系统性红斑狼疮患者外周血T辅助细胞因子的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中T辅助细胞因子Th1和Th2的表达情况。方法：用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测了10例正常人和8例活动期SLE患者血清中的白细胞介素2（IL－2）、白细胞介素4（IL－4）、白细胞介素10（IL－10）、γ干扰素（INF－γ）的表达水平。结果：与正常人相比，活动期SLE患者外周血中IL－2的表达水平降低（P＜0．05），IL－10的表达水平增高（P＜0．01），而INF－γ与IL－4则无显著性差异（P＞0．05。结论：活动期SLE患者中Th12细胞因子表达为IL－2的下调，Th2细胞因子表达为IL－10的上调，可能在SLE发病机制中起一定的作用。     

初发SLE患者Th1/Th2及其调控因子基因的研究

目的：探讨未经药物治疗初发狼疮病人Th1/Th2细胞亚群分布及其调控细胞因子基因表达的差异。方法：运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发狼疮病人细胞亚群分布，并以10例正常人作对照；ABI 7700real-time PCR法同时检测38例病人和28例正常人IL－10、IL－12P40、IL18mPNA表达水平的差异。结果：1、初发狼疮病人Th1较正常人明显减低（P＜0．05），但Th1/Th2无显著性改变。2、与正常组相比，SLE组病人IL－12P35、IL－12P40、IL－18mRNA及其受体表达较正常人明显降低（P均＜0．05）；3、面部红斑组病人Th1/Th2、IL－12P35较正常组降低（P均＜0．05）；4、RNP阳性组病人IL－12P40较正常组升高，IL－12P35、IL－18较正常组降低（P均＜0．05）；5、有关节炎较无关节炎患者IL－18RmRNA表达升高（P＜0．05）。结论：SLE是一种以Th1细胞下降，Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病，源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致。     

腺苷、白介素—1及茶碱对哮喘患者外周血单核细胞A2腺苷受体mRNA表达的影响

目的 通过研究腺苷、白介素（IL）－1、茶碱对哮喘患者外周血单个核细胞（PBMCs)表达A2a及A2b腺苷受体（A2aAR及A2bAR)mRNA的影响,探讨A2aAR及A2bAR在哮喘发病中的作用,为临床使用茶碱提供理论依据。方法 11例正常人及哮喘患者PBMCs经Ficoll液分离,分对照组,腺苷组、腺苷＋IL－1组及腺苷＋茶碱4组,体外培养18小时,收集细胞,采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）法和图象分析半定量法检测A2aAR及A2bAR mRNA表达。结果 正常人及哮喘患者各组PBMCs表达A2aARmRNA无明显差异（P＞0．05）。哮喘患者PBMCsA2bAR mRNA表达较正常人增加（P＜0．01）,腺苷、IL－1促进哮喘患者（P＜0．01）。腺苷及IL－1对哮喘患者PBMCsA2bAR mRNA表达的影响与血清TIgE水平呈正相关（P＜0．05）,与FEV1％呈负相关P＜0．05）。结论 PBMCs A2bARmRNA表达的影响与血清TIgE水平呈正相关（P＜0．05）,与FEV1％呈负相关P＜0．05）。结论 哮喘患者PBMCs表达A2bmRNA增加,腺苷及IL－1促进其表达,且与患者机体过敏状态及气道阻塞程度相关,茶碱能抑制A2bAR mRNA表达;腺苷、IL－1及茶碱对PBMCs表达A2aAR mRNA无明显影响。     

系统性红斑狼疮患者Th1／Th2相关转录因子的基因表达

目的：探讨转录因子对T细胞分化的影响及它们和细胞因子在系统性红斑狼疮（SEE）发病机制中的作用。方法：利用实时荧光定量PCR技术检测SLE患者、正常人外周血单核细胞（PBMC）中T—bet和GATA-3 mRNA表达状况;用ELISA检测SLE患者、正常人血清中IL-10和TGF-β水平。结果：SLE患者T—bet mRNA表达低于正常人,差异具有显著性（P〈0．05）;SLE患者GATA-3mRNA表达明显高于正常人,具有统计学差异（P〈0．05）。SLE患者IL-10明显高于正常人,差异具有统计学意义（P〈0．05）;SLE患者TGF-8与正常人差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：SLE患者Th1／Th2免疫不平衡占优势,调节Th1细胞的转录因子T—bet表达降低。调节Th2细胞的转录因子GATA-3表达升高,细胞因子IL-10水平升高,TGF—β没有明显变化。     

高分子合成膜和纤维素膜透析器生物相容性的研究

目的：比较高分子合成膜透析器和纤维素膜透析器的生物相容性。方法：利用酶联免疫吸附分析（ELISA）方法和逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）、斑点杂交方法检测了应用铜仿膜（14例）、聚甲基丙烯酸甲酯膜（PMMA）（14例）、聚砚膜（14例）血液透析患者、尿毒症未透析患者（10例）、腹膜透析患者（10例）及正常人（10例）血浆IL－1β、TNFα、IL－6水平及其基因表达。结果：正常人血浆IL－1β、TNFα、IL－6水平很低,外周血单核细胞（PBMC）中未检测到它们的mRNA表达。尿毒症未透析患者血浆IL－1β、TNFα、IL－6水平显著高于正常（P＜0．05）,表达3种细胞因子的mRNA。血液透析患者透析中细胞因子的mRNA表达均较未透析者显著升高（P＜0．05）,其中铜仿膜组IL－1β、TNFα、IL－6mRNA表达显著高于PMMA膜组和聚砚膜组,后两者间无显著性差异。但应用3种透析膜透析过程中IL－1β、TNFα、IL－6的血浆水平无显著性差异（P＞0．05）。结论：铜仿膜的生物相容性较PMMA膜、聚砚膜差,可导致细胞因子基因的过度表达,机体免疫功能紊乱。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th1和Th2平衡的研究

目的 通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患外周血中CD4^ 和CD8^ T淋巴3细胞分泌细胞因子的情况以及γ干扰素（IFN-γ)和白介素－4（IL－4）的水平，探讨T淋巴细胞亚群与SLE发病的关系。方法 采用流式细胞术分析SLE患和正常健康人外周血中淋巴细胞内细胞因子（IFNγ、IL－4）和表面抗原（CD4、CD8），用Dot blot法检测IFN－γ和IL－4mRNA的表达。以ELISA法测定血清中IFN－γ和IL－4的水平。结果 与对照组相比，SLE患外周血中1类辅助T细胞（Th1)、Th1/Th2比率、IFN－γmRNA的表达和IFN－γ水平和IFN－γ／IL－4比值均明显降低（P＜0．01），而Th2细胞、Th0细胞和IL－4 mRNA表达的水平及其外周血中IL－4的水平则无明显改变（P＞0．05）。结论 在SLE患外周血中，Th1细胞的数量及其分泌的细胞因子的水平均明显下调，提示Th1/Th2细胞的失衡在SLE发病中有着重要的作用。     

SLE患者血清IL—4、IFN—γ水平测定及意义

目的：通过检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE)患血清细胞因子细胞介素－4（interlukin-4,IL-4)，γ－干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）水平，探讨T淋巴细胞亚群与SLE发病的关系。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定SLE患和健康志愿血清IL－4和IFN－γ水平。结果：（1）SLE活动组血清IL－4水平和IL－4／IFN－γ值明显升高，与非活动组、对照组比较有显性差异（P＜0．001）。（2）血清IFN－γ水平3组（SLE活动组，非活动组和对照组）间比较差异无显意义（P＞0．05）。（3）SLE患激素治疗后血清IL－4水平明显降低。结论：IL－4、IFN－γ作为区分CD4T细胞亚群的指标之一，间接反映了Th1,Th2细胞活化状态；SLE患血清IL－4水平，IL－4／IFN－γ值明显升高，且与病情活动性相关；IFN－γ水平无明显变化，说明活动性SLE患存在Th2细胞优势活化状态，破坏了体人Th1/Th2正常平衡状态。血清IL－4水平可作为SLE病情活动性监测指标之一，并可作为疗效判断指标之一。寻找有效方法调节SLE患血清IL－4水平，从而调节体内Th1-Th2平衡，将为治疗SLE开辟一条新途径。     

哮喘病人外周血单个核细胞ICAM-1 mRNA表达测定

目的：探讨细胞间粘附分子－1（ICAM－1）在哮喘炎症反应中的作用，进一步了解哮喘发病机制。方法：采用免疫组织化学和RT－PCR方法检测10例支气管哮喘发作患者和10例正常人外周血单个核细胞（PBMCs)ICAM-1表达。结果：哮喘患者PBMCs ICAM-1及ICAM－1mRNA均较正常对照组增高（P＜0．05），哮喘患者PBMCs ICAM－1与ICAM－1 mRNA表达成正相关。结论：ICAM－1参与哮喘炎症反应的发生。     

地塞米松对狼疮性肾炎患者外周全血培养细胞IL-12,IFN-γ分泌水平的影响

目的：探讨狼疮性肾炎（LN）患者外周循环IL－12，IFN－γ分泌水平的变化，以及肾上腺皮质激素对其分泌的影响。方法：选取16例活动性LN患者和10例正常人，采集静脉血标本分空白组，LPS／PHA刺激组及LPS／PHA＋DXM组作体外全血细胞培养，然后应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养上清IL－12，IFN－γ分泌水平，经扣除血浆基础细胞因子水平后作为该例标本的IL－12或IFN－γ分泌量。结果：LN患者的全分泌水平，经扣除血浆基础细胞因子水平后作为该例标本的IL－12或IFN－γ分泌量。结果：LN患者的全血培养细胞IL－12及IFN－γ的分泌量明显高于正常人（IL－12：P＜0．005，IFN－γ：P＜0．001）；而且两者均与系统性红斑狼疮疾病活动指数（SLEDIA）呈不同程度的正相关关系；DXM对IL－12及IFN－γ分泌均有显著的抑制作用（均P＜0．01），而且在LN患者抑制作用更明显。结论：IL－12及IFN－γ分泌上调在LN的发病中起重要作用，抑制IL－12及IFN－γ的产生可能是它治疗LN中的机制之一。     

高迁移率族蛋白B1及其糖基化终产物受体在系统性红斑狼疮患者中的变化及其临床意义

目的：探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）及其糖基化终产物受体（RAGE）在系统性红斑狼疮（SLE）发病中可能的作用。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测52例SLE女性患者（SLE组）及40例体检健康女性（HC组）血浆HMGB1水平;同时采用实时荧光定量PCR（RT‐qPCR）检测外周血单核细胞（PBMCs）HMGB1及RAGE mRNA表达水平;并分析SLE患者血浆HMGB1及 PBMCs HMGB1、RAGE mRNA 水平与临床指标的相关性。结果 SLE 组患者血浆 HMGB1及 PBMCs HMGB1 mRNA水平高于HC组,差异均有统计学意义（P＜0．01）;而PBMCs RAGE mRNA水平比较,差异无统计学意义（P＞0．05）;Spearman相关性分析显示,SLE患者血浆 HMGB1水平与抗核抗体滴度、SLE活动性指数（SLEDAI）评分均呈正相关（P＜0．05）,与其他临床和实验室指标无明显相关性（P＞0．05）;HMGB1 mRNA表达水平与RAGE mRNA表达水平、SLEDAI评分均呈正相关（P＜0．01,P＜0．05）,与其他临床和实验室指标无明显相关性（P＞0．05）。结论血浆 HMGB1及 PBMCs HMGB1 mRNA在SLE患者的异常表达提示其可能在SLE的发生、发展中发挥作用,可能参与了SLE的免疫炎症调节。     

miR-203在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-203的表达水平与疾病活动度?肾脏受累情况等临床表现之间的关系,初步探讨miR-203在SLE中的临床意义?方法:收集31例SLE患者?16例健康志愿者外周血标本,根据肾脏受累分为狼疮肾炎21例和SLE无肾脏受累10例?采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quota polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中miR-203表达,比较各组间miR-203表达水平的差异,并分析其与SLE临床指标之间的关系?结果:SLE患者miR-203表达明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.05);狼疮肾炎组患者miR-203表达低于SLE无肾脏受累组和正常对照组,差异具有统计学意义(P < 0.01);SLE患者miR-203表达水平与24 h尿蛋白?肾脏急性指数呈明显负相关(P < 0.01)?结论:SLE患者PBMCs中miR-203的表达水平降低,表明miR-203在SLE发病机制中可能发挥一定作用;狼疮肾炎患者miR-203的表达降低,提示miR-203可能参与了狼疮肾炎的发病?     

系统性红斑狼疮26例IL-10及IL-12的异常表达及其相互作用

目的:了解系统性红斑狼疮(SLE)患者白细胞介素(IL)-10、IL-12异常表达的相互关系,探讨IL-10对IL-12分泌的影响。方法:取26例SLE患者及正常对照18例志愿者的外周血(PBMCs),用ELISA法测定其血清、单个核细胞(PBMCs)培养上清、植物血凝素(PHA)刺激培养上清中IL-10、IL-12水平;在SLE患者及正常对照PBMCs中分别加入正常人血清、SLE血清、SLE血清 IL-10抗体,PHA刺激培养24h,用ELISA法测培养上清中IL-12的水平。结果:SLE患者血清、PBMCs培养上清中自发产生和PHA刺激诱生的IL-10及IL-12P40水平均异常增高。然而仅血清IL-10水平与SLEDAI呈正相关,但血清IL-12P40水平、PBMCs培养上清自发产生的及PHA刺激诱生的IL-12P40水平均与SLEDAI呈正相关。尽管SLE患者血清IL-10水平与IL-12P40血清及PBMCs培养上清水平呈正相关,但体外实验时,在PBMCs培养中,加入SLE血清,可显著抑制IL-12的产生,采用IL-10抗体中和掉SLE血清中的IL-10后,正常人或SLE患者的PBMCs培养上清中IL-12可明显增多。结论:SLE患者IL-10及IL-12表达水平异常增高,且血清水平与SLE活动性正相关;体外细胞培养实验中SLE血清中IL-10可明显抑制IL-12的分泌,但在细胞因子网络环境中两者之间相互作用更为复杂。     

单核细胞趋化蛋白-1表达与狼疮肾炎

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在狼疮肾损伤中的作用.方法应用ELISA方法测定112例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例类风湿性关节炎患者、11例非SLE肾损伤患者及40例正常健康者血清MCP-1水平;应用RT-PCR方法,测定以上各组外周血单个核细胞(PBMCs)MCP-1 mRNA表达.结果狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,尤其是狼疮肾炎活动组患者PBMCs MCP-1 mRNA表达增加最为显著(P＜0.001),PBMCs MCP-1 mRNA表达不仅与总狼疮疾病活动指数评分呈正相关(r=0.6245,P＜0.001),而且与狼疮疾病活动指数肾评分呈正相关(r=0.6808,P＜0.001),而在类风湿性关节炎组和非狼疮肾脏疾病组仅低水平表达,与正常对照组水平相近似(P＞0.05).狼疮活动组血清MCP-1水平较非活动组及正常对照组均明显升高(P＜0.001),但活动性狼疮肾炎组与无肾损伤组之间血清MCP-1水平的差异无显著性(P＞0.05).结论狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,并与狼疮肾炎的疾病活动情况密切相关.     

系统性红斑狼疮患者血清sICAM-1和IL-12的变化

目的 探讨活动期和稳定期系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清中的可溶性胞间粘连分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）和白细胞介素１２（ＩＬ－１２）的变化及其意义。方法 应用ＥＬＩＳＡ法测定１６例活动期、１５例稳定期及２０例健康者血清中要和ＩＬ－１２水平,并与抗－ｄｓＤＮＡ,抗核抗体（ＡＮＡ）,血沉等进行相关分析。结果 与对照组比较,稳定期和活动期口才血清中ＩＬ－１２水平依次降低;ＳＬＥ患者血清中ｓＩＣＡＭ－１水平     

循环型microRNA-26a及其靶基因PTEN与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨循环型microRNA-26a（miR-26a）及靶基因PTEN在系统性红斑狼疮（SLE）的表达,以及在SLE发生、发展中可能发挥的作用。方法选取36例SLE和10例健康体检者血液标本,实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-26a、外周血单个核细胞（PBMC）中PTEN 的表达,统计分析miR-26a、PTEN 与SLE临床资料的相关性,利用双荧光素酶报告系统验证PTEN是否为miR-26a 的靶基因。结果SLE 患者血清miR-26a mRNA 的表达高于健康人群（P <0.05）,PBMC 中PTEN mRNA 的表达低于健康人群（P <0.05）。SLE 患者miR-26a、PTEN 的表达水平与C3、抗ds-DNA、红细胞沉降率、狼疮活动指数相关。miR-26a 转染BaF3 细胞后,PTEN 表达下调,PI3K 表达上调,转染组荧光素酶活性下降（P <0.05）。结论SLE 患者血清中过表达的miR-26a可能通过下调靶基因PTEN,上调PI3K/AKT信号通路,参与SLE的发生、发展。     

B细胞刺激因子在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞上的表达及意义

目的 探讨B细胞刺激因子(Blys)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞上的表达情况及临床意义.方法 应用流式细胞仪技术,检测50例SLE患者(其中活动期和稳定期各25例)外周血单个核细胞上Blys的表达,与25例健康献血人员作比较.并分析SLE患者外周血单个核细胞上Blys的表达与病情活动、其他实验指标及自身抗体的关系.结果 SLE患者外周血单个核细胞上表达Blys的百分率上调(P＜0.001),活动期和稳定期SLE患者Blys的表达率均高于健康对照组(P＜0.001和P＜0.05);其中,活动期和稳定期SLE患者比较,活动期患者Blys的表达更高(P＜0.05).SLE患者外周血单个核细胞上Blys的表达水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.702,P＜0.001),与免疫球蛋白IgG、IgM呈正相关(r=0.695,P＜0.001和r=0.356,P＜0.01),与补体C3、C4呈负相关(r=-0.42,P＜0.001和r=-0.31,P＜0.05).dsDNA抗体( )组患者外周血单个核细胞上Blys的表达较dsDNA抗体(-)组高(P＜0.05).Clq抗体( )组患者外周血单个核细胞上Blys的表达也较C1q抗体(-)组高(P＜0.05).结论 Blys在SLE外周血单个核细胞上的表达率升高.Blys的表达在一定程度上反映了病情的活动,并与自身抗体的产生相关.     

系统性红斑狼疮患者血清IL-17和IL-35水平及其与肾损害的关系

目的:探讨白介素（IL）-17和IL-35在系统性红斑狼疮（SLE）中的作用及其与肾损害的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测55例SLE患者和25名健康者血清IL-17和IL-35水平,比较SLE患者与对照者、SLE活动组与SLE非活动组、狼疮肾炎（LN）患者与非LN患者中两种细胞因子的差异,分析SLE患者血清IL-17、IL-35、SLE疾病活动指数（SLEDAI）评分的相关性以及LN患者血清IL-17、IL-35与尿蛋白的相关性。结果:与对照者相比,SLE患者血清IL-17水平升高而IL-35水平降低（P＜0.01）,且SLE活动组的血清IL-17水平高于非活动组（P＜0.01）,IL-35水平低于非活动组（P＜0.01）。SLE患者血清IL-17水平与SLEDAI评分正相关而IL-35水平与SLEDAI评分负相关,且血清IL-17水平与IL-35水平呈负相关。与非LN患者比较,LN患者的血清IL-17水平升高而IL-35水平减低（P＜0.05）,且LN患者尿蛋白定量（24 h）与血清IL-17水平正相关,与IL-35水平负相关。结论:IL-17和IL-35是一对紧密相关的促炎/抗炎细胞因子,血清IL-17水平升高、IL-35水平下降,两者的平衡失调,参与了SLE的疾病发生及其肾脏损伤过程。     

白细胞介素10 及受体在系统性红斑狼疮患者中表达的研究

 目的明确白细胞介素10（IL-10）及IL-10受体（IL-10R）在系统性红斑狼疮（SLE）发病过程中的作用。方法应用流式
细胞微球捕获技术检测血浆IL-10 表达水平,应用流式细胞方法检测外周血白细胞表面IL-10R表达水平。共检测40 例SLE 患
者和20 例正常对照者。以SLE 疾病活动性指数（SLEDAI）判定SLE 疾病活动性。结果狼疮肾炎（LN）患者血浆IL-10 表达水
平较正常对照者高。各细胞亚群表面的IL-10R 表达水平在SLE 和正常对照组中相似,但是,LN 患者的CD4+和CD8+T 细胞表面
IL-10R 表达降低。血浆IL-10 水平与SLEDAI没有相关性,而CD4+T 细胞和CD8+T细胞的IL-10R1表达水平与SLEDAI 呈明显
负相关。结论IL-10 及其受体在狼疮肾炎发病过程中可能具有重要的作用。