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目的 探讨转化生长因子β(TGF-β)对miR-200b-200a-429簇表达的影响,对其调控机制作初步研究。 方法 使用RT-PCR方法检测TGF-β对人肾小管上皮细胞HK-2 miR-200a、miR-200b和miR-429表达的影响。PCR方法扩增出miR-200b-200a-429簇启动子序列,构建miR-200b-200a-429启动子荧光素酶报告基因表达载体,转染至HK-2细胞,检测其荧光素酶活性。观察TGF-β对miR-200b-200a-429转录的表达调控。 结果 实时定量PCR检测结果显示TGF-β作用细胞24 h后下调了miR-200a、miR-200b和miR-429的表达。成功构建miR-200b-200a-429启动子荧光素酶表达载体,测序正确,然后利用双荧光素酶报告基因系统证实构建的报告基因载体启动子具有活性,发现TGF-β可以抑制miR-200b-200a-429启动子活性(P<0.05)。 结论 TGF-β可以调控miR-200b-200a-429启动子的活性。 相似文献
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目的:探讨重组人转化生长因子(TGF)-β1荧光质粒的构建及经脂质体转染软骨细胞的表达情况.方法:体外酶消化分离法培养兔关节软骨细胞并采用特异性细胞外基质Ⅱ型胶原免疫细胞染色进行鉴定.双酶切法切取TGF-β1的cDNA片段,通过T4 DNA连接酶连接到pEGFP-C1载体上构建pEGFP-C1-TGF-β1表达质粒.用构建的pEGFP-C1-TGF-β1表达质粒经脂质体转染软骨细胞,在12、24 h、2、4、6 d通过荧光显微镜观察细胞内TGF-β1基因的表达,应用荧光定量PCR检测表达水平.结果:成功分离培养软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫细胞染色显示细胞胞质染成棕黄色,胞核基本不着色.pEGFP-C1-TGF-β1真核表达载体质粒成功构建,酶切及测序结果证明表达质粒的DNA序列完全正确.荧光显微镜观察转染后的软骨细胞有绿色荧光蛋白表达,软骨细胞的转染率分别为12 h:(8.22±2.02)%,24 h:(16.54 4±2.91)%,2 d:(14.06±3.67)%,4 d:(14.24±2.62)%,6 d:(12.36±2.28)%.荧光定量PCR检测转染软骨细胞TGF-β1基因拷贝数为16 277±1779,高于未转染软骨细胞的3095±205(P〈0.05).结论:构建的TGF-β1荧光质粒可以转染软骨细胞并获得表达,为基因治疗骨性关节炎的研究提供基础. 相似文献
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目的 探讨哮喘患者转化生长因子β1(TGF-β1)基因多态性与血清TGF-β1水平的相关性。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析结合琼脂糖凝胶电泳的方法检测哮喘患者TGF-β1基因型,采用酶联免疫吸附法测定血清中TGF-β1水平。结果 哮喘患者TGF-β1 TT型血清TGF-β1水平明显高于CT型和CT型(P〈0.01),CT型血清中TGF-β1水平与CC型比较无显著性差异(P〉0.05)。结论 哮喘患者TGF-β1基因多态性影响血清TGF-β1水平。 相似文献
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目的:探讨转化生长因子β1(TGF—β1)和转化生长因子DRⅡ(TGFβ1RⅡ)的表达与肝癌临床病理因素的关系,了解TGF—β1和TGFl3RⅡ在肝癌浸润、转移中的作用。方法:用免疫组化方法(S—P法)检测原发性肝细胞肝癌和癌旁组织57例中TGF—β1和TGFβ1RⅡ的表达水平。结果:TGF-β1,在肝癌组织中的阳性表达47例(82.46%)显著高于癌旁组织38例(66.67%)(P〈0.05);TGFβ1RⅡ在肝癌组织中的阳性表达20例(35.09%),显著低于癌旁组织48例(84.21%)(P〈0.05)。TGF—β1在有转移的患者中的表达率为(92.31%)明显高于无转移的患者(74.19%)(P〈0.05),而TGFβ1RⅡ在有包膜浸润、转移、组织分化Ⅲ-Ⅳ的患者中染色较浅且阳性表达率明显下降,分别为19.52%、19.23%和7.14%,明显低于相对应组50.00%、49.39%和62.07%的阳性表达率(P〈0.01)。结论:TGF—β1过度表达和TGFβ1RⅡ表达下降可能增强了肝癌细胞的浸润、转移。 相似文献
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转化生长因子β1与支气管哮喘的相关研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 :观察血清转化生长因子 β1(TGF - β1)在不同严重度以及治疗前后哮喘患者的浓度变化。方法 :对治疗前的哮喘发作组 (分轻度和中重度组 )和正常对照组用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定TGF -β1浓度 ,对治疗后的哮喘发作组再用ELISA测定TGF - β1浓度。结果 :治疗前哮喘发作组血清TGF - β1浓度较正常对照组低 ,中重度组较轻度组低 ,各组间差异均有显著性 (P <0. 0 0 1)。治疗后中重度组中TGF -β1浓度升高明显 ,与治疗前比较 ,差异有统计学意义 (P <0 . 0 0 1)。轻度组中TGF - β1浓度升高不明显 ,与治疗前比较 ,差异没有统计学意义 (P >0 . 5 )。结论 :在全身系统中 ,TGF - β1可能起到抑制哮喘的作用 ,为治疗哮喘提供一个新的思路。 相似文献
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人成骨肉瘤细胞系转化生长因子β1成熟肽基因克隆及序列分析 总被引:3,自引:3,他引:0
目的:分析人成骨肉瘤细胞系中转化生长因子β1(TGF—β1)成熟肽基因序列,探讨TGF—β1基因突变存在的可能性及其病理机制。方法:提取人成骨肉瘤细胞系SOSP—9607中的总RNA,采用逆转录PCR(RT—PCR)方法获得TGF-β1成熟肽基因,经克隆后进行序列测定和分析。结果:发现人成骨肉瘤细胞系中存在TGF-β1基因突变,并引起相应多肽的结构改变。结论:人成骨肉瘤细胞系肽SOSP-9607中存在TGF-β1基因突变,其可能在病理机制中起重要作用。 相似文献
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维拉帕米阻断TGF-β1诱导的α1(Ⅰ)胶原基因启动子的激活 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:探讨维拉帕米对α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的影响。方法:将人α1(Ⅰ)胶原基因启动子重组体pCOLH1.5、pCOLH2.5转染至大鼠肾小球纱膜细胞,分别经不同浓度的转化生长因子β1(TGF-β1)和纺拉帕米处理后,ELISA法测定细胞CAT表达水平。结果:TGF-β1作用后,pCOLH1.5和pCOLH2.5的CAT活性明显增加,分别为对照组的1.498和1.551倍;维拉帕米对两上重组体的CAT表达均有抑制作用,与单纯TGF-β1组比较,维拉帕米加TGF-β1组pCOLH2.5的CAT活性明显降低(维拉帕米低浓度组P<0.05,高浓度组P<0.01)。结论:维拉帕米不仅直接抑制启动子的活性,而且还部分阻断TGF-β1诱导的α1(Ⅰ)胶原基因启动子激活。 相似文献
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转化生长因子β1在宫颈癌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
转化生长因子β1(Ttransforming growth factor β1,TGFβ1)是一种具有广泛生物学作用的同源二聚体多肽.它可在细胞增殖、细胞外基质沉积、血管生成及免疫反应等生理病理过程中起作用[1].其在肿瘤发生和恶性转化过程中的作用尤其受到有关学者的重视.国内外文献已报道,多种肿瘤TGFβ1表达均强于其起源组织,而宫颈癌中TGFβ1的表达特点在国内还未见相关报道.本研究对72例宫颈癌进行TGFβ1免疫组织化学染色,以探讨TGFβ1在宫颈癌组织中的表达特点及其意义. 相似文献
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肝纤维化是各种致病因子持续作用于肝脏 ,导致慢性肝损伤后的共同病理改变[1 ,2 ] ,多种细胞因子参与肝纤维化的发生[3 ,4] ,其中 ,转化生长因子 β1 (transforminggrowthfactorβ1 ,TGF β1 )起关键性的作用[5] 。本文对TGF β1在肝纤维化发生中的作用及诊断、治疗中的意义作一综述。1 TGF β1概要TGF β1是一大家族的前体物质 ,大多由实质细胞产生 ,亦可由浸润细胞 ,如淋巴细胞、单核细胞 /巨噬细胞和血小板产生及释放。在损伤或炎症时 ,所有这些细胞都是TGF β1的潜在来源。TGF β1可调节细胞的生长和细胞形态学发生 ,诱导基质… 相似文献
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目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和转化生长因子βRⅡ(TGFβRⅡ)的表达与肝癌临床病理因素的关系,了解TGF-β1和TGFβRⅡ在肝癌浸润、转移中的作用.方法:用免疫组化方法(S-P法)检测原发性肝细胞肝癌和癌旁组织57例中TGF-β1和TGFβRⅡ的表达水平.结果:TGF-β1在肝癌组织中的阳性表达47例(82.46%)显著高于癌旁组织38例(66.67%)(P<0.05);TGFβRⅡ在肝癌组织中的阳性表达20例(35.09%),显著低于癌旁组织48例(84.21%)(P<0.05).TGF-β1在有转移的患者中的表达率为(92.31%)明显高于无转移的患者(74.19%)(P<0.05),而TGFβRⅡ在有包膜浸润、转移、组织分化Ⅲ-Ⅳ的患者中染色较浅且阳性表达率明显下降,分别为19.52%、19.23%和7.14%,明显低于相对应组50.00%、49.39%和62.07%的阳性表达率(P<0.01).结论:TGF-β1过度表达和TGFβRⅡ表达下降可能增强了肝癌细胞的浸润、转移. 相似文献
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目的:探讨转化生长因子β1和冠心病(CAD)的关系。方法:采用ELISA法检测303例CAD患者和68例健康对照者血浆中活化的转化生长因子β1(TGFβ1)和总TGFβ1的含量。结果:CAD患者总TGFβ1水平与对照组的水平无明显差异(P>0.20),但活化的TGFβ1水平CAD患者明显高于对照组(P<0.001)。随着病变冠脉数量增加,活化TGFβ1水平亦呈线性增加(P<0.001),三支冠脉病变患者的活化TGFβ1水平是对照组的两倍。结论:血浆活化TGFβ水平增高可能与CAD发生发展有密切关系。 相似文献
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转化生长因子β1对胰腺星状细胞中结缔组织生长因子基因的调控作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠结缔组织生长因子(CTGF)基因启动子活性的调控作用。方法 将大鼠CTGF基因启动子片段与荧光素酶报告基因组成重组体pcTGF-luc。采用脂质体转染方法将该质粒转至原代分离并培养的2~5代大鼠胰腺星状细胞(PSCs)中,24h后分别在不同时间和不同浓度的体外CTGF-β1刺激下用Dual-luciferase报告系统检测相应荧光素酶的活性。结果 TGF-β1表现为以剂量和时间依赖的方式上调PSCs中CTGF基因启动子活性,TGF-β1在短时间内即可使CTGF基因启动子活性明显增高,并达到高峰,且能有效地保持至36h左右。结论 在PSCs中,TGF-β1主要在转录水平调节CTGF表达,较小浓度和较短时间即可使CTGF启动子活性增强。 相似文献
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转化生长因子-β1基因单核苷酸多态性与卵巢癌的相关性 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)基因启动子多态性各等位基因及基因型在卵巢癌患者中的分布频率,初步分析其基因型及血清水平与卵巢癌的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测110例卵巢癌患者和120例正常对照组TGF-β1的基因多态性,包括TGF-β1基因启动子-800G/A,-509C/T位点,同时采用酶联免疫吸附试验检测血清TGF-β1水平。结果卵巢癌患者血清TGF-β1水平显著高于对照组(P<0.01),TGF-β1基因-800G/A位点多态性在卵巢癌组和正常人群中的分布差异无显著性(P>0.05),而TGF-β1基因-509C/T多态性各等位基因及基因型频率在两组人群中的分布差异有显著性(P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,T等位基因携带者患卵巢癌的风险是C等位基因的1.702倍,携带T等位基因的卵巢癌患者血清TGF-β1水平显著高于不携带者(P<0.01)。结论TGF-β1基因-509C/T多态性与卵巢癌的发病具有相关性,其中T等位基因可能是卵巢癌发病的遗传易感基因;携带T等位基因的个体可能通过促进TGF-β的高度表达进而增加了卵巢癌的发病风险。 相似文献
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目的:观察山莨菪碱对肝纤维化大鼠肝组织内转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体(TβRⅠ)表达的影响,探讨该药对肝纤维化防治作用的机制。方法:本研究用四氯化碳(CC l4)诱导肝纤维化模型。防治组在造模后1h始以山莨菪碱7.0mg.kg-1.d-1腹腔注射。大、小剂量治疗组造模后第4周始腹腔注射给药,剂量分别为14.0mg.kg-1.d-1和7.0mg.kg-1.d-1。第10周末测定血清血清谷丙转氨酶(ALT)和透明质酸(HA),RT-PCR法和免疫组化法分别检测肝组织中TβRⅠmRNA和TGF-β1蛋白的表达。结果:各山莨菪碱给药组大鼠血清ALT和HA含量均较模型组明显下降(P<0.01或P<0.05);同时该药还能抑制纤维化肝组织中TβRⅠmRNA的表达和TGF-β1蛋白的表达。结论:山莨菪碱能通过抑制肝组织中TGF-β1及TβRⅠ的表达,减轻肝纤维化。 相似文献
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类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是由于机体的免疫功能失调导致体液免疫和细胞免疫的高敏感性引起的以关节滑膜组织炎性增生、关节破坏为主要特点的一种疾病。其主要病理改变是关节滑膜改变,即滑膜炎和血管翳形成,血清和滑膜组织中多种细胞因子、抗原抗体黏附分子的变化。其中细胞因子在类风湿关节炎发病过程中起了至关重要的作用,是炎症和损伤的重要递质,转化生长因子-β1(transforming growth factor -β1,TGF-β1)近年来备受关注,它是一种重要的调节细胞生长及分化的多肽因子,具有双重生物学效应, 相似文献