日本血吸虫成虫31／32KD蛋白的纯化及其免疫化学特性

本支采用制备型SDS-PAGE和电渗析法分离纯化日本血吸虫成虫31／32KD蛋白，分离纯化的血吸虫31／32KID蛋白经SDS--PAGE、EITB和ELlSA检测证明纯度高，活性不量影响．鉴于血吸虫成虫31／32KD蛋白是一种主要血清学抗原，它的分离纯化为改进和标化血吸虫病的诊断及分子疫苗的研制提供了条件。     

应用日本血吸虫成虫31/32KD抗原诊断血吸虫病

采用IHA和ELISA对纯化的日本血吸虫成虫31/32KD抗原与虫卵可溶性抗原的诊断特异性和敏感性进行比较。结果表明,前者的特异性高,检测正常人血清未见假阳性反应,与肝吸虫或肺吸虫病人血清无交叉反应;治后一年的阴转率达70％,故疗效考核价值较高。二种抗原的敏感性无显著差异。     

日本血吸虫成虫31／32KD蛋白保护性免疫力的研究

采用纯化的日本血吸虫成虫31／32KD蛋白加福氏佐剂免疫小鼠，不仅可减少虫负荷(减虫率28．1％)，还可降低血吸虫成虫的产卵量(减卵率71．4%)。抑制虫卵内芽肿的形成．结果提示，日本血吸虫成虫31／32KD蛋白具有较高的减卵率．可望作为混合多价疫苗的侯选组分．     

日本血吸虫成虫和虫卵可溶性抗原及其组分抗原的研究

目的:探讨日本血吸虫雄虫、雌虫、虫卵的可溶性抗原雄虫(AWA-m、雌虫AWA-f、虫卵SEA)及其组分抗原的特性.方法:用DE22纤维素层析柱对日本血吸虫AWA-m,AWA-f,SEA抗原进行纯化,得到相应组分抗原.分别以SDS-PAGE和Western blot对组分抗原进行全面分析,并与相应未经纯化的可溶性抗原作比较.结果:经DE22纤维素层析处理的AWA-m,AWA-f,SEA,均能获得含多种蛋白的组分抗原.SDS-PAGE结果表明,AWA-m见10条主带和9条次带,其中Mr 37 000,28 000,25 000为特异性条带,出现8条免疫反应阳性带;而AWA-m组分抗原为9条蛋白带和6条免疫反应阳性带.AWA-f见15条蛋白带,其中Mr 26 500为特异性条带,组分抗原为8条蛋白带.AWA-f粗抗原及其组分抗原均见9条反应带.SEA见8条主带和10条次带,13条为免疫反应阳性条带;SEA组分抗原见11条带,其中9条为免疫反应阳性带.结论:AWA-m,AWA-f,SEA经DE22纤维素层析纯化获得组分抗原,方法简单、可靠.该组分抗原含有粗抗原的主要免疫反应成分,去除了多种与日本血吸虫病免疫反应无关的蛋白.     

纯化31/32kDa抗原诊断日本血吸虫病的价值

目的：探讨纯化31／32kDa抗原（Sj31／32）诊断日本血吸虫病的价值。方法：以纯化Sj31／32包板，与成虫粗抗原（AWA）相比较，ELISA法检测不同类型日本血吸虫病患者血清抗体滴度。结果：急性、慢性和晚期血吸虫病患者血清平均抗Sj31／32抗体滴度分别为2．77±0．25、2．67±0．30和2．46±0．19（P＜0．01），抗AWA抗体滴度分别为3．27±0．16、3．28±0．16和3．20±0．17（P＞0．05）。慢性血吸虫病患者血清抗Sj31／32抗体滴度与EPG有高度的相关性（r＝0．93），明显高于抗AWA抗体与EPG的相关性（r＝0．45）。结论：利用纯化Sj31／32诊断血吸虫病能较好地区分各种感染类型和不同感染度。     

日本血吸虫31/32kDa抗体的检测及其在诊断中的作用

目的：探讨纯化日本血吸虫３１／３２３ｋＤａ抗原（Ｓｊ３１／３２）诊断的特异性、敏感性及疗效考核价值。方法：利用纯化Ｓｊ３１／３２与可深性虫卵抗原（ＳＥＡ）ＥＬＩＳＡ方法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清。结果：急、慢性血吸虫病患者血清抗Ｓｊ３１／３２抗体检出率为１００％和９５％，与正常人、肝吸虫和肺吸虫病患者血清未出现交叉反应；抗ＳＥＡ抗体检出率为９７．４％和９０％，与正常人和肠道吸虫病患者有不同程     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原的分析

采用免疫沉淀技术和ＥＩＴＢ技术分析了日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）。结果：能被ＳＩＥＡ免疫血清识别的ＳＩＥＡ带主要于３０．８ＫＵ到４９．６ＫＵ之间，其主要反应带为４９．６ＫＵ，３９．７ＫＵ和３３．７ＫＵ。推测４９．６ＫＵ和３３．７ＫＵ这两怕 诱导宿主产生抗卵或熟过程中可能起着重要作用。     

日本血吸虫表面膜抗原23KDα的克隆及其鉴定

根据已报道的２３ＫＤα基因序列，设计了２个寡核苷酸引物，应用聚合酶链反应技术，将提取的日本血吸虫成虫的总ＲＮＡ逆转录成ｃＤＮＡ进行扩增。扩增的基因克隆到质粒ｐＢｌｕｓｒｉｐｔ中，重组质粒转化Ｅ．ｃｏｌｉ ＴＧ１，在ＬＢ平板上挑阳性克隆经酶切分析，ＰＣＲ扩增及测序鉴定含完整２３ＫＤα基因的重组质粒。     

免疫金银染色法对日本血吸虫31／32KD分子抗原的定位研究

应用免疫金银染色法（ＩＧＳＳ）和免疫酶染色法（ＩＥＳ）对日本血吸虫３ｌ／３２ＫＤ分子抗原进行了比较定位研究。结果证实了日本血吸虫３１／３２ＫＤ抗原是一种肠相关抗原，并进一步验证了常规制备的单特异抗血清用于抗原分析和来源定位的可行性。     

日本血吸虫成虫抗原基因的克隆和序列分析

本实验在用感染兔血清和单克隆抗体对日本血吸虫（大陆株）成虫ｃＤＮＡ表达文库进行筛选的基础上，对筛选出的阳性克隆插入片段ＤＮＡ进行了亚克隆和序列分析