3种灵芝多糖的研究

 目的对3种灵芝多糖的含量、单糖组成和糖蛋白含量进行研究。方法提取和纯化灵芝子实体、菌丝体和发酵液多糖,应用高效液相色谱法和凯氏定氮法对多糖的含量、单糖组成及糖蛋白质含量作了分析、比较。结果3种灵芝多糖含量分别为：子实体含0.75%;菌丝体含2.13%;发酵液含0.982 g·L^-1。3种多糖均由葡萄糖、果糖组成,这两种单糖在子实体和菌丝体多糖中的摩尔比相同,为7∶1;在发酵液多糖中的摩尔比为2∶1。3种灵芝多糖中糖蛋白含量分别为：子实体多糖含12.22%;菌丝体多糖含26.62%;发酵液多糖含2.92%。结论研究结果为综合开发利用灵芝提供了科学依据。     

草栽与段木栽培的灵芝活性成分的分离与鉴定 Ⅰ.多糖肽成分的提取、纯化及性质

目的　研究草栽和段木栽培灵芝的多糖性质和含量 ;考察以草代木栽培灵芝的可行性的研究。方法　提取、分离、逆相透析方法研究二者子实体多糖。应用气相色谱、凝胶渗透色谱法测定多糖的组成、摩尔比和相对分子质量。 IR,1 H- NMR和 1 3C- NMR等光谱确定多糖肽化合物结构。结果　草栽灵芝多糖肽 ( GL PG )和段木多糖肽( GL PW)的重均相对分子质量 ( Mw)分别为 5 .13× 10 5和 5 .85× 10 5;黏均相对分子质量 ( Mη)分别为 6 .2 1× 10 5和6 .96× 10 5,二者具有相同的相对分子质量分布及光谱数据。从光谱分析中看出各单糖间的苷键构型相似 ,均以β-苷键为主 ;糖肽部分均含有相同的 16种氨基酸 ,糖的组份为鼠李糖、木糖、果糖、半乳糖、葡萄糖等 ,GL PW还含有微量甘露糖。结论　草栽灵芝与段木灵芝多糖肽的主要理化特性相似 ,其提取率比段木灵芝约高 2 .8倍 ,为草栽灵芝的综合开发与药用提供了科学依据。     

灵芝多糖肽GL-PPSQ_2结构研究及其应用

目的从灵芝Ganoderma水提物中分离纯化活性多糖肽,对其进行结构研究,并作为对照品用于灵芝产品中多糖肽含量测定。方法采用热水提取、膜超滤技术和凝胶过滤色谱等方法进行分离纯化,根据理化测定及波谱数据分析鉴定化合物结构。检测多糖肽含量采用高效液相色谱仪附紫外检测器,以水作为流动相,体积流量为1mL/min。结果灵芝多糖肽相对分子质量为5.0×10~4,质量分数97%以上,得率为0.49%,多糖含量达87.17%,单糖组成以葡萄糖为主和少量甘露糖组成的多糖,其物质的量比为31.85∶1.00,含有16种氨基酸,氨基酸总量为5.04%。依据甲基化、一维和二维核磁谱图,GL-PPSQ2结构重复单元为主链由→3)-β-D-Glcp-(1→构成,每4个→3)-β-D-Glcp-(1→在O-6位连接一个长支链,该支链由α-D-Glcp-(1→、→4,6)-β-D-Glcp-(1→、→4)-β-D-Glcp-(1→和→6)-β-D-Glcp-(1→依次相连构成。结论通过膜技术和凝胶色谱分离纯化得到活性多糖肽,该方法简便、快速,为灵芝提取物及其产品中多糖肽质量控制提供了科学依据。     

碱提灵芝多糖的分离纯化、结构表征及免疫活性评价

目的从赤芝Ganoderma lucidum中提取、分离和纯化获得碱提多糖组分,在表征其基本理化性质和精细结构的基础上,对其体外免疫调节活性进行研究。方法赤芝子实体干燥粉碎后,利用碱提醇沉法提取粗多糖,经Q-Sepharose Fast Flow离子交换色谱柱纯化得到灵芝多糖组分(LZJ-0.15)。采用PMP柱前衍生-高效液相色谱法(HPLC)及高效凝胶渗透色谱-十八角度激光光散射联用法(HPGPC-MALLS)测定LZJ-0.15的单糖组成及相对分子质量特征,并通过核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)及二维谱(1H-1H COSY和1H-13C HSQC)对LZJ-0.15的精细结构进行表征。采用小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红实验对灵芝多糖LZJ-0.15进行免疫活性评价。结果 LZJ-0.15的相对分子质量、分子半径及Mw/Mn分别为24 700、46.6 nm和1.019,其单糖组成分析显示以葡萄糖为主(92.3%),核磁谱图显示LZJ-0.15为→3)Glc(β1→及→6)Glc(β1→连接为主的葡聚糖。RAW264.7细胞吞噬中性红实验显示LZJ-0.15具有较好的免疫调节活性。结论赤芝碱提灵芝多糖相较于水提多糖组分具有较优的免疫活性,有望开发成重要的免疫调节剂。     

柱前衍生化-HPLC法分析麻黄多糖ESP-B1的单糖组成

目的建立了柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生HPLC法分离检测6种中性糖、2种糖醛酸的方法,对麻黄纯多糖ESP-B1的单糖组成进行分析。方法麻黄热提总多糖经各种离子交换和凝胶柱色谱分离得到1个麻黄纯多糖ESP-B1,经H2SO4水解后,用PMP柱前衍生,KH2PO4-NaOH缓冲液(pH 6.8)-乙腈(84∶16)等度洗脱,高效液相250 nm紫外检测。结果麻黄纯多糖ESP-B1由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖4种单糖组成,其物质的量比为3.5∶2.2∶1.0∶93.3。结论该衍生化方法以及优化的高效液相色谱法具有简单、快速、重现性好等特点,可用于麻黄多糖中单糖组成的测定。     

不同品种灵芝多糖含量差异研究

目的 :比较产粉灵芝与无粉灵芝多糖含量的不同,明确不同品种灵芝子实体多糖含量的差异。 方法 :光学显微镜观察灵芝子实体结构,蒽酮-硫酸法测定了不同品种灵芝多糖含量。 结果 :无粉灵芝的多糖含量比产粉灵芝多糖含量高出近1倍;灵芝子实体由4部分组成,分别为菌皮、皮层、菌肉、菌管;子实体中菌管所占比例最大,厚度比例占70％以上,且多糖含量在各部分中也最高,最高可达3.88％。 结论 :无粉灵芝多糖含量高于产粉灵芝;菌管是灵芝子实体多糖的主要来源。     

草栽灵芝多糖肽提取条件的研究

灵芝[Ganoderma lucidum(Curt．:Fr．)Karst]具有多种生理活性和药理作用。为探讨草栽灵芝多糖肽替代段木栽培灵芝多糖肽的可行性,我们研究了草栽灵芝子实体多糖肽提取的最佳条件,发现草栽灵芝除了多糖肽的主要理化特性与段木灵芝相似外,多     

破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的分析

目的研究灵芝孢子粉多糖的组成、相对分子质量及相对分子质量分布,比较破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的异同。方法用不同提取方法提取灵芝孢子粉多糖,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析灵芝孢子粉多糖的相对分子质量及其分布。结果不同提取方法所得灵芝孢子粉多糖的得率不同,破壁后灵芝孢子粉含的多糖是不破壁的1.7倍;灵芝孢子粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,破壁与不破壁的多糖组成完全相同,其相对质量分数略有区别;破壁灵芝孢子粉多糖的GPC有两个多糖峰,相对分子质量分别为7.80×104和1.17×104,而不破壁灵芝孢子粉多糖只有相对分子质量为7.80×104的一个峰。结论破壁与不破壁孢子粉多糖的单糖组成相同,但破壁灵芝孢子粉多糖较不破壁孢子粉的多糖高出70%,增加部分为相对分子质量较小的多糖。这可以解释破壁灵芝孢子粉的功效好于不破壁灵芝孢子粉的原因。     

膜分离赣南黑灵芝多糖的研究

目的：本实验尝试以江西赣南出产的黑灵芝为研究对象,利用膜分离技术分离提纯灵芝多糖。方法：根据灵芝多糖与其他成分分子量差异,先采用微滤膜对灵芝浸提液进行除杂;然后采用超滤技术,对灵芝水提物进行分离。结果：分离出分子量〉100ku（AGP1）、30-100ku（AGP2）、10-30ku（AGP3）和〈10ku（AGP4）四个多糖组分。各分子量段多糖的总糖含量存在一定差异,AGP1的总糖含量最高,为52.77%,AGP4的总糖含量最低,为41.03%。结论：膜分离赣南黑灵芝多糖,具有操作简单,能耗少,工序简捷的特点,采用微滤超滤分离得到四个不同分子量段的赣南黑灵芝多糖组分,总糖含量及单糖组成分析表明四者总糖含量存在一定差异。相关结果可为灵芝多糖类保健食品的工业开发提供理论支撑。     

HPLC-ELSD法分析破壁灵芝孢子粉的多糖组成

目的建立HPLC-ELSD法对破壁灵芝孢子粉中多糖的单糖组成进行分析。方法采用Shodex Asahipak NH2P-50 4E色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(83∶17);体积流量1.0 m L/min;进样量10μL;柱温30℃;ELSD检测条件为漂移管温度85℃,载气体积流量2.0 m L/min。结果岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、果糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的进样量对数与峰面积对数在一定范围内均呈现出较好的线性关系,回收率均在87.5%~97.4%之间,而且RSD(n=6)均小于2%。结论该方法准确可靠,分离效果好,可用于破壁灵芝孢子粉多糖的单糖组成分析。     

日本灵芝对小鼠脾细胞产生白细胞介素-2的影响

本实验研究日本灵芝对小鼠脾细胞产生白细胞介素－２（ＩＬ－２）的影响。结果表明在试管内氢化考的松０．０２５－１μｇ／ｍｌ及环胞霉素Ａ０．０５μｇ／ｍｌ可明显抑制小鼠脾细胞产生ＩＬ－２，Ｐ〈０．０１。灵芝在试管内能明显对抗氢化考的松及环胞霉素Ａ的抑制作用而促进ＩＬ－２产生增加，其作用与药物浓度有关，１０μｇ／ｍｌ以上有显著作用，Ｐ〈０．０１。灵芝不同浓度与氢化考的松同时对脾细胞进行预处理８ｈ后，灵芝…     

灵芝孢子粉破壁技术、质量分析与深加工相关研究进展

破壁灵芝孢子粉为一种灵芝深加工产品,具有多种药理学活性,更易被人体吸收。灵芝孢子的破壁方法包括生物化学法、物理法和机械法等,工业生产多综合利用多种方法。破壁灵芝孢子粉的质量分析还没有统一的国家标准,灵芝孢子粉质量可以参考地方标准进行综合评价,还可以参考近期发表的一些分析方法。灵芝孢子粉提取物产品以孢子油为主,其它产品也有研发并推出市场。药理学研究表明,灵芝孢子油、灵芝孢子粉水提物和醇提物均具有抗癌活性,有良好的应用前景。     

泰山赤灵芝肽多糖的化学研究

从泰山赤灵芝中分离得到7个肽多糖,对主要成分化学研究证明TGLP-2分子量20.9×10⁴,为β-(1→3)(1→4)连接的甘露葡聚糖肽,TGLP-3分子量4.5×104,为β-(1→3)(1→4)(1→6)甙键连接的葡聚糖肽,并有α-甙键存在,TGLP-6分子量32×10⁴,为β-(1→3)(1→4)甙键相连的葡聚糖肽,TGLP-7分子量10×10⁴,为β-(1→3)(1→4)(1→6)糖甙键的半乳聚糖肽。     

赤芝菌丝体活性多糖的分离、纯化及结构研究

赤芝(Ganoderma lucidum)固体发酵菌丝体经水堤、乙醇沉淀得总菌丝体多糖,药理实验表明,总多糖具有明显的增强免疫和抗肿瘤活性。总多糖经DEAE-Sephadex柱层析分离、脱色、脱盐得多糖 GLMB_0。总多糖经硼酸型DEAE-Cellulose柱层析分离、脱色、脱盐得多糖GLMB_1。Sephadex柱层析法和旋光法测定了两多糖的纯度。GLMB_0为肽杂多糖,GLMB_1为杂多糖。笔者通过IR、完全酸水解、GC、Smith降解、酶解、β-消除反应、CNMR对GLMB_1、GLMB_0进行了结构研究。     

Comparative studies on the immunomodulatory and antitumor activities of the different parts of fruiting body of Ganoderma lucidum and Ganoderma spores

Ganoderma lucidum (GL, Lingzhi) has been suggested as a candidate for immunomodulation and cancer treatment. The present study aimed at comparing the different parts of the fruiting body (whole fruiting body, pileus and stipe) of GL as well as Ganoderma spores (sporoderm-broken and -unbroken), with regard to their antitumor and immunomodulatory activities in S-180 sarcoma-bearing mice. The hot water extracts of different parts of GL or the Ganoderma spores were orally administered to the sarcoma-bearing mice. The results showed that GL whole fruiting body, stipe and sporoderm-broken spore possessed stronger inhibitory activities on sarcoma growth when compared with the pileus extract. Higher immunomodulatory activities in terms of enhancing the proliferative responses and the cytokines (IFN-gamma, IL-4 and IL-6) production of spleen lymphocytes were also found in GL stipe and sporoderm-broken spore treatment groups. The sporoderm-broken spores had higher stimulatory effects on mitogen-activated spleen lymphocytes of healthy mice than those of sarcoma-bearing mice. In addition, the immunostimulatory activities of GL hot water extracts and Ganoderma spores were shown to be comparable; hence the latter did not show superiority in efficacy. This is the first comparative study on the immunomodulatory activities of Ganoderma spores and the fruiting body extracts.     

灵芝总三萜与紫杉醇或与顺铂在对人源肿瘤细胞细胞毒性中的相互作用

目的：灵芝三萜类化合物是常被用于辅助性肿瘤治疗的灵芝中具有细胞毒性作用的主要成分。本研究考察灵芝总三萜和化疗药物之间的相互作用。方法：应用了两种肿瘤细胞株即人宫颈瘤HeLa细胞株和人非小细胞肺癌A549细胞株。检测了将灵芝总三萜与紫杉醇或顺铂合用时对细胞的毒性作用，并用Chou and Talalay合用指数法判断合用的相互作用类型。结果：灵芝总三萜和紫杉醇的合用在HeLa细胞中表现为协同作用而在A549细胞中表现为加合作用。灵芝总三萜与顺铂的合用效果则依赖于该两种药物的作用强度，即当其中一种药物的作用强于另外一种时表现为拮抗作用，而当两种药物的作用相似时表现为协同作用。结论：灵芝总三萜可以促进某些化疗药物的作用。     

3种灵芝子实体腺苷TLC鉴定及HPLC含量测定

目的建立灵芝属药材赤芝、紫芝和树舌子实体中腺苷的HPLC含量测定及TLC鉴别的方法。方法采用硅胶GF254薄层板,以正丁醇-乙腈-0.1 mol.L-1醋酸铵-浓氨水(6:1:2:1)为展开剂,紫外光灯(254 nm)检视进行腺苷TLC鉴别;采用ZORBAX SB-C1(84.6×250 mm)色谱柱,以甲醇-0.01mo.lL-1磷酸二氢钾(10:90)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长:254 nm,柱温26℃为条件进行腺苷HPLC含量测定;结果 TLC法均可从赤芝、紫芝、树舌子实体中鉴别出腺苷;应用HPLC方法测定腺苷在3.125⁵0μg内线性关系良好(r=0.999 3),重复性良好(RSD=1.2%),平均加样回收率为103.9%,精密度良好(RSD=1.1%),24 h内测定结果稳定(RSD=1.1%),测得赤芝、紫芝和树舌的腺苷含量分别为38.7μg/g、35.3μg/g和75.2μg/g。结论采用TLC法和HPLC法鉴定灵芝药材中腺苷,简便易行,重复性好,可作为灵芝属药材(子实体)质量控制另一指标。     

灵芝总三萜与紫杉醇或与顺铂在对人源肿瘤细胞的细胞毒性中的相互作用

目的:灵芝三萜类化合物是常被用于辅助性肿瘤治疗的灵芝中具有细胞毒性作用的主要成分.本研究考察灵芝总三萜和化疗药物之间的相互作用.方法:应用了两种肿瘤细胞株即人宫颈瘤HeLa细胞株和人非小细胞肺癌A549细胞株.检测了将灵芝总三萜与紫杉醇或顺铂合用时对细胞的毒性作用,并用Chou and Talalay合用指数法判断合用的相互作用类型.结果:灵芝总三萜和紫杉醇的合用在HeLa细胞中表现为协同作用而在A549细胞中表现为加合作用.灵芝总三萜与顺铂的合用效果则依赖于该两种药物的作用强度,即当其中一种药物的作用强于另外一种时表现为拮抗作用,而当两种药物的作用相似时表现为协同作用.结论:灵芝总三萜可以促进某些化疗药物的作用.     

Post‐treatment of Ganoderma lucidum reduced liver fibrosis induced by thioacetamide in mice

The present study was aimed at assessing the effects of Ganoderma lucidum extract (GLE) on an established liver fibrosis model with reference to the previously reported hepatoprotective effect of GLE against CCl₄‐induced fibrosis in rats. Repeated administration of thioacetamide (TAA) for 12 weeks to mice induced liver fibrosis. Treatment with GLE after the induction of liver fibrosis decreased the hepatic hydroxyproline content and improved liver histology. RT‐qPCR analysis showed that GLE treatment reduced the mRNA expression of collagen (α1)(I), smooth muscle α‐actin, tissue inhibitor of metalloproteinase 1 and metalloproteinase‐13. In addition, the TAA‐induced decrease in total collagenase activity was reversed by GLE treatment. In conclusion, oral administration of GLE reversed TAA‐induced liver fibrosis, the mechanism of which might be related to the enhancement of collagenase activity. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.