线粒体ATP敏感性钾通道与心脏缺血预适应

关于心脏缺血预适应的研究较多，其机制尚不清楚，但ATP敏感性钾通道（KATP）的参与已被肯定。以往认为，心脏缺血预适应是细胞膜上钾通道开放诱导所产生，但近年来的多项研究表明是线粒体内膜ATP敏感性钾通道（mitoKATP)的作用。我们就缺血预适应目前研究现状、mitoKATP开放产生缺血预适应的证据、可能机制及mitoKATP的调节进行综述，以期找到理想的mitoKATP开放剂，通过药理干预达到类似缺血预适应的心脏保护作用。     

线粒体ATP敏感性钾通道与心脏缺血预适应

关于心脏缺血预适应的研究较多,其机制尚不清楚,但ATP敏感性钾通道（K     

银杏叶提取物对家兔心室肌细胞瞬时外向钾电流和动作电位的影响

目的:探讨银杏叶提取物(Egb761)对家兔心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)和动作电位的作用,揭示其抗心肌缺血及缺血引起的心律失常的离子机制。方法:酶解法分离家兔的心室肌细胞。全细胞膜片钳技术记录心肌细胞的Ito和动作电位及其被Egb761作用后的变化。结果:①在电压钳制方式下,60μg/L Egb761作用心室肌细胞5 min后,各个钳制电位下的Ito均明显增大,在钳制电位为+50 mV时,Egb761使Ito的电流密度由对照组的(7.59±0.19)pA/pF增加到(11.18±0.89)pA/pF(P<0.01,n=8),Egb761还使Ito的I-V曲线比对照组Ito的I-V明显抬高,但I-V曲线方向没有发生改变,表明Egb761引起了心肌细胞Ito的明显外流。②在电流钳制下,对照组心室肌细胞动作电位都具有从0期到4期的动作电位形态,60μg/L Egb761使心肌细胞动作电位形态呈三角形尖锥锋形,动作电位时程(APD)明显缩短,其复极化50%时程(APD50)和复极化90%时程(APD90)分别由(83.6±4.3)ms缩短为(51.3±3.2)ms和由(168.7±4.1)ms缩短为(93.8±4.4)ms(分别与对照组相比,P<0.01,n=8),尽管Egb761使动作电位幅度(APA)和静息电位(RP)降低,但与对照组相比,没有显著性差异(P>0.05)。结论:Egb761可使心室肌细胞Ito显著增加和APD明显缩短,从而减轻心肌缺血时细胞内阳离子超载对心肌造成的损伤和心肌缺血引起的心律失常的发生,以及增加心脏泵血功能。     

过氧化氢对大鼠心室肌细胞钠通道电流的影响

目的 研究过氧化氢(H2O2)对单个大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的影响.方法 用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞;用标准的全细胞膜片钳技术记录钠通道电流,观察1 mmol/L H2O2引起单个大鼠心室肌细胞INa改变.结果 在1 mmol/L H2O2作用下,大鼠心室肌细胞INa峰值电流密度从(19.95±4.58)pA/pF减少至(15.19±4.15)pA/pF(n=8,P＜0.05),电流-电压曲线上移,翻转电位左移,但对激活电位、峰电位无明显影响;H2O2对INa稳态激活曲线无明显改变,V0 5从(-64.54±0.16)mV左移至(-66.28±0.32)mV(n=8,P＞0.05),对其稳态失活曲线无明显改变,V0 5从(-91.46±0.17)mV左移至(-94.52±0.25)mV(n=8,P＞0.05);H2O2对INa失活后再激活曲线有明显改变,对照组τ为(6.43±1.04)ms,H2O2组τ为(8.31±1.48)ms(n=6,P＜0.05).结论 过氧化氢可以减少大鼠心肌细胞INa,且使其复活明显减慢.     

氯胺酮对人单个心房肌细胞ATP敏感性钾电流(IK·ATP)的影响

目的:探讨氯胺酮对人单个心房肌细胞ATP敏感性钾电流(IK·ATP)的影响.方法:取房缺或室缺修补术患者的右心耳组织,置于100%氧饱和的无钙心肌细胞保护液中,30 min内送至实验室.将标本剪成1 mm3的小块,用二步酶解法分离出单个心房肌细胞.采用膜片钳全细胞记录方法,观察两种浓度氯胺酮对人单个心房肌细胞IK·ATP的影响.结果:在电极内液含ATP(0.3 mmol·L-1)的条件下,记录到一束外向K+电流.该电流可被KATP通道特异阻滞药格列苯脲(10μmol·L-1)抑制,表明此电流为IK·ATP在指令电位为+20mV时,用含低浓度氯胺酮(0.01 mmol·L-1)的细胞外液灌流时,IK·ATP受到抑制,抑制率为11.1%(n=3,P＜0.01).用含高浓度氯胺酮(0.1 mmol·L-1)的细胞外液灌流时,IK·ATP被大量激活,增加率为57.6%(n=3,P＜0.01).结论:低浓度氯胺酮(0.01 mmol·L-1)对人心房肌细胞IK·ATP具有抑制作用;高浓度氯胺酮(0.1 mmol·L-1)对IK·ATP则有激活作用.     

乳酸司帕沙星对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的影响

目的:观察乳酸司帕沙星(SPX)对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流(IK)的影响.方法:采用酶消化方法分离单个豚鼠心室肌细胞,利用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞IK,观察不同浓度SPX(0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L、100 μmol/L和1 000 μmol/L)对IK的影响.结果:除0.1 μmol/L外,SPX浓度分别为1 μmol/L、10 μmol/L、100 μmol/L、1 000 μmol/L时IK的脉冲电流和尾电流较正常心室肌细胞脉冲电流和尾电流均减少(P＜0.05或0.01).SPX明显抑制了IK的脉冲电流和尾电流(P＜0.05),SPX的量效关系曲线显示SPX的IC50为14.89 μmol/L. 结论:SPX能浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞IK,提示高浓度SPX有引发心律失常的潜在不良反应.     

枸杞多糖对大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的:探讨枸杞多糖对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的作用。方法:用急性酶解法获得大鼠的单个心肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流。结果:①枸杞多糖能使I-V曲线明显上移。②枸杞多糖对ICa-L呈浓度依赖性的抑制作用。③50 mg/L枸杞多糖能使ICa-L稳态激活曲线右移、还能增加失活后恢复的τ值;但对失活曲线无影响,不改变ICa-L失活特性。结论:枸杞多糖对ICa-L有阻断作用,主要作用于钙通道激活和恢复过程。     

线粒体ATP敏感性钾通道在心肌预适应中的作用机制

自 198 6年Murry等[1 ] 提出心肌预适应 (preconditioning ,PC)概念以来 ,已有许多研究对心肌预适应的保护机制进行了探讨。目前认为 ,预适应的机制是 :心肌在预先受某种刺激(如缺血、快速起搏、热休克和药物等 )后 ,激活并释放腺苷、内皮素、缓激肽、乙酰胆碱、和儿茶酚胺等内源性触发因子及介子 ,再分别与G蛋白耦联受体结合 ,通过跨膜信号转导 ,将信号传入细胞内 ,激活蛋白激酶C(PKC)及其他信号转导途径 ,最终激活终末效应子 (如ATP敏感性钾通道、热休克蛋白等 )而产生细胞保护。其中ATP敏感性钾通道 (KATP)是最重要的心肌预适应…     

缺氧预适应鼠脑提取液对海马神经元ATP敏感性钾通道活动的影响

目的 观测缺氧预适应的小鼠脑提取液对大鼠海马神经元ATP敏感性钾通道(KATP)的影响。方法 用膜片钳全细胞记录优降糖(GLI)处理前后急性分离大鼠海马神经元外向钾电流(Ik)的变化。结果 给予氰化钠(NaCN)时,Ik显著增加(1448→2381pA),再给予Gu时,Ik增加受到抑制(2381→1725pA);给予腺苷(ADO)和Gu后,Ik的相应显著变化为1399→2584→1703pA;给予4次缺氧预适应鼠脑提取液和GLI后,Ik亦产生类似的显著变化(1298→2413→1713pA);1次缺氧未缺氧鼠脑匀浆提取液对Ik的作用未见显著影响。结论 缺氧预适应小鼠脑提取液,通过腺苷样神经活性物质,激活海马神经元KATP,参与缺氧预适应。     

白藜芦醇对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的:研究白藜芦醇对正常豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响. 方法:采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度白藜芦醇作用前后对ICa-L的影响. 结果:①白藜芦醇呈浓度依赖性阻断ICa-L,但对激活电位、峰电位、反转电位均没有影响;②白藜芦醇使ICa-L稳态激活曲线右移,V1/2由对照的(-18.97±4.08) mV变为(-15.97±4.13) mV (n=7,P=0.02),κ由(3.64±0.56)变为(3.82±0.60)(n=7,P=0.67);③对失活曲线无影响,不改变ICa-L失活特性;④白藜芦醇使ICa-L失活后再恢复时间常数τ缩短,从(98.50±9.00) ms变为(54.53±4.27) ms(n=6,P=0.000). 结论:白藜芦醇对ICa-L有阻断作用,主要作用于钙通道激活和恢复过程.     

缺血预适应对兔离体灌注心脏生化及电生理的影响

目的：观察缺血预适应（LPC）对兔离体灌注心脏生化及电生理的影响。方法：用离体兔心脏灌注模型观察：（1）缺血及再灌注对兔心肌的损伤作用，心律失常的发生以及心内外膜MAP的变化；（2）IPC对上述各种变化的影响；（3）优降糖对缺衄再灌及预适应的影响，对心律失常的影响。结果：（1）缺血及再灌注可产生明显的心肌损伤，心肌酶的漏出增加。心律失常的发生。心内外膜的MAPD90缩短幅度分别达到52．7％和59．1％，但在缺血15分钟后心内外膜之间的离散度增大；（2）2次5分钟间断缺血和再灌注，能产生明显的心肌保护作用。心律失常发生率下降，缺血致APD缩短速度加快，心内外膜离散度减小；（3）优降糖能阻断预适应对心肌的保护作用。降低心律失常的发生，但对APD的变化无明疆影响。结论：（1）IPC对兔心肌有显著的保护作用和抗心律失常作用；（2）KATP是预适应保护的重要环节；（3）IPC的抗心律失常作用不依赖于心肌保护。     

药物预处理与缺血预处理对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:本实验旨在讨论心肌缺血再灌注损伤的发生机理,观察药物预处理与缺血预处理对心肌缺血再灌注损伤保护作用并探讨临床价值。方法:采用在体兔心肌缺血再灌注模型,结扎兔冠状动脉前降支,缺血20 min/再灌注30 min。将健康家兔40只随机分为4组:Ⅰ组为对照组(SC);Ⅱ组为缺血预处理组(IPC),缺血前给予5 min缺血/5 min再灌注处理;Ⅲ组腺苷预处理组(Adopc),缺血前于左心耳5 min内推注腺苷2 mg/kg;Ⅳ组为去甲肾上腺素预处理组(NEPC),缺血前给予5 min静脉滴注去甲肾上腺素每分钟0.25μg/kg。观察指标:①心功能各参数;②心律失常发生;③血肌酸激酶;④心肌超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MAD);⑤心肌超微结构。结果:再灌注期间Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组左室最大压力变化速率(±dp/dtmax)较Ⅰ组差异有统计学意义(P<0.05),但Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间差异无统计学意义。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组再灌注心律失常的发生率较Ⅰ组均明显降低(P<0.05)。再灌注血肌酸激酶CK的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组明显优于Ⅰ组(P<0.05),MAD含量则明显低于Ⅰ组(P<0.05)。心肌超微结构的改善Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组优于Ⅰ组。结论:本实验研究表明,药物预处理与缺血预处理均对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用,他们是通过激发机体内源性保护机制而发挥其心肌保护作用,尤其是药物预处理具有潜在的临床价值,为临床防治心肌缺血再灌注损伤带来了新的希望。     

人参与丹参配伍对心肌缺血再灌注模型大鼠抗氧化和血管内皮细胞因子的影响

目的研究人参与丹参配伍对心肌缺血再灌注模型大鼠抗氧化能力和血管内皮细胞因子的影响。方法建立大鼠心肌缺血再灌注模型,分为假手术组、模型组、人参与丹参2∶1配伍组、2∶0组、0∶1组,灌胃给药28 d后取血分离血清,用比色法测定总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原性谷胱甘肽(GSH)含量;ELISA法测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量。结果与假手术组比较,模型组T-AOC、GSH、SOD、VEGF和bFGF含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,2∶1组、2∶0组、0∶1组T-AOC、GSH、SOD、VEGF和bFGF含量均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2∶1组T-AOC、SOD、GSH、VEGF和bF-GF含量改变与2∶0组、0∶1组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论人参与丹参配伍组具有一定的抗氧化能力和促血管内皮细胞新生能力,其中以人参与丹参2∶1配伍组更显著。     

丹参对抗内毒素体外实验研究

目的：探讨丹参抗感染性休克的机制。方法：对丹参抗内毒素（ＬＰＳ）进行体外实验。分别在不同浓度的丹参液和生理盐水中加入１０Ｅｕ的ＬＰＳ,Ⅰ组０．５ｍＬ丹参,Ⅱ组５ｍＬ丹参,Ⅲ组为生理盐水。置入３７℃恒温箱进行孵育。观察在相同时点,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组ＬＰＳ浓度的变化。结果：Ⅰ、Ⅱ组比Ⅲ组ＬＰＳ浓度下降幅度大,有显著性差异（Ｐ〈０．０５）;且Ⅱ组与Ⅰ组比相同时点ＬＰＳ的浓度下降幅度大,也有明显差异（Ｐ〈０．０     

中药丹参对哮喘大鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-9的影响

目的：研究丹参对哮喘大鼠气道重塑和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量的影响。方法将SPF级SD成年雄性大鼠70只随机分为正常对照组、哮喘模型组(哮喘2周组、哮喘4周组、哮喘8周组)、丹参干预组(丹参2周组、丹参4周组、丹参8周组)3个大组和7个小组。卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏激发大鼠复制哮喘气道重塑模型,分别持续2、4、8周。观察哮喘大鼠肺组织病理形态变化,采用ELISA检测大鼠肺组织MMP-9含量。结果丹参能改善哮喘大鼠气道炎症细胞的浸润及支气管平滑肌的增厚。与正常对照组[(1.99±0.29)ng/mL]比较,哮喘4周组[(2.43±0.40)ng/mL]、哮喘8周组[(3.01±0.31)ng/mL]肺组织中MMP-9含量升高(P<0.05、P<0.01);与哮喘2周组[(2.29±0.51) ng/mL]、哮喘4周组[(2.43±0.40) ng/mL]比较,哮喘8周组[(3.01±0.31) ng/mL]肺组织中MMP-9含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);与哮喘8周组[(3.01±0.31) ng/mL]比较,丹参8周组[(2.10±0.20)ng/mL]肺组织中MMP-9含量显著降低(P<0.01)。结论丹参能够抑制哮喘大鼠肺组织MMP-9的分泌,改善哮喘大鼠气道重塑状态。     

复方丹参合剂对高脂血症大鼠血脂和骨的影响

目的:探讨复方丹参合剂对高脂血症大鼠血脂和骨的影响。方法:将27只SD大鼠随机分成普通饲料组、脂肪乳剂组和复方丹参合剂组,每组9只。普通饲料组予普通饲料及生理盐水处理,脂肪乳剂组予普通饮食加脂肪乳剂灌胃,复方丹参合剂组予脂肪乳剂和复方丹参合剂灌胃,连续20周,实验结束后取血和胫骨检测。结果:脂肪乳剂灌胃使大鼠血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)水平升高和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)下降(P<0.01),胫骨上段骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、数量(Tb.N)、厚度(Tb.Th)明显下降(P<0.01),骨小梁分离度(Tb.Sp)增加(P<0.01),骨量显著丢失,荧光标记减弱,骨形成减少;而复方丹参合剂可使HDL-c含量增加(P<0.01),%Tb.Ar、Tb.N、Tb.Th增加,Tb.Sp减少(P<0.01),骨形成增加(P<0.05)。结论:长期脂肪乳剂灌胃建立的高脂血症大鼠有明显的骨质疏松,复方丹参合剂有升高HDL-c和预防高脂血症骨质疏松的作用。     

伊文思兰对兔左室心肌灌注范围显示效果及跨膜动作电位的影响

目的　探讨伊文思兰对于经冠脉灌注的兔左室心肌组织块灌注范围显示效果及跨膜动作电位的影响。方法　制做兔左心室游离壁楔形组织块 ,经回旋支持续灌注台式液。采用浮置的玻璃微电极同步记录内、中、外层心肌细胞跨膜动作电位并记录跨壁心电图。分析伊文思兰灌注前、灌注 30 min后组织块显色情况及不同频率刺激下内、中、外层跨膜动作电位时程和跨壁复极离散度的变化。结果　伊文思兰可清晰显示灌注范围 ,且 30 m in后颜色仍保持不变 ;在 5 0 0～ 4 0 0 0 ms刺激作用下 ,伊文思兰灌注前与灌注 30 m in后动作电位时程、跨壁复极离散度无显著变化 (P>0 .0 5 ) ,灌注过程中组织块无室性心律失常发生。结论　伊文思兰可以作为组织块灌注范围的显示剂     

注射用丹参冻干粉联合低分子量肝素钠治疗缺血性结肠炎

目的：观察缺血性结肠炎联合应用注射用丹参冻干粉注射液及低分子量肝素钠治疗的疗效。方法：对30例缺血性结肠炎的患者随机分为两组,对照组（15例）给予单纯抗生素治疗和其他常规对症支持治疗;治疗组（15例）给予抗生素加注射用丹参冻干粉注射液及低分子量肝素钠及常规支持治疗。观察治疗前后腹痛、便血的恢复情况,比较红细胞压积、血黏度、纤维蛋白原的变化,复查结肠镜,比较肠黏膜损伤指数及愈合情况。结果：与对照组比较,治疗组腹痛、便潜血恢复的时间缩短,血红细胞压积降低、血黏度降低较明显,复查结肠镜黏膜损伤指数及恢复率高,治疗结束后黏膜修复状态更好。结论：注射用丹参冻干粉联合低分子量肝素钠对缺血性结肠炎症状的恢复、肠黏膜的修复有促进作用,可以明显改善血液流变学指标,有利于抑制缺血对肠黏膜的损伤。注射用丹参冻干粉联合低分子量肝素钠可用于缺血性结肠炎的临床治疗。     

间羟胺对大鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的观察α肾上腺素能受体激动剂间羟胺对大鼠心室肌动作电位及L-型钙电流的影响。方法采用全细胞膜片钳方法,记录离体大鼠心室肌细胞动作电位和L-型钙电流。结果 200μmol/L间羟胺可使心室肌细胞L-型钙电流增大（P〈0.05）,动作电位时程（APD）明显延长（P〈0.01）,动作电位复极50%和90%时间（APD50and APD90）明显延长（P〈0.01）。100μmol/L酚妥拉明可使增大的的L-型钙电流和APD、APD50、APD明显恢复。结论间羟胺可明显延长大鼠心室肌动作电位时程,而酚妥拉明可不同程度地拮抗此效应。