全反式维甲酸联合三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病疗效观察

目的观察全反式维甲酸（ATRA）联合三氧化二砷（As2O3）治疗初发急性早幼粒细胞白血病（APL）的疗效和不良反应。方法25例初发APL患者，采用ATRA联合As2O3治疗。用药方法：ATRA A30-60mg／d；0．1％As2O3注射液10ml溶解于5％葡萄糖注射液500ml中，持续静脉滴注4-5h，1次/d，28d为1个疗程。观察完全缓解率、获得完全缓解的时间、不良反应等。结果25例初发APL患者早期死亡2例，23例获完全缓解，完全缓解率为92％；获得完全缓解的平均时间为（25．5±4．5）d；15例（60％）患者在治疗开始后出现WBC升高，调整ATRA和As2O3的剂量后均能恢复；10例（40％）患者出现轻度肝功能异常，经调整剂量及应用护肝药物后均能恢复。随访至2005年12月（4-28个月），23例获完全缓解的患者无一例复发。结论ATRA联合As2O3治疗初发APL疗效好，不良反应少，而且能缩短达完全缓解的时间。     

全反式维甲酸联合三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病疗效观察

目的观察全反式维甲酸(ATRA)联合三氧化二砷(As2O3)治疗初发急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效和不良反应。方法25例初发APL患者,采用ATRA联合As2O3治疗。用药方法:ATRA30～60mg/d;0.1%As2O3注射液10ml溶解于5%葡萄糖注射液500ml中,持续静脉滴注4～5h,1次/d,28d为1个疗程。观察完全缓解率、获得完全缓解的时间、不良反应等。结果25例初发APL患者早期死亡2例,23例获完全缓解,完全缓解率为92%;获得完全缓解的平均时间为(25.5±4.5)d;15例(60%)患者在治疗开始后出现WBC升高,调整ATRA和As2O3的剂量后均能恢复;10例(40%)患者出现轻度肝功能异常,经调整剂量及应用护肝药物后均能恢复。随访至2005年12月(4～28个月),23例获完全缓解的患者无一例复发。结论ATRA联合As2O3治疗初发APL疗效好,不良反应少,而且能缩短达完全缓解的时间。     

三氧化二砷对人红白血病细胞增殖抑制作用

三氧化二砷(arsenic trioxide,As₂O₃)是中药砒霜的主要有效成分。新近研究发现,As₂O₃对多种肿瘤细胞具有广谱的细胞毒效应^(1-2),被首选用于血液系统恶性肿瘤的治疗。本研究以人红白血病细胞株(K562细胞)为靶点,观察不同浓度的As₂O₃制剂对K562细胞增殖周期的影响及亚细胞结构改变,旨在为人红白血病的治疗提供理论依据。     

全反式维甲酸联合As2O3治疗急性早幼粒细胞白血病21例分析

目的：观察三氧化二砷（As2O3）联合全反式维甲酸（ATRA）治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）的疗效及毒副反应。方法：对21例急性早幼粒细胞白血病（APL）患者应用As2O3联合ATRA双诱导治疗,对高白细胞患者加用单一化疗药物高三尖衫酯碱（H）或柔红霉素（DNR）。结果：21例患者中19例完全缓解,完全缓解（CR）率90.47%;1例死于颅内出血。结论：三氧化二砷联合全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病疗效确切,患者耐受性较好。     

全反式维甲酸与PD98059联合应用抑制结肠癌细胞的增殖

目的本实验拟通过阐明全反式维甲酸（ATRA）与MEK1／2的特异性抑制剂PD98059联合作用对结肠癌细胞增殖的影响。方法实验分组：未加药对照组,ATRA加药组,ATRA与PD98058联合加药组。MTT法检测PD98059联合ATRA对结肠癌细胞株LS174T的增殖抑制作用。流式细胞仪检测结肠癌细胞凋亡情况。结果MTT法显示PD98059联合ATRA应用引起细胞抑制效果明显优于单个药物作用的效果。流式细胞仪检测也表明两种药物联合应用引起结肠癌细胞凋亡效果明显优于任一单个药物。结论AT1KA与PD98059联合应用可通过引起结肠癌细胞凋亡．从而抑制癌细胞增殖。     

全反式维甲酸与PD98059联合应用抑制结肠癌细胞的增殖

目的本实验拟通过阐明全反式维甲酸(ATRA)与MEK1/2的特异性抑制剂PD98059联合作用对结肠癌细胞增殖的影响。方法实验分组:未加药对照组,ATRA加药组,ATRA与PD98058联合加药组。MTT法检测PD98059联合ATRA对结肠癌细胞株LS174T的增殖抑制作用。流式细胞仪检测结肠癌细胞凋亡情况。结果 MTT法显示PD98059联合ATRA应用引起细胞抑制效果明显优于单个药物作用的效果。流式细胞仪检测也表明两种药物联合应用引起结肠癌细胞凋亡效果明显优于任一单个药物。结论 ATRA与PD98059联合应用可通过引起结肠癌细胞凋亡,从而抑制癌细胞增殖。     

全反式维甲酸诱导人膀胱癌EJ细胞凋亡的研究

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)诱导人膀胱癌EJ细胞凋亡的可能性,并进一步研究其作用机制.方法 体外培养人膀胱癌EJ细胞,以不同浓度ATRA处理后,用MTT法测定细胞生长抑制情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;分光光度法检测caspase-3活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测bcl-2 mRNA表达.结果 ATRA能显著抑制EJ细胞的生长,并在一定浓度和时间范围内呈现出时间、剂量依赖关系;细胞的凋亡率随着ATRA浓度的增大而增高;ATRA作用后bcl-2 mRNA表达随着ATRA浓度的增大而降低;caspase-3基因的活性随着ATRA浓度的增大而升高.结论 ATRA对人膀胱癌EJ细胞生长的抑制在一定浓度范围内呈时间和剂量依赖性.ATRA通过抑制bcl-2 mRNA表达,激活caspase-3基因而诱导凋亡,这为其诱导凋亡的作用机制之一.     

全反式维甲酸复方血宁联合治疗复发、难治性急性早幼粒细胞白血病疗效观察

目的观察全反式维甲酸(Tretinoin)与复方血宁(As2O3)联合治疗40例复发、难治性急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效.方法全反式维甲酸每日40～60 mg,分2次口服,同时联合运用5%葡萄糖注射液500 ml加0.1%复方血宁注射液5～10 ml静脉滴注,每日1次,疗程28～45 d,具体疗程依据外周血象及骨髓象变化而定.结果 40例患者中,完全缓解(CR)28例,CR率为70%,部分缓解(PR)8例,PR率为20%,未缓解(NR)4例,NR率为10%,总有效率为90%.结论全反式维甲酸与复方血宁联合是治疗复发、难治性急性早幼粒细胞白血病的有效方法.     

复方黄黛片联合全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病的效果观察

目的探讨复方黄黛片联合全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病的效果。方法按随机数字表法将2015年3月至2017年3月期间本院接诊的102例急性早幼粒细胞白血病患者分为两组,对照组患者接受常规化疗,治疗组患者接受复方黄黛片联合全反式维甲酸序贯治疗。比较两组治疗起效情况、生存时间、维持治疗阶段不良发生情况。结果治疗组完全缓解率为100.00%(51/51)高于对照组的88.24%(45/51),差异具有统计学意义(P0.05);治疗组首次完全缓解时间、血小板计数(PLT)开始回升时间、血红蛋白(Hb)开始回升时间均短于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗组随访期间死亡率为11.76%(6/51)低于对照组的29.41%(15/51)(P0.05)。治疗组末梢神经异常、头痛头昏、肝酶升高、肌肉关节疼痛、皮疹等不良反应发生率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论对急性早幼粒细胞白血病患者采用复方黄黛片联合全反式维甲酸序贯治疗能提高完全缓解率,缩短起效时间,延长生存时间,降低死亡率和不良反应发生率,安全性较高。     

全反式维甲酸对白血病HL-60细胞株GPI-PLD基因表达的影响

目的研究用分化诱导剂全反式维甲酸（ATRA）培养HL-60细胞株后GPI-PLD的表达变化,以初步探讨该酶在全反式维甲酸（ATRA）作用下的变化及其与白血病细胞生长增殖的关系。方法用ATRA处理HL-60细胞后,以胎盘碱性磷酸酶为底物,定量检测GPI-PLD活性;RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平;MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期。结果加入全反式维甲酸培养后,HL-60细胞株中GPI-PLD表达量和活性增加。流式细胞仪检测显示细胞阻滞在G2/M期;MTT实验检测显示ATRA处理后HL-60细胞株增殖生长受到抑制。结论加ATRA处理后HL-60细胞株增殖生长受到抑制,可能与GPI-PLD表达量显著增加有关。     

三氧化二砷、维甲酸联合化疗序贯治疗对急性早幼粒细胞白血病的长期疗效

目的总结三氧化二砷（As2O3）、全反式维甲酸（ATRA）及化疗的序贯巩固方案对急性早幼粒细胞白血病（APL）的远期疗效。方法对我院1996～2006年间诊断为APL的40例患者,缓解后用序贯方案进行巩固治疗的24例,回顾性地与单用维甲酸进行巩固治疗的16例作比较,随访时间至少超过5年,评价两组间的复发率及5年无病生存率的差异。结果接受序贯巩固治疗患者的复发率仅4%,单用维甲酸组复发率为26.6%,5年生存率两组分别为96%及81%。结论接受序贯巩固方案有利于减低APL的复发率,提高患者的5年无病生存率。     

三氧化二砷对C6胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对体外培养的C6胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 以浓度为1、3、5μmol/LAs2O3分别作用于体外培养的C6胶质瘤细胞,采用甲基噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,并用倒置显微镜及透射电子显微镜观察细胞形态学和超微结构的变化.结果 经1、3、5μmol/L As2O3作用后,MTT检测C6胶质瘤细胞活性受到抑制,且呈剂量时间依赖性;流式细胞仪检测凋亡细胞数目随着As2O3浓度的增加呈现逐渐递增的趋势;且上述药物干预者与未用药物干预者比较差异均有统计学意义(P＜0.05);透射电子显微镜检测药物干预者C6胶质瘤细胞较未用药物干预者体积明显缩小,可见少量空泡,细胞核不规则,核内染色质凝聚、边集,形成凋亡细胞的形态学改变等现象.结论 As2O3可抑制C6胶质瘤细胞增殖,诱导C6胶质瘤细胞凋亡.

Abstract：

Objective To investigate the effects of arsenic trioxide(As2O3) on the cell proliferation and apoptosis of C6 glioma cells in vitro.Methods The C6 glioma cells were treated by 1,3,5 μ mol/L of As2O3 with different duration and observed under the microscope and electromicroscope.The viability of C6 glioma cells was examined by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay,and cell cycle and apoptosis were examined by flow cytometry.Results After treatment of 1,3,5 μ mol/L As2O3,C6 glioma cells were inhibited obviously with a dose- and time-dependent manner (P ＜0.05) by MTT.During flow cytometry,more increasing apoptotic cells were found in different concentration As2O3.Characteristic morphological changes were observed in As2O3 intervention by transmission election microscopy including cell shrinkage,physaliphore,nuclear condensation and apoptosis and so on.Conclusion As2O3 can inhibit the cell proliferation and induce the apoptosis of C6 glioma cells.     

三氧化二砷联合全反式维A酸治疗急性早幼粒细胞白血病疗效与安全性分析

目的 观察三氧化二砷(ATO)联合全反式维A酸(ATRA)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效与安全性.方法 83例初治APL患者按随机数字表法分为两组,观察组48例采用ATO联合ATRA诱导缓解治疗,对照组35例采用ATRA联合化疗诱导治疗,比较两组的疗效及不良反应发生情况.结果 观察组有效率和早期病死率分别为100.0％(48/48)和O,对照组分别为97.1％(34/35)和2.9％( 1/35),两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).观察组骨髓抑制、感染、肝肾损害、心脏毒性和消化道症状发生率分别为8.3％(4/48)、10.4％(5/48)、12.5％ (6/48)、6.2％(3/48)和18.8％(9/48),而对照组分别为97.1％(34/35)、65.7％(23/35)、45.7％(16/35)、37.1％(13/35)和100.0％(35/35),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ATO联合ATRA治疗APL,疗效显著,不良反应少,值得临床推广应用.     

三氧化二砷对肝癌HepG2细胞铁死亡影响的研究

目的 探究三氧化二砷是否会诱导肝癌细胞铁死亡,并比较Alamar blue 法和MTT法在肝癌细胞铁死亡中检测细胞活力的差异。方法 以人肝癌HepG2细胞为研究对象,分为对照组、三氧化二砷处理组、公认的铁死亡诱导剂Erastin处理组以及联合铁死亡抑制剂Ferrostatin-1处理组,分别采用倒置生物显微镜观察各组细胞形态及存活情况,采用MTT法和Alamar blue 法检测各组细胞活力,探索三氧化二砷是否可以诱导铁死亡。结果 不同浓度三氧化二砷或Erastin处理后,HepG2细胞出现不同程度的死亡;铁死亡抑制剂Ferrostatin-1可以抑制Erastin诱导的细胞铁死亡,但不能抑制三氧化二砷诱导的细胞死亡;与MTT法相比,Alamar blue 法在检测细胞铁死亡时与显微镜观察结果一致,且各浓度组内检测值标准差较小。结论 三氧化二砷可能不会诱导肝癌细胞铁死亡;Alamar blue 法较MTT法在肝癌HepG2细胞铁死亡后活力检测中有更高的灵敏性,是细胞铁死亡研究中活力检测的首选方法。     

三氧化二砷对HepG2细胞表达基因调节作用

目的 应用基因芯片技术，阐明低剂量三氧化二砷作用于肝HepG2细胞之后，无机砷对差异表达基因的调节作用。方法 应用基因表达谱芯片技术，对5μmol／L三氧化二砷诱导的HepG2细胞和以生理盐水处理的相同细胞的mRNA进行差异显示分析，研究三氧化二砷诱导人HepG2细胞后的差异表达基因。结果 HepG2细胞经5μool／L三氧化二砷诱导后。所检测的4096条目的基因中有123条产生差异表达，其中48条基因表达上调，75条基因表达下调。结论 应用基因表达谱芯片成功筛选了低剂量三氧化二砷诱导肝细胞后的差异表达基因，无机砷对肝细胞有双向调节作用。     

曲古菌素A联合全反式维甲酸诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的协同作用

目的:探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的协同作用及其相关机制。方法:TSA与ATRA联合或者单独作用于SiHa细胞,采用CellTiter 96Aqueous法检测细胞增殖情况,7AAD荧光染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V/7AAD法流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot法检测P53、BCL-2和Caspase-3蛋白的表达变化。结果:细胞增殖实验结果显示TSA联合ATRA对SiHa细胞有显著的增殖抑制作用;7AAD荧光染色结果显示联合用药组细胞凋亡明显增加,出现核碎裂等典型凋亡改变;流式细胞术检测结果显示联合用药组凋亡率显著增高;Western Blot结果显示:与对照组比较,联合用药组中P53和活化性Caspase-3蛋白的表达水平显著升高,而BCL-2蛋白表达水平显著下降。结论:TSA联合ATRA在体外对SiHa细胞具有明显的协同抑制增殖和诱导凋亡作用,推测其机制可能与P53和活化性Caspase-3蛋白表达水平上调、BCL-2蛋白表达水平下调有关。     

凋亡相关基因PDCD5与三氧化二砷诱导卵巢癌细胞凋亡的相关性研究

目的探讨凋亡相关基因人程序化死亡分子5（PDCD5）在三氧化二砷（As2O3）诱导卵巢癌细胞凋亡过程中发挥的作用。方法流式细胞仪检测，并在荧光显微镜下观察PDCD5在As2O3诱导卵巢癌细胞凋亡前后的表达状况。结果PDCD5在卵巢癌细胞系中表达，经As2O3孵育后PDCD5的表达强度增加，其增加量与As2O3的剂量有关。结论凋亡促进剂PDCD5在As2O3诱导的卵巢癌细胞凋亡过程中发挥重要作用。     

应用流式细胞仪研究As2O3及NaAsO2诱导EBL7404细胞及HeLa细胞分化

目的用流式细胞仪研究As2O3及NaAsO2诱导EBL7404细胞及HeLa细胞分化。方法采用0.25μmol/L的As2O3及NaAsO2同EBL7404细胞及HeLa细胞共同作用7 d后,用CD44作为宫颈及肝癌细胞的特异性抗原进行标记,应用流式细胞仪进行肿瘤细胞与分化细胞的分选。结果 0.25μmol/L的As2O3及NaAsO2同EBL7404细胞及HeLa细胞共同作用7 d后均有肿瘤细胞进行了不同程度的分化。以0.25μmol/L NaAsO2处理的HeLa细胞分化率最高,为1.8%,其次为0.25μmol/L As2O3处理的HeLa细胞,分化率为0.7%,0.25μmol/L As2O3处理的EBL7404细胞为0.6%,0.25μmol/LNaAsO2处理的EBL7404细胞分化率为0.3%。结论低剂量的As2O3及NaAsO2同EBL7404细胞及HeLa细胞共同作用一段时间后,均有不同细胞分化。     

砷体外诱导人Jurkat T淋巴细胞的差异表达cDNA文库的构建

目的 了解三氧化二砷(As2O3)诱导人T淋巴细胞的差异表达基因,探讨砷的免疫毒性和免疫抑制的机制。方法 在体外用As2O3处理人Jurkat T淋巴细胞(5μmol／L,24h)后,应用抑制性消减杂交技术(SSH)和克隆技术构建差异表达的cDNA文库,用聚合酶链反应技术和测序技术鉴定阳性克隆。结果 用SSH技术成功地构建了由As2O3诱导的Jurkat T淋巴细胞的差异表达基因的正向消减cDNA文库。经测序分析该文库含有30个基因片段,其中仅有1个是重复基因片段。与基因库的序列比较显示,这些基因序列的同源性在95％～100％。该文库的基因有：氧化代谢基因(包括磷酸丙糖脱氢酶、酰胺腺嘌呤二核苷酸4亚单位、焦磷酸合成酶、16S核糖体、琥珀酰CoA合成酶和ATP合成酶6),转录和翻译基因(包括多聚腺苷结合蛋白、泛醌素特异性蛋白酶14、核糖体蛋白：[23、核糖体蛋白S15a、真核翻译起始因子3、Rab5相互作用蛋白、剪切因子和ADP-核糖体因子6样相互作用蛋白),与氧化应激相关的基因(铁蛋白重链和高泳动类蛋白2),与细胞分化或凋亡相关基因(髓细胞分化初期应答蛋白和凋亡相关蛋白),参与蛋白活化或信号传导的基因(酪氨酸激酶、丝氨酸激酶和磷脂酰4磷接头蛋白-1相关蛋白);5个功能不详的基因是KIAA0092、CGI-147蛋白、GCI-35、核磷蛋白Nopp34和与骨骼肌部分mRNA假设蛋白同源基因。1个在基因库中无同源序列的新基因。结论 应用SSH技术成功构建了As2O3诱导T淋巴细胞差异表达基因的正向消减cDNA文库。并且发现以往在砷的研究中从未涉及的基因。基因功能分析结果提示,As2O3在诱导T淋巴细胞凋亡的过程中不但有多种基因参与,而且还有一些未知的基因也参与细胞凋亡或(和)细胞抗砷毒性作用的应答过程。