HSP70基因与睾丸生精细胞凋亡

HSP70基因是参与睾丸生精细胞凋亡的重要基因之一。现就睾丸生精细胞凋亡特点及其生理意义、HSP70基因研究及如何影响睾丸生精细胞凋亡等方面作一综述。     

睾丸生殖细胞凋亡与男性不育

自从ＫｅｒＪ于 1 972年首次提出细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)的概念以来 ,人们逐渐认同细胞凋亡是一种基因凋控的自主有序的死亡过程。在生理状态下 ,细胞凋亡参与体内正常细胞的更新和异常细胞的清除 ,对维持个体正常的生理过程和功能表达具有重要的生物学意义。这一过程的紊乱与多种疾病的发生密切相关 ,哺乳动物包括人的睾丸生精细胞凋亡发生紊乱 ,可能是引起男性不育的重要原因。因此 ,深入研究睾丸生殖细胞凋亡的本质及其凋控 ,对指导男性不育的治疗具有重大的现实意义。1　生精细胞凋亡的规律睾丸精子发生过程中的自发生殖细胞凋亡…     

特发性少精子症生精细胞增殖与凋亡变化的研究

目的 探讨特发性少精子症患者睾丸生殖细胞增殖与凋亡的病理生理机制。方法 选择特发性少精子症患者79例,行睾丸穿刺活检,所取睾丸组织采用免疫组织化学技术观察生精细胞增殖细胞核抗原的表达,采用原位3'羟基末端标记法观察生殖细胞的凋亡变化。同时以5 例暴死男性的睾丸作为正常对照组,经病理证实组织结构无异常。结果 与正常睾丸生精细胞相比,特发性少精子症患者增殖细胞核抗原增殖指数明显降低, P<0.001;而凋亡指数明显升高,P<0.01。结论 特发性少精子症患者精子减少的主要原因之一是由于生精细胞增殖能力减少及凋亡增加造成增殖与凋亡的平衡失调所致。     

睾丸内生精细胞凋亡与激素调控

生精过程中细胞凋亡一方面是维持正常精子数量和质量的重要机制，另一方面又是导致少精或无精症的重要原因之一。凋亡的诱发及调控因素很多，其中，雌二醇、睾酮、卵泡刺激素、促黄体生成素、催乳素、绒毛膜促性腺激素等激素在生精细胞的凋亡过程中发挥着重要的作用。本文就睾丸内生精细胞凋亡与激素调控之间的关系作一综述。     

睾丸高表达蛋白质HSD-14对小鼠精子发生的影响

目的 研究睾丸高表达基因HSD-14及其编码蛋白质对小鼠精子发生的影响.方法 利用本实验室构建的人睾丸特异ESTs文库,通过电子克隆方法获得一新基因命名为HSD-14基因.纯化原核表达的HSD-14蛋白,并制备兔多克隆抗体.通过HE染色观察腹腔注射HSD-14纯化蛋白或睾丸曲细精管显微注射HSD-14纯化抗体后小鼠睾丸组织的生精变化,并进行TUNEL凋亡检测.结果 电子克隆获得HSD-14基因,在原核表达系统中表达成功.小鼠腹腔注射HSD-14纯化蛋白或睾丸曲细精管显微注射HSD-14纯化抗体后,均发现曲细精管中生精细胞大量脱落,生精细胞的层次紊乱,管腔内有时可见成团脱落的生精细胞,附睾中几乎观察不到成熟精子.TUNEL凋亡检测结果表明,抗体注射组小鼠曲细精管中生精细胞(以精母细胞为主)凋亡程度较正常小鼠睾丸和免疫前血清注射组明显,且多数细胞停留在精母细胞甚至精原细胞的阶段.结论 HSD-14通过诱导精母细胞凋亡抑制小鼠精子发生.     

用蛋白质组学技术探讨补肾生精法对老龄大鼠睾丸生精功能影响的机制

目的：应用蛋白质组学技术研究补肾生精法对老龄大鼠睾丸生精功能影响的机制。方法：20只22月龄老龄雄性SD大鼠随机分为2组，每组10只，分别为老龄组（SC）和补’肾生精组（KT）。KT组灌胃给药补肾生精颗粒，连续用药60d。取附睾尾精子应用精子运动CASA分析技术，研究补肾生精法对衰老大鼠精子运动能力的影响。应用流式细胞仪检测技术，观察补肾生精颗粒对老龄大鼠睾丸生殖细胞凋亡率的影响。取大鼠右侧睾丸，应用双向凝胶电泳分析老龄组和补肾生精组大鼠睾丸表达差异蛋白。结果：与老龄组相比，补肾生精组大鼠精子密度明显增加（P〈0．05）；活动率和直线活动率显著上升（P〈0．001）；补肾生精组生殖细胞凋亡率明显下降（P〈0．05）。与老龄组相比，补肾生精组大鼠睾丸中有7种蛋白表达发生了显著变化，其中4种蛋白表达上调，3种下调。对7种差异表达蛋白点胶内酶切后进行质谱分析，其中5种蛋白分别鉴定为磷脂酰乙醇胺结合蛋白（PEBP），热休克蛋白8（HSP7C），磷酸丙糖异构酶（Triose-phosphate isomerase，TPIS），3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH），谷胱苷肽转移酶1（GSTM1-1）。结论：补肾生精法对老龄大鼠睾丸功能具有提高精子运动能力及减少其生殖细胞凋亡的作用。运用蛋白质组学技术，研究补肾生精法对衰老过程睾丸蛋白表达的影响，有助于在蛋白质组水平阐释中医肾主生殖，延缓睾丸衰老，改善睾丸生精功能的机制。     

睾丸生殖细胞凋亡的基因调控

细胞凋亡是在基因控制之下的细胞自我消亡过程。许多实验提示．细胞凋亡涉及一个基因表达的级联反应(casade)．睾丸生殖细胞的凋亡同细胞的增殖分化一样受多种基因的控制。凋亡相关基因分为凋亡刺激基因和凋亡抑制基因．他们表达的基因产物具有协同或拮抗作用。维持着一种动态平衡。共同控制生精细胞的凋亡。     

人类生精细胞凋亡的调控因素

细胞凋亡(apoptosis)是由多种因素调控的细胞程序性死亡,在生精细胞的发育中具有重要影响.现已证实,睾丸生精细胞退化是通过细胞凋亡实现的.在精子发生的各个阶段都存在生精细胞凋亡,但不同时期凋亡细胞数目有很大差异,精原细胞和精母细胞凋亡最多,而精子细胞凋亡很少发生.睾丸就是通过精原细胞不断增殖,同时过量的受到损伤的生精细胞不断凋亡,来控制精子细胞数目,维持精子发生的动态平衡.本文就睾丸生精细胞凋亡的调控因素作一综述.     

睾丸支持细胞生殖毒性研究进展

睾丸支持细胞是雄性动物睾丸曲细精管内唯一的体细胞,可以维持和调节正常的生精过程,在精子发育成熟过程中具有极为重要的作用。睾丸支持细胞结构和功能的完整性对生精细胞增殖和成熟十分关键,其改变可导致生精细胞脱落和死亡。本研究将近年来关于环境毒物、药物通过睾丸支持细胞产生生殖毒性的机制研究进行综述。     

青春期精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡的研究

目的研究精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞凋亡的影响及生精细胞凋亡与Bcl-2/Bax表达的关系,以探讨精索静脉曲张影响睾丸生精功能的机制。方法通过部分结扎左肾静脉建立青春期大鼠左侧精索静脉曲张模型,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测睾丸生精细胞凋亡情况及免疫组化SABC法检测Bcl-2/Bax的表达情况。结果试验组细胞凋亡指数显著高于对照组(P<0.05),且双侧睾丸组织内均见大量生精细胞凋亡。试验组Bcl-2表达较对照组低,左侧睾丸比右侧睾丸低;而Bax表达较对照组高,左侧睾丸比右侧睾丸高。结论精索静脉曲张可明显改变青春期大鼠凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达,导致双侧睾丸生精细胞凋亡增加,这可能是精索静脉曲张影响睾丸生精功能的机制之一。     

睾丸固定术对隐睾大鼠生殖细胞凋亡与eNOS表达的影响

目的 探讨睾丸固定术对隐睾大鼠生殖细胞发育与凋亡的影响.方法 22日龄 SD 雄性大鼠复制左侧隐睾模型.实验随机分为假手术组、隐睾组和隐睾固定术组,每组10 只.建立左侧隐睾模型,隐睾固定术组于建立左侧隐睾模型后14 d行隐睾下降固定术.以生物素-dUTP/ 酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡数目,用免疫组化SABC法检测eNOS 基因表达.结果 与假手术组相比,隐睾组和隐睾固定术组隐睾侧睾丸发生生精细胞凋亡的数目显著增加(P＜0.01).与隐睾组相比,睾丸固定术后生殖细胞凋亡明显减少(P＜0.01).隐睾组睾丸退化的生精细胞胞浆中eNOS 基因表达明显增强.结论 隐睾大鼠生殖细胞凋亡增多,睾丸固定术可降低生精细胞的凋亡水平.eNOS表达与生精细胞凋亡有密切关系.     

生精细胞凋亡与基因调控

生精细胞凋亡是一个多基因调控的过程。研究表明Fas／FasL、Bel-2、p-53、C-myc、CREM等基因在生精细胞凋亡调控中有重要意义。本文对近年来生精细胞凋亡及其基因调控的研究进展作一综述。     

淫羊藿苷对环磷酰胺诱导生精障碍大鼠睾丸的影响

精子发生过程中,生精细胞存在自发凋亡现象,T水平降低是生精细胞凋亡的重要原因;生精细胞凋亡的基因调控复杂,Bcl-2基因家族中Bcl-2促进生殖细胞生存,抑制凋亡;c-kit/SCF系统在胎儿时,对于生殖细胞存活和增殖至关重要。环磷酰胺（CP）容易导致精子DNA损伤、少精症、和后代畸形;对FSH、LH、T的影响,主要表现FSH和LH升高、T水平下降,对GnRH的影响未见报道。淫羊藿苷（Icariin,ICA）是淫羊藿的主要有效成分,也是探讨含淫羊藿苷中成药的首选成分;体外实验表明,淫羊藿能明显促进大鼠间质细胞睾酮基础分泌,ICA有明显的性激素样作用,促进幼年小鼠附睾及精囊的发育,对离体培养的大鼠睾丸间质细胞睾酮的基础分泌和cAMP的生成也有促进作用。     

生精细胞凋亡的线粒体调控

细胞凋亡是一种形态和生化特征明确的细胞主动死亡形式。哺乳动物睾丸生精细胞在精子形成过程中的自发细胞死亡是通过生精细胞的凋亡来实现的。睾丸生精细胞凋亡及其机制的研究日益受到人们的重视,线粒体在其调控细胞凋亡进程中发挥重要的调控作用。本文就生精细胞凋亡的线粒体调控机制以及线粒体与氧化应激、Bcl-2蛋白家族、HSPs和TR3的相互协同作用进行综述。     

羊睾丸提取液对铅暴露小鼠睾丸生精细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究羊睾丸提取液对铅暴露小鼠睾丸生精细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的影响.方法 30只成年雄性昆明种小鼠分为3组:对照组、实验1组和实验2组,分别给予生理盐水、醋酸铅、醋酸铅+羊睾丸提取液,每天1次,共14 d.停药1周后手术取睾丸.用免疫组织化学技术检测睾丸生精细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达.结果 实验1组细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达较对照组差异均有显著性(P<0.01),实验2组较对照组均无显著性差异(P>0.05).结论 一定量的铅负荷可导致小鼠生精细胞凋亡,而羊睾丸提取液可通过上调Bcl-2及下调Bax的表达抑制铅暴露所导致的生精细胞凋亡.     

小鼠生后睾丸生精细胞的凋亡及P53的表达变化

目的:观察小鼠生后生精细胞的凋亡变化规律以及凋亡相关基因P53的表达变化.方法:用生后0、1、4、7、10、13、2o、30、50天的昆明小鼠,取其睾丸,Bouin液固定后,用TUNEL法检测其生精细胞凋亡率;用免疫组织化学的方法检测凋亡相关基因P53的表达变化.结果:生后4天的小鼠生精细胞开始出现凋亡,10～20天达高峰,以后渐减少.P53的表达从生后7天的小鼠睾丸生精细胞出现阳性,20天时达高峰,以后渐减少.结论:小鼠睾丸在发育过程中有大量细胞凋亡,在其生后10～20天为高峰期.P53的表达较凋亡出现稍晚,但变化规律与凋亡近似.     

小鼠生后不同发育阶段睾丸生殖细胞的超微结构研究

目的:研究生精细胞、支持细胞、睾丸间质细胞在生后不同发育阶段的超微结构特点,了解雄性生殖细胞发育、分化和成熟的过程,亲代细胞与子代细胞间及3种生殖细胞在发育过程中的相互影响关系.方法:分别取生后5天、10天、20天雄性小鼠睾丸,固定后作超薄切片,染色后透射电镜下观察并拍片记录.结果:生精小管的细胞组合在不同发育阶段表现不同.生后5天,小管管腔很小,管壁细胞排列呈单层,细胞类型仅有精原细胞和幼稚的支持细胞两种,且均于基膜相贴,睾丸间质细胞不可见.生后10天,小管管腔增大,细胞排列呈2～3层,精原细胞增殖分化,支持细胞、睾丸间质开始发育.生后20天,细胞层数增多,出现各级生精细胞,增殖的子代细胞分布于近腔面,可见胞质间桥和变态发育中的精子;支持细胞、间质细胞发育成熟.结论:生精细胞在生精小管中的分布具有规律性,不同发育阶段表现出不同的细胞组合.在发育过程中,间质细胞、支持细胞的结构和功能的成熟先于生精细胞的分化,表明生精细胞的发育分化受间质细胞、支持细胞及基膜的共同参与下完成的.     

愤怒应激对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的:探讨愤怒应激对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响.方法:20只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组与愤怒组.愤怒组大鼠采用“夹尾激怒法”刺激大鼠,每次夹尾30 min,间隔3h再刺激1次,每天2次,连续14 d.对照组不予夹尾激怒,余同愤怒组.14 d后,HE染色法、TUNEL法分别检测观察睾丸组织病理学改变,生精细胞凋亡情况.结果:①与对照组相比,愤怒组大鼠睾丸生精小管生精上皮层数减少,各级生精细胞及支持细胞排列松散、不规则,生精细胞与支持细胞核浓缩凝集,生精细胞脱落明显,管腔内精子数量减少;②两组大鼠睾丸存在生精细胞凋亡,与对照组相比,愤怒组大鼠生精细胞凋亡显著增高(P＜0.05).结论:愤怒应激导致大鼠睾丸生精细胞凋亡增加,可导致愤怒应激大鼠睾丸生精细胞数量减少.     

ICR小鼠胚胎及生后不同阶段睾丸内生殖细胞的发育

目的 :观察ICR小鼠胚胎及出生后的睾丸内生殖细胞在不同阶段的发育情况 ,了解雄性生殖细胞分化、发育和成熟的过程。方法 :采用半薄切片甲苯胺蓝染色法 ,对雄性胚胎第 13,16 ,18d和出生后第 1,3,7,10 ,15 ,19d、4 ,6周及成年 (8周 )睾丸生殖细胞进行观察。结果 :原始生殖细胞向精原细胞的演化经历了一个分散 居中 分散靠边的过程。出生后第 7d ,支持细胞达到一个增殖高峰 ;出生后第 10d ,原始生殖细胞出现一个增殖高峰 ;出生后第 10d ,间质细胞达到一个增殖高峰 ;出生后第 15d ,出现初级精母细胞 ;出生后第 4周 ,产生精子细胞 ,同时间质细胞出现另一个增殖高峰并保持在一个高水平 ;出生后第 6周 ,开始有精子出现。结论 :当精原细胞大量增殖和生成精子细胞与精子时 ,生殖细胞可能需间质细胞提供大量激素相辅助 ;支持细胞在支持生精细胞、促进生精细胞转位及精子生成过程中起了一定作用。     

细胞凋亡因子survivin与男性不育症

细胞凋亡是生精过程中的一个普遍现象，它的失调与男性不育症有着密切关系。survivin是一种细胞凋亡抑制蛋白，它在细胞分裂时调控细胞凋亡，不仅在人类肿瘤组织中普遍过度表达，而且表达于人类的正常睾丸组织中。不断有研究显示survivin是精子发生过程中的一个潜在的分子标志物，它的表达在生精障碍的患者中有明显改变。本文就survivin与男性不育症的关系作一综述。