玉米赤霉烯酮调节细胞色素P450 3A4转录表达的研究

目的研究真菌性雌激素玉米赤霉烯酮(ZEA)是否能通过活化人甾体激素和外源化学物受体(SXR)诱导细胞色素P4503A4(CYP3A4)的转录表达。方法在人肝肿瘤细胞株细胞中,用瞬时共转染报告基因试验即共转染含人SXR序列质粒和含CYP3A4外源化学物反应元件的报告基因质粒来检测ZEA对SXR介导的CYP3A4的转录调节作用。结果ZEA能通过活化SXR诱导CYP3A4的转录表达,并具有剂量效应关系和时间效应关系。在剂量效应关系研究中,ZEA浓度分别为001、010、100和1000μmol/L时,其诱导倍数分别为01%二甲基亚砜处理细胞的(150±021)倍、(166±027)倍、(304±082)倍和(396±116)倍。在时间效应关系研究中,100和1000μmol/L的ZEA处理细胞48h后,诱导能力分别为01%二甲基亚砜处理细胞的(369±134)倍和(518±150)倍。在浓度为10μmol/L,处理时间为48h时诱导能力最大,为用01%二甲基亚砜处理细胞的(518±150)倍。结论ZEA能通过活化SXR诱导CYP3A4的转录表达。ZEA对CYP3A4的诱导可能影响其他CYP3A4底物,尤其是药物在体内的代谢。     

HPLC法同时测定栀子金花丸中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素

目的 建立栀子金花丸中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的HPLC同时测定方法.方法 色谱柱:Dikma Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱;变波长测定.结果 黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的线性范围分别为0.418～4.18 μg,02～2 μg,0.233～2.33 μg,0.215～2.15 μg,线性相关系数均达0.999以上.平均回收率分别为98.40％ (RSD=0.46％),98.66％ (RSD=1.43％),98.89％ (RSD=1.49％),98.98％(RSD=1.45％).结论 该方法快速、简便、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为栀子金花丸中这4种成分的含量测定方法.     

中药半枝莲总黄酮含量分析

半枝莲(Scutellariabarbata)是唇形科的一种草本植物．全草有很多的药用功能，具有清热、解毒、活血、祛瘀、消肿、止痛、抗癌等功效。半枝莲中化学成分主要含有生物碱、糖类及黄酮类化合物。黄酮类化合物包括印黄芩素(又名野黄芩苷Scutellarin)、红花素(Carthamidin)、异红花素(Isocarthamidin)等，其中含量最多的是野黄芩苷。现代生物医学研究，     

PDCD4参与异甘草素诱导宫颈癌细胞凋亡的实验研究

目的研究程序性细胞死亡4 (PDCD4)在异甘草素诱导宫颈癌细胞凋亡中的作用。方法宫颈癌细胞Si Ha经异甘草素处理以后,MTT检测细胞增殖,计算半数抑制浓度,Western blot和qRT-PCR检测细胞中PDCD4蛋白和mRNA水平。在Si Ha细胞中转染PDCD4过表达载体和阴性对照载体,用Western blot和qRT-PCR检测细胞中PDCD4表达变化。用半数抑制浓度的异甘草素处理过表达PDCD4的Si Ha细胞,MTT检测细胞增殖能力,克隆形成实验检测细胞克隆能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化型Caspase-3 (Cleaved Caspase-3)蛋白水平。结果异甘草素抑制宫颈癌细胞增殖,其半数抑制浓度为40μmol/L。40μmol/L异甘草素处理宫颈癌细胞,细胞中PDCD4 mRNA和蛋白表达水平升高。转染PDCD4过表达载体的宫颈癌细胞中PDCD4 mRNA和蛋白水平升高。过表达PDCD4或者异甘草素处理均可以降低宫颈癌细胞增殖和克隆能力,促进宫颈癌细胞凋亡和细胞中Cleaved Caspase-3蛋白表达,并且异甘草素处理过表达PDCD4宫颈癌细胞对细胞增殖、克隆能力的抑制作用更强,细胞凋亡和细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平更高。结论 PDCD4参与异甘草素诱导宫颈癌细胞凋亡过程,PDCD4高表达能够协同异甘草素诱导宫颈癌细胞凋亡。     

黄芩素干预宫颈癌细胞凋亡机制的研究

摘要:目的　观察通过使用不同浓度黄芩素干预宫颈癌HeLa细胞后,TIMP2及凋亡相关因子Bax、Bcl2 mRNA及蛋白水平表达的变化。方法　体外培养HeLa细胞株,分为空白对照组、100 μmol/L干预组、200 μmol/L干预组,培养24 h。相差显微镜下观察细胞形态及数量的变化。流式细胞技术法检测细胞周期的变化。RT-PCR法检测TIMP2、Bax、Bcl2 mRNA水平的表达变化。Western Blot法检测TIMP2、Bax、Bcl2蛋白水平的表达变化。结果　黄芩素干预24 h后,与空白对照组相比较,各组细胞G1期均受阻滞,组织程度与黄芩素干预浓度成正向变化,Bcl2的mRNA及蛋白表达与黄芩素干预浓度浓度相关,呈逐渐降低的趋势（P＜0.05）,TIMP2、Bax的mRNA及蛋白水平表达趋势为随黄芩素浓度增加而逐渐增强（P＜0.05）。结论　黄芩素通过阻滞细胞周期中G1期,上调Bax,下调TIMP2和Bcl2的表达,促使HeLa细胞凋亡。     

黄芩苷对结肠癌细胞迁移与侵袭能力的抑制作用及其机制研究

目的研究黄芩苷对人结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法、细胞划痕实验和Transwell实验检测黄芩苷对SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力的作用,Western blot方法检测黄芩苷作用后SW480细胞中MMP-9和COX-2的蛋白表达水平。结果黄芩苷以时间和浓度依赖方式抑制SW480细胞的增殖;黄芩苷能明显抑制SW480细胞的迁移和侵袭能力(P=0.0012,P=0.0017);并且黄芩苷能够下调SW480细胞中MMP-9和COX-2蛋白的表达(P=0.0013,P=0.0036)。结论黄芩苷可能通过下调MMP-9和COX-2蛋白的表达,从而发挥抑制SW480细胞增殖、迁移和侵袭的作用。     

miR-21在黄芪甲苷保护ox-LDL诱导的内皮细胞炎症损伤过程中的作用

目的探讨miR-21在黄芪甲苷保护氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症损伤中的作用及其机制。方法将体外培养的HUVEC分为对照组(未干预)、模型组(以100μmol/L ox-LDL作用24 h)、治疗-低剂量(L)组、治疗-中剂量(M)组和治疗-高剂量(H)组,其中治疗-L、M和H组细胞以100μmol/L ox-LDL作用24 h后,分别加入10、20和40 mg/L的黄芪甲苷作用2 h。MTT法检测细胞的存活率,ELISA法检测细胞上清液中炎症相关因子TNF-α、IL-6和NF-κB的含量,RT-PCR检测细胞内miR-21和TLR4 mRNA的表达,Western blot检测TLR4蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-21和TLR4的靶向关系。转染miR-21模拟物和抑制剂构建miR-21过表达和低表达的HUVEC株,观察miR-21对HUVEC炎症因子分泌和TLR4表达的影响;同时,在给予40 mg/L的黄芪甲苷治疗的基础上,观察转染miR-21抑制剂下调miR-21表达对黄芪甲苷作用下HUVEC炎症因子的影响。结果与对照组相比,模型组、治疗-L组、治疗-M组和治疗-H组细胞存活率和细胞中miR-21表达显著降低,而细胞上清液中TNF-α、IL-6和NF-κB的含量以及细胞中TLR4 mRNA、蛋白的表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,治疗-L组、治疗-M组和治疗-H组细胞存活率和miR-21表达逐渐升高,而TNF-α、IL-6和NF-κB的含量以及TLR4 mRNA、蛋白的表达逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实TLR4是miR-21的潜在靶基因。miR-21过表达降低HUVEC内炎症因子的分泌和TLR4的表达,反之,则促进HUVEC内炎症因子的分泌和TLR4的表达;下调miR-21表达后可逆转黄芪甲苷对HUVEC炎症因子的调控。结论黄芪甲苷可减轻ox-LDL诱导的HUVEC炎症损伤,其作用机制可能与上调miR-21靶向抑制TLR4表达有关。     

芍药苷对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的 保护作用

摘要:目的　探讨芍药苷对过氧化氢（H2O2）诱导人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用。方法　体外培养HUVEC,以200 μmol/L H2O2诱导人脐静脉血管内皮细胞损伤建立模型,同时以100、200、400 μmol/L的芍药苷分别干预,显微镜下观察细胞形态,用噻唑蓝（MTT）法检测HUVEC活力,微板法检测上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性及一氧化氮（NO）的含量,酶联免疫吸附法（ELISA）法检测内皮素-1（ET-1）、组织型纤溶酶原激活物（tPA）、纤溶酶原激活物抑制因子（PAI-1）的含量。结果　与模型组比较,芍药苷中、高剂量组细胞活力显著升高,LDH活性显著减低、ET-1和PAI-1含量显著减少,NO和tPA显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。结论　芍药苷对H2O2诱导的HUVEC损伤具有明显的保护作用。     

六溴环十二烷对视黄醛类X受体α、孕烷X受体、过氧化物酶体增殖物活化受体γ的影响及其相互作用

目的探讨六溴环十二烷(HBCDs)对小鼠神经母细胞瘤细胞N2a增殖的影响以及对3个重要细胞核受体:视黄醛类X受体α(RXRα)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、孕烷X受体(PXR)表达及其相互作用的影响。方法用不同浓度的3种非对映异构体(±)α-HBCD,(±)β-HBCD,(±)γ-HBCD处理N2a细胞,Cell counting kit-8(CCK-8)法检测HBCD对N2a的细胞毒性作用;流式细胞术检测HBCD对N2a细胞周期的影响;实时荧光定量(RT-PCR)和免疫蛋白印迹(Western blot,WB)法分别用于检测3个细胞核受体RXRα、PPARγ、PXR和下游靶基因细胞色素P450亚酶CYP3A11的mRNA及蛋白表达水平的变化;免疫共沉淀技术分析RXRα、PXR、PPARγ受体间的相互作用。结果β-HBCD对N2a的细胞毒性明显大于α-HBCD,γ-HBCD没有明显的细胞毒性。α-HBCD、β-HBCD对N2a细胞增殖的抑制作用呈时间-剂量效应关系(P0.05),其半数抑制浓度(IC_(50))分别为60.07和10.52μmol/L,γ-HBCD的细胞毒性较小,镜下可见黑色絮状物,CCK-8法未能测定出其IC_(50);α-、β-HBCD会使细胞周期阻滞在G2/M期;染毒24 h后,RXRα、PPARγ、PXR及CYP3A11的mRNA及蛋白表达水平均呈现上升趋势(P0.05);在N2a细胞内,α-HBCD染毒前后,RXRα与PPARγ、PXR之间始终存在交互作用关系。结论α-HBCD、β-HBCD对N2a细胞具有增殖抑制作用,细胞周期主要阻滞在G2/M期。α-HBCD、β-HBCD均可诱导3种细胞核受体RXRα、PPARγ和PXR的表达升高,PXR受体下游表达基因CYP3A11的表达也明显升高(P0.05)。RXRα与PPARγ、PXR三个细胞核受体之间始终存在交互作用,但是受体间相互作用的分子机制有待深入研究。     

DEHP及其代谢产物MEHP对MLTC-1细胞凋亡和类固醇激素合成基因表达的影响

目的实验测评DEHP及其主要代谢产物MEHP暴露对MLTC-1细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响。方法将MLTC-1分别暴露于DEHP(0,1,10,100,1 000μmol/L)和MEHP(0,1,10,100,1 000μmol/L)24 h,采用Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡,并应用荧光定量PCR法分析细胞类固醇激素合成过程中涉及关键酶的基因表达水平。结果凋亡实验结果显示DEHP(100和1 000μmol/L)和MEHP(10和1 000μmol/L)显著诱导MLTC-1细胞晚期凋亡的发生,1 000μmol/L DEHP和MEHP显著降低了MLTC-1活力。所以本研究采用了较低的染毒浓度(1,10和100μmol/L)对MLTC-1染毒24 h来评估DEHP和MEHP对MLTC-1类固醇合成通路的影响。荧光定量结果显示1μmol/L DEHP显著增加MLTC-1 CYP17A1基因表达水平,而100μmol/L DEHP显著抑制MLTC-1 CYP17A1、CYP11A1和SF-1基因表达水平。10μmol/L DEHP显著增加MLTC-1外CYP1A1基因表达水平。100μmol/L DEHP显著抑制MLTC-1黄体激素受体LHR基因表达水平。1μmol/L MEHP显著增加MLTC-1 3β-HSD基因表达水平。然而MEHP对类固醇激素合成过程中一些酶如STAR、CYP17A1、CYP11A1、重要调节因子胰岛素样激素3 INSL-3、SF-1、关键受体AR和LHR基因表达水平均无显著影响。结论 DEHP和MEHP诱导MLTC-1凋亡,DEHP和MEHP都可影响MLTC-1细胞类固醇激素合成过程中关键基因的表达,从而引起内分泌干扰。     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。