急性胰腺炎大鼠细胞钙—镁ATP酶的变化及维生素E的影响

目的：研究急性胰腺炎（AP）大鼠细胞钙－镁ATP酶的变化及维生素E对其的影响，以进一步探讨维生素E在AP治疗中的作用机制。方法：将56只SD大鼠分为正常组、AP组及AP后维生素E治疗组3组，后两组在制备AP动物模型后分别于1、5、10h活体取材胰、肝组织，通过钙－镁ATP酶的酶组织化学染色检测其活性；同时通过逆转录聚合酶链反应（RT－PCR），测定其组织钙-镁ATP酶的表达。结果：实验大鼠胰、肝组织细胞钙－镁ATP酶酶组织化学染色阳性率AP组低于正常组（P＜0．05），且AP组5h的阳性率低于1h；维生素E治疗组的阳性率高于AP组（P＜0．05）且5h的高于1h。RT－PCR结果显示：胰腺组织钙－镁ATP酶的表达AP组最低，且AP组5h的表达低于1h；维生素E治疗组的钙－镁ATP酶表达高于AP组，且5h的表达高于1h；肝组织钙－镁ATP酶的表达各组均为阳性，各组间无显著性差异。结论：AP时细胞钙-镁ATP酶活性降低，可参与AP时细胞钙超载的发生和发展，由引引起细胞正常结构与功能的破坏，加重AP的病理变化。维生素E通过其抗氧化作用在治疗AP的过程中，提高细胞钙－镁ATP酶活性，减轻细胞钙超载，这可能是其作用机制之一。     

急性脑卒中患者血清钙、镁变化

钙和镁是人体必需的离子 ,它们参与催化和激活体内多种酶系统及能量代谢 [1 ] 。有关的研究结果表明 ,动脉粥样硬化及脑卒中均与缺镁、缺钙有关 ,缺镁、缺钙是发生脑卒中的危险因素 [2 ,3] 。本文通过观察急性脑卒中患者血清镁、钙水平 ,探讨其在脑卒中发病机制中的作用 ,为镁、钙制剂在临床中的应用提供理论依据。1　资料与方法1.1　一般资料　 6 2例脑卒中患者均为我院 1995年 1月～2 0 0 1年 1月的住院患者 ,均于发病当天入院。男性 2 8例 ,女性 34例 ,年龄 30～ 85岁 ,平均年龄 6 0 .5 6岁。其中脑梗塞(CI)和脑栓塞 (DM)患者 2 6例 ,…     

细胞内钙超负荷在大鼠胆汁性急性胰腺炎发病机理中的作用

细胞内钙超负荷在大鼠胆汁性急性胰腺炎发病机理中的作用沈骥吴宗平肖华宋永慧黄建民刘浦青凡严律南我们用荧光指标剂Ｆｕｒａ－２／Ａｍ测定了急性胰腺炎（ＡＰ）大鼠胰腺病理细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），同时观察胰腺组织病理变化，以探讨细胞内钙超负荷...     

肾结石患者红细胞膜ATP酶活性变化及相关性研究

目的：探讨肾结石患者红细胞膜Ca^2 -Mg^2 -ATP酶（Ca^2 -Mg^2 -ATPase)的活性变化与肾结石发生发展的相互关系。方法：参照Shalev法检测25名正常人和30例肾结石患者红细胞膜Ca^2 -Mg^2 -ATPase活性；采用原子吸收火焰法测定红细胞内Ca^2 和Mg^2 浓度，并进行比较分析。结果：肾结石患者红细胞膜Ca^2 -Mg^2 -ATPase活性明显增加，与正常对照组比较有显著性差异（P＜0．01）；而其红细胞内Ca^2 含量明显下降，Mg^2 含量则明显升高（P均＜0．01）。结论：肾结石患者红细胞膜Ca^2 -Mg^2 -ATPase活性异常增加可能是导致或加速肾结石发生发展的原因之一。     

妊高征患者红细胞钙、镁和环核苷酸含量变化

目的 探讨妊高征患者红细胞内外的Ｃa^2 、Ｍg^2 和环磷酸腺苷（cＡＭＰ）、环磷酸鸟苷（cＧＭＰ）的含量变化，相互关系及与妊高征发病机制的关系。方法 采用生化方法测定２５例妊高征患者和２７例政党晚期妊娠妇女红细胞膜ＡＴＰ酶活性１红细胞内外Ｃa^2 、Ｍg^2 含量；采用竞争性蛋白质结合分析方法测定血浆cＡＭＰ、放射免疫方法测定cＧＭＰ。结果 妊高征组红细胞膜Ｎa^ -、K^ -ATP酶和Ｃa^2 －ＡＴＰ酶活性明显降低（Ｐ＜０.００１），而Ｍg^2 －ＡＴＰ活性未见改变。红细胞内Ｃa^2 含量显著增高（Ｐ＜０.０１）。血浆Ｃa^2 、Ｍg^2 的浓度显著低于对照组（Ｐ＜０.０５），而血浆cAMP和cＧＭＰ的浓度显著增高（Ｐ＜０.０５）。妊高征组的平均动脉压（ＭＡＰ）与红细胞膜的Ｃa^2 -、Na^ -、K^ -ATPase的活性呈负相关，与Ｃa^2 、cＡＭＰ和cＧＭＰ呈正相关。Ｃa^2 －ＡＴＰ酶与Ｃa^2 呈负相关；Ｃa^2 与cＡＭＰ和cＧＭＰ呈正相关。结论 在妊高征的发生机制中缺镁比缺钙更有意义。细胞Ｃa^2 转运障碍和cＡＭＰ、cＧＭＰ的代谢异常可能与妊高征的发生有关，它们在妊高征的发展和转归中起着举足轻重的作用。     

柴芩承气汤减轻急性胰腺炎大鼠胰腺钙超载的机制研究

目的：观察柴芩承气汤（Chaiqinchengqi decoction,CQCQD）对急性胰腺炎大鼠胰腺组织肌浆网钙ATP酶（sarcoendoplasmic reticulum Ca2＋-ATPase,SERCA）mRNA表达的影响。方法：30只SD大鼠随机分成正常对照组、模型组及CQCQD组。采用蛙皮素腹腔注射法建立急性胰腺炎大鼠模型。逆转录聚合酶链式反应检测胰腺组织SERCA1和SERCA2 mRNA表达的变化;激光共聚焦显微镜检测腺泡细胞内钙离子浓度,并比较各组大鼠胰腺组织病理变化。结果：SERCA1 mRNA在正常胰腺和急性胰腺炎胰腺腺泡细胞均不表达。模型组与正常对照组比较,腺泡细胞SERCA2 mRNA表达下调,表达率为0.536（P=0.001）;CQCQD组与模型组比较,腺泡细胞SERCA2 mRNA的表达上调,表达率为1.803（P=0.035）。模型组大鼠细胞内钙离子的荧光强度高于正常对照组及CQCQD组（P〈0.05）;CQCQD组大鼠胰腺组织的病理评分低于模型组（P〈0.05）。结论：CQCQD可以通过上调SERCA2 mRNA表达,减缓胰腺细胞内钙超载,减轻胰腺组织的病理改变。     

重症急性胰腺炎大鼠空肠酶组织化学的变化

目的观察重症急性胰腺炎(SAP)时空肠组织酶活性的变化。方法将大鼠随机分为假手术组(SO组,开腹后牵拉十二指肠、胰腺)、SAP组(用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠复制SAP模型)、谷氨酰胺(Gln)治疗组(SAP+Gln组,制作SAP模型后用Gln治疗),于术后24h、48h、72h分批处死动物,用组织化学染色法对空肠组织中碱性磷酸酶(ALP)、ATPase酶、细胞色素C氧化酶(CCO)、琥珀酸脱氢酶(SDH)进行染色,观察比较酶活性变化及其规律。结果SAP组ALP、ATPase、CCO、SDH活性明显降低,且随病程发展呈进行性下降,经过Gln治疗后酶的活性显著恢复。结论SAP时肠道功能随病情进展而下降,谷氨酰胺具有保护肠道功能的作用。     

胰腺腺泡细胞钙超负荷在诱发大鼠由水肿性向坏死性胰腺炎转变中 …

OBJECTIVE: To investigate the potential of pancreatic acinar cell calcium overload in the conversion of acute edematous pancreatitis (AEP) to necrotizing pancreatitis (ANP). METHODS: Ninety-six Sprague-Dawley rats were randomized in three experimental groups. Sham-operated control (Group I) AEP (Group II) was induced by pancreatic duct ligation and intravenous injection of bombesin (100 micrograms/kg) and secretin (10 micrograms/kg). ANP (Group III) was induced same as group II but with a large dose of dextran 110,000(500 mg/kg) intravenously. Pancreatic acinar cell Ca2+ overload was studied using fluorescent probe Fura2. Cytosolic free Ca2+ concentration ([Ca2+]i) in isolated pancreatic acinar cells and Ca(2+)-ATPase activity in pancreatic cell plasma membranes were determined 1, 3, 6, 9 h respectively after treatment. RESULTS: The results showed that pancreatic acinar cell [Ca2+]i was elevated at 1 h[(213 +/- 19) nmol/L, P < 0.05] and increased to (464 +/- 29) nmol/L at 6 h(P < 0.05) in rats with ANP, pancreatic cell plasma membrane Ca(2+)-ATPase activity decreased significantly from (29.8 +/- 0.4) nmol.min-1.mgp-1 at 1 h to (18.6 +/- 0.5) nmol.min-1.mgp-1 at 9 h in rats with ANP (P < 0.05). CONCLUSIONS: In ischemia-induced conversion of AEP to ANP, there exists Ca2+ overload in the pancreatic acinar cells. The decreased pancreatic cell plasma membrane Ca(2+)-ATPase activity may be an important reason for acinar cell Ca2+ overload in the development of acute pancreatitis.     

细胞凋亡在大鼠急性胰腺炎发病机制的探讨

目的：探讨胰腺腺细胞凋亡和急性胰腺炎发病机制之间的关系。方法：用Chetty法制作大鼠的ANP模型，术后动态测定对照组、ANP组及大黄素 治疗组血淀粉酶，并取胰组织作病理检查，同时用TUNEL法分析腺泡凋亡情况。结果：血清淀粉酶在0h三组间无差别；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著差异（P＜0．01）；36h治疗组与ANP组之间无显著差异（P＞0．05）；二组与对照之间有显著差异（P＜0．01）；胰腺组织变化及细胞凋亡在0h三组间无差别；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著差异（P＜0．01）；30h及36h治疗组与ANP组之间有显著差异（P＜0．01）。结论：胰腺腺细胞凋亡参与急性胰腺炎的发病过程，且与其病情严重程度呈负相关，表明细胞凋亡在AP的发生和发展过程中起着一定作用。     

急性胰腺炎与细胞因子

不少急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者症状轻微,病情呈自限性,但对于重症急性胰腺炎(severe acute pancreati-tis,SAP)患者确有接近30%的病死率,继发感染时则更高。近年来,随着对AP发病机制研究的深入,细胞因子在AP发生、发展过程中起的作用愈来愈受到重视。本文就近几年来细胞因子在AP发病机制中的作用做一综述。细胞因子是指由机体的免疫细胞和非免疫细胞合成和分泌的、参与免疫调节和炎症反应的一组低相对分子质量的蛋白质(16～25kDa),参与并介导细胞间的相互作用。已知细胞因子达30多种,各自有着不同的结构和生理学特性。细…     

Duchenne型肌营养不良红细胞膜糖、脂质及Ca~(2+)-Mg~(2+)ATP酶的变化

对10例Duchenne型肌营养不良(DMD)患者红细胞膜进行了膜糖、脂质及Ca~(2+)-Mg~(2+)ATP酶活力的研究。结果为DMD红细胞膜唾液酸显著减少,而中性糖含量无变化;膜磷脂含量无明显改变,但膜胆固醇显著增加,磷脂/胆固醇之比显著降低,膜Ca~(2+)-Mg~(2+)ATP酶活力显著升高。表明DMD红细胞膜有组成和功能上的改变。     

7-氯苄基四氢巴马汀对大鼠心肌肥厚及左心室肌原纤维Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATP酶活力的影响

目的观察 7-氯苄基四氢巴马汀 ( 7-chlor -BTHP)对大鼠心肌肥厚和心室肌原纤维质膜Ca2 -Mg2 -ATP酶活力的影响。方法用L -甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚 ,然后观察 7-chlor -BTHP对大鼠心肌肥厚及左心室肌原纤维Ca2 -Mg2 -ATPase的影响 ,以普萘洛尔 (Pro)作为阳性对照。结果经过 7-chlor-BTHP治疗 3天后 ,心肌肥厚明显改善 ,Ca2 -Mg2 -ATPase活力明显降低。结论 7-chlor-BTHP能明显消退L -甲状腺素诱发的大鼠心肌肥厚 ,并能显著降低心室肌原纤维膜Ca2 -Mg2 -ATPase酶活力。     

急性胰腺炎大鼠血浆内皮素的变化及意义

应用牛磺胆酸钠溶液注入大鼠胆胰管内，诱发大鼠急性胰腺炎（ＡＰ）。术后１．６、１２ｈ分别检测血浆内皮素（ＥＴ）、胰组织血流量（ＰＢＦ）及灌注量（ＰＴＰ）、胰组织丙二醛（ＭＤＡ）和钙离子（Ｃａ６＾２＋）的变化，并探讨ＥＴ与其它指标的相关性。结果显示：与假手术组相比，ＡＰ大鼠术后随时间延长，ＥＴ、ＭＤＡ和Ｃａ＾２＋含量则递增，ＰＢＦ、ＰＴＰ呈递减。ＥＴ与ＰＢＦ、ＰＴＰ呈负相关（Ｐ〈０．０５）、与ＭＤＡ、     

心衰大鼠心肌SR Ca~(2+)泵活性和Ca~(2+)释放通道密度的变化及培哚普利干预的影响

目的　探讨ACEI干预慢性心衰对心肌肌浆网 (SR)Ca2 + 泵活性和Ca2 + 释放通道 (RyR2 )密度的影响及意义。方法　通过结扎大鼠左冠脉建立慢性心衰模型 ,以培哚普利进行干预 ,对照观察血流动力学、左室心肌SRCa2 + 泵活性、[3 H]-ryanodine与RyR2 最大结合量 (Bmax)、Kd 值。结果　与对照组 (C组 )相比 ,心衰组 (F组 )LVEDP显著升高 (P <0 0 1) ,+dp/dtmax、-dp/dtmax显著降低 (P <0 0 1) ,培哚普利组 (P组 )LVEDP显著低于F组 (P <0 0 1) ,+dp/dtmax、-dp/dtmax显著高于F组 (P <0 0 1)。F组心肌SRCa2 + 泵活性、[3 H]-ryanodine与RyR2 最大结合量Bmax显著低于C组 (P <0 0 1) ,也显著低于P组 (P <0 0 1) ,三组Kd 值无显著差异 (P >0 0 5 )。心肌SRCa2 + 泵活性与 +dp/dtmax、-dp/dtmax显著正相关 (r=0 5 16 1、0 6 172 ,P <0 0 1)。结论　培哚普利长期干预慢性心衰 ,能够改善心肌SRCa2 + 泵活性 ,增加RyR2 密度 ,可能与其改善心肌舒缩功能及心肌保护作用有关。     

胞外钙及胞内钙库钙在膀胱ICCs细胞自发性钙瞬变中的作用

目的 观察离体活膀胱肌条铺片中卡哈尔间质细胞(interstitial cells of cajal,ICCs)自发性钙瞬变,并检测胞外钙及胞内钙库钙对ICCs细胞自发性钙瞬变的影响,探讨ICCs细胞自发性钙瞬,变产生的机制.方法 制作离体膀胱肌条铺片,生理液灌流保持肌条铺片活性.待肌条自发性收缩活动出现后,Fluo-4负载肌条铺片,激光共聚焦显微镜观察其中ICCs细胞自发性钙瞬变,随后观察尼莫地平(Nimodipine)、2-氨基乙基二苯硼酸盐(2-aminoethoxydip henylborate,2-APB)、雷诺丁(Ryanodine)、毒胡萝卜素(Thapsigargin)及无钙、高钙生理液对ICCs细胞自发性钙瞬变的影响,探讨ICCs细胞自发性钙瞬变产生的机制.结果 可见离体活膀胱肌条铺片中平滑肌细胞和ICCs细胞均产生节律性A发性钙瞬变,平滑肌细胞钙瞬变频率较快,而ICCs细胞钙瞬变频率相对较慢.尼莫地平能完全抑制平滑肌细胞的自发性钙瞬变,但对ICCs细胞的自发性钙瞬变无显著影响.2-APB、雷诺丁、毒胡萝卜素及无钙生理液均可完全抑制ICCs细胞的自发性钙瞬变,高钙生理液可显著增加ICCs细胞自发性钙瞬变的频率.结论 细胞外钙离子通过非L型钙离子通道入胞及细胞内钙库放钙均参与ICCs细胞自发性钙瞬变的产生.     

低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸生精细胞线粒体结构、ATPase 活性及钙离子浓度的变化

目的：观察0.025~0.200 Gy X线低剂量电离辐射后3~24 h小鼠生精细胞线粒体结构、睾丸组织内ATPase和生精细胞钙离子浓度的变化,阐明线粒体结构与相关生物学功能改变在调控凋亡中的作用。方法：透射电镜检测小鼠睾丸生精细胞线粒体结构的改变;蛋白酶法检测ATPase活性的改变;以Fluo-3为探针,流式细胞术检测钙离子浓度（［Ca²⁺］i）的变化。结果：0.075 Gy照射后12 h,小鼠精原细胞与精母细胞线粒体肿胀、空泡化、嵴断裂;精子细胞核固缩,顶体囊泡结构模糊,核膜结构不清楚,线粒体空泡化。0.025~0.200 Gy照射后12 h,睾丸组织中Na⁺-K⁺-ATPase活性较0 Gy照射降低,其中0.050~0.200 Gy较0 Gy显著降低（P< 0.05）,Ca²⁺-ATPase活性均较0 Gy照射显著降低（P< 0.05）;生精细胞中［Ca²⁺］i也具有同样的剂量-效应关系,其中0.075 Gy照射后,较0 Gy显著降低（P< 0.05）。0.075 Gy照射后3~24 h,睾丸组织中Na⁺-K⁺-ATPase活性较0 h均显著降低（P< 0.05）;Ca²⁺-ATPase活性在3 h稍有升高后,6~24 h较0 h均显著降低（P< 0.05）;生精细胞中［Ca²⁺］i也具有相似的时程-效应关系。结论：低剂量电离辐射能够诱导小鼠睾丸生精细胞线粒体结构的改变;同时,其诱导ATPase活性和［Ca²⁺］i的变化具有剂量-效应与时程-效应规律性。     

慢性肺心病急性期患者红细胞膜Na~ -K~ -ATPase、Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATPase活性研究

应用酶学比色法测定３５例肺心病急性期患者及３０例健康人红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性，同时测定患者动脉血氧分压（ＰａＯ２）、动脉血二氧化碳分压（ＰａＣＯ２）。结果：患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降与对照组比差异十分显著（Ｐ＜０．０１）。患者组Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性与ＰａＯ２呈显著正相关；与ＰａＣＯ２呈显著负相关。表明：肺心病急性期红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降与严重缺氧、ＣＯ２潴留有关。Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降是引起肺心病急性期细胞内、外离子紊乱的重要因素。     

孔雀绿比色法同步测定大鼠成骨细胞膜Ca~(2+)-ATP酶和Na~+、K~+-ATP酶活性

为探索同步测定大鼠成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的方法。采用孔雀绿比色法测定磷以反映酶活性。结果显示：Ｃａ２＋浓度以及成骨细胞传代培养的代数是影响酶活性的重要因素。Ｃａ２＋有助于提高ＡＴＰａｓｅ活性。Ｃａ２＋浓度为４０μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＴＰａｓｅ活性较高。细胞传代越多，膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性越低。成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ。结论：孔雀绿比色法同步测定大鼠成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性，方法简便、灵敏、可靠。