肿瘤可溶性抗原和金葡菌超抗原构建肿瘤疫苗的基础研究及临床应用

目的 探讨肿瘤疫苗在临床应用效果,分析有效成分,为进一步纯化肿瘤疫苗打下良好基础.方法 提取肺部肿瘤临床标本的可溶性抗原,和金葡菌超抗原等共同构建肿瘤疫苗,对112例肺癌术后患者(治疗组56例,对照组56例),经3～10年随访,观察临床效果;分离提取肿瘤标本中的膜蛋白、DNA、RNA、HSP70以及多肽,分析其有效成分.结果 治疗组患者5年生存率高于对照组,其差异有统计学意义(P＜0.01);治疗组患者未见全身及局部明显毒副作用;该疫苗的主要有效成分是多肤,膜蛋白也具有免疫活性.结论 用该方法构建的肿瘤疫苗用于肺癌术后患者可提高5年生存率,患者耐受性好;该疫苗的主要有效成分是多肤和膜抗原.     

可溶性肿瘤抗原对小鼠CD3AK细胞生物免疫功能的影响

目的：观察可溶性肿瘤抗原对小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞的体外增殖,体外杀瘤活性以及体内抑瘤作用的影响。方法：采用四甲基偶氮唑盐比色法（ＭＴＴ法）,分别检测小鼠脾脏单个核细胞的体外增殖活笥和杀瘤效应细胞体外杀瘤活性,并通过测定实体瘤质量来分析杀瘤效应细胞的体内抑瘤作用。结果：ＳＴＡ协同增强小鼠ＣＤ３单抗诱导的小鼠脾脏单个核细胞的体外增殖活性。     

肿瘤抗原MAGE-2多抗原肽疫苗的设计合成及免疫原性研究

目的采用多抗原肽(multiple antigen peptide,MAP)设计方案,提高线性短肽的免疫原性.方法对肿瘤抗原MAGE-2220-228细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位进行分子修饰,设计、合成四分支多抗原肽(MAP4).标准Fmoc合成方案进行合成,液相色谱/质谱联用(LC/MS)进行目的肽鉴定.以体外刺激人外周血单核细胞(PBMC)诱导CTL效应及IFN-γ分泌,标准51Cr释放实验与Elispot实验进行免疫原性的研究.结果标经准51Cr释放实验验证,低浓度的MAP4可以诱导出有效的CTL效应,Elispot实验显示MAP4能够有效诱导的IFN-γ分泌.结论 MAP的构建能够增强CTL效应和IFN-γ的分泌,是一种有效刺激CTL应答的多肽疫苗形式.     

日本血吸虫成虫和虫卵可溶性抗原及其组分抗原的研究

目的:探讨日本血吸虫雄虫、雌虫、虫卵的可溶性抗原雄虫(AWA-m、雌虫AWA-f、虫卵SEA)及其组分抗原的特性.方法:用DE22纤维素层析柱对日本血吸虫AWA-m,AWA-f,SEA抗原进行纯化,得到相应组分抗原.分别以SDS-PAGE和Western blot对组分抗原进行全面分析,并与相应未经纯化的可溶性抗原作比较.结果:经DE22纤维素层析处理的AWA-m,AWA-f,SEA,均能获得含多种蛋白的组分抗原.SDS-PAGE结果表明,AWA-m见10条主带和9条次带,其中Mr 37 000,28 000,25 000为特异性条带,出现8条免疫反应阳性带;而AWA-m组分抗原为9条蛋白带和6条免疫反应阳性带.AWA-f见15条蛋白带,其中Mr 26 500为特异性条带,组分抗原为8条蛋白带.AWA-f粗抗原及其组分抗原均见9条反应带.SEA见8条主带和10条次带,13条为免疫反应阳性条带;SEA组分抗原见11条带,其中9条为免疫反应阳性带.结论:AWA-m,AWA-f,SEA经DE22纤维素层析纯化获得组分抗原,方法简单、可靠.该组分抗原含有粗抗原的主要免疫反应成分,去除了多种与日本血吸虫病免疫反应无关的蛋白.     

膀胱癌可溶性抗原诱导细胞毒T细胞的实验研究

目的 观察膀胱癌可溶性抗原诱导细胞毒Ｔ细胞生长,为构建膀胱癌疫苗及过继性免疫治疗提供实验基础。方法 提膀胱癌可溶性抗原（ＴＳＡ）,用ＴＳＡ、抗ＣＤ－３单抗、ＩＬ－２联合诱导外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,动态观察细胞增殖,进行细胞表型分析和细胞因子测定;并与ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ细胞,抗ＣＤ－３单抗、ＩＬ－２诱导的ＣＤ３－ＡＫ细胞进行比较。结果 实验组细胞第８ｄ增殖７．５２倍,第１２ｄ增殖２８．９２倍     

尿可溶性抗原检测早期诊断军团菌肺炎的实验研究

为探讨应用生物素-亲和素的酶联免疫测定法检测军团菌可溶性抗原对早期诊断军团菌肺炎价值，用BA—ELISA法检测27只Lp1型军团菌肺炎豚鼠尿标本，发现感染后第1d36．8％（7／19）的豚鼠尿中可测出军团菌可溶性抗原，至感染后第5d达83.3％（20/24），累计敏感性达100％。47只非军团菌感染豚鼠尿检示该法的特异性为91.5％（43／47），与金黄色葡萄球菌（金葡菌）及某些假单胞菌有交叉反应，表明BA—ELISA法检测尿军团菌抗原具有较高和较早的诊断价值。     

尿可溶性抗原检测早期诊断军团菌肺炎的实验研究

为探讨应用生物素－亲和素的酶联免疫测定法检测军团菌可溶性抗原对早期诊断军团菌肺炎价值，用ＢＡ－ＥＬＩＳＡ法检测２７只Ｌｐ１型军团菌肺炎豚鼠尿标本，发现感染后第１ｄ３６．８％（７／１９）的豚鼠尿中可测出军团菌可溶性抗原，至感染后第５ｄ达８３．３％（２０／２４），累计敏感性达１００％。４７只非军团菌感染豚鼠尿检示该法的特异性为９１．５％（４３／４７），与金黄色葡萄球菌（金葡菌）及某些假单胞菌有交叉反应     

肺癌可溶性抗原致敏的DC诱导CTL特异性杀伤肺癌细胞的实验研究

目的 通过对负载人肺癌GLC-82细胞可溶性抗原的树突状细胞（DC）体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）对肺癌细胞的杀伤研究，为以DC为基础的肺癌免疫瘤苗的临床应用提供一定的实验依据。方法 通过用3MKCl提取法和弱酸洗脱法获得人肺腺癌细胞GLC-82的可溶性抗原多肽，用GLC-82细胞抗原多肽冲击致敏从人外周血单核细胞（PBMC）中用GM-CSF、IL-4和TNF—α体外诱导扩增并经鉴定的DC；利用负载GLC～82细胞抗原多肽的DC，刺激同种异体外周血T淋巴细胞活化增殖，诱导产生具有识别肺癌细胞抗原的特异性CTL；进一步探讨该CTL对GLC-82，肺癌CALU-6和人红白血病K562细胞的体外杀伤效应。结果 人PBMC体外经7d诱导出的DC，经光镜、电镜、免疫组化证实具有典型的树突状细胞特性；经GLC-82抗原致敏的DC诱导同种异体T淋巴细胞活化增殖产生CTL，诱导激活的CTL与靶细胞共育时镜下发现CTL靠近并聚集在肿瘤细胞周围，致使肿瘤细胞发生凋亡和坏死。结论肺癌可溶性蛋白抗原能活化致敏DC，无需明确肿瘤特异抗原，获取方法简便可行；联合应用GM—CSF、IL-4和TNF—α诱导人PBMC中的单核细胞，能诱导出功能较强的DC；致敏DC能强烈刺激初始型同种异体T淋巴细胞增殖产生CD8^＋表达增加的CTL;激活的CTL对肺癌靶细胞发挥高效而特异的细胞毒效应，对非肺组织瘤靶细胞也具有非特异性杀伤效应。     

角膜可溶性抗原诱导前房相关性免疫偏离的实验研究

①目的 建立兔前房相关性免疫偏离（ACAID）诱导模型。②方法 采用甘氨酸法制备可溶性角膜分类抗原,分组行兔前房注射诱导ACAID,并观察各组耳膨胀试验和脾脏病理学检查结果。③结果 角膜上皮、内皮、基质及全角膜可溶性抗原皆可诱导ACAID,诱导质量浓度为2.0g/L,成功率分别为90%,100%,80%和100%。④结论 角膜可溶性抗原可以诱导产生ACAID。     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原的分析

采用免疫沉淀技术和ＥＩＴＢ技术分析了日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）。结果：能被ＳＩＥＡ免疫血清识别的ＳＩＥＡ带主要于３０．８ＫＵ到４９．６ＫＵ之间，其主要反应带为４９．６ＫＵ，３９．７ＫＵ和３３．７ＫＵ。推测４９．６ＫＵ和３３．７ＫＵ这两怕 诱导宿主产生抗卵或熟过程中可能起着重要作用。     

EXPERIMENTAL STUDY OF RADIOIMMUOGUIDED SURGERY IN OVARIAN CARCINOMA

INTRODUCTIONThemaintreatmenttodateforovariancarcinomaissurgicalresection,thesocalledcytoreductivesurgery.Toperformacompleteresection,surgeonsusuallydependonvisualandtactilesensesaswellassurgicalinstinctswhicharerelativelycrudeinidentifyingsubclinicalmicroscopictumor.Radioimmuno--guidedsurgerysystem(RIGS)hasbeentakenoverthelast10yearsinbothlaboratoryandclinicalsettings.However,onlyafewreportswereseenaboutitsstudyinovariancancerworldwideespeciallyinourcountry.OurstudyincludeestablishingaR…     

肿瘤相关抗原CA—125在卵巢癌诊断和监测中的应用

目的：探讨ＣＡ－１２５在卵巢癌诊断和治疗监测中的临床意义。方法：应用免疫放射分析法（ＩＲＭＡ）检测１３８例卵巢恶性肿瘤。６０例卵巢良性肿瘤和健康妇女血液中肿瘤相关抗原ＣＡ－１２５的水平。结果：（１）卵巢恶性肿瘤患者血液中ＣＡ－１２５水平明显高于良性肿瘤和健康妇女组（Ｐ〈０．００１）。（２）ＣＡ－１２５水平的高低及阳性率卵巢恶性肿瘤的临床分期无关（Ｐ〉０．０５）。结论：血液中ＣＡ－１２５的变化对卵巢     

EFFECTS OF RETINOIC ACID ON PROLIFERATION AND DIFFERENTIATION OF A HUMAN OVARIAN CARCINOMA CELL LINE： 3AO

Objective To observe the effects ofretinoic acid (RA) on the proliferation and differentiation of a human ovarian carcinoma cell line: 3AO cells. Methods 3AO cell proliferation was evaluated by viable cell count, percentage of cells in each cycle phase were analyzed by flow cytometric analysis, alkaline phosphatase (AKP) activity was determined as described, and CA125 expression was measured by ELISA. Results RA could inhibit the proliferation of 3AO cells accompanied with morphological changes in a dose-dependent manner. Cell cycle analysis indicated that RA inhibition of 3AO cells growth occurred through induction of G1 arrest with a concomitant reduction in the proportion of cells in S phase, AKP activity increased significantly after treatment with RA(0.1 μmol/L) for 1-5 days. Dose-response studies revealed that the AKP activity increased to a different extent as a function of RA concentrations. Furthermore, RA could suppress the expression of CA125 tumor marker in 3AO cells. Conclusion RA could markedly inhibit the proliferation and induce the differentiation of 3AO cells.     

基于肿瘤抗原的肿瘤免疫治疗

基于肿瘤抗原的免疫治疗主要在于肿瘤疫苗、包括肿瘤细胞疫苗、肿瘤抗原疫苗、多肽疫苗、基因疫苗、树突状细胞肿瘤疫苗。本文对此进行综述。     

子宫癌组织癌胚抗原的免疫组织化学研究

本文用过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)法,对87例子宫颈鳞状土皮癌、20例子宫颈腺癌及54例子宫内膜癌组织进行了癌胚抗原(CEA)的研究.通过病理形态学观察及统计学处理,探讨CEA与癌组织学变化、细胞学分化、临床分期等因素的关系.对癌组织内的CEA检测可应用于子宫颈鳞状上皮原位癌与不典型增生上皮,以及子宫颈腺癌与子宫内膜癌的鉴别诊断;对正常子宫颈鳞状上皮进行CEA检测,可用于筛选随访,观察早期子宫颈癌病例.提出癌细胞内CEA的表达(expression)程度可能与癌细胞的分化过程和分化程度有关.     

滋养细胞肿瘤中角蛋白和上皮细胞膜抗原的表达

应用抗上皮细胞膜抗原（ＥＭＡ）和角蛋白（ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ，ＣＫ）等单克隆抗体对正常胎盘、葡萄胎、浸润性葡萄胎、胎盘部位中间型滋养细胞肿瘤（ＰＳＴＴ）和绒癌等进行免疫组织化学研究，结果发现 ＥＭＡ和 ＣＫ在正常滋养细胞及其肿瘤中皆有较高的表达，阳性率分别为９４％和 ９１％，并且在合体滋养细胞（ＳＴ）、细胞滋养细胞（ＣＴ）和中间型滋养细胞（ＩＴ）中皆有不同程度的表达，其中，ＥＭＡ的阳性表达在ＳＴ中９４％，ＩＴ中８９·６％，ＣＴ中９２．５％； ＣＫ的表达在ＳＴ中９１％、ＩＴ中５３．７％和ＣＴ中８５．１％，ＥＭＡ在ＩＴ的表达明显优于ＣＫ（Ｐ＜０．０１），提示ＥＭＡ是ＩＴ的优良标志物。     

用聚合酶链反应技术构建人可溶性肿瘤坏死因子受体cDNA克隆

肿瘤坏死因子受体（ＴＮＦＲ）是肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）发挥其生物学作用的关键性物质。利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，扩增并改造５５ＫＤＴＮＦＲｃＤＮＡ，成功地扩增出编码可溶性肿瘤坏死因子受体成熟肽的序列，并在该序列的５’端和３’端分别引入ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ识别序列，使之便于与载体重组，为获得亚克隆及在大肠杆菌高效表达奠定基础。