中压液相层析法纯化人VLDL主要载脂蛋白

目的 建立中压液相层析分离法纯化人VLDL主要载脂蛋白(apo) E、CⅠ、CⅡ和CⅢ的方法.方法 以低温乙醇法制备人血浆白蛋白后的残余组分FⅡ Ⅳ为原料,经一次性密度梯度超离心得到VLDL.脱脂后的VLDL(apoVLDL)经中压Sephacryl S-200柱层析得到apoE和apoCs粗品.apoE经肝素琼脂糖CL-6B亲和层析进一步纯化,apoCs经DEAE-Sephacel离子交换层析进行分离.结果 apoE经肝素琼脂糖CL-6B亲和层析进一步纯化,可得纯度为93.8%的纯品;apoCs经离子交换层析分离得到纯度为92%以上的apoCⅡ、apoCⅢ.所纯化各载脂蛋白apo E、CⅠ、CⅡ及CⅢ经免疫单扩和SDS-PAGE鉴定为免疫纯及电泳纯.结论 成功建立了一种可大量、快速、高分辨分离提纯载脂蛋白apo E、CⅠ、CⅡ及CⅢ的方法.     

小鼠肝细胞膜载脂蛋白C Ⅲ受体特性的进一步研究

目的研究小鼠肝细胞膜载脂蛋白(apo)CⅢ受体与apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及E的结合特性.方法用受体的放射性配基结合分析法(RBA)观察血浆脂蛋白(VLDL、LDL及HDL)以及纯化的apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及E与小鼠肝细胞膜apoCⅢ受体结合的活性.结果 apoCⅢ受体与125I-apoCⅢ的结合能被非标记 apoCⅠ、CⅡ、CⅢ、E及VLDL抑制,其中apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及VLDL抑制曲线相似,以apoCⅢ的抑制作用最强,apoCⅠ次之,apoCⅡ最弱,apoE与apoCⅢ受体亦有一定结合;而含apoB100的LDL以及含apoAⅠ及apoAⅡ的HDL和人血清白蛋白则对结合无影响.结论小鼠肝细胞膜上存在apoCⅢ受体,除能特异结合apoCⅢ及VLDL外,亦能在一定程度上与 apoCⅠ、CⅡ及E结合.     

小鼠肝细胞膜载脂蛋白CⅢ受体特性的进一步研究

目的 研究小鼠肝细胞膜载脂蛋白（apo)CⅢ受体与apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及E的结合特性。方法 用受体的放射性配基结合分析法（RBA）观察血浆脂蛋白（VLDL、LDL及HDL）以及纯化的apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及E与小鼠肝细胞膜apoCⅢ受体结合的活性。结果 apoCⅢ受体与^125I-apoCⅢ的结合能被非标记apoCⅠ、CⅡ、CⅢ、E及VLDL抑制，其中apoCⅠ、CⅡ、CⅢ及VLDL抑制曲线相似，以apoCⅢ的抑制作用最强，apoCI次之，apoCⅡ最弱，apoEGN apoCⅢ受体亦有一定结合；而含apoB100的LDL以及含apoAI及apoAⅡ的HDL和人血清白蛋白则对结合无影响。结论 小鼠肝细胞膜上存在apoCⅢ受体，除能特异结合apoCⅢ及VLDL外，亦能在一定程度上与apoCⅠ、CⅢ及E结合。     

成都地区269例健康成人血清载脂蛋白CⅢ含量的研究

作者采用竞争性酶免疫试验(CEIA)测定了成都地区正常人血清载脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)含量。269例正常人apoCⅢ含量为11.8±3.6mg/dl(M±SD),与国外有关报道基本一致,并初步表明apoCⅢ的含量似无种族、营养、性别及年龄差异。血清apoCⅢ含量与甘油三酯呈正相关(r=0.24),提示血中apoCⅢ含量与VLDL的增长有关。     

诺衡对糖尿病高脂血症患者apo CⅡ、CⅢ的影响

作者观察了20例糖尿病高脂血症患者诺衡治疗前后的apoCⅡ、CⅢ、CⅢ/CⅡ比值、血脂及脂蛋白的变化。结果表明:诺衡治疗后apoCⅢ及CⅢ/CⅡ比值降低明显,分别为31.38％及35.49％。诺衡可促进甘油三脂代谢。     

人血清载脂蛋白CⅢ竞争性酶免疫测定法

本文介绍一种特异、灵敏、简便测定人载脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)的竞争性酶免疫测定法。单价特异抗体由免疫家兔获得。部分纯化的apoCs用于包被聚苯乙烯板。或根过氧化物酶-羊抗兔γ-球蛋白交联物按简化过碘酸钠法制备。apoCⅠ、CⅡ、AⅠ以及LDL(d=1.030～1.050g/ml)无交叉反应。本法最小检测量为100mg％。样品apoCⅢ含量在11.8～24.0mg％,板内及板间变异系数分别为6.8～7.5及8.2～10.7％,回收率为95.4％。35例正常人及24例高甘油三酯血症患者apoCⅢ含量分别为12.2±4.5及 27.5±5.7mg％(M±SD)。     

142例冠心病患者血脂及载脂蛋白AⅠ、B100、CⅠ、CⅡ及CⅢ的研究

对成都地区142例冠心病患者及64例年龄相当的正常人的血脂及载脂蛋白(apo)AⅠ、B100、CⅠ、CⅡ及CⅢ进行了分析。结果表明,患者血清甘油三酯显著升高(P<0.001),高密度脂蛋白胆固醇显著下降(P<0.001),胆固醇除陈旧性心肌梗塞组略有增加外,余未见改变,apoAⅠ及apoC Ⅱ显著下降(P<0.01或P<0.001),apoB100升高(P<0.01或P<0.001),apoCⅢ轻度升高。作者结合成都地区膳食及Ⅳ型高脂血症发生率高的特点对所得结果进行了讨论。     

内源性高甘油三酯血症者血浆脂蛋白中脂质和载脂蛋白组成及分布的初步研究

对7例内源性高甘油三酯血症者(HTG)及4例血脂正常者血浆的VLDL、IDL、LDL、HDL_2及HDL_3中脂质及载脂蛋白(apo)AI、B100、CⅡ、CⅢ、E的组成和分布进行了比较研究。HTG者VLDL富含甘油三酯、胆固醇及磷酯,其apoCⅡ、CⅢ的含量显著增加;HDL中甘油三酯含量增加,而胆固醇、apoCⅡ及CⅢ含量显著减少;HDL_2中apoA I含量减少。VLDL和HDL这种组成异常可能系胆固醇和apoC由HDL向VLDL转移增加而引起脂质和载脂蛋白分布异常所致。     

聚焦层析法分离人血清载脂蛋白CⅢ亚型

用密度梯度超速离心法,从混合人血清中分离极低密度脂蛋白,经脱脂后再进行聚焦层析分离其中的载脂蛋白。获得的纯品载脂蛋白ＣⅢ１和ＣⅢ２经等电聚焦电泳均呈现一条带。生物活性的细胞学实验鉴定发现,纯化载脂蛋白ＣⅢ能抑制培养ＨｅｐＧ２细胞对标记极低密度脂蛋白的提取。聚焦层析方法简便,一次上样量大,速度快,分离效果好,还可同时获得载脂蛋白ＣⅠ,ＣⅡ和Ｅ,是分离纯化脱脂极低密度脂蛋白中载脂蛋白的较好方法     

恶性高脂血症载脂蛋白C的等电聚焦分析

为了揭示婴儿恶性高脂血症的发病机制，利用分析性等电聚焦技术对一例婴儿恶性高脂血症患儿父母极低密度脂蛋白载脂蛋白进行分析。并对聚焦条带进行等电点测定及光密度扫描。结果：患儿父母载脂蛋白（apo)CⅡ（父0.008g/L，母0.026g/L)、apoCⅢ（父0.04g/L，母006g/L)的含量均比正常人少，且患儿父母apoCⅢ1缺失，所测到的apoCⅡ、apoCⅢ0、apoCⅢ2等电点分别为4.79、4.93、4.54，未发现等电点异常的条带，推测其父母是apoCⅡ缺乏征杂合子，患儿为apoCⅡ缺乏征纯合子，结果提示患儿父母apoCⅢ总量的减少乃至apoCⅢ1缺乏是对apoCⅡ含量下降的补偿，apoCⅡ浓度及/或apoCⅡ/apoCⅢ比值可能是有效激活脂蛋白脂酶（LPL）的关键。     

载脂蛋白AⅠ、CⅠ、CⅡ、CⅢ、E对肝细胞膜高密度脂蛋白受体结合功能的影响

以~(125)碘标记人不含apoE HDL_3为配体,研究纯化人apoAI、CⅠ、CⅡ、CⅢ、Cs及E对大鼠肝细胞膜HDL受体结合功能的影响。结果:非标记apoAI及apoCs均可有效竞争性抑制~(125)I-HDL_3与肝细胞膜HDL受体的结合;apoC亚类中,apoCⅢ抑制活性最强,抑制曲线与apoAI相似,非标记apoE则无明显抑制活性。表明apoC(尤其是apoCⅢ)对肝细胞膜HDL受体活性有重要调节作用,提示HDL受体可能是一种能识别和结合apoA及apoC的“apoA/C受体”。     

人血清载脂蛋白CⅠ酶联免疫测定法的研究

本文介绍一种测定人血清载脂蛋CⅠ(apo CⅠ),且具特异、灵敏、简便的间接竞争性酶免疫方法(Competitive Enzyme Immunoassay,CEIA)。本法采用部分纯化的apoCs(内含apoCⅠ、CⅡ及CⅢ)包被的聚苯乙烯板及成二醛交联的辣根过氧化物酶-羊     

人血清载脂蛋白CⅠ酶联免疫测定法的研究

载脂蛋白CⅡ(apo CⅡ)主要存在于乳糜微粒及VLDL之中,是脂蛋白脂酶不可缺少的激活剂,在富含甘油三酯的脂蛋白(乳糜微粒及VLDL)的代谢中具有特别重要的作用。作者采用超速离心和SephadexG-75以及DEAE-Sephacel层析由人血浆制备纯化的apo CⅡ,建立了一种特异、灵敏、简便的人血清apo CⅡ竞争性酶免疫测定法(Competitive En-zyme Immunoassay,CEIA)。单价特异抗体由免     

脑卒中患者血脂及载脂蛋白AⅠ、B100、CⅠ及CⅡ的研究

对72例脑卒中患者及64例年龄相当正常人的血脂及载脂蛋白(apo)AⅠ、B100、CⅠ及CⅡ进行了全面分析。结果发现脑卒中患者血清甘油三酯含量显著增加,HDL-胆固醇显著降低,总胆固醇含量略有下降。患者血清apoAⅠ略有降低,apoB100略有升高,而apoCⅠ及CⅡ显著降低。作者对结果进行了讨论。     

海口市237例健康成人血清载脂蛋白AⅠ,B100,CⅡ,CⅢ水平的调查

本文测定了273例健康成人血清中aPoA－Ⅰ、apoB100、apoCⅡ、apoCⅢ的正常值。结果男性血清aPoAⅠ、B100、CⅡ、CⅢ的浓度与女性无显著差异。男性aPoAⅠ与年龄呈显著及相关，与TC、TG、HDL-ch呈显著正相关，apo－B100、CⅡ、CⅢ与年龄、TC、TG呈显著正相关，女性apoAⅠ与年龄呈显著负相关，与HDL－ch是显著正相关，apoB100与年龄、TC呈显著正相关、与TG、HDL－ch呈显著负相关，apoCⅡ与年龄呈正相关，与HDL－ch呈显著负相关，apoCⅡ与年龄、TC、TG呈显著正相关、与HDL-ch呈显著负相关。     

载脂蛋白CⅢ与2型糖尿病微血管并发症的关系

目的分析2型糖尿病患者血清载脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)的含量变化,探讨其与2型糖尿病微血管并发症的关系。方法将120例2型糖尿病患者分为单纯2型糖尿病组,糖尿病肾病组,每组各60例。检测各组患者血压、体质指数、血清空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和apoCⅢ含量。按照ETDRS的标准对所有患者的视网膜病变进行评分。结果所有2型糖尿病患者的收缩压、体质指数、血清FBG、TG、VLDL、HbA1c、apoCⅢ水平明显升高(P<0.05),HDL水平明显下降(P<0.01);所有2型糖尿病肾病患者的舒张压,血清TC、LDL水平也明显升高(P<0.05);与单纯2型糖尿病患者比较,2型糖尿病肾病患者血清FBG、HbA1c、TG、TC、LDL、VLDL水平有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),而收缩压、舒张压以及apoCⅢ水平明显升高(P<0.01)。血清apoCⅢ与TG、VLDL、尿微量白蛋白(MAU)水平及ETDRS评分呈正相关(P<0.05),与HDL水平呈负相关(P<0.05)。apoCⅢ(β=0.17,P<0.05)决定MAU;apoCⅢ(β=0.18,P<0.05)决定ETDRS评分。结论 apoCⅢ含量异常是2型糖尿病患者代谢紊乱的特征,同时可能是预测糖尿病微血管病变的重要指标。     

高糖及高脂膳食对血浆载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅠ、CⅡ、CⅢ及E的影响

作者对高糖及高脂膳食对正常人(10人)及内源性高甘油三酯血症者(10人)血浆载脂蛋白(apo)AⅠ、AⅡ、B100、CⅠ、CⅡ、CⅢ及E含量的影响进行了观察。高糖膳食中糖(主要为淀粉)、脂肪及蛋白质分别占总热量的80％、5％及15％;高脂膳食为40％、45％及15％;正常膳食为60％、25％及15％。结果表明,摄取高糖膳食后,apoAⅠ、B100、CⅠ、CⅡ、CⅢ及E轻度下降,apoAⅡ增加。摄取高脂膳食后,血浆apoB100、AⅠ、CⅡ及CⅢ轻度增加,apoCⅠ及E轻度下降,而apoAⅡ无改变。膳食引起的血浆apo的这些改变可能在血脂代谢中发挥调节作用。     

高糖膳食对大鼠肝实质及非实质细胞VLDL HDL及载脂蛋白CⅢ受体的影响

对高糖膳食诱发的内源性高甘油三酯血症大鼠肝脏VLDL、HDL及载脂蛋白(apo)CⅢ的受体功能进行了研究。发现肝非实质细胞VLDL受体存在下降调节机理;VLDL及HDL的受体除了受血浆脂蛋白浓度的下降或上升调节外,还可能与apoCⅢ受体活性的增加有关。     

人脑脊液载脂蛋白AⅠ、B100、CⅡ、CⅢ及E的测定

用载脂蛋白研究室建立的人血清载脂蛋白单向免疫扩散测定法,对人脑脊液载脂蛋白(apo)AⅠ、B100、CⅡ、CⅢ及E的含量进行了测定。结果表明,人脑脊液不含apoB100、CⅡ,含极微量的apoCⅢ,微量apo AI(1.00±0.54mg/dl,n=7,相当于正常人血清含量121.3±21.5mg/dl的0.8％)及相对较多量的apoE(0.69±0.16mg/dl,n=16,相当于正常人血清含量3.10±0.56mg/dl的22.2％)。并对所得结果进行了讨论。     

高效液相层析(HPLC)法分离纯化鸭血清主要载脂蛋白及其理化性质研究

北京鸭是不易形成实验性动脉粥样硬化(As)的动物模型,研究其载脂蛋白对于阐明北京鸭不易形成As的机制有重要意义。本实验先用密度梯度超速离心法从北京鸭血清中分离出纯的高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL);再低温脱脂得各脂蛋白的apos组分,即apoHDL,apoLDL和apoVLDL;然后用HPLC法直接分离apoHDL和apoVLDL.从apoHDL中获五种主要apo组分,经SDS-PAGE、糖基分析、氨基酸组成测定,确定这五种apo为apoA-Ⅰ、apoCⅢ_0.apoCⅢ_1和/或apoCⅢ_2、apoCs及可能的apoA-Ⅲ。apoA-Ⅰ和apoCⅢ_0的分子量分别为31000