锰对大鼠海马神经微丝蛋白表达折影响

目的：探讨锰的神经毒性作用机制，观察锰对大第马神经微丝蛋白（ＮＦ）表达的影响。方法：选用２月龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠１６只，均分为染锰组和对照组，３个后采用免疫组化法研究大鼠海马ＮＦ表达的变化情况，结果：海巴各区ＮＦ免疫组化反应产物的表达强度明显降低，且有串珠样改变，结论：ＮＦ结构蛋白表达的改变是锰影响脑发育的一个重要特征。     

亚急性外源性锰中毒对大鼠海马的影响

目的:研究外源性锰中毒对大鼠海马的影响。方法:SD大鼠腹腔注射染锰,用动物磁共振成像(MRI)和免疫组化法(SABC法)对大鼠海马进行研究。结果:染锰后大鼠T1加权成像和翻转恢复MRI发现大鼠海马区域信号强度显著增强;HE染色未发现海马区域明显的神经元坏死;免疫组化法则显示胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达明显增强。结论:海马对锰具有高度亲和性并大量沉积,锰可导致大鼠海马胶质细胞活化。     

APP17肽对卵巢去势大鼠海马神经元凋亡相关因子表达的影响

为研究卵巢去势大鼠海马神经元内凋亡相关因子Fas、Fas L、NFκB、c fos、c Jun的表达及APP1 7肽对这些因子表达的影响 ,将健康雌性Wistar大鼠行双侧卵巢切除手术造模 ,并用APP1 7肽治疗 ,分别用免疫组化方法观察Fas、Fas L、NFκB、c fos、c Jun的表达 ,用TUNEL方法检测神经元的凋亡。结果发现 :卵巢去势大鼠海马神经元Fas、Fas L、c fos、c Jun的表达增高 ,而NFκB的表达则减少 ;使用APP1 7肽治疗后 ,上述蛋白质的表达恢复到正常水平 ,TUNEL检测未发现凋亡神经元。提示卵巢去势大鼠发生了海马神经元的凋亡相关蛋白的改变 ,可能是神经元处于凋亡前状态 ;APP1 7肽可改善卵巢去势大鼠海马神经元内凋亡相关蛋白的表达 ,维持神经元的正常功能     

APP17肽对卵巢去势大鼠海马神经元凋亡相关因子表达的影响

为研究卵巢去势大鼠海马神经元内凋亡相关因子Fas、Fas-L、NFκB、c-fos、c-Jun的表达及APP17肽对这些因子表达的影响,将健康雌性Wistar大鼠行双侧卵巢切除手术造模,并用APP17肽治疗,分别用免疫组化方法观察Fas、Fas-L、NFκB、c-fos 、c-Jun的表达, 用TUNEL方法检测神经元的凋亡.结果发现卵巢去势大鼠海马神经元Fas、Fas-L、c-fos、c-Jun的表达增高,而NFκB的表达则减少;使用APP17 肽治疗后,上述蛋白质的表达恢复到正常水平,TUNEL检测未发现凋亡神经元. 提示卵巢去势大鼠发生了海马神经元的凋亡相关蛋白的改变,可能是神经元处于凋亡前状态;APP17肽可改善卵巢去势大鼠海马神经元内凋亡相关蛋白的表达,维持神经元的正常功能.     

注射YVAD-CHO后癫痫大鼠海马组织细胞形态及Caspase-3表达的改变

目的:探讨癫痫大鼠单侧海马注射Caspase-3抑制剂YVAD-CHO后海马组织形态及Caspase-3表达的改变.方法:将YVAD-CHO注射入癫痫大鼠模型单侧海马,HE染色观察组织形态学变化,免疫组化法观察Caspase-3蛋白的表达及相应的改变.结果:HE染色显示,干预组1大鼠海马安蒙角(Cornu ammonis,CA)1-CA3区神经细胞胞质浓染,核固缩等改变,与模型组比较明显减少;免疫组化显示干预组1海马区Caspase-3蛋白的表达较模型组明显减少.结论:YVAD-CHO可在体内抑制大鼠海马神经元凋亡.     

被动吸烟对大鼠后代记忆功能和c-fos基因表达的影响

目的 探讨胚胎期被动吸烟对学习能力的影响及其机制。方法 采用反映学习记忆功能的水迷宫法测试仔鼠神经行为的改变;免疫组化法研究仔鼠脑组织fos(fos-IR）阳性表达的水平。结果 胚胎期被动吸烟使大鼠学习记忆能力下降。大脑皮质及海马区内均有较多的fos蛋白阳性细胞。结论 胚胎斯被动吸烟对大鼠学习记忆能力有明显影响,且这种改变可能与脑组织的c-fos表达有关系。     

益气通脉胶囊对脑缺血大鼠学习记忆能力的影响

目的观察益气通脉胶囊对脑缺血损伤后大鼠学习记忆能力的影响及相关机理研究。方法选择SD大鼠90只,按随机数字表法选择10只作为对照组,其余大鼠采用反复夹闭双侧颈总动脉结合硝普钠降压法复制SD大鼠拟血管性痴呆模型。造模后选存活大鼠50只随机分为模型组、脑心通组和益气通脉胶囊高、中、低剂量组,每组各10只,连续给药15 d后通过Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆能力,之后取大鼠脑的海马组织,提取蛋白测定生长相关蛋白43(growth associated protein 43,GAP43)和神经丝蛋白-200(Neurofilaments Protein-200,NF200)的表达,以及测定大鼠海马组织NOS活性和NO含量。结果 (1)大鼠的学习记忆能力:益气通脉胶囊高、中剂量组大鼠的学习记忆能力均高于模型组。(2)GAP43和NF200的表达:益气通脉胶囊高、中、低剂量组的蛋白表达均明显大于模型组。(3)益气通脉胶囊高、中剂量组大鼠的NOS活性和NO含量均显著低于模型组。结论益气通脉胶囊对脑缺血损伤后大鼠学习记忆能力的恢复有明显的促进作用,能使神经可塑性相关蛋白表达上调,降低大鼠海马组织NOS活性和NO含量。     

慢性应激大鼠抑郁症模型的免疫组织化学和MRI研究

目的:探讨大鼠抑郁症模型海马容积改变的特点及其病理特征。方法:对大鼠抑郁症模型组、治疗组和对照组行MRI检查,测量两侧海马容积,采用免疫组化方法观察抑郁症大鼠模型组和治疗组海马及额叶5-HT、NSE、GFAP的变化。结果:①MRI显示抑郁症大鼠脑纵裂增宽,扩大且左侧海马容积小于对侧;②氟西汀治疗组未见明显海马容积及形态改变;③模型组海马及额叶NSE表达明显减弱,额叶的GFAP表达明显减弱;治疗组NSE及GFAP的表达有明显增强。结论:抑郁症时存在独特的病理变化,在一定程度上支持神经影像学的发现。     

神经前体细胞的分离培养及绿色荧光蛋白基因的转染

[目的]为替换中枢神经损伤后死亡的神经元提供方便追踪观察的神经前体细胞.[方法]应用含碱性成纤维生长因子(bFGF)的无血清培养技术,从新生大鼠海马组织分离培养神经前体细胞,并借助免疫组织化学技术检测这些细胞巢蛋白(nestin)的表达以及细胞分化后神经丝蛋白(NF)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.采用磷酸钙法将绿色荧光蛋白(GFP)基因转染目的细胞内.[结果]从海马组织分离的细胞具有分裂能力,能表达nestin.分化后一些细胞能表达NF,而另一些细胞则表达GFAP.GFP基因修饰的细胞能发出荧光.[结论]从海马组织分离的细胞能表达nestin,属于神经前体细胞,它们具有明显的增殖能力.有些神经前体细胞已经分化为神经元和神经胶质细胞.GFP基因已成功转染到神经前体细胞内,并表达了GFP.     

注射Aβ25-35后大鼠海马超微结构及caspase-3表达的改变

目的探讨大鼠双侧海马注射Aβ25-35后海马组织形态、超微结构及caspase-3表达的改变.方法采用Aβ25-35双侧海马注射的阿尔茨海默病(AD)大鼠模型,光镜及透射电镜观察海马组织结构,免疫组化法观察caspase-3蛋白的表达.结果苏木素伊红(HE)染色显示,模型组大鼠海马CA1-CA4区及齿状回神经元数量较对照组明显减少,可见较多的神经细胞胞质浓染,核固缩;透射电镜下,模型组海马CA1区神经元较少,可见部分神经细胞膜皱缩,胞体缩小,核膜完整,核染色质电子密度增强;海马区Caspase-3蛋白的表达明显增加.结论Aβ25-35可在体内诱导大鼠海马神经元凋亡.     

糖尿病大鼠脑组织一氧化氮合酶表达的变化

目的：探讨一氧化氮在糖尿病神经病变发病机制中的作用。方法：采用硫辛氨脱氢酶酶组织化学染色法测定糖尿病大鼠脑组织一氧化氮合酶表达的变化。结果：糖尿病成模后３个月,大脑皮层区ＮＯＳ阳性神经元明显减少,但在海马区却发现ＮＯＳ阳性细胞。结论：ＮＯＳ的改变,可能参与糖尿病中枢神经系统病变的发病过程。     

慢性砷中毒大鼠脊髓神经元蛋白免疫组织化学研究

目的：通过对慢性砷中毒大鼠脊髓神经丝蛋白（ＮＦ）的免疫组化观察，研究其脊髓神经元的病理学改变。方法：采用实验组和对照组，分别于大鼠砷中毒３５ｄ、３个月、６个月时取材，进行免疫组化研究。结果：中毒３５ｄ脊髓内ＮＦ免疫反应基本同对照组；中毒３个月脊髓内ＮＦ阳性反应强度明显低于对照组；中毒６个月ＮＦ阳性反应产物明显减少或消失。结论：实验表明砷中毒可影响ＮＦ的合成，且其毒性具有蓄积性。证实砷可直接损伤脊髓神经元     

心肺复苏术后大鼠海马组织高迁移率族蛋白B1和NF-κB的表达及相关性分析

目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）、核转录因子（NF‐κB）在心肺复苏术后大鼠海马组织内的表达,以期探讨其可能意义。方法40只SD大鼠分为假手术组和复苏组（按复苏后自主循环恢复后2、6、12、24和48 h各时间点分为5亚组）。在相应的时间点断头处死,取海马组织,HE染色观察海马病理变化,RT‐PCR和Western Blot检测HMGB1、NF‐κB水平表达,并对二者进行相关分析。结果病理切片显示假手术组海马结构未见明显变化,复苏组存在缺血病理改变,24 h最为显著,48 h损伤仍比较重;与假手术组比较,复苏组海马HMGB1、NF‐κB mRNA表达均呈先上升后下降的趋势,均于24 h达峰值（P＜0．01）;复苏组HMGB1蛋白表达在自主循环恢复后2 h显著降低,24 h达到峰值,在48 h稍下降,差异均有统计学意义（P＜0．01）;HMGB1和NF‐κB蛋白表达呈显著正相关。结论 HMGB1／NF‐κB信号通路可能参与心肺复苏术后早期脑炎性损伤,干预此通路的靶向性治疗有望减轻心肺复苏术后脑炎性损伤。     

大鼠外伤性脑干损伤脑干的双重免疫组化及超微病理研究

报告建立大鼠外伤性脑干损伤模型，并以死后脑干伤作对照，用神经微丝（ｎｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔ，ＮＦ）及胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）双重免疫组化染色观察了脑干神经轴索及星形胶质细胞的变化，且对轴索的直径和星形胶质细胞数进行了图像分析及统计处理。用透射电镜观察了延脑网状结构的超微结构变化。结果发现：轴索直径在脑干伤０．５、１ｈ组与死后伤组间无显著性差异，而３ｈ组与死后伤组间差异有显著性。ＧＦＡＰ阳性细胞数在脑干伤０．５ｈ时无明显变化，而伤后１、３ｈ显著性增加。电镜观察到延脑网状结构内的神经髓鞘层面分离，ＮＦ排列紊乱，疏密不一等病变。本研究明确了颅脑损伤早期死亡与脑干损伤的关系，并发现ＮＦ－ＧＦＡＰ双重免疫组化染色可诊断伤后存活１ｈ或更长时间的大鼠外伤性脑干损伤。     

慢性染铅大鼠海马脑源性神经营养因子的改变

Objective: To investigate the changes of brain derived neurotrophic factor(BDNF) in hippocampus of chronic lead exposed rats. Methods: Wistar rats were exposed to lead by drinking 0.02%、0.2% lead acetate solution for three months, respectively. Investigate the changes of learning and memory ability by Y-labyrinth experiment, study the changes of BDNF positive neuron in CA1, CA3 and dentate gyrus in hippocampus of rats by immunohistochemistry. Results: BDNF positive neurons distribute everywhere in the hippocampus under normal condition. Compared with the contral group, the number of BDNF positive neurons in the hippocampus subregions were decreased significantly of two different dosage (0.02%, 0.2% ) chronic lead exposed groups( P ＜ 0. 05). Conclusion: These results suggest that the reduction of BDNF positive neuron in hippocampus might be related to the impact of lead on learning and memory.     

长期远隔后适应对脑缺血再灌注大鼠脑组织神经中丝200表达的影响

目的研究长期远隔缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织神经中丝200(NF200)表达的影响。方法应用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注损伤模型,再灌注即刻给予远端肢体缺血后适应,即双侧股动脉夹闭10 min/放开10 min,反复3次。此后每天给予一次远端肢体缺血后适应。实验分为4组:缺血再灌注7 d组(C7组);缺血再灌注后适应7d组(P7组);缺血再灌注28 d组(C28组);缺血再灌注后适应28 d组(P28组)。每组6只大鼠。采用免疫印迹法研究各组大鼠脑组织中NF200蛋白的表达水平,并采用免疫荧光法观察大鼠脑组织NF200蛋白的表达部位。结果 P7组大鼠脑组织内NF200表达比C7组明显增高(P<0.05),P28组大鼠脑组织内NF200表达比C28组及P7组明显增高(P均<0.05),而C28组大鼠与C7组相比脑组织内NF200表达无明显变化。免疫荧光染色结果显示NF200在神经元胞体及轴突中均有表达。结论长期远隔缺血后适应可增加大鼠脑组织内NF200的表达,可能与减轻脑缺血损伤相关。     

老龄大鼠脑组织内不同部位葡萄糖转运蛋白3的表达

目的:观察老龄大鼠的脑组织内不同部位的葡萄糖转运蛋白3(GLUT 3)的表达情况,探讨GLUT 3在神经系统衰老过程中的作用.方法:用免疫组织化学染色方法,测定3月龄、18月龄及30月龄大鼠(各10只)脑组织内不同部位GLUT 3的表达强弱.结果:各月龄组大鼠脑组织内不同部位阳性细胞数均有显著差异(P<0.01),其中海马区,尤其是海马CA1 区阳性细胞数最多,而运动皮质区及第1小脑小叶阳性细胞数相对较少.结论:在老龄大鼠脑组织中GLUT 3的表达减弱,提示GLUT 3在神经系统衰老过程中发挥一定作用.     

实验性头颅侧向旋转脑弥漫轴索损伤神经丝蛋白亚单位含量变化

目的： 探讨实验性头颅侧向旋转脑弥漫轴索损伤（ＤＡＩ）中神经丝（ＮＦ）蛋白亚单位含量变化． 方法： ＳＤ大鼠２４只,等分为三个损伤组（伤后２, １２, ２４ ｈ）及一个对照组,对损伤组制作头颅侧向旋转脑ＤＡＩ模型． 用Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹技术进行免疫活性定量测定,以检测全部损伤及对照组大鼠脑干组织ＮＦ蛋白亚单位ＮＦ６８的含量． 结果： 脑干ＮＦ６８含量在伤后２ ｈ 倾向下降,１２ ｈ 显著减少,继续降低至２４ ｈ;其降解产物ＮＦ５６, ＮＦ５２在伤后２ ｈ～１２ ｈ 趋于增加,２４ ｈ 提高至显著水平． 结论： 头颅侧向旋转ＤＡＩ后脑干神经丝产生磷酸化反应,引起ＮＦ６８水解,造成ＮＦ６８含量减少． 提示神经丝蛋白亚单位水解是ＤＡＩ中神经丝结构破坏的重要原因．     

施万细胞对共培养的神经干细胞增殖与分化的影响

目的:探讨施万细胞诱导神经干细胞增殖与分化的影响因素。方法:大鼠胚胎神经干细胞单独培养及与新生SD大鼠施万细胞共培养,观察神经干细胞的形态变化,并分别检测特异性标志蛋白S-100、NF和GFAP的表达。结果:相差显微镜下可见共培养组大部分神经干细胞伸出多个细长突起;与单独培养组相比,免疫荧光染色显示共培养组NF表达阳性细胞数多;GFAP表达阳性细胞数少。结论:施万细胞可促进共培养的神经干细胞增殖,并可诱导神经干细胞向神经元方向分化。     

凝血酶预处理减轻凝血酶所致的脑水肿

目的:探讨凝血酶预处理对脑水肿的影响,检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在脑组织内的表达并分析其与凝血酶所致脑水肿的关系.方法:建立大脑皮质内血肿模型.选择健康成年SD大鼠40只,随机分为作为对照的未预处理组(ST组)和小剂量凝血酶(1 U)预处理组(TT组).观察不同时相脑组织含水量及钠含量的变化及TNF-α在脑组织内的表达.结果:ST组脑组织含水量和钠含量明显高于TT组,且第1天高于第3天.TT组与ST组脑组织内TNF-α阳性表达与含水量的变化相一致.结论:凝血酶预处理可以减轻凝血酶所致的脑水肿;TNF-α的表达与凝血酶所致的脑水肿有关.