克拉霉素的极谱催化波及其应用

目的建立灵敏快速测定克拉霉素的新方法。方法基于氧化剂存在时克拉霉素产生的极谱催化波,用线性单扫描极谱法快速测定克拉霉素。结果在0.24 mol·L^-1 KH₂PO₄-Na₂HPO₄ (pH 6.81)支持电解质中，克拉霉素于-0.79 V (vs SCE)电位处产生1个还原波。加入过二硫酸钾后，该还原波峰电流增加约20倍，峰电位基本不变，产生一极谱催化波。其二阶导数峰电流i_p″与克拉霉素的浓度在4.0×10^-7-5.0×10^-5mol·L^-1呈良好线性关系(r=0.999 1,n=10)，检出限为2.0×10^-7 mol·L^-1。结论该方法可用于药剂中克拉霉素含量的测定。     

H2O2存在下橙皮苷的极谱催化波机理及其应用

目的　研究在过氧化氢存在下橙皮苷极谱催化波产生机理,建立测定橙皮苷的极谱催化波新方法。方法用线性变位极谱法、循环伏安法等技术。结果　橙皮苷C-4位上的羰基C==O首先经单电子单质子还原为自由基,产生第1个还原波;该自由基的一部分由于共轭作用使其能量降低,并进一步还原,产生第2个还原波,另一部分发生二聚化反应。当氧化剂H_{2O2 存在时,H2O2 氧化橙皮苷羰基还原中间体自由基,阻断了该自由基进一步还原和二聚化反应,并使橙皮苷再生,产生橙皮苷的极谱催化波。在0.12mol·L^-1 HAc-0.4 0mol·L^-1 NaAc (pH 5.3)1.0×10^-2mol·L^-1 H2O2 支持电解质中,该催化波的一阶导数峰电流与橙皮苷浓度在1.0×10^-7-1.8×10^-6 mol·L^-1 有良好线性关系,相关系数γ=0.9954。检测限为8.0×10^-8mol·L^-1 。结论　该催化波有较高的灵敏度,可用于药物分析。}     

马蔺子素的单扫描示波极谱法测定

目的建立测定马蔺子素的极谱法。方法单扫描示波极谱法。结果在8.0×10^-3 mol·L^-1 Na₂B₄O₇-1.6×10^-2 mol·L^-1 KH₂PO₄ (pH 7.7)支持电解质中,马蔺子素有一灵敏的极谱还原波,其峰电位E_p=-1.23 V(vs SCE),二阶导数峰电流i_p″与马蔺子素浓度为1.5×10^-7～5.2×10^-6 mol·L^-1呈良好线性关系(γ=0.9992,N=9),检出限为6.0×10^-8 mol·L^-1。13次测量2.0×10^-6 mol·L^-1马蔺子素还原波二阶导数峰峰电流,相对标准偏差RSD为0.87%。结论该方法灵敏、简便、快速,可用于原料药及胶囊中马蔺子素含量的测定。     

四肽FMRFa对大鼠心室肌Na+/Ca2+交换的抑制

目的　研究四肽FMRFa对大鼠单个心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换的作用。方法　用膜片钳全细胞记录法测定成年大鼠心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换电流(I_Na⁺/Ca²⁺)和其他离子通道电流。结果　FMRFa对大鼠心室肌细胞I_Na⁺/Ca²⁺呈浓度依赖性抑制,100μmol·L^-1浓度时抑制内向和外向I_Na⁺/Ca²⁺密度分别达60.1%和56.5%,对内向电流及外向电流的IC₅₀分别为20μmol·L^-1和34μmol·L^-1。FMRFa5μmol·L^-1抑制I_Na⁺/Ca²⁺内向和外向电流密度分别为38.7%和34.9%,但FMRFa5μmol·L^-1及20μmol·L^-1对L型钙电流、钠电流、瞬时外向电流和内向整流钾电流均无显著抑制作用。结论　FMRFa对大鼠心室肌细胞是一个特异性Na⁺/Ca²⁺交换抑制剂。     

醋酸甲羟孕酮的极谱行为及其分析应用

目的:研究醋酸甲羟孕酮(MPA)的电极反应机理,拟定了测定MPA的单扫描示波极谱法。方法:用单扫描示波极谱法、快速扫描循环伏安法、恒电位电解法、紫外分光光度法等多种技术进行研究。结果:在醋酸盐缓冲溶液中,MPA的C=C双键首先发生单电子单质子还原,产生了中间体自由基HMPA·。随后HMPA·可以单电子单质子方式进一步还原,形成产物H2MPA;同时也可以与中性MPA分子形成二聚体自由基HMPA·MPA·。在0.2mol·L^-1HAc—NaAc缓冲液中,MPA还原波的二阶导数峰电流iP″与其浓度C_MPA在2.0×10^-6～6.0×10^-5mol·L^-1范围内成线性关系,相关系数γ=0.998。结论:证实MPA的还原过程有中间体自由基参与。     

格列美脲的极谱行为及测定格列美脲的极谱行为及测定

目的建立灵敏快速测定格列美脲的新方法。方法用氧化剂存在时格列美脲产生的极谱催化波提高分析灵敏度，用线性单扫描极谱法实现快速测定。结果在Na₂B₄O₇-KH₂PO₄支持电解质中，格列美脲产生1个催化氢波。加入K₂S₂O₈后，该催化氢波被催化，峰电流增加约25倍，峰电位基本不变，产生1个较灵敏的平行催化氢波。其二阶导数峰峰电流ip″与格列美脲浓度在1.0×10^-7～4.2×10^-5 mol·L^-1呈线性关系，检出限为5.0×10^-8 mol·L^-1。结论该方法可用于药物制剂中格列美脲含量的测定。     

大黄素的极谱行为及应用研究

在H₃BO₃-Na₂B₄O₇(pH8.5)底液中,大黄素在单扫示波极谱仪上于-0.75V(vs.SCE)左右有一灵敏的二阶导数峰,峰电流与浓度在1.42×10^-7～5.7×10^-6mol·L^-1和7.1×10^-6～7.1×10^-5mol·L^-1范围内呈良好的线性关系,检测限为0.7×10^-7mol·L^-1。本法操作简便、快速、灵敏、选择性好,应用于中药大黄中大黄素的测定,结果良好。本文还研究了大黄素的极谱行为及电极反应机理,并用电化学方法讨论了大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚和芦荟大黄素清除由邻苯三酚自氧化产生的超氧自由基(O^·-₂)的作用。     

柔红霉素在钴离子注入修饰电极上的电化学行为及其应用

目的研究柔红霉素在Co/GC离子注入修饰玻碳电极上的电化学行为及其应用。方法柔红霉素在0.05 mol·L^-1 Na₂HPO₄-KH₂PO₄溶液(pH 6.82)中，用Co/GC离子注入修饰电极进行伏安测定。结果得到一个良好的还原峰，峰电位为-0.60 V (vs SCE)。峰电流与柔红霉素的浓度在2.84×10^-8～1.42×10^-6 mol·L^-1和1.42×10^-6～1.28×10^-5 mol·L^-1呈线性关系，r分别为0.999 2和0.999 3，检出限为1.42×10^-8 mol·L^-1。用于注射液中柔红霉素的测定，回收率为95.8%～102.8%。用线性扫描、循环伏安法研究了柔红霉素的电化学行为及其机制。结论电极反应为具有吸附性质的准可逆过程，质子化的柔红霉素在电极表面得到2个电子和1个质子还原。离子注入电极对柔红霉素具有电催化活性。     

氧氟沙星在Pt/GC离子注入修饰电极上的电化学行为及其应用

目的　研究氧氟沙星在Pt/GC离子注入修饰电极上的电化学行为。方法　氧氟沙星在0.40mol·L^-1KCl溶液中,用Pt/GC离子注入修饰电极进行伏安测定。结果　得到一良好的还原峰,峰电位Ep=-1.35V(vsSCE)。峰电流与氧氟沙星的浓度在1.0×10^-6-3.0×10^-5mol·L^-1呈线性关系,相关系数γ=0.9992;检出限为5.0×10^-7mol·L^-1。该法用于药片的测定,获得满意结果。用线性扫描和循环伏安法等电化学手段研究体系的电化学行为和电极反应机理。用俄歇电子能谱(AES)、光电子能谱(XPS)和扫描电子显微镜(SEM)等表面分析技术检测了注入电极表面的元素的组成、价态和深度分布,对离子注入电极的催化性质进行了探讨。结论　实验表明,体系属于两电子还原的不可逆过程。     

银杏叶提取物对低氧复氧、H2O2和谷氨酸损伤时谷氨酸引起的大鼠星形胶质细胞［Ca2+］i变化的影响

目的研究银杏叶提取物对低氧复氧、H₂O₂和L-谷氨酸损伤时谷氨酸升高大鼠星形胶质细胞［Ca²⁺］_i的影响。方法钙荧光探针Fluo-3/AM标记胞浆内游离钙离子，激光扫描共聚焦显微镜测定［Ca²⁺］_i的变化。结果 在低氧复氧、H₂O₂以及高浓度的L-谷氨酸损伤后，外源性谷氨酸（27 μmol·L^-1）均不能引起培养乳大鼠星形胶质细胞正常的［Ca²⁺］_i升高，反而使［Ca²⁺］_i分别降低(3.3±1.6)%，(81±11)%和(81±7)%；损伤前预先给予GbE（10 mg·L^-1）不能明显改善星形胶质细胞的谷氨酸反应，但预先给予GbE（100 mg·L^-1）后，27 μmol·L^-1谷氨酸可使损伤的星形胶质细胞［Ca²⁺］_i分别升高(135±98)%，(117±93)%和(89±36)%。结论低氧复氧、H₂O₂以及高浓度的L-谷氨酸均能损伤星形胶质细胞的谷氨酸反应，影响神经细胞与胶质细胞的双向交流。GbE能明显逆转不同损伤后谷氨酸诱导星形胶质细胞［Ca²⁺］_i的异常变化，使星形胶质细胞在不同损伤时能维持正常功能，该作用可能与GbE的脑保护作用有关。     

Some properties of the interaction between 2,2'-diselenadibenzoic acid and serum albumins

The binding of 2,2'-diselenadibenzoic acid to bovine serum albumin (BSA) and human serum albumin (HSA) was studied by using fluorescence spectroscopy. The measurement was performed in Tris-HCl buffer aqueous medium at pH = 7.40. The quenching constant at 303 K was (3.277 +/- 0.046) x 10(13) L mol(-1) s(-1) for BSA, and (3.946 +/- 0.002) x 10(12) L mol(-1) s(-1) for HSA. Decreased quenching was observed in association with increased temperature. Our findings show that the observed binding constant is dependent on the ionic strength of the medium. It is said that electrostatic interactions play a role in the binding of 2,2'-diselenadibenzoic acid to serum albumin, in addition to the hydrophobic association. The decrease of the linearity of S-V plot demonstrates reduced binding of ligand to the protein in the presence of anionic surfactants such as sodium dodecyl sulfate (SDS), which indicates that 2,2'-diselenadibenzoic acid most likely binds to the hydrophobic pockets within sub-domain IIA of serum albumin, the same site as SDS.     

Analysis of eupatilin-human serum albumin interactions by means of spectroscopic and computational modelling

The interaction of eupatilin (5,7-dihydroxy-3',4',6-trimethoxyflavone) with human serum albumin (HSA) was studied at simulative physiological pH, with a HSA concentration of 3.0 x 10(-6)mol L(-1) and eupatilin concentrations over the range of 6.0 x 10(-6) to 1.9 x 10(-5) mol L(-1). Fluorescence spectroscopy in combination with UV absorption spectroscopy and Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy were used to study the binding properties (including binding mechanism, the binding constants, the number of binding sites and the binding mode) of the interaction of eupatilin with HSA and the effect of this drug on HSA conformation changes. According to the Scatchard equation there was only one class of binding site that could bind to HAS; the binding constants were 1.53 x 10(5), 1.20 x 10(5), 1.05 x 10(5), 0.87 x 10(5) L mol(-1) at temperatures of 287, 298, 310 and 318 K, respectively. The FTIR spectra revealed that the protein secondary structure changed, with reductions in alpha-helices of about 3.65% at a drug to protein molar ratio of 3. The thermodynamic analysis (enthalpy and entropy change: DeltaH(0) and DeltaS(0)) and the computational modelling study indicated that hydrophobic force played an important role in eupatilin-HSA complex stabilization, and eupatilin could bind within the subdomain IIA of HSA.     

盐酸西布曲明与牛血清白蛋白结合作用的光谱学研究

目的运用光谱学方法研究在生理pH值条件下盐酸西布曲明与牛血清白蛋白之间的结合作用。方法 通过荧光法和吸收光谱法确定了盐酸西布曲明对牛血清白蛋白的荧光猝灭机制。依据Scatchard方程测定了不同温度下该结合反应的结合常数和结合位点数。根据热力学方程讨论了两者间的主要作用力类型。结合同步荧光分析了盐酸西布曲明对牛血清白蛋白构象的影响。结果盐酸西布曲明对牛血清白蛋白的荧光猝灭机制为静态猝灭。在8，25和37 ℃时盐酸西布曲明与牛血清白蛋白的结合常数分别为1.21×10⁵，8.31×10⁴和6.97×10⁴ L·mol^-1，结合位点数均为1。结合反应的热力学参数为ΔH=-9.70 kJ·mol^-1，ΔS=56.41 J·mol^-1·K^-1。结论 两者结合的主要作用力类型是静电作用。盐酸西布曲明在体内能够被血清蛋白存储和转运且结合时对蛋白构象无影响。     

TPPS4的电化学分析法，TPPS4和BSA的相互作用以及环糊精对二者作用体系影响的荧光法研究

目的确立一种快速、准确检测水溶性卟啉(TPPS₄)的分析方法,从而进一步了解水溶性卟啉和牛血清白蛋白(BSA)之间相互作用的机制。方法采用电化学法对TPPS₄的极谱伏安行为进行了研究,同时采用电化学法、荧光法和紫外法对TPPS₄与BSA之间的相互作用分别进行了研究。3种方法相互辅证使得试验结果更加可靠。结果在底液NaH₂PO₄-Na₂HPO₄缓冲液(pH 7.18)中,TPPS₄在-0.70 V(vs SCE)处有一个稳定而灵敏的还原峰,其峰电流与TPPS₄浓度在1.0×10^-7～1.0×10^-5 mol·L^-1有良好的线形关系(r²=0.998 3,0.999 3),检测限LOD为3.0×10^-8 mol·L^-1。平均标准回收率为99.59%,精密度较好,RSD为0.56%(n=5)。在NH₄Cl-NH₃·H₂O缓冲液(pH 9.05)中,实验结果表明BSA与TPPS₄相互作用生成1∶1的TPPS₄-BSA超分子体系。另外,加入环糊精体系后,磺丁醚-β-CD(SBE-β-CD)和羟丙基-β-CD(HP-β-CD)均能促进TPPS₄与BSA发生反应。结论建立了一种简单、快速、准确的水溶性卟啉四-(4-磺基苯)卟啉(TPPS₄)的电化学分析方法。卟啉类药物被环糊精包合后更容易与人体内的蛋白质进行作用,环糊精在卟啉类药物的控制、释放中具有重要的作用和意义。     

糖基化白蛋白液中糖含量的不同定量方法比较

目的探讨测定糖基化白蛋白反应液中葡萄糖含量的适宜方法。方法对3熏5-二硝基水杨酸法、邻甲苯胺法和苯酚-硫酸法三种不同测定糖含量方法进行研究比较。结果3熏5-二硝基水杨酸法、邻甲苯胺法、苯酚-硫酸法测定糖的线性范围分别为:2.5×10-5～3.0×10-4mol/L,3.0×10-5～3.0×10-4mol/L,2.5×10-5～2.5×10-4mol/L;直线回归方程为:y=0.01780x-0.05400穴r=0.9991雪,y=0.006029x+0.004286穴r=0.9988雪,y=0.01554x-0.001905穴r=0.9994雪;摩尔吸光系数为:6.5×103L/mol·cm,2.4×102L/mol·cm,2.4×104L/mol·cm;回收率分别为:101.9%～108.0%,92.3%～109.1%,94.3%～104.5%。结论苯酚-硫酸法具有操作简便、准确、灵敏、快速、显色后颜色稳定等优点,适用于测定糖基化白蛋白样品中的糖含量。     

同步荧光光谱法研究牛蒡子苷-牛血清白蛋白体系的荧光增强效应

目的:研究牛蒡子苷与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制.方法:采用紫外-可见吸收光谱法和同步荧光光谱法.结果:在△λ=15 nm时,牛蒡子苷对BSA的荧光具有规律性增强作用,最大发射波长蓝移,表明牛蒡子苷的加入影响了BSA中酪氨酸残基的微环境.用荧光效应增强方程计算它们在298 K、310 K和318 K温度下的结合常数分别为K1=7.899×104 L/mol、K2=5.962×104 L/mol和K3=3.903 × 104 L/mol,对应温度下的热力学参数△H=-26.874 kJ/mol,△S分别为3.601、4.737、3.395 J/(mol·K),△G分别为-27.940、-28.340、-27.951 kJ/mol.结论:牛血清白蛋白与牛蒡子苷分子间有较强的结合作用,且结合力以静电相互作用为主.