辐射损伤后小鼠T细胞功能亚群及其IL-4和IFN-γ的变化

目的 观察不同剂量辐射损伤后小鼠T细胞功能亚群、细胞因子IL-4和IFN-γ的变化。方法 C57BL/6j小鼠分为假照射组和辐射损伤模型组。采用⁶⁰Coγ线照射诱导辐射损伤模型。吸收剂量分别为0.7、1.4、2.8及5.6 Gy。应用细胞表面标志和细胞内因子标记结合流式细胞仪分析急性照射损伤和损伤恢复期小鼠脾CD3+、CD4+、CD8+T细胞功能亚群,以及细胞因子IL-4和IFN-γ的变化。结果 1 辐射损伤后CD3+、 CD4+及 CD8+有明显的减低,其改变幅度与受照剂量有关。2 照射后1 d, IFN-γ降低幅度明显高于IL-4,受照剂量大于2.8 Gy组,IL-4/IFN-γ比值较空白对照组明显升高。3 辐射对淋巴细胞功能亚群、细胞因子IL-4和IFN-γ的损伤在照射后25 d有不同程度的恢复,但与假照射组比较仍有明显差别。 结论 电离辐射可使淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD8+、 CD4+/CD8+、细胞因子IL-4和IFN-γ发生改变,并诱发受照小鼠免疫功能低下,特别是使细胞因子IL-4和IFN-γ发生失衡,再次证实辐射损伤后小鼠脾Th1/Th2模式向Th2免疫反应漂移的现象。     

固相酶联免疫斑点技术检测递增负荷过度训练大鼠细胞免疫机能变化研究

目的:建立大鼠脾脏淋巴细胞中Th1/Th2型淋巴细胞亚群表达的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术检测方案,进一步比较Th1/Th2淋巴细胞和CD4+/CD8+在大鼠递增负荷过度训练过程中的改变,为筛选最佳免疫学评价指标提供参考。方法:雌性SD大鼠进行9周递增负荷跑台训练,分别在训练的第1周、第3周、第9周训练结束后的36小时,以及恢复1周后处死大鼠。采用不同种类刺激剂、不同刺激剂浓度刺激不同数量大鼠脾脏淋巴细胞,建立最佳ELISPOT检测方案。检测大鼠血红蛋白、睾酮、皮质酮,评估疲劳模型的建立,并对Th1/Th2型淋巴细胞亚群以及传统免疫学指标CD4+/CD8+进行动态观察。结果:建立最佳ELISPOT技术检测方案:PMA和Ionomycin联合刺激。刺激物浓度:检测γ干扰素(IFN-γ)时PMA浓度为2.5ng/ml,检测白细胞介素4(IL-4)时PMA浓度为10ng/ml;检测IFN-γ时Ionomycin浓度为0.05μg/ml,检测IL-4时Ionomycin浓度为0.2μg/ml。细胞浓度:3×104cells/孔(IFN-γ),60×104cells/孔(IL-4)。运动后36小时,运动组血红蛋白、睾酮、皮质酮均较对照组显著下降;经1周恢复后,和对照组相比无显著性差异。递增负荷运动第1周跑台训练后,运动组Th1型细胞因子IFN-γ与对照组相比显著升高;第3周跑台训练后,运动组和对照组相比显著下降;恢复1周后,运动组IFN-γ与对照组相比显著下降。递增负荷训练结束后的恢复期,运动组Th2型细胞因子IL-4较对照组升高了1.44倍(P<0.01)。CD4+/CD8+在整个训练期及恢复期均无显著性变化。结论:递增负荷过度训练过程中,与CD4+/CD8+相比,采用ELISPOT技术检测SD大鼠Th1/Th2淋巴细胞亚群的改变具有较高的灵敏性。     

12周不同负荷运动对大鼠外周血Th1/Th2平衡的影响

目的:探讨长期不同负荷运动对SD大鼠外周血Th1/Th2平衡的影响。方法:36只大鼠随机分为小负荷运动组、中负荷运动组、大负荷运动组和对照组4组。运动组进行12周游泳训练,在末次游泳的24小时后麻醉,腹主动脉取血,检测血清白细胞介素4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)含量,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果:与对照组相比,大负荷运动组血清IFN-γ含量和IFN-γ/IL-4的比值显著降低(P<0.05);中、小负荷运动血清IFN-γ、IL-4含量和IFN-γ/IL-4的比值无明显变化。结论:中、小负荷运动有利于维持Th1/Th2平衡,大负荷运动可影响Th1/Th2平衡,使免疫功能由Th1向Th2漂移。     

太极拳运动对中老年女性外周血白细胞细胞因子IFN-γ、IL-4的影响

目的:探讨太极拳运动对人体免疫机能作用的细胞因子学发生机制。方法:25名中老年女性进行为期6个月的有规律太极拳训练,分别于实验前、运动后第4和第6个月应用多色荧光标记抗细胞因子单克隆抗体,结合细胞表型测定,采用流式细胞仪检测外周血白细胞细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)。结果:长期太极拳运动后中老年女性IFN-γ、IL-4百分含量明显上升,IFN-γ/IL-4比率呈上升趋势。练习4个月,IFN-γ百分含量与实验前相比差异非常显著(P<0.01),IL-4百分含量差异显著(P<0.05);练习6个月,IFN-γ百分含量与实验前相比差异显著(P<0.05)。结果提示,长期太极拳运动对细胞免疫和体液免疫均有上调作用,而且有促进免疫机能的重心向细胞免疫漂移的现象,这意味着Th1细胞免疫反应增强。     

电针对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠急性期脑组织IFN-γ、IL-4含量的影响

 目的 探讨电针治疗急性期实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的有效性及其作用机制.方法 采用豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)与完全福氏佐剂(CFA)制成混合乳剂免疫Wistar雌性大鼠制备EAE模型,研究电针对急性期EAE大鼠脑组织IFN-γ、IL-4含量的影响,并通过神经功能评分观察电针治疗EAE的有效性.结果 电针组及激素组均能明显改善急性期EAE的临床症状,脑组织中IFN-γ的含量较模型组显著降低(P<0.05),IL-4的含量较模型组明显升高(P<0.05),且电针组和激素组之间没有差异.结论 电针治疗通过干预Th0细胞向Th2细胞分化,促进脑组织中IL-4含量提高,抑制了IFN-γ的含量,调节Th1/ Th2细胞的平衡.     

肾上腺髓质素对大鼠肾脏损伤早期白细胞介素-4及γ-干扰素表达的影响

目的 观察外源性肾上腺髓质素(ADM)对肾脏机械性损伤后γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4表达的影响.方法 健康成年普通级Wistar大鼠104只,采用随机数字表法分为四组:正常对照组(8只)、单纯创伤组(32只)、预防组(32只)、治疗组(32只);后三组采用自由落体打击仪直接打击大鼠左侧脊肋区制作肾脏机械性损伤模型.两给药组分别于致伤前、后10 min腹腔注射ADM(0.1 nmol/kg).三组肾脏损伤分别于伤后1,6,12,24 h采用快速心脏采血法处死.提取肾脏,甲醛固定,免疫组织化学染色,观察IFN-γ、IL-4在组织中的表达.结果 (1)IL-4表达:预防组在伤后1 h出现阳性表达,6,12 h阳性表达强度渐升,24 h达高峰,与同时相点单纯创伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组在伤后1 h升高,6 h达高峰,与同时相点单纯创伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05);伤后12 h下降,24 h接近单纯创伤组水平.(2)IFN-γ表达:与同时相点单纯创伤组比较,预防组在伤后6,24 h表达明显升高(P<0.05),12 h表达降低(P<0.05);治疗组在1,12,24 h的表达明显低于单纯创伤组(P<0.05).与正常对照组比较,治疗组在伤后1,12 h明显降低.治疗组各时相点IL-4及INF-γ的表达均较预防组明显下降(P<0.05).单纯创伤组IL-4与IFN-γ水平呈负相关关系,预防组IL-4与IFN-γ间呈正相关关系.结论 IL-4与IFN-γ在肾损伤与修复中发挥拮抗作用.外源性ADM的预防性给药及治疗性给药均对IL-4的表达有增强作用.预防性应用外源性ADM的主要作用在于动态调控IFN-γ的表达.

Abstract：

Objective To observe the effects of exogenous adrenomedullin(ADM)on expressions of IL-4 and IFN-γ following mechanical renal trauma in the rats. Methods A total of 104 healthy adult plain grade Wistar rats were,randomly divided into four groups,ie,normal control group(eight rats),simple trauma group(32 rats),prevention group(32 rats,injected with ADM before trauma)and treatment group(32 rats,injected with ADM after trauma).The experimental model of rat with mechanical renal trauma was prepared by striking the ridge of the left rib area with free dropping forrous hammer in all groups except for the control group.Ten minutes before and after mechanical renal trauma,ADM ly.All rats were sacrificed by draining out all the blood in their hearts at 1,6,12 and 24 hours after mechanical renal trauma.Then,the renal tissues were removed and fixed with 10% formalin for observing the positive expressions of IL-4 and IFN-γ by means of SABC staining. Results Compared with the simple trauma group,the positive expression of IL-4 in the prevention group Wag observed at 1 hour,gradually increased at 6 and 12 hours and reached the peak at 24 hours after mechanical renal trauma,with statistical difference(P<0.05).The positive expression of IL-4 in the treatment group WaS increased at one hour and reached the peak at 6 hours after mechanical renal trauma,with statistical difference(P<0.05).Compared with the simple trauma group,the IFN-γ expression in the prevention group was,increased at 6 and 24 hours but decreased at 12 hour,while that in the treatment group was decreased significantly at 1,12 and 24 hours.Compared with the normal control group,the IFN-γ expression in the treatment group was significantly decreased at 1 and 12 hours.The IFN-γ expression in the treatment group was lower than that in the prevention group at every time points,with statistical difference(P<0.05). Conclusions Preventive and therapeutic administration of exogenous ADM can enhance the expression of IL-4.IL-4 and IFN-γ play an antagonistic role in repair ofthe renal injury.The primary role of exogenous ADM is the dynamic regulation of IFN-γ expression.     

γ射线照射后肠上皮内淋巴细胞IFN-γ分泌变化及对IEC-6增殖的影响

目的探索肠上皮内淋巴细胞（IEL）受照射后IFN-γ分泌的变化及其对肠上皮细胞增殖的影响。方法采用ELISPOT法观察IEL受^60Coγ射线8Gy照射前后IFN-γ的分泌变化；利用新分离的IEL及大鼠隐窝空肠上皮细胞株（IEC-6）为离体细胞模型，通过混合、双室（隔离）培养系统，用MTF法观察IEL对IEC-6增殖活性的影响。结果照射后IEL分泌IFN-γ增加，受照射IEL培养上清对IEC-6细胞增殖具有抑制作用，而双室培养可减轻抑制作用，加入抗IFN-γ抗体亦可减轻对IEC-6的抑制作用。结论IEL受照后IFN-γ的分泌增加，对IEC-6的增殖具有抑制作用，IFN-γ是一种重要的介质因子，细胞与细胞紧密接触是IEL影响IEC-6增殖分化的一种重要方式。     

IFN-γ预处理骨髓间充质干细胞及其抑制小胶质细胞 活化作用的影响

 目的 探讨干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)预处理大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)及其抑制脂多糖(lipopolysaccharide ,LPS)诱发的小胶质细胞(microglia,MG)活化作用的影响。方法 采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMMSCs,利用含100 ng/ml 的IFN-γ完全培养液对BMMSCs进行预处理;利用LPS(10μg/ml)诱导大鼠小胶质细胞活化。小胶质细胞分离纯化后,以1×10⁵/孔种植于6孔板中,按以下分组将小胶质细胞和BMMSCs以直接接触的方式进行共培养24h:B组(单纯BMMSCs组)、L+B组(LPS+ BMMSCs组)、I+B组(IFN-γ预处理BMMSCs组)、L+I+B组(LPS+IFN-γ预处理BMMSCs组)、M组(单纯MG组)、L+M组(LPS+MG组)、B+L+M组(BMMSCs+LPS+MG组)、I+B+L+M组(IFN-γ预处理BMMSCs+LPS+MG组)。采用ELISA技术检测培养液上清TNF-α、IL-1β水平,免疫荧光法检测小胶质细胞表面标记物CD68表达。结果 L+M组小胶质细胞CD68表达增高,分泌TNF-α、IL-1β含量明显增多;B+L+M组以及I+B+L+M组的小胶质细胞CD68表达水平、TNF-α、IL-1β分泌量低于L+M组,且B+L+M组与I+B+L+M组相比有统计学差异(P＜0.05)。结论 BMMSCs和IFN-γ预处理的BMMSCs均可以直接接触的方式抑制LPS诱发的小胶质细胞的活化且经IFN-γ预处理后的BMMSCs对小胶质细胞活性抑制作用更强。     

肠道缺血再灌注损伤中CD4+T细胞的激活及其与肠上皮细胞的相互作用

 目的 探讨缺血后的肠道是否引起T细胞细胞因子的分泌类型改变,从而影响肠上皮细胞迁移和增殖的功能.方法 将SD大鼠随机分为3组:正常对照组(n=7);I/R模型组(n=7);假手术组(n=7).I/R模型组大鼠肠系膜上动脉夹闭60 min、再灌注24 h,取其回肠.通过免疫组化方法来分析CD4+ T细胞、CD40、干扰素γ(IFNγ)和白介素4(IL-4)的表达.结果 与假手术组相比,I/R模型组大鼠回肠黏膜层和黏膜下层的CD4、IFNγ和CD40表达明显增加,而IL-4的表达差异没有统计学意义.结论 肠道缺血再灌注损伤可能与CD4+T细胞的激活并进一步向产生IFN-γ的Th1分化有关,而CD4+T细胞的活化可能与CD40信号途径的激活有关.     

可溶性CD30和Th1/Ih2检测在慢性移植肾功能不全患者免疫状态评估中的应用

目的 探讨将血清可溶性CD30(sCD30)和外周血CD3 CD8-T淋巴细胞Th1/Th2检测用于评估慢性移植肾功能不全(CRAD)患者免疫状态的价值.方法 通过分析临床资料,结合移植肾穿刺活检,选取移植术后远期(＞6个月)免疫损伤为主的慢性移植肾功能不全患者(A组)、非免疫损伤为主的慢性移植肾功能不全患者(B组)和移植肾功能正常患者(C组)各15例,采用流式细胞术检测每例患者外周血CD3 CD8-T淋巴细胞IFN-γ和IL-4表达率,以IFN-γ和IL-4表达率之比作为Th1/Th2比例,同时留取标本以ELISA法行血清sCD30水平测定.结果 A、B、C组患者外周血CD3 CD8-细胞IFN-γ表达率(11.2%±6.2%、10.9%±6.4%、12.3%±6.9%)无统计学差异(P＞0.05).A组患者外周血CD3 CD8-T细胞IL-4表达率(4.0%±2.8%)明显低于B、C组(7.9%±5.5%、10.2%±7.5%,P＜0.01),且其Th1/Th2比例(3.1±1.1)明显高于B、C组(1.5±0.5、1.4±0.5,P＜0.01).B、C组患者外周血CD3 CD8-T细胞IL-4表达率和Th1/Th2比例无统计学差异(P＞0.05).A组患者血清sCD30水平(20.2±12.4ng/ml)明显高于B、C组(7.8±3.1ng/ml、7.6±3.0ng/ml,P＜0.01),而B、C组患者血清sCD30水平无统计学差异(P＞0.05).受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,当Th1/Th2比例取1.95时,鉴别以免疫损伤为主的CRAD的敏感度为80%,特异度为90%;血清sCD30水平取10.0ng/ml时,鉴别以免疫损伤为主的CRAD的敏感度为93.3%,特异度为86.7%.结论 以免疫损伤为主的CRAD患者大都存在Th1/Th2平衡失调(向Th1方向偏移),且血清sCD30水平相对较高.根据外周血CD3 CD8-T细胞Th1/Th2比例和血清sCD30水平鉴别以免疫损伤为主的CRAD具有较高的敏感性和特异性.     

罗格列酮、5-AsA和VSI#3对SW480细胞TR4、PPARy、NF—KB表达的影响

目的探讨罗格列酮、5-ASA和VSL#3对SW480细胞TLR4-NF-KB信号途径关键位点蛋白表达的影响。方法 SW480细胞分为5组,4组以脂多糖（LPS）50ng／ml刺激24h,另一组仅加入无LPS的RMPI1640为对照组。刺激后,3组分别以罗格列酮（10μmol／L）、5-ASA（1mg／m1）和VSL#3（0．0lg／m1）干预2h。收集各组上清液,用WB法检测各组TLR4、NF-KB、PPARy蛋白的表达,用ELISA法测量IL-8生成量。结果VSL#3明显减少11LR4表达,促进PPARy表达,抑制NF-KB活化;罗格列酮、5-ASA明显促进PPARy表达,阻止NF-KB活化,对TLR4基本无影响。LPS组IL-8生成量明显高于对照组;罗格列酮、5-ASA、VSL#3干预可明显降低IL-8生成量。结论TLR4-NF-KB信号途径是重要的信号通路,PPARy对这条信号通路有抑制作用。VSL#3通过同时降低,rLR4表达和增加PPAR7的表达,抑制NF-KB的活性,抑制这条信号通路,最终缓解炎症。罗格列酮的作用可能主要是通过增加PPARy表达和促进其活性实现。PPAR1是5-AsA的作用靶点之一。     

树突状细胞诱导抗胃癌效应的实验研究

目的探讨树突状细胞（DC）抗胃癌效应的作用。方法分离正常人外周血单个核细胞（PBMC），加入GM－CSF和IL－4培养，于第5d加入TNF—α继续培养，诱导分离DC。将淋巴细胞与DC混合培养4d后，加入胃癌细胞MKN45、MKN28及SGC7901抗原培养至10d，诱导产生肿瘤特异性的CTL。ELISA检测IL－12和IFN－γ的水平，MTF法检测DC诱导的CTL对MKN45、MKN28、SGC7901和A549体外杀伤效应，流式细胞术检测CTL对肿瘤细胞周期、凋亡的影响。结果培养10d后，IL－12、IFN－γ的分泌量明显提高，DC对同种不同分化类型的胃癌细胞株MKN45、MNK28和SGC7901均有强烈的杀伤效应，杀伤活性显著高于A549（P〈0．01）。与A549比较，MKN45、MKN28和SGC7901的细胞周期显著抑制、凋亡率增加（P〈0．01）。结论DC体外可诱导出高效而特异的抗胃癌效应，显著抑制胃癌细胞分裂增殖，促进其凋亡。     

幽门螺杆菌感染者胃IL-4和IFN-C表达的免疫组织化学研究

摘要目的：探讨幽门螺杆菌（HP）感染与未感染的十二指肠溃疡（DU）、胃溃疡（GU）,慢性胃炎（CO）患者的胃白介素-4（IL-4）和γ-干扰素（γ-IFN）的原位分布,观察其间的差异。方法：选取接受胃镜检查并活检的门诊病人的胃黏膜标本97例进行H．pylori感染的评定,免疫组织化学染色观察IL-4和γ-IFN在胃的原位分布。结果：,γ-IFN、IL-4在感染组与未感染组均有表达,IL-4主要分布于固有层的淋巴细胞和单核细胞以及少量的胃上皮细胞,γIFN布于部分上皮细胞、固有层单核细胞和淋巴细胞。HP感染者中DU、CG患者γ-IFN的染色阳性率高于GU,差异有统计学意义（P=0．019）;Hp感染者IL-4染色阳性率在DU、CG、GU问无差别（P〉0．05）。结论：无论是否存在HP感染,胃黏膜都有IL-4和γ-IFN表达,染色阳性率与是否感染无关;γ-IFN的表达在CG、GU的表达较明显,提示其与CG、GU的关系更为密切。     

地塞米松对哮喘模型豚鼠肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ水平及肺组织NF-κB的影响

目的：探讨地塞米松对支气管哮喘豚鼠模型肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ水平及肺组织中NF-κB的影响。方法：实验分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组。用卵白蛋白（OVA）致敏、激发建立哮喘豚鼠模型。ELISA法检测豚鼠BALF中IL-4，IFN-γ含量。免疫组化法观察NF-κB在豚鼠支气管上皮的表达。结果：哮喘组BALF中的IL-4、IFN-γ含量及PC20水平都与正常对照组有显著差别（P〈0．05），而地塞米松治疗组豚鼠BALF中IL-4含量明显低于哮喘模型组（P〈0．05），其IFN-γ含量和PC20水平较后者显著升高（P〈0．05）。哮喘模型组和地塞米松治疗组豚鼠气道中NF-κB阳性细胞百分比有显著差异（P〈0．05）。结论：地塞米松能有效降低豚鼠BALF中IL-4水平，升高IFN-γ含量，同时降低气道高反应性和NF-κB在哮喘豚鼠支气管上皮中的表达。     

外源性FGF9对体外肺泡Ⅱ型上皮细胞作用的实验研究

目的观察外源性成纤维细胞生长因子9（fibroblast growth factor 9,FGF9）对体外大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ细胞）生长的影响。方法体外原代分离、纯化、培养成年大鼠ATⅡ细胞,锥虫（台盼）蓝拒染法测定细胞活力,透射电镜鉴定细胞,碱性磷酸酶（AKP）染色法确定细胞纯度。实验组分别用10,30,50 ng/ml FGF9和200μg/ml肝素处理细胞24 h,对照组为未经药物处理的ATⅡ细胞。选择30 ng/ml FGF9浓度后,再通过噻唑蓝检测法（MTT法）分别检测24,48,72和96 h的细胞存活率。结果原代培养ATⅡ细胞的产量约为2×107个/鼠,细胞活力〉90%,电镜下观察到ATⅡ细胞典型细胞结构——板层小体,细胞纯度〉90%。采用30和50 ng/ml浓度FGF9刺激细胞24 h,ATⅡ细胞存活率明显增高（P〈0.01）。采用30 ng/ml FGF9刺激ATⅡ细胞不同时间（24,48,72和96 h）发现,24,48,72和96 h细胞存活率均明显高于对照组（P均〈0.01）。结论利用弹性蛋白酶消化分离和大鼠IgG免疫黏附纯化,可获得高产量、高纯度及高活力的原代ATⅡ细胞。FGF9以浓度和时间依赖的方式促进ATⅡ细胞增殖。     

天花粉蛋白对IL-1β介导下的人牙周膜细胞MMP-1表达的影响

目的 观察天花粉蛋白(TCS)对白细胞介素-1β(IL-1β)介导下人牙周膜细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响,为进一步研究对抗牙根吸收的可能途径提供实验依据.方法 用IL-1β 10 ng/ml作用于体外培养的人牙周膜细胞(hPDLCs),通过噻唑蓝比色测定法(MTT)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),观察IL-1β对hPDLCs生长状态及MMP-1表达影响;将TCS 0.05 ng/ml作用于IL-1β介导状态下的hPDLCs,观察hPDLCs生长状态及MMP-1表达的变化.结果 在IL-1β及IL-1β复合TCS作用下,hPDLCs的增殖状况无明显改变(P＞0.05);IL-1β介导下,hPDLCs中MMP-1的mRNA表达呈上升趋势.相对于IL-1β单独作用,IL-1β复合TCS作用下,hPDLCs中MMP-1的mRNA表达下调.结论 IL-1β介导下的hPDLCs 的MMP-1表达增高;TCS有抑制IL-1β介导下的hPDLCs MMP-1表达增高作用.     

慢性丙型肝炎患者树突状细胞体外培养后IL-12、INF-γ水平变化

目的 探讨慢性丙型肝炎患者树突状细胞（dendritic cells,DC）体外培养后细胞因子IL-12、INF-γ水平变化.方法 选择32例慢性丙型肝炎患者作为观察组,30例健康体检者作为对照组,分别取抗凝血50 ml,经过DC体外培养后留取上清液5 ml备检,用ELISA试剂盒检测两组培养前、后细胞因子IL-12、INF-γ的水平变化.结果 观察组实验前血清中细胞因子IL-12为（38.46±4.97）ng/L,INF-γ为（15.27±2.67）pg/ml,对照组分别为（61.10±4.38）ng/L、（27.24±1.79）pg/ml,两组差异有统计学意义（P＜0.01）.观察组DC培养后上清液中IL-12为（337.91±13.35）ng/L,INF-γ水平为（6076.72±403.43）pg/ml,对照组分别为（661.44±52.99）ng/L、（10 449.00±626.54）pg/ml,两组差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 体外培养后DC分泌IL-12、INF-γ水平明显高于培养前,提示通过DC培养提高细胞因子水平诱导细胞免疫,可作为慢性丙型肝炎的一种新型辅助疗法.     

青蒿对RA患者外周血和滑膜细胞TNF-α、IL-6水平的影响

目的 观察中药青蒿对类风湿关节炎(RA)患者外周血和滑膜细胞培养液TNF-α、IL-6水平的影响,探讨青蒿治疗RA的免疫机制.方法 (1)入选50例活动性RA患者,随机分为两组,对照组口服甲氨蝶呤(MTX)10 mg,1次/w.治疗组服中药青蒿20 g,1剂/d;MTX 10 mg,1次/w.两组疗程均为12 w.用ELISA法检测两组治疗前后血清TNF-α、IL-6水平.(2)收集25例活动性RA患者关节液标本,体外分离培养滑膜细胞,以生长良好的3～5代滑膜细胞进行实验,分为对照组、青蒿琥酯(ART)12.5 μg/ml组、MTX 20 μg/ml组、ART + MTX组.结果 (1)两组RA患者血清IL-6水平均较治疗前显著降低(P＜0.05);治疗后治疗组TNF-α水平较治疗前降低(P＜0.05),对照组TNF-α水平虽较治疗前降低,但差异无显著性(P＞0.05),治疗后治疗组的TNF-α水平较对照组显著降低(P＜0.05);治疗后两组IL-6水平无显著差异(P＞0.05);(2)RA患者滑膜细胞IL-6、TNF-α水平变化:ART 12.5 μg/ml、MTX 20 μg/ml及两种药物的混合液分别处理滑膜细胞48 h后,培养上清液中TNF-α、IL-6水平均较对照组降低(P＜0.05);组间比较,ART与MTX联合应用较单用一种药物能更显著降低细胞因子水平(P＜0.05).结论 青蒿能明显降低RA患者的TNF-α、IL-6水平,这可能是青蒿治疗RA的作用机制之一.     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠炎性细胞因子的影响

目的观察白藜芦醇对重症急性胰腺炎（severeacutepancreatitis,SAP）大鼠血清炎性细胞因子的影响。方法取SD大鼠,经胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备SAP模型,分为假手术组、模型组、白藜芦醇组（20、10、5ms／kg）,每组16只。采用尾静脉注射给药,术后6h和12h分别于光镜下观察胰腺组织的病理学改变,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-1（IL-1）和IL-6水平。结果白藜芦醇各剂量均能减轻胰腺组织的炎性反应,病理评分与模型组比较,明显降低（P〈0．01）;术后6h各剂量对应TNF-α[（89．0±19．2）、（84．7±16．0）、（105．6±22．3）ns／L]、IL-1[（109．3±19．8）、（114．5±30．2）、（135．5±29．2）ns／L]和IL-6[（185．3±28．8）、（201．5±44．0）、（213．0±30．7）ns／L],水平均明显低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）。术后12h情况同术后6h。结论白藜芦醇通过减少炎性细胞因子的过度释放,对大鼠SAP具有保护作用。     

湿润烧伤膏对烫伤大鼠炎症反应与创面愈合的影响

目的:观察湿润烧伤膏(MEBO)对烫伤大鼠炎症反应与创面愈合的影响.方法:将100只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、一般对照治疗组和湿润烧伤膏治疗组,正常对照组20只,其他两组各40只.正常对照组不做任何处理,一般对照治疗组和湿润烧伤膏治疗组造成背部10%深Ⅱ度烫伤后分别给予一般烧伤清创包扎疗法和湿润烧伤膏创面湿性疗法.根据创面情况,一般对照治疗组每2天～4天换药一次,湿润烧伤膏治疗组每4小时～6小时换药一次,并于伤后2小时、12小时、24小时、48小时用酶联免疫吸附试验测定血清肿瘤坏死因子TNF-α及白细胞介素IL-6的含量.对两组大鼠创面行肉眼及组织病理学观察,记录创面愈合时间及愈合质量情况.结果:与正常对照组比较,烧伤后2小时两组大鼠血清TNF-α和IL-6的含量明显升高,至24小时达到高峰,而且一般治疗组明显高于湿润烧伤膏治疗组(P<0.05);肉眼及组织病理学观察两组创面炎症反应明显,但一般治疗组更为严重;一般治疗组愈合时间较湿润烧伤膏治疗组延长(P<0.05).结论:大鼠烫伤后局部应用湿润烧伤膏治疗能减轻局部及全身性炎症反应,加快创面愈合速度,提高愈合质量.