损伤,且低剂量氯氨酮作用更明显。     

延黄消心痛胶囊对实验性急性心肌梗死大鼠Bcl-2、Bax蛋白表达及心肌细胞凋亡的影响

目的观察延黄消心痛胶囊对实验性急性心肌梗死大鼠Bax、Bcl-2蛋白及心肌细胞凋亡的影响,探讨其干预心肌梗死的机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、延黄消心痛胶囊高、中、低剂量组和地奥心血康对照组,药物干预7d后,结扎SD大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心梗动物模型。应用免疫组化法观察Bax、Bcl-2蛋白表达;应用TUNEL法观察大鼠心肌缺血区的心肌细胞凋亡情况。结果①模型组的Bax蛋白阳性表达显著高于假手术组(P值均<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.01);干预药高、中、低剂量组和对照组的Bax蛋白阳性表达显著低于模型组(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著上调(P<0.01)。②模型组与假手术组心肌细胞凋亡指数的差异有统计学意义(P<0.01),干预药高、中、低剂量组和对照组均与假手术组、模型组的差异有统计学意义(P值均<0.01)。结论延黄消心痛胶囊能够抑制心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡,其机制与Bcl-2蛋白表达上调、Bax蛋白表达下调有关。     

缬沙坦、依那普利、普萘洛尔对未成年自发性高血压大鼠心脏重塑与心肌细胞凋亡的影响

目的 观察缬沙坦、依那普利、普萘洛尔对未成年自发性高血压大鼠心脏重塑与心肌细胞凋亡的影响及二者的关系,探讨预防性药物干预改善高血压心脏重塑的机制以及心肌细胞凋亡的变化在高血压病早期心脏重塑中的作用和意义。方法 24只4周龄自发性高血压大鼠(SHR),按随机区组设计分为4组,分别应用缬沙坦(30mg·kg-1·d-1)、依那普利(30mg·kg-1·d-1)和普萘洛尔(50mg·kg-1·d-1)干预4周,另设一组为对照组。计算心肌重量指数(CPI)、左心室肥厚指数(LVHI)和右心室肥厚指数(RVHI)。采用末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的带荧光的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)对左心室游离壁心肌的凋亡细胞进行检测并进行半定量分析,计算心肌细胞凋亡指数(CMAI)。结果 (1)与对照组比较,依那普利和缬沙坦组CPI和LVHI明显下降(P<0.01),CMAI显著升高(P<0.01)。普萘洛尔组CMAI明显升高(P<0.05),CPI和LVHI呈下降趋势但未达到统计学意义(P>0.05)。(2)未成年SHR LVHI与CPI呈显著正相关(tr-10.856,r=0.918,P<0.001),CPI、LVHI与CMAI呈显著负相关(前者tr=3.917,r=-0.641,P<0.001;后者tr=4.716,r=-0.709,P<0.001)。结论 (1)未成年SHR即存在心肌细胞增生与凋亡的调节失衡,结果导致心脏重量增加,出现心脏重塑。(2)缬沙坦、依那普利、普萘洛尔对未     

缬沙坦治疗免疫性肝纤维化大鼠及其对Bcl-2/Bax表达的影响

目的 评价缬沙坦对免疫性大鼠肝纤维化的治疗作用,并观察其对免疫性肝纤维化大鼠肝组织中凋亡相关因子Bcl-2/Bax表达的影响.方法 36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组和治疗组.治疗组在造模第6周开始予以缬沙坦干预;第10周实验结束后,观察三组在肝组织纤维化程度、血清透明质酸(HA)、羟脯氨酸(Hyp)水平的变化,免疫组化检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Bcl-2、Bax的表达.结果 治疗组大鼠肝纤维化程度、炎症活动度均较模型组明显减轻.模型组和治疗组肝胶原面积分别为(12.5±2.15)%和(5.21±1.21)% (P＜0.05).与模型组比较,治疗组血清HA、Hyp水平均降低(P＜0.05).模型组肝组织α-SMA、Bcl-2和Bax的表达较空白对照组明显增强(P＜0.05);而治疗组α-SMA表达明显低于模型组(P＜0.05).治疗组Bcl-2表达较模型组显著降低(P＜0.05), Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05).结论 缬沙坦能明显减轻猪血清诱导的肝纤维化大鼠的肝纤维化程度、炎症活动度,其机制可能与下调Bcl-2的表达及降低Bcl-2/Bax比值有关.     

DIDS对Bcl-2/Bax在staurosporine诱导心肌细胞凋亡中表达的影响

目的探讨氯离子通道阻断剂DIDS(4,4′-diisothiocy-ano-2,2′-stilbene-disulfonic acid)对staurosporine(STS)诱导心肌细胞凋亡的调节蛋白Bcl-2/Bax表达的影响。方法在STS诱导心肌细胞凋亡模型上,观察DIDS对心肌细胞存活率、caspase-3活性、Bcl-2/Bax蛋白表达水平及Bax细胞内分布的影响。实验分组:对照组、STS组、DIDS组。结果与STS组比较,DIDS能够明显抑制STS诱导的心肌细胞凋亡发生,心肌细胞存活率增加,caspase-3活性水平降低(P<0.01)。对照组、STS组和DIDS组在全细胞水平上Bcl-2、Bax表达差异无显著性(P>0.01),在亚细胞水平上发现STS组有明显的Bax蛋白从胞质向线粒体转位,DIDS可以抑制STS诱导的Bax线粒体转位。结论DIDS抑制心肌细胞凋亡可能与抑制促凋亡分子Bax由胞质向线粒体转位有关。     

参乌冠心颗粒剂对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Fas、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨中药复方参乌冠心颗粒剂防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法采用异丙肾上腺素连续多点皮下注射,复制大鼠心肌缺血动物模型。运用DNA末端标记(TUNEL)法,观察复方参乌冠心颗粒剂对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Fas、Bcl-2蛋白表达的影响。结果①参乌冠心颗粒剂有明显的抗心肌缺血作用。②参乌冠心颗粒剂可显著下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。③参乌冠心颗粒剂可能通过抑制和阻断心肌细胞过度凋亡的发生而起到保护心肌的作用。结论通过调节缺血心肌Fas、Bcl-2基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生,说明中药复方参乌冠心颗粒剂具有防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制。     

丹参粉针剂对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨丹参粉针剂对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞凋亡的作用。方法18只引种繁殖的雄性SHR随机分成3组,每组6只对照组育至第8周处死;丹参组从第8周给药,丹参粉针剂每天1 g·kg-1腹腔注射,第18周处死;高血压组用相同容量蒸馏水替代丹参针腹腔注射,余同丹参组。测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)及左心室重量指数(LV-MI) ,采用TdT介导的原位末端缺口标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,用S-P免疫组化法检测心肌细胞Bcl-2基因蛋白表达。结果与对照组比较,高血压组SBP、LVMI、心肌细胞凋亡指数(AI)显著增加,Bcl-2蛋白阳性表达指数(PEI)降低;与高血压组比较,丹参组LVMI、AI显著降低,PEI增高,差异均有统计学意义。结论长期应用丹参粉针剂治疗,能显著上调SHR心肌细胞Bcl-2基因蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡,预防高血压左室肥厚的形成。     

河豚毒素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的研究河豚毒素（TTX）心脏停搏液对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法取Wistar大鼠24只,建立Langendorff-Neely离体心脏灌注模型,随机分为3组（n=8）：基础组、STH-2组、TTX组。用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化测定凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53的表达,Westernblot检测Bcl-2蛋白表达。结果STH-2组凋亡指数（AI）（11.20±0.79）%高于TTX组（6.92±1.10）%和基础组（1.34±0.23）%（P〈0.01）。TTX组Bcl-2的PEI为（22.63±1.10）%高于STH-2组（13.51±0.67）%和基础组（2.52±0.58）%（P〈0.01）;STH-2组Bax的PEI为（8.04±0.57）%高于TTX组（6.05±0.46）%和基础组（2.14±0.57）%（P〈0.01）。TTX组Bcl-2/Bax为3.78±0.41高于STH-2组1.75±0.15（P〈0.01）。TTX组Bcl-2的相对蛋白含量为（86.1±0.98）%高于STH-2组（53.2±1.76）%和基础组（23.7±2.61）%（P〈0.01）。p53蛋白在各组均未见明显阳性表达。结论与STH-2比较,TTX能减少缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡数,其抗凋亡的机制可能与上调Bcl-2表达,下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值有关。     

涎腺黏液表皮样癌中P53、Bcl-2蛋白和Cyclin D1的表达及临床意义

目的探讨P53蛋白、肿瘤抗凋亡蛋白Bcl-2和Cyclin D1在涎腺黏液表皮样癌（MEC）中表达的临床意义。方法采用免疫组织化学方法,分别检测P53、Bcl-2及Cyclin D1在26例MEC和15例多形性腺瘤（PAS）中的表达情况。结果P53和Cyclin D1在PAS组中无表达,在MEC组中阳性表达率分别为62%及73%,与对照组（PAS）比较差异有统计学意义（P〈0.01）。Bcl-2在PAS组中表达率为47%,MEC组中表达率为60%,比较差异无统计学意义（P〉0.05）。MEC组中P53和Cyclin D1表达与临床分期、组织分级和有无淋巴结转移组间比较差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）;Bcl-2表达在临床分期组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,在组织分级和有无淋巴结转移组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论联合检测P53、Bcl-2和Cyclin D1有助于评价肿瘤患者的预后。     

奈达铂与鼻咽癌相关蛋白P53、Bcl-2、caspase的表达水平与相关性分析

目的 观察奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响,探讨奈达铂与鼻咽癌相关蛋白P53、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、caspase的表达水平与相关性分析.方法 分析不同浓度的奈达铂(0 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml、20 μg/ml)和作用不同时间(12 h、24 h、36 h、48 h)对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响;分析不同浓度的奈达铂对CNE-2细胞P53、Bcl-2、caspase蛋白表达水平的影响.结果 使用MTT法检测不同浓度的奈达铂对CNE-2细胞增殖的影响,随奈达铂浓度的升高OD值逐渐降低(P<0.05),且随着奈达铂作用时间的延长OD值逐渐降低(P<0.05).形态学可见:奈达铂浓度0 μg/ml时CNE-2细胞增值迅速、细胞饱满,形态规则;奈达铂作用下细胞增值减慢,细胞变圆、边缘模糊;使用流式细胞仪检测不同浓度的奈达铂对CNE-2细胞凋亡率可见随着奈达铂浓度的升高细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05);使用免疫组化光密度定量检测不同浓度的奈达铂对CNE-2细胞P53、Bcl-2、caspase蛋白表达水平的影响,可见随着奈达铂浓度的升高P53、Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),caspase蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05).结论 奈达铂能够明显抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖和促进凋亡,其可能与抑制P53、Bcl-2蛋白表达和促进caspase蛋白表达有关.     

内源性糖皮质激素对酒精性股骨头缺血坏死骨细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的 探讨内源性糖皮质激素(EGC)与酒精性股骨头缺血坏死骨细胞凋亡以及相关蛋白p53和Bcl-2的关系。方法 家兔90只,随机分为三组,灌胃法建模,实验组予含50％乙醇的烈性白酒8ml·kg-1·d-1,干预组给予氨鲁米特25mg·kg-1·d-1,对照组只给等量生理盐水。1~6个月分批处死,检测血清中EGC浓度、骨细胞凋亡、p53和Bcl-2蛋白的表达。结果 实验组血清EGC浓度高于干预纽和对熙组(P<0.01)。2个月时起实验组骨细胞凋亡数明显高于干预组和对照组,但干预组与对照组之间差异无显著性(P>0.05);3、6个月时,凋亡细胞逐渐增多,三组间差异均有显著性(P<0.05)。第2个月时骨细胞Bcl-2和p53蛋白阳性细胞数,实验组与对照组之间差异有显著性(P<0.05),干预组与实验室和对照组之间差异无显著性;3、6个月时,三组间差异均有显著性(P<0.05)。结论 过量饮酒后所致的EGC浓度增加使p53蛋白上调和Bcl-2蛋白下调是引起股骨头骨细胞凋亡的重要原因。     

川芎嗪对儿茶酚胺诱导大鼠心肌损伤时Bcl-2和Fas蛋白表达的影响

目的 :观察川芎嗪对儿茶酚胺诱导大鼠心肌损伤时心肌细胞Bcl 2和Fas蛋白表达的影响。方法 :采用皮下多点注射异丙肾上腺素 (ISO ,5mg·kg- 1)每天 1次 ,连续 3d ,诱导大鼠心肌损伤 ,采用免疫组化方法检测Bcl 2和Fas蛋白的水平 ,并利用图像分析系统分析蛋白阳性表达区域平均光密度值。结果 :损伤组和川芎嗪保护组心肌细胞Bcl 2蛋白表达较对照组均显著升高 (P <0 .0 1 ) ,损伤组Fas蛋白水平较对照组也显著升高 (P <0 .0 1 ) ,川芎嗪保护组的Fas蛋白水平较损伤组显著下降 (P <0 .0 1 ) ,且Bcl 2 Fas比值也较损伤组和对照组明显增加。川芎嗪保护组的病理损伤程度明显低于损伤组。结论 :川芎嗪可抑制儿茶酚胺诱导的心肌损伤时心肌细胞中促凋亡基因Fas的表达 ,提高心肌细胞中Bcl 2 Fas比值     

冬凌草乙素诱导GBC-SD细胞的凋亡及对Bcl-2、p53、Fas/APO-1、C-myc表达的影响

目的　探讨冬凌草乙素对人胆囊癌GBC SD细胞增殖抑制和诱导调亡的机制。方法　不同浓度的冬凌草乙素处理GBC SD细胞后 ,用MTT法检测GBC SD细胞的存活率 ,通过倒置显微镜、扫描电子显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计观察和分析凋亡细胞 ,用免疫组织化学法和流式细胞仪检测细胞内Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达。结果　冬凌草乙素浓度依赖性地抑制GBC SD细胞增殖及诱导其凋亡 ;药物作用 2 4h后 ,细胞内Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达有不同程度的下调 ;Caspase 3活性与凋亡程度相关。结论　冬凌草乙素抑制GBC SD细胞的增殖和诱导其凋亡与Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达有关     

醛固酮受体拮抗剂对心肌细胞凋亡的影响

目的研究醛固酮受体拮抗剂螺内酯对急性心肌梗死心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的作用。方法通过结扎左冠状动脉前降支造成大鼠左室大面积心肌梗死模型。SD大鼠随机分为心肌梗死对照组(AMI组,0.9%氯化钠溶液2ml/d灌胃,n=24)和螺内酯治疗组(Spi组,螺内酯20mg/kg/d,2ml灌胃,n=24),另设假手术组(Sham组,0.9%氯化钠溶液,2ml/d灌胃,n=24)。分别于术后2、7、14、21d观察下列指标:用流式细胞学方法测定非梗死心肌细胞凋亡率及Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与Sham组相比较,AMI组大鼠和Spi组非梗死区心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.01);BCL-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax蛋白表达升高(P<0.05);与AMI组比较,大鼠心肌细胞凋亡率和非梗死区心肌细胞BCL-2蛋白表达在2d、7d差异无统计学意义(P>0.05),14d、21d有所升高(P<0.05)。Bax蛋白表达在2d、7d差异无统计学意义(P>0.05),14d、21d有所降低(P<0.05)。结论螺内酯治疗可减少心肌细胞凋亡,同时增加凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达和减弱Bax蛋白的表达。     

环氧化酶-2和P53蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的研究环氧化酶-2（COX-2）和P53蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）组织和癌旁组织中表达情况,探讨其在NSCLC的发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP方法,检测NSCLC组织（40例）和癌旁组织（40例）中COX-2及P53蛋白表达情况。结果COX-2及P53蛋白在NSCLC组织中的表达显著高于癌旁组织。COX-2在NSCLC组织中的表达与组织类型、分化程度、肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移密切相关;在腺癌中的表达明显高于鳞癌,且随着肿瘤分化程度越低、肿瘤体积增大、分期越高及淋巴结转移增多,COX-2表达阳性率越高。P53蛋白在NSCLC组织中的表达与淋巴结转移密切相关,随着肿瘤淋巴结转移增多,P53蛋白表达阳性率越高。P53的表达与COX-2正相关,P〈0．01。结论COX-2及P53蛋白在NSCLC组织中呈高表达,它们在非小细胞肺癌的发生、发展过程中起重要作用,有助于判断NSCLC的发展、淋巴结转移及其预后。