复方丹参注射液退黄降酶保肝作用的实验研究

本实验主要研究复方丹参注射液的退黄降酶保肝作用。采用四氯化碳(CCl4)、D-半乳糖胺(D-Gla)致小鼠急性肝损伤模型,观察复方丹参注射液对肝损伤的保护作用;采用异硫氰酸萘酯(ANIT)致小鼠急性黄疸模型,观察复方丹参注射液对急性黄疸的退黄降酶作用。通过以上实验可以得出复方丹参注射液能明显降低CCl4和D-Gla致小鼠急性肝损伤模型血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和总胆红素(T-BIL)含量;复方丹参注射液能明显降低ANIT致小鼠急性黄疸模型血清中ALT、AST、T-BIL和丙二醛(MDA)含量,升高超氧化物歧化酶(SOD)活性。综上所述,复方丹参注射液具有退黄降酶保肝作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

降酶灵胶囊对急性肝损伤的药效研究

目的观察降酶灵胶囊保肝降酶的作用。方法采用四氯化碳(CCl4)制作小鼠的急性肝损伤模型,然后给予不同剂量降酶灵胶囊,观察小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和肝病理学的变化;用D-氨基半乳糖对大鼠造成急性肝损伤模型,再给予不同剂量降酶灵胶囊,观察大鼠血清ALT和总胆红素(TBIL)的变化。结果降酶灵胶囊0.135、0.270、0.540g/kg组均能明显降低由CCl4引起的小鼠急性肝损伤的ALT;降酶灵胶囊0.135、0.270g/kg组均能显著降低由D-氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤血清ALT与TBIL。结论降酶灵胶囊具有保肝降酶和降低胆红素的作用。     

茵栀黄颗粒的急性毒性和保肝作用研究

目的　检测茵栀黄颗粒的急性毒性和保肝作用。方法　采用灌胃给药观察茵栀黄颗粒对四氯化碳 (CCl4)所引起的小鼠急性肝损伤的影响及其急性毒性 ,给药后观察动物摄食、活动、中毒症状并记录死亡动物数。结果小鼠一次性灌胃给药 ,茵栀黄颗粒的最大耐受量为 32 g·kg-1。茵栀黄颗粒能明显降低CCl4和D -氨基半乳糖 (D -GalN)所致肝损伤小鼠血清ALT、AST。结论　茵栀黄颗粒为低毒药物 ,对CCl4和D -GalN所致肝损伤具有保护作用     

扛板归对CCl_4致大鼠肝损伤的保护作用研究

目的:研究扛板归醇提物对CCl4致大鼠肝损伤的保护作用。方法:复制CCl4致大鼠化学性肝损伤模型,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果:扛板归能不同程度降低肝损伤大鼠血清中ALT、AST活性,升高SOD活性,降低MDA含量;并能减轻肝组织变形、坏死等病理改变。结论:扛板归具有一定的保肝作用,其机制可能与抗脂质过氧化作用有关。     

蒙药地格达-4对CCl_4致大鼠肝损伤的保护作用研究

目的:研究蒙药地格达-4对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝损伤的保护作用。方法:SD大鼠按3mL·kg-1腹部皮下注射40%CCl4橄榄油溶液,每周2次,持续1月复制肝损伤模型。实验分为6组,即空白对照、模型、联苯双酯(0.075g·kg-1)和地格达-4高、中、低剂量(1.5、0.75、0.38g·kg-1)组。给药40d后测定血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)的活性,总胆红素(TBIL)的含量,肝脏指数及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、人谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,丙二醛(MDA)的含量,总抗氧化能力(T-AOC);并对肝组织做病理学检测。结果:地格达-4能显著降低血清中AST、ALT活性及肝脏指数(P<0.05),降低TBIL、ALP、GGT含量;升高肝组织中SOD活性,降低MDA含量和CAT、GSH-PX、T-AOC活性;减轻肝组织变性、坏死等病理改变。结论:地格达-4对CCl4所致大鼠肝损伤具有保肝作用,作用机制可能与其抗脂质过氧化作用相关。     

异甘草素对大鼠急性化学性肝损伤的保护作用

目的研究异甘草素(ISL)对CCl4所致大鼠急性化学性肝损伤的保护作用及其机制.方法①在体实验选用♂Wistar大鼠48只,随机分6组,每组8只.ISL三剂量给药组分别灌服ISL 10,20,40 mg·kg-1·d-1;甘草酸二铵胶囊(DG)组灌服DG 500 mg·kg-1·d-1;正常对照组和模型组每日灌服等容量的溶媒.连续给药7 d,qd.以CCl4诱导大鼠急性肝损伤模型,酶学测定各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及肝组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量.②体外实验采用大鼠离体肝细胞原代培养,并建立CCl4诱导肝细胞损伤模型,检测ISL对其作用的影响.结果①lSL剂量依赖性降低大鼠血清中升高的ALT和AST活性,升高肝组织中降低的GSH含量、SOD和GSH-Px活性,同时降低过氧化物终产物含量.②ISL浓度(5.0～20.0 μmol·L-1)依赖性抑制CCl4引起的ALT和AST升高,ISL 20.0 μmol·L-1可阻断CCl4产生的肝细胞ALT和AST漏出.结论ISL对大鼠化学性肝损伤具有显著的保护作用.其机制与清除肝组织中的自由基和抗脂质过氧化等作用有关.     

来氟米特对急性化学性肝损伤的治疗作用

目的：观察来氟米特对急性化学性肝损伤的治疗作用。方法：分别利用CCl4和D－Gal诱导化学性肝损伤。血浆中ALT,AST和肝组织中MDA水平用紫外分光光度法检测。结果：Lef(4、12、36mg.kg^1)明显降低CCl4和D－Gal诱导的化学性肝损伤小鼠血浆ALT、AST活性和肝匀浆DNA水平的上升,结论：来氟米特对急性化学性肝损伤有治疗作用。     

连翘苷元对四氯化碳大鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨连翘苷元对四氯化碳(CCl4)所致急性肝损伤的保护作用。方法用CCl4诱导化学性急性肝损伤模型,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平;肝脏组织切片,苏木精-伊红(HE)染色,光镜观察病理学改变;用试剂盒测定肝组织中SOD、GSH-Px和GSH的活性及脂质过氧化产物MDA含量。ELISA法检测血清中TNF-α、IL-8含量。结果在CCl4诱导的大鼠急性肝损伤模型中,连翘苷元(0.05、0.15、0.5mg·kg-1,sc)明显降低血清ALT、AST和TBIL水平;明显改善肝脏病理组织状况;连翘苷元(0.05、0.15、0.5 mg·kg-1,sc)明显降低CCl4诱导的急性肝损伤大鼠的肝组织匀浆中MDA的含量,明显增加SOD、GSH-Px和GSH的活性。连翘苷元(0.15、0.5 mg·kg-1,sc)明显降低TNF-α、IL-8含量。结论连翘苷元对CCl4诱导大鼠急性肝损伤具有保护作用,该作用与其增加肝组织中抗氧化酶的活性、降低脂质过氧化水平、降低TNF-α、IL-8等促炎因子水平有关。     

3-14 三精蜂王浆冻干片对化学性肝损伤的保护作用

目的三精蜂王浆冻干片是以蜂王浆为主要原料精制而成的保健食品.本实验研究其保肝作用.方法选用Wistar雄性大鼠连续灌胃给予0.075、0.25、0.75g/kg的三精蜂王浆冻干片30d后,以CCl4造成急性化学性肝损伤模型.即于试验第31天将各组动物禁食16h,肝损伤组及各样品组1次灌胃给予2%CCl45ml/kg,阴性对照组给植物油,受试物组连续给予受试物至试验结束(与CCl4灌胃间隔4h以上).给予CCl4后42h处死动物,进行血清ALT、AST、肝匀浆MDA的测定及肝脏病理学检查.结果CCl4模型组的ALT、AST显著高于阴性对照组.三精蜂王浆冻干片高、低剂量组(0.75、0.075g/kg)的ALT较CCl4模型组低,差异有显著性.高剂量组大鼠肝细胞坏死较CCl4模型组轻,差异显著.结论三精蜂王浆冻干片对化学性肝损伤有辅助保护作用.     

人工发酵虫草菌粉及其提取物保肝作用的研究

目的 观察人工发酵虫草菌粉及其提取物对实验性肝损伤的保护作用。方法 分别采用D-氨基半乳糖(D—G1aN)和四氯化碳(CCl4)致小鼠急性实验性肝损伤，测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量及肝组织切片病理观察。结果 对D—G1aN致小鼠急性肝损伤，人工发酵虫草菌粉及其提取物可使升高的ALT降低(P＜0．01)，病理检查显示有明显保肝作用，对AST作用不明显；而对CCl4致小鼠急性肝损伤，仅菌粉和其提取物高剂量组有一定的降ALT作用。结论 人工发酵虫草菌粉及其提取物有一定保肝作用。     

常见肝损伤动物模型构建和应用的研究状况

肝是机体生物转化的最主要器官,对于维持机体的生命活动发挥着重要作用.因此肝损伤会对机体造成严重伤害,轻则引发脂肪肝,持续性加重将诱导肝纤维化和肝硬化,最终导致肝衰竭或肝癌,严重危及人体生命健康.对此,建立与临床肝损伤的病理生理过程及发病程度相似的动物模型对于更好地探究肝损伤患者的发病机制及临床治疗方法就具有十分重要的意...     

肝损状态下尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶研究进展

肝脏是人体内最重要的代谢器官,包含绝大部分的Ⅰ相和Ⅱ相代谢酶,在内源性和外源性物质的代谢解毒方面起着重要的作用.参与葡萄糖醛酸代谢的尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)是Ⅱ相代谢中最重要的酶,与常见的CYP450酶相比,研究相对滞后,尤其在肝损伤状态下UGT的相关研究仍处于探索阶段.本文参考最新UGT的研究成果,综述了UGT分子生物学目前研究的概况、肝脏分布及其与肝脏疾病的关系;总结了几种不同诱因的肝损伤病理状态UGT表达和葡萄糖醛酸代谢的变化情况并且深入探讨了相关机制,旨在为药物的肝脏代谢尤其是在肝损状态下葡萄糖醛酸结合消除研究提供一定的参考依据,为肝脏疾病患者的临床合理用药提供指导.     

吲哚菁绿 15 min 滞留率在肝储备功能评估中的价值探讨

目的 探讨吲哚菁绿 15 min 滞留率（ICGR15）评估肝储备功能的价值。 方法 肝病患者 185 例, 其中肝衰竭组 45 例、肝硬化组 90 例（Child A、B 及 C 分别为 16、26 及 48 例）、急性肝炎组 20 例、慢性肝炎组（轻、中度）30 例。 比较各组的 ICGR15 表达水平差异。 比较肝衰竭组治疗前及治疗后 1 个月时 ICGR15、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）、凝血时间（PT）的变化。 急性肝炎组治疗前及治疗后 1 个月丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、 TBIL 及 ICGR15 水平的变化。 结果 肝衰竭组、肝硬化组、急性肝炎组、慢性肝炎组 ICGR15（%）分别为 56.3±14.7、 28.9±9.6、 22.4±6.8、 13.7±2.3, 呈逐渐下降趋势（F=125.317, P＜ 0.05）。 其中 , 肝硬化组 Child A 、 B 及 C 级别组 ICGR15（%）水平分别为 17.3±5.4、25.7±7.5、34.5±7.3, 呈逐渐升高趋势（P＜ 0.05）。 治疗后１个月时, 肝衰竭组 TBIL、 PT 及 ICGR15 均低于治疗前, 急性肝炎组 ALT、AST、TBIL 及 ICGR15 均低于治疗前（P＜ 0.05）。 结论 ICGR15 可以反映肝功能储备情况, 且不受 ALB、鲜血浆应用的影响, 弥补了 ALB、PT 检查的不足。     

人工肝支持系统在各型重型肝炎治疗中的应用

目的 探讨人工体外支持系统在重型肝炎治疗中的疗效及其影响疗效的因素。方法 采用血浆交换仪进行血浆交换和胆红素吸附治疗各型重型肝炎患75例，共141例次。结果 75例重型肝炎患经血浆置换和/或胆红素吸附治疗后临床症状得到一定程度的改善，血清胆红素从平均495.6umol/L降至256.7unol/L，凝血酶原活动度从26.9%提高至54.3%。人工肝支持治疗后总生存率为58.6%(44/75），但该疗法对早期慢性重型肝炎疗效最佳，其存活率达86.2%(25/29）。肝肾综合征对该治疗效果影响最大，出现该并发症的患病死率高达82.6%(19/23）。结论 人工肝支持治疗对重型肝炎病情的改善、存活率的提高、黄疸的消退、凝血功能的改善均有肯定的疗效；该治疗对早期慢性重型肝炎疗效较好。     

复方中药对肝星状细胞胶原合成与降解的影响

目的观察中药复方丹参对肝星状细胞胶原合成与降解的影响.方法选择肝星状细胞系作为体外研究对象,MTT法观察药物对细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞上清液Ⅰ、Ⅲ、V型胶原含量,RNA-cDNA分子杂交检测细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平.逆转录多聚酶链反应检测间质胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平.结果中药复方丹参明显抑制肝星状细胞增殖且呈剂量依赖趋势,与对照组比较,中药组细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原含量明显降低,细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平明显降低,间质胶原酶基因表达水平明显增强,金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显受到抑制(P＜0.01).结论中药复方丹参可能通过抑制肝星状细胞的增殖,抑制胶原的异常合成,促进异常沉积胶原的降解,从而起到抗肝纤维化的作用.     

海狗油保肝作用的实验研究

目的：观察海狗油对化学毒物所致小鼠、大鼠急性肝损伤及对长期喂食高脂饲料大鼠的影响。方法：实验分为6组(n=10)：即空白组、模型组、阳性药组、海狗油低、中、高剂量组。化学毒物乙硫氨酸或四氯化碳致急性肝损伤实验：小鼠和大鼠各组分别灌胃(ig)给供试药9d或7d；d7ig DL-乙硫氨酸，实验结束时测定肝脂；d6ip四氯化碳，实验结束时测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和组织学检查。长期喂食高脂饲料大鼠实验：于实验d1一次性皮下注射小剂量四氯化碳并长期喂食高脂饲料造成脂肪肝模型大鼠，同时各组分别ig供试药，每天1次，连续10周后，称肝脏重量并计算肝脏系数，测定血脂、肝脂、脂质过氧化指标和组织学检查。结果：对乙硫氨酸致急性肝损伤的小鼠和大鼠ig给予海狗油(小鼠7．2 g·kg~(-1)，大鼠4．8g·kg~(-1))后，与模型组比较甘油三酯(TG)分别降低23％和16％(P＜0．01)；对四氯化碳致急性肝损伤的大鼠，海狗油4．8mg·kg~(-1)组使ALT降低24％(P＜0．01)、AST降低16％(P＜0．01)。长期喂食高脂饲料大鼠，与模型组比较，海狗油4．8mg·kg~(-1)组血清总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、肝重量及肝细胞内TG、TC、FFA和丙二醛(MDA)含量显著降低(P＜0．01)，超氧化物歧化酶(SOD)活性升高(P＜0．01)，组织学检查显示肝细胞内脂变程度减轻，脂滴减少。结论：海狗油对化学毒物所致急性肝损伤的肝细胞有保护作用，对脂肪肝的形成具有明显的预防作用。     

Overdose pattern and outcome in paracetamol-induced acute severe hepatotoxicity

AIMS

Paracetamol (acetaminophen) hepatotoxicity is the commonest cause of acute liver failure (ALF) in the UK. Conflicting data regarding the outcomes of paracetamol-induced ALF resulting from different overdose patterns are reported.

METHODS

Using prospectively defined criteria, we have analysed the impact of overdose pattern upon outcome in a cohort of 938 acute severe liver injury patients admitted to the Scottish Liver Transplantation Unit.

RESULTS

Between 1992 and 2008, 663 patients were admitted with paracetamol-induced acute severe liver injury. Of these patients, 500 (75.4%) had taken an intentional paracetamol overdose, whilst 110 (16.6%) had taken an unintentional overdose. No clear overdose pattern could be determined in 53 (8.0%). Unintentional overdose patients were significantly older, more likely to abuse alcohol, and more commonly overdosed on compound narcotic/paracetamol analgesics compared with intentional overdose patients. Unintentional overdoses had significantly lower admission paracetamol and alanine aminotransferase concentrations compared with intentional overdoses. However, unintentional overdoses had greater organ dysfunction at admission, and subsequently higher mortality (unintentional 42/110 (38.2%), intentional 128/500 (25.6%), P < 0.001). The King''s College poor prognostic criteria had reduced sensitivity in unintentional overdoses (77.8%, 95% confidence intervals (CI) 62.9, 88.8) compared with intentional overdoses (89.9%, 95% CI 83.4, 94.5). Unintentional overdose was independently predictive of death or liver transplantation on multivariate analysis (odds ratio 1.91 (95% CI 1.07, 3.43), P= 0.032).

CONCLUSIONS

Unintentional paracetamol overdose is associated with increased mortality compared with intentional paracetamol overdose, despite lower admission paracetamol concentrations. Alternative prognostic criteria may be required for unintentional paracetamol overdoses.     

Novel findings for the development of drug therapy for various liver diseases: Current state and future prospects for our liver regeneration therapy using autologous bone marrow cells for decompensated liver cirrhosis patients

We have developed an in vivo mouse model [the green fluorescent protein (GFP) / carbon tetrachloride (CCl(4)) model] and reported that infused GFP-positive bone marrow cells administered via a tail vein efficiently repopulated cirrhotic liver tissue under conditions of persistent liver damage induced by CCl(4). Moreover, bone marrow cells infused into the liver improved liver function and ameliorated liver fibrosis with higher expression of matrix metalloproteinase 9 (MMP-9), consistent with improved survival rate. Based on these findings, we started a multicenter clinical trial of autologous bone marrow cell infusion (ABMi) therapy for decompensated liver cirrhosis patients and demonstrated the efficacy of this approach without unexpected complications. However, this therapy involves bone marrow aspiration under general anesthesia and is not indicated for patients for whom general anesthesia is difficult. We therefore aimed to develop a new liver regeneration therapy in which cells having a curative effect on liver cirrhosis are isolated and cultured from a small amount of autologous bone marrow aspirated under local anesthesia and infused back into the same subject. Herein, we present results for the GFP/CCl(4) model and ABMi therapy and future prospects for a new liver regeneration therapy.     

Staggered overdose pattern and delay to hospital presentation are associated with adverse outcomes following paracetamol-induced hepatotoxicity

AIMS

Paracetamol (acetaminophen) poisoning remains the major cause of severe acute hepatotoxicity in the UK. In this large single centre cohort study we examined the clinical impact of staggered overdoses and delayed presentation following paracetamol overdose.

RESULTS

Between 1992 and 2008, 663 patients were admitted with paracetamol-induced severe liver injury, of whom 161 (24.3%) had taken a staggered overdose. Staggered overdose patients were significantly older and more likely to abuse alcohol than single time point overdose patients. Relief of pain (58.2%) was the commonest rationale for repeated supratherapeutic ingestion. Despite lower total ingested paracetamol doses and lower admission serum alanine aminotransferase concentrations, staggered overdose patients were more likely to be encephalopathic on admission, require renal replacement therapy or mechanical ventilation and had higher mortality rates compared with single time point overdoses (37.3% vs. 27.8%, P = 0.025), although this overdose pattern did not independently predict death. The King''s College poor prognostic criteria had reduced sensitivity (77.6, 95% CI 70.8, 81.5) for this pattern of overdose. Of the 396/450 (88.0%) single time point overdoses in whom accurate timings could be obtained, 178 (44.9%) presented to medical services >24 h following overdose. Delayed presentation beyond 24 h post overdose was independently associated with death/liver transplantation (OR 2.25, 95% CI 1.23, 4.12, P = 0.009).

CONCLUSIONS

Both delayed presentation and staggered overdose pattern are associated with adverse outcomes following paracetamol overdose. These patients are at increased risk of developing multi-organ failure and should be considered for early transfer to specialist liver centres.