rhBMP-2/Nha/Co复合膜异位成骨的实验研究

目的:观察rhBMP- 2/nHA/Co复合膜异位诱导成骨的能力.方法: 构建nHA/Co 复合膜和rhBMP- 2/nHA/Co复合生物膜,分别植入裸鼠后肢大腿肌囊,于10、20、30 d后观察成骨情况,并作比较.结果: rhBMP/nHA/Co组材料在裸鼠肌囊内出现骨样结构,异位成骨的能力较nHA/Co组强.结论: 动物实验中Co、nHA均为BMP的良好缓释载体,此复合膜能有效的诱导异位成骨.     

rhBMP-2/Co/HA复合材料的制备及异位诱导成骨作用

目的：测定rhBMP-2/Co/HA复合制剂的生物活性,为其作为盖髓剂和根尖诱导剂提供理论依据。方法：将rhBMP-2、Ⅰ型胶原和羟基磷灰石复合,采用异位骨诱导实验检测复合材料的生物活性,并通过X线及组织学观察其效果。结果：rhBMP-2/Co/HA复合材料能够异位诱导成骨。结论：rhBMP-2/Co/HA复合材料可作为一种新型的、具有良好生物活性的材料进一步研究,为将来的临床开发和应用打下基础。     

复合膜引导牙周组织再生

目的：观察基因重组人骨形成蛋白-2、胶原、聚乳酸／聚羟基乙酸共聚体（rhBMP-2／Co／PLGA）复合膜引导牙周组织再生的效果。方法：在杂犬的第四前磨牙及第-磨牙颊侧部位,制备急性牙周组织缺损模型,将复合膜材料植入实验部位,设对侧为同体对照。术后8周处死动物,切取双侧下颌骨标本,行软x线照相和组织学观察。结果：实验侧可见大量新生牙槽骨、牙骨质和牙周膜纤维形成;对照侧主要是牙龈上皮和上皮下结缔组织增生。结论：rhBMP-2／Co／PLGA复合膜符合GTR的要求,能够引导牙周组织再生。     

rhBMP-2/Co/PLGA复合生物膜对腭裂骨缺损修复的实验研究

目的:观察引导性骨再生(guidedboneregeneration,GBR)技术修复腭裂骨缺损的效果。方法:16只成年犬分为2组:实验组8只,对照组8只。实验组将rhBMP-2/Co/PLGA复合生物膜植入骨缺损区,对照组植入Co/PLGA复合生物膜。分别于术后第4、8、12、24周,对其上颌骨进行三维CT扫描观察,同时进行新骨组织学检查。结果:从影像学、组织学检查的结果看,实验组的新骨形成优于对照组。结论:植入rhBMP-2/Co/PLGA复合生物膜可用于修复腭裂骨缺损。     

活性纳米羟基磷灰石复合胶原聚乳酸材料异位成骨性能研究

目的：探讨既具有骨引导性又具有骨诱导性的活性纳米羟基磷灰石复合胶原/聚乳酸（AnHAC/PLA）材料的异位成骨能力,为该材料作为植骨材料应用于临床打下实验基础。方法：通过扫描电镜观察rhBMP-2与nHAC/PLA材料的复合情况,并将nHAC/PLA、rhBMP-2、AnHAC/PLA材料分别植入小鼠股后肌袋内,术后2周、6周通过X线片、组织学观察、成骨量测定来研究AnHAC/PLA的异位成骨能力。结果：rhBMP-2在nHAC/PLA孔隙中均匀分布,6周时AnHAC/PLA组诱导形成的骨量是rhBMP-2组的10.5倍。结论：AnHAC/PLA材料具有良好成骨能力,nHAC/PLA是rhBMP-2理想的缓释载体。     

基因重组人骨形成蛋白-2和聚乳酸复合异位诱导成骨的实验研究

目的：观察基因重组人骨形成蛋白－2（recombinant human Bone Morphofenetic protein-2,rhBMP-2)和聚乳酸（Polylactic acid,PLA)复合形成的活性涂层种植体的异位诱导成骨活性。方法：将rhBMP-2与聚乳酸复合，构建活性涂层种植体，植入兔肌内，于1，4，8周后进行X线、大体观察及组织学观察，检测异位成骨活性。结果：rh-BMP-2/PLA活性复合涂层种植体具有骨诱导能力，PLA为rhBMP-2的良好控释载体。结论：rhBMP-2/PLA涂层具有良好的生物相容性和骨诱导活性，是一种理想的种植体涂层形成。     

消旋聚乳酸复合rhBMP-2/hTGF-β1诱导小鼠成骨及其机制的研究

目的:评价消旋聚乳酸(PDLLA)载体材料复合重组rhBMP-2和hTGF-β1诱导小鼠体内异位成骨的能力,初步探讨其作用机制。方法:建立诱导RCI小鼠股部肌内异位成骨的18只动物模型,实验组(各6只)分别植入PDLLA/rhBMP-2/hTGF-β1和PDLLA/rhBMP-2复合材料,对照组(6只)植入PDLLA材料。采用图像处理技术、组织病理学和RT-PCR等分子生物学方法,对消旋聚乳酸载体材料复合2种细胞因子诱导小鼠体内异位成骨能力进行评价;并对其诱导异位成骨过程中,II型胶原蛋白、骨桥蛋白和骨钙蛋白等骨基质蛋白基因表达进行检测。结果:PDLLA/rhBMP-2/hTGF-β1和PDLLA/rhBMP-2组复合材料均具有明显的诱导小鼠肌内异位成骨能力,而单纯PDLLA载体材料无诱导异位成骨能力,表现为小鼠股部复合材料植入区的相对密度指数存在显著性差异。II胶原、骨桥蛋白和骨钙蛋白及其基因在2种细胞因子复合材料植入组中均有较高表达,而在单纯PDLLA组则无表达。结论:PDLLA复合rhBMP-2/hTGF-β1具有诱导异位成骨作用,软骨内成骨是其诱导小鼠体内异位成骨的主要方式。     

rhBMP-2/HA/Co复合材料异位诱导成骨中钙含量的检测

目的 确定rhBMP-2/HA/Co的生物活性。方法 用原子吸收分光光度法测定rhBMP-2/HA/Co复合材料异位诱导成骨区样本单位湿重的钙含量,并与HA/Co组对照。结果 实验组样本的单位湿重钙含量的平均值高于对照组。结论 rhBMP-2/HA/Co复合材料具有良好的生物活性。     

兔下颌骨放疗后牵张成骨动物模型的建立

目的探讨建立兔下颌骨放疗后牵张成骨动物模型的可行性。方法24只成年新西兰大白兔随机分为放疗组和未放疗组,每组12只。放疗组采用60Co放疗机照射兔下颌骨,5.4Gy/次,隔日1次,共5次。3个月后在2组兔下颌骨的双侧截骨处安装牵张器,经5d延迟期后开始牵张,速率为1mm/d,0.5mm/次,每日2次,连续7d,共延长下颌骨7mm。固定期的第0、4、6周摄下颌骨侧位X线片。固定期的第4、6周分别取出下颌骨行组织学观察。结果兔对放疗和牵张成骨术耐受良好,未见放疗引起的不良反应。X线片有新骨形成,未见死骨;组织学观察见放疗组较未放疗组有更多软骨形成。结论兔是一种用于建立放射损伤区牵张成骨模型的良好动物。     

载辛伐他汀磷酸钙骨水泥/聚乳酸-聚羟基乙酸新型材料对拔牙创骨改建影响的实验研究

目的：探讨载辛伐他汀磷酸钙骨水泥/聚乳酸-聚羟基乙酸（CPC/PLGA）生物复合支架材料对拔牙创骨改建的影响。方法：选用50只Wistar雄性大鼠,随机均分为实验组和对照组,拔除右下颌中切牙后,实验组即刻植入载辛伐他汀/CPC/PLGA支架材料,对照组植入CPC/PLGA空白支架材料。术后1、2、4、8、12周分别处死实验组和对照组大鼠各5只,采用大体观察、软X线、组织学等方法定性、定量进行骨改建效果评价。结果：术后2、4、8、12周,剩余牙槽嵴相对长度实验组与对照组相比明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。剩余牙槽嵴相对宽度实验组与对照组相比明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。组织学观察表明实验组成骨速度和质量优于对照组。结论：载辛伐他汀/CPC/PLGA可诱导拔牙窝内新骨的形成,且在成骨数量上优于单一的CPC/PLGA支架材料组。     

重组人骨形成蛋白-2结合胶原膜在兔颅骨引导骨再生模型中的成骨效应研究

目的    探讨重组人骨形成蛋白-2（rhBMP-2）与胶原膜靶向结合后在兔颅骨引导骨再生（GBR）模型中的成骨效应。方法    将20只普通级雌性健康新西兰大白兔随机分成2周组和6周组,每组10只。所有大白兔均制备颅骨GBR模型,在颅顶骨植入4个钛筒,分别盖rhBMP-2/CBD胶原膜（rhBMP-2/CBD胶原膜组）、rhBMP-2胶原膜（rhBMP-2胶原膜组）、胶原膜（胶原膜组）和不盖膜（空白组）。分别在2周和6周时处死各对应组的大白兔,取样制作硬组织切片和石蜡切片,染色后进行组织学观察。结果    2周时可见胶原膜阻挡了纤维组织的长入,4组钛筒上层均无新骨生成,其中rhBMP-2/CBD胶原膜组钛筒顶端毛细血管增生量明显较其余3组多。6周时可见rhBMP-2/CBD胶原膜组钛筒上层大量新骨生成,与来源于颅骨骨面的新骨界限明显,而其余3组钛筒顶端未见新骨生成。结论    rhBMP-2与胶原膜靶向结合可形成具有骨诱导性的胶原膜,缓释rhBMP-2使胶原膜下方大量新骨生成,表层成骨可阻止纤维组织的长入和防止植骨床的塌陷,使成骨速度加倍。     

The effect of rhBMP-2 around endosseous implants with and without membranes in the canine model

BACKGROUND: Bone morphogenetic protein (BMP) is a potent differentiating agent for cells of the osteoblastic lineage. It has been used in the oral cavity under a variety of indications and with different carriers. However, the optimal carrier for each indication is not known. This study examined a synthetic bioabsorbable carrier for BMP used in osseous defects around dental implants in the canine mandible. METHODS: Twelve canines had their mandibular four premolars and first molar teeth extracted bilaterally. After 5 months, four implants were placed with standardized circumferential defects around the coronal 4 mm of each implant. One-half of the defects received a polylactide/glycolide (PLGA) polymer carrier with or without recombinant human BMP-2 (rhBMP-2), and the other half received a collagen carrier with or without rhBMP-2. Additionally, one-half of the implants were covered with a non-resorbable (expanded polytetrafluoroethylene [ePTFE]) membrane to exclude soft tissues. Animals were sacrificed either 4 or 12 weeks later. Histomorphometric analysis included the percentage of new bone contact with the implant, the area of new bone, and the percentage of defect fill. This article describes results with the PLGA carrier. RESULTS: All implants demonstrated clinical and radiographic success with the amount of new bone formed dependent on the time and presence/absence of rhBMP-2 and presence/absence of a membrane. The percentage of bone-to-implant contact was greater with rhBMP-2, and after 12 weeks of healing, there was approximately one-third of the implant contacting bone in the defect site. After 4 weeks, the presence of a membrane appeared to slow new bone area formation. The percentage of fill in membrane-treated sites with rhBMP-2 rose from 24% fill to 42% after 4 and 12 weeks, respectively. Without rhBMP-2, the percentage of fill was 14% rising to 36% fill, respectively. CONCLUSIONS: After 4 weeks, the rhBMP-2-treated sites had a significantly higher percentage of contact, more new bone area, and higher percentage of defect fill than the sites without rhBMP-2. After 12 weeks, there was no significant difference in sites with or without rhBMP-2 regarding percentage of contact, new bone area, or percentage of defect fill. In regard to these three outcomes, comparing the results with this carrier to the results reported earlier with a collagen carrier in this study, only the area of new bone was significantly different with the collagen carrier resulting in greater bone than the PLGA carrier. Thus, the PLGA carrier for rhBMP-2 significantly stimulated bone formation around dental implants in this model after 1 month but not after 3 months of healing. The use of this growth factor and carrier combination appears to stimulate early bone healing events around the implants but not quite to the same degree as a collagen carrier.     

犬骨髓基质细胞片层在构建组织工程骨中的作用

目的:探讨犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)细胞片层在构建组织工程骨中的价值.方法:制备犬同种异体脱钙骨基质(dermineralized bone matrix,DBM).将人重组骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)复合到DBM上.抽取犬髂骨骨髓,采用密度梯度离心法分离犬骨髓基质细胞(BMSCs).将经成骨诱导的第3代细胞接种于温度反应性培养皿中,制备BMSCs细胞片层.用得到的BMSCs细胞片层包裹DBM/rhBMP-2/BMSCs复合体,植入犬背阔肌血运丰富的肌筋膜下为实验侧,以无BMSCs细胞片层包裹的DBM/rhBMP-加MSCs复合体为对照侧.术后4、8、12周取材,行组织学观察,评价体内异位成骨的情况.采用SPSS13.0软件,对数据进行两样本均数差别的t检验.结果:实验侧成骨面积大于对照侧,2组差异有显著性(P<0.05).术后12周,实验侧生成大量板层骨,有哈弗系统形成,骨髓腔内有红骨髓.对照侧有板层骨形成,无哈弗系统形成,骨髓腔内无红骨髓.结论:BMSCs细胞片层可促进具有致密板层骨和哈弗系统的组织工程骨的形成.     

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目的 探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)与胶原膜靶向结合后在兔颅骨引导骨再生(GBR)模型中的成骨效应。方法 将20只普通级雌性健康新西兰大白兔随机分成2周组和6周组,每组10只。所有大白兔均制备颅骨GBR模型,在颅顶骨植入4个钛筒,分别盖rhBMP-2/CBD胶原膜(rhBMP-2/CBD胶原膜组)、rhBMP-2胶原膜(rhBMP-2胶原膜组)、胶原膜(胶原膜组)和不盖膜(空白组)。分别在2周和6周时处死各对应组的大白兔,取样制作硬组织切片和石蜡切片,染色后进行组织学观察。结果 2周时可见胶原膜阻挡了纤维组织的长入,4组钛筒上层均无新骨生成,其中rhBMP-2/CBD胶原膜组钛筒顶端毛细血管增生量明显较其余3组多。6周时可见rhBMP-2/CBD胶原膜组钛筒上层大量新骨生成,与来源于颅骨骨面的新骨界限明显,而其余3组钛筒顶端未见新骨生成。结论 rhBMP-2与胶原膜靶向结合可形成具有骨诱导性的胶原膜,缓释rh BMP-2使胶原膜下方大量新骨生成,表层成骨可阻止纤维组织的长入和防止植骨床的塌陷,使成骨速度加倍。     

Intramuscular osteoinduction and bone marrow formation by the implantation of rhBMP-2 with atelopeptide type I collagen

The study examines the osteoinductive potential of recombinant human morphogenetic protein 2 (rhBMP-2) radiologically and histologically in rat calf muscle.Ten male Wistar rats were used. rhBMP-2 50 μg was implanted with atelopeptide type I collagen as carrier in a pouch in rat calf muscle (n=5), and atelopeptide type I collagen alone was implanted in a further five as control. Induction of osteogenesis at 4 weeks was investigated.In all rats in which rhBMP-2 had been implanted there was a radio-opaque shadow in the muscle in the soft tissue radiograph. No such shadows were noted in the control group. Histological examination showed bony trabeculum, osteoblasts, and vigorous bone marrow including fatty marrow and angioid tissue both at the margins and in the center of the excised lumps in the rhBMP-2 group. There were no such signs in the control group.rhBMP-2 may be capable not only of inducing the formation of bone, but also of inducing a ‘self-supporting bone organ’ in the muscle.     

rhBMP-2、胶原、珊瑚复合骨诱导骨形成生物活性的实验研究

目的：研究珊瑚、胶原、ｒｈＢＭＯＰ－２复合骨异位诱导新骨形成的活性和载体在体内降解情况。方法：选择珊瑚和１型胶 为ｒｈＢＭＰ－２载体,采用肌袋异位成骨的动物模型,通过大体观察、组织测量等手段,研究复合骨诱导新骨形成的特点、珊瑚降解的过程。结果：ｒｈＢＭＰ－２、珊瑚和胶原复合骨诱导骨组织形成,在一定范围内随作用时间延长新骨形成量持续增加,其中ｒｈＢＭＰ－２、胶原、珊瑚复合骨具有骨引导性和骨诱导性,珊