孕酮对大鼠大脑皮质神经元氨基酸受体亚单位GBR1和NR2B表达的影响

目的:研究孕酮(PROG)对大鼠大脑皮质神经元氨基酸受体亚单位GBR1和NR2B表达的影响。方法:不同剂量(1,10,100μmol.L-1)的孕酮处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元,采用免疫细胞化学法测定神经元氨基酸受体亚单位GBR1和NR2B表达的变化。结果:与对照组相比,1,10,100μmol.L-1 PROG使GBR1表达分别增加45.9%、172.0%、211.6%(P<0.01),使NR2B表达分别增加42.1%、51.4%、88.4%(P<0.05或P<0.01)。结论:孕酮可增强氨基酸受体亚单位GBR1和NR2B的表达水平。     

褪黑素对下丘脑氨基酸神经递质的影响

应用纸电泳一双波长薄层扫描法测定了雄性小鼠下丘脑天冬氨酸（Ａｓｐ）．谷氨酸（Ｇｉｎ），及γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）３种神经递质的含量和褪黑素（ＭＴ）对其影响。结果发现；下丘脑内３种氨基酸神经递质含量均呈明显的昼夜节律性变化，ＭＴ使Ａｓｐ、ＧＡＢＡ的昼夜节律曲线上移，在１２：００及２０：００ｈ升高Ａｓｐ、ＧＡＢＡ作用明显。不同剂量的ＭＴ腹腔注射能够升高Ａｓｐ．ＧＡＢＡ含量，以５μｇ·ｋｇ－１剂量为强，脑室注射ＭＴ的效果更佳。然而，不同浓度，不同时ＩＭＭＴ给药均不影响下丘脑Ｇｌｕ水平。利血平化小鼠的Ａｓｐ、ＧＡＢＡ含量升高，Ｇｌｎ含量则下降、给利血平化动物注射ＭＴ，则ＭＴ对Ａｓｐ，ＧＡ－ＢＡ的影响消失，而使Ｇｌｎ含量进一步下降。提示：ＭＴ对Ａｓｐ、ＧＡＢＡ昼夜节律产生影响，这种影响可能通过单胺神经递质介导。     

胞磷胆碱注射液对大鼠脑缺血组织氨基酸神经递质的影响

目的:观察大鼠脑出血周边组织谷氨酸、γ氨基丁酸含量的变化;胞磷胆碱注射液对缺血周边组织谷氨酸、γ氨基丁酸含量的影响。方法:选择大鼠100只,体重250～300g。随机分组,假手术组4只,脑缺血组48只,胞磷胆碱注射液治疗组48只。在实验前后(4h,6h,12h,24h,72h,7d),各时间点选择8只大鼠,处死后测定谷氨酸(Glu)和γ氨基丁酸(GABA)含量。结果:胞磷胆碱注射液对脑缺血大鼠具有保护作用,能使氨基酸神经递质保持动态平衡。结论:胞磷胆碱注射液对大鼠脑缺血部位治疗有益。     

马桑内酯对培养大鼠大脑皮质神经元胞内游离钙的作用

AIM: To study the effect of Coriaria lactone (CL) on cytosolic free calcium ([Ca2+]i) of cultured neurons from cerebral cortex. METHODS: Primary neuron culture (14d) and AR-CM-MIC cation measurement system were used, the [Ca2+]i were measured. CL effect was observed by loading egtazic acid. RESULTS: The [Ca2+]i of cultured neurons (99.4-103.4) nmol.L-1 was elevated concentration-dependently by CL (25-500) mumol.L-1 (P < 0.01). This effect disappeared after loading egtazic acid 5 mmol.L-1, but reappeared after adding CaCl2 to 1 mmol.L-1. CONCLUSION: The [Ca2+]i of cultured neurons was elevated by CL, depending on extracellular Ca2+.     

天麻钩藤饮对早期帕金森病运动症状与血浆氨基酸类神经递质水平的影响

目的:探析天麻钩藤饮对早期帕金森病运动症状与血浆氨基酸类神经递质水平的影响。方法:选取2018年1月至2020年12月期间本院收治的82例早期帕金森病患者及20例健康体检者,将82例早期帕金森病患者依据治疗方法分为对照组（36例）及观察组（46例）,20例健康体检者设为正常组。对照组男19例,女17例,年龄（64.57...     

兴奋性氨基酸及尼莫地平对培养大鼠脑皮层神经元钙电流的影响

AIM: To study the effect of excitatory amino acid (EAA) and calcium channel blocker on neuronal calcium channels. METHODS: With path-clamp technique (whole-cell recording), the effects of Bay-K-8644, cesium glutamate, potassium aspartate, and nimodipine (Nim) on calcium currents (ICa) in cultured cortical neurons of neonatal rats were studied. RESULTS: ICa was raised obviously by Bay-K-8644 and glutamate. ICa was raised concentration-dependently by aspartate (0.5, 5, 50 mmol.L-1), with increasing rates 15% +/- 3%, 37% +/- 3%, and 53% +/- 6%, respectively. The inhibition of ICa was obvious while adding Nim in the bath solution. With Nim 10 mumol.L-1, the inhibitory rate was 46% +/- 4%. CONCLUSION: EAA had increasing effects on neuronal calcium currents and Nim inhibited Ca2+ influx in neurons.     

丙泊酚对大鼠海马突触体释放谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

目的观察丙泊酚对大鼠海马突触体谷氨酸和γ氨基丁酸(GABA)Ca2+依赖性释放和非Ca2+依赖性释放的影响。方法制备突触体后用人工脑脊液(aCSF)孵育,分为7组,应用丙泊酚(propofol)的浓度分别为3(Pro3组)、10(Pro10组)、30(Pro30组)、100(Pro100组)和300μmol·L-1(Pro300组),脂肪乳剂对照组加入脂肪乳(Intralipid组),空白对照组(Control组)不加入任何药物。在观察Ca2+依赖性释放时,加入二氢海人藻酸和哌啶酸;在观察非Ca2+依赖性释放的时候,去除aCSF中的Ca2+。在37℃的条件下,应用20μmol·L-1藜芦定或30mmol·L-1KCl诱发递质释放。应用反相高效液相色谱法测定aCSF中谷氨酸和GABA的浓度。结果①Ca2+依赖性递质释放:应用藜芦定时,Pro30、Pro100和Pro300组的谷氨酸和GABA释放量低于Intralipid组(P<0.01或P<0.05);应用KCl时,各组的谷氨酸和GABA释放量无差异(P>0.05)。②非Ca2+依赖性释放:各组应用藜芦定和KCl诱发的谷氨酸和GABA释放量无差异(P>0.05)。结论丙泊酚可以抑制Ca2+依赖性谷氨酸和GABA的释放,而对非Ca2+依赖性谷氨酸和GABA释放无影响。     

头孢曲松对甲基苯丙胺致大鼠行为及纹状体氨基酸等递质含量改变的影响

目的观察甲基苯丙胺(METH)急性处理时致神经损伤情况,以及纹状体中氨基酸类神经递质谷氨酸(glutamate,Glu)、单胺类神经递质多巴胺(dopamine,DA)及其代谢产物DOPAC的变化。方法建立METH急性毒性模型,同时利用药物头孢曲松进行干预,利用清醒动物脑微透析技术检测神经递质含量的变化。结果 METH急性给药组与盐水对照组相比,刻板行为明显增加(P<0.01);急性给予METH后,胞外Glu浓度持续增加,在本试验检测时间(0～6 h)范围内,与基础平衡值相比,在给药5.5 h时Glu浓度已增加450%。胞外DA水平在1 h达峰值,与基础平衡值相比,浓度增加1248.6%。与METH组相比,头孢曲松预防给药可明显降低大鼠纹状体胞外Glu浓度(P<0.05)。结论 METH急性处理能引起纹状体中胞外谷氨酸的含量明显增加,导致神经损伤;METH的神经毒性与兴奋性氨基酸的过度释放密切相关。     

4-氨基吡啶对牛磺酸调节突触体氨基酸释放的影响

AIM　To elucidate the mechanism of taurine-regulated amino acid release from synaptosomes. METHODS　Endogenous aspartate, glutamate and GABA release from cortical synaptosomes were measured by high performance liquid chromatography using stepwise elution system, Glutamate release was monitored by continuous fluorometry. RESULTS　4-Aminopyridine (3.0×10^-2 mol*L^-1) counteracted the taurine-induced inhibition of glutamate overflow (P<0.05), while aspartate and GABA release was not affected. Nimodipine (10^-5 mol*L^-1) combined with 4-aminopyridine was shown to decrease glutamate release (P<0.05). CONCLUSION　Taurine may regulate glutamate release through presynaptic L-type calcium channel and aslo act on Asp-and GABA-nereve terminal to regulate Asp and GABA release in rat cortex.     

超低分子肝素对原代培养大鼠大脑皮质神经元化学诱导损伤的保护作用

目的探讨超低分子肝素(ULMWH)对不同化学诱导损伤大脑皮质神经元的保护作用。方法谷氨酸、叠氮钠、KCl和咖啡因诱导损伤原代培养的大鼠大脑皮质神经元,观察神经元存活率、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)。结果ULMWH(0.01～1.0mg.L-1)预处理24h可显著提高谷氨酸损伤神经元的存活率,降低细胞LDH的漏出量和[Ca2+]i,高浓度(1.0mg.L-1)时对叠氮钠引起的神经元损伤也有一定的保护作用,但对咖啡因和KCl所致的神经元损伤无影响。结论ULMWH对谷氨酸和叠氮钠所致大鼠大脑皮质神经元损伤有一定的保护作用,可能与其抑制[Ca2+]i升高有关;但不能对抗KCl和咖啡因所致的皮质神经元损伤。     

硫喷妥钠对大鼠前额皮层突触体谷氨酸和γ-氨基丁酸释放的影响

目的　观察硫喷妥钠对大鼠前额皮层突触体谷氨酸和γ 氨基丁酸 (GABA)Ca2 + 依赖性和Ca2 + 非依赖性释放的影响。方法　制备大鼠前额皮层粗突触体。用人工脑脊液(aCSF)孵育 ,分为 5组 :基础释放组 (Base)、硫喷妥钠 10μmol·L-1组 (THS10 )、硫喷妥钠 30 μmol·L-1组 (THS30 )、硫喷妥钠 10 0 μmol·L-1组 (THS10 0 )、硫喷妥钠 30 0 μmol·L-1组 (THS30 0 ) ,每组含 8份突触体。向每组各等份突触体反应液中加入不同浓度的硫喷妥钠 (Base组不加入 ) ,于 37℃条件下应用 30mmol·L-1KCl或 2 0 μmol·L-1veratridine诱发谷氨酸和GABA释放。应用反相高效液相色谱法 (RP HPLC)测定各反应液中的谷氨酸和GABA浓度。观察谷氨酸和GABACa2 + 非依赖性释放时 ,aCSF中不含Ca2 + 。结果　硫喷妥钠 30、10 0、30 0 μmol·L-1可显著抑制KCl或vera tridine诱发的Ca2 + 依赖性谷氨酸释放 (P <0 0 1,P <0 0 1,P <0 0 1) ,IC50 分别为 2 5 6 μmol·L-1和 2 6 3μmol·L-1;THS10与THS30组 ,THS30与THS10 0组之间差异有显著性 (P <0 0 1,P <0 0 1)。硫喷妥钠各浓度组中 ,Ca2 + 依赖性GABA释放及Ca2 + 非依赖性谷氨酸和GABA释放水平与Base组比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　硫喷妥钠可剂量依赖性地抑制大     

大脑皮层神经细胞低密度原代培养

本文探讨了大脑皮层神经细胞低密度原代培养方法，利用此方法培养了１５批大脑皮层神经细胞，建立了稳定的低密度培养模型，并对低密度培养各阶段的神经细胞形态特征进行了系统观察，同时对低密度培养神经细胞的细胞选择，形态特征、底物的作用及低密度培养的神经细胞在突出构建、离子通道、神经元通讯研究等方面的作用进行了讨论。     

兴奋性氨基酸及尼莫地平对培养大鼠脑皮层神经元钙电流的影响(英文)

目的:探讨兴奋性氨基酸(EAA)及钙通道阻断剂对神经元钙通道的影响,方法:用全细胞膜片箝技术研究Bay-K-8644、谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)及尼莫地平(Nim)对培养大鼠皮层神经元钙电流(I_(Ca))的作用,结果:Bay-K-8644及Glu明显增加I_(Ca) Asp 0.5,5及50 mmol·L~(-1)浓度依赖性地增加I_(Ca)(分别为14.8％,37.1％和53.1％),细胞浴液中加入Nim 10 μmol·L~(-1),I_(Ca)被抑制46.2％,结论:EAA使神经元钙电流增加,Nim抑制神经元的Ca~(2 )内流。     

蛇床子素对脑缺血/再灌注大鼠海马LTP及氨基酸含量的影响

目的研究蛇床子素对脑缺血/再灌注大鼠海马齿状回突触传递活动及海马内氨基酸含量的影响。方法 SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、蛇床子素组(25.0、12.5 mg.kg-1)和尼莫地平组(1.0 mg.kg-1),腔内线栓法制作右侧大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血后2 h再灌。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法记录大鼠脑梗死体积、Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力、电生理学方法记录中枢突触传递长时程增强(long-term potentiation,LTP)现象、高效液相色谱法记录大鼠海马内氨基酸含量的变化。结果蛇床子素(25.0、12.5 mg.kg-1,ip)可减少大鼠脑梗死体积,剂量依赖性地缩短大鼠寻找站台的时间,增强大鼠海马齿状回高频刺激(high frequency stimulation,HFS)诱导的LTP,降低再灌后72 h内海马内谷氨酸含量,蛇床子素(25.0 mg.kg-1)对于γ-氨基丁酸产生先降低后升高的调节作用,与尼莫地平组作用结果一致。结论蛇床子素改善学习记忆障碍、增强脑缺血/再灌注大鼠海马齿状回HFS诱导的LTP的作用,与调节海马内谷氨酸、γ-氨基丁酸水平有关。     

脱氢表雄酮对大鼠大脑皮质神经元氨基酸受体亚单位NR2B和GBR1表达的影响

目的研究脱氢表雄酮(DHEA)对大鼠大脑皮质神经元氨基酸受体亚单位NR2B和GBR1表达的影响。方法不同剂量(1、10、100μmol.L-1)的DHEA处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元,采用免疫细胞化学法测定神经元氨基酸受体亚单位NR2B和GBR1表达的变化。结果与对照组相比,低、中、高剂量DHEA使NR2B表达分别增加15.6%、19.9%、49.4%(P<0.05或P<0.01);使GBR1表达分别增加4.3%(P>0.05)、14.5%、58.5%(P<0.05或P<0.01)。结论DHEA可增强氨基酸受体亚单位NR2B和GBR1的表达水平。     

Effect of ligustrazine on levels of amino acid neurotransmitters in rat striatum after cerebral ischemia-reperfusion injury

This study aimed to evaluate the effect of ligustrazine on levels of amino acid transmitters in the extracellular fluid of striatum following cerebral ischemia/reperfusion (I/R) in male Sprague-Dawley rats. A microdialysis cannula guide was implanted into the right striatum. After recovery, animals underwent a sham operation or middle cerebral artery occlusion (MCAO). Those that developed cerebral ischemia after MCAO were randomized to receive propylene glycol salt water and ligustrazine respectively. Striatal fluid samples were collected from all animals at 15-min intervals after treatment and were subjected to HPLC analysis of aspartic acid, glutamic acid, taurine, and γ-amino butyric acid. Upon the last sample collection, animals were sacrificed and brain tissue specimens were collected for triphenyltetrazolium chloride staining and NeuN staining. Compared with the sham operation, MCAO induced significant neurological deficits and increased striatal concentrations of the four neurotransmitters assessed in a time-dependent manner (P < 0.01). Ligustrazine effectively attenuated the detrimental effects of MCAO on the brain. These observations suggest that ligustrazine as a novel cerebral infarction-protective agent may have potential clinical implications for I/R-related brain damage.     

固定化谷氨酸脱羧酶转化γ-氨基丁酸的研究

目的用固定化谷氨酸脱羧酶转化制备γ-氨基丁酸(GABA)。方法以海藻酸钠与明胶为协同作用载体包埋固定化酶,考察影响固定化酶活性的因素,获得固定化酶的优化条件,并将酶应用于制备GABA。结果海藻酸钠、明胶、氯化钙和戊二醛浓度分别为2.5%,1.0%,3.0%和0.3%,硬化时间4 h,固定化酶的相对活性最高,酶活回收率达到65.3%。以谷氨酸为底物,固定化谷氨酸脱羧酶为催化剂,采用填充床反应器连续制备GABA,连续反应60 h,酶相对活性仍保持在初始值的76.9%,谷氨酸转化率为98.7%。结论该固定化谷氨酸脱羧酶可应用于生物转化法连续制备GABA。     

吗啡对原代培养大鼠皮质神经元神经甾体水平的影响

目的探讨吗啡慢性处理对大鼠大脑皮质神经元合成释放神经甾体水平的影响及其机制。方法建立原代培养大鼠大脑皮质神经元吗啡依赖样模型,固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用法测定细胞培养液中神经甾体水平;免疫印迹法检测神经元中p-CREB水平。结果与盐水对照组相比,吗啡(1μmol.L-1)处理使PREG和DS的水平降低(P<0.01);μ-受体激动剂DAMGO使PREG、DS和PS水平下降,AP水平增高;与吗啡单独处理组相比,μ-阿片受体拮抗剂CTAP与吗啡联合处理使PREG增加(P<0.01)。与盐水对照组相比,吗啡或DAMGO慢性处理均可增加神经元内p-CREB的水平(P<0.01);与吗啡处理组相比,CTAP抑制吗啡诱导的p-CREB的增加。结论μ-阿片受体参与了介导吗啡慢性处理对皮质神经元神经甾体合成释放的影响;神经元内p-CREB水平的变化反映了吗啡引起的神经元适应性改变,提示神经甾体水平的变化可能与吗啡依赖有关。