上皮–间质转化在蒿甲醚逆转结直肠癌细胞放化疗抵抗中的作用

目的:探讨上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)在蒿甲醚(artemether,ARE)对同期放化疗抵抗人结直肠癌细胞HCT116(HCT116CRR)的逆转作用中的作用。方法:实验分为四组:1)对照组;2)单纯放化疗组;3)ARE联合放化疗组;4)ARE组。采用Real-time PCR和Western blot,检测各组E MT相关指标E-cad her in,N-cad her in,v iment in,snail mRNA及其蛋白的表达情况。结果:Real-time PCR和Western blot结果显示E-cadherin mRNA及其蛋白的表达情况,单纯放化疗组ARE联合放化疗组对照组ARE组;N-cadherin,vimentin,snail mRNA及其蛋白的表达情况,单纯放化疗组ARE联合放化疗组对照组ARE组。结论:EMT在ARE逆转同期放化疗抵抗人结直肠癌细胞HCT116CRR细胞系的放化疗抵抗作用中有重要的作用,即上调E-cadherin mRNA及其蛋白的表达,下调N-cadherin,vimentin,snail mRNA及其蛋白的表达。     

幽门螺杆菌诱导上皮-间质转化在胃癌中的作用机制

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是一种单极、微需氧、多鞭毛、螺旋形的革兰氏阴性菌,可在人胃黏膜上存活并定植。Hp作为与胃癌相关的Ⅰ类致癌物,其对胃黏膜的长期刺激可导致萎缩性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等多种疾病。研究表明,Hp感染可诱导胃上皮细胞发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT),而EMT的异常调控则会导致胃癌发生。本文就Hp诱导胃上皮细胞发生EMT致胃癌的相关机制研究展开综述,为胃癌的早期诊断和靶向治疗提供新思路。     

雷公藤甲素对脂多糖诱导的小鼠肾脏足细胞上皮-间质转化的抑制作用

目的观察雷公藤甲素(triptolide, Tp)干预后脂多糖诱导的小鼠肾脏足细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白表达变化,探讨Tp对小鼠肾脏足细胞EMT的抑制作用。方法采用CCK-8法检测小鼠肾脏足细胞活性,确定脂多糖浓度为5μg/L,Tp浓度为10μg/L。将小鼠肾脏足细胞分为对照组(不作处理)、脂多糖组(5 mg/L脂多糖溶液)和Tp+脂多糖组(10μg/L Tp+5 mg/L脂多糖溶液),处理24 h,采用Western blot法检测Toll样受体(Toll-like receptor, TLR)4、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-9、紧密连接蛋白-1(zonula occluden-1, ZO-1)蛋白相对表达量。结果脂多糖组TLR4(1.24±0.04)、MMP-9(0.87±0.03)蛋白相对表达量均高于对照组(1.07±0.03、0.61±0.16)和Tp+脂多糖组(0.98±0.11、0.60±0.01)(P<0.05),ZO-1蛋白相对表达量(...     

百草枯诱导肺上皮细胞上皮间质转化促进肺纤维化

目的观察百草枯(PQ)诱导人肺上皮HPAEpiC细胞发生上皮间质转化(EMT)作用及其调节机制。方法MTT法计算PQ对HPAEpiC细胞的半数抑制浓度(IC50)值,计算最适合诱导HPAEpiC细胞发生EMT的浓度,Transwell检测证实PQ诱导肺上皮细胞体外迁移能力增强,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转化生长因子-β(TGF-β)变化。实时聚合酶链式反应(Real time-PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测细胞EMT标志物及TGF-β下游信号通路变化。结果 PQ对HPAEpiC细胞的IC50值为95.3μmol/L,与DMSO对照组比较,PQ可以诱导肺上皮HPAEpiC细胞形态发生EMT改变,并增加其体外迁移能力,PQ可以促进肺上皮HPAEpiC细胞TGF-β的分泌,并增加其下游Smad2/3、抑制Smad7的蛋白表达;PQ也可以增加间质性标志物N-cadhenrin、波形蛋白(Vimentin)及基质金属蛋白酶2(MMP2)表达,抑制上皮性标志物E-cadherin表达。结论 PQ在促进人肺上皮HPAEpiC细胞死亡的同时促进其向EMT转化,提示PQ诱导肺纤维化的一种新机制。     

P120ctn基因沉默促进舌癌细胞上皮-间质转化

目的探索P120-连环蛋白(P120ctn)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)上皮-间质转化(EMT)中的作用。方法采用质粒pGFP-V-RS-P120ctn shRNA转染人舌鳞癌细胞(TSCCA),采用实时荧光定量聚合酶链反应、Western blot检测细胞中P120ctn、E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)和波形蛋白(Vim)的mRNA和蛋白表达的变化,通过Transwell细胞侵袭及细胞迁移试验检测转染前、后细胞迁移和侵袭能力的变化。结果用质粒pGFP-V-RS-P120ctn shRNA转染TSCCA后发现,随着P120ctn表达的明显降低,E-cad的mRNA和蛋白表达水平明显降低,N-cad和Vim的mRNA和蛋白表达水平明显升高,细胞迁移和侵袭能力明显提高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论在OSCC中P120ctn可能通过调控EMT标记物E-cad的表达参与EMT的发生,调节肿瘤的侵袭和转移。     

头颈部鳞状细胞癌细胞中的上皮间质转化机制

上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)对肿瘤转移过程至关重要。在EMT形成中,两个EMT标志性蛋白E-钙粘蛋白和波形蛋白是通过多个信号转导通路被严格控制的。表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和转换生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)通过调节一组独特的转录因子促进EMT的形成,这些独特的转录因子包括Snail和Twist。Snail、Twist和Slug通过直接调控参与细胞黏附、迁移和侵袭的基因诱导EMT的发生。本文将重点阐述头颈部鳞状细胞癌细胞中EMT发生过程中的分子机制,为进一步研究头颈部鳞状细胞癌的转移机制提供理论基础。     

胺碘酮增加α-SMA表达诱导肺A549细胞上皮-间质转化机制研究

目的 探讨胺碘酮诱导肺A549细胞上皮-间质转化的机制.方法 通过胺碘酮体外干预肺A549细胞,通过免疫荧光染色检测细胞形态及间质细胞标志物α-SMA的表达,通过实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测间质细胞标志物α-SMA的mRNA表达.结果 相差显微镜观察A549细胞在应用胺碘酮100μM,150μM处理72h组呈α-SMA的高表达.实时RT-PCR分析显示胺碘酮诱导的α-SMAmRNA及α-SMA蛋白上调达72h.胺碘酮诱导的A549细胞系中α-SMAmRNA及α-SMA的表达变化呈剂量依赖性及时间依赖性.结论 胺碘酮通过增加α-SMA表达诱导肺A549细胞上皮-间质转化,可能是胺碘酮诱发肺纤维化的重要促纤维化因子.     

活性氧对卵巢癌上皮-间质转化作用研究进展

上皮-间质转化与上皮性卵巢肿瘤的侵袭和转移密切相关,氧化应激对疾病的发生、发展有重要影响。活性氧作为氧化应激过程中的重要产物,在卵巢癌细胞上皮-间质转化中通过对多种因子的调节参与卵巢癌细胞增殖分化、黏附和迁移等,在卵巢癌的诊断、治疗及预后中有重要作用。本文就活性氧对卵巢癌上皮-间质转化作用的研究进展作一综述。     

基质金属蛋白酶-11对骨肉瘤细胞上皮-间质转化的调控作用

目的 观察基质金属蛋白酶-11(matrix metalloproteinase-11, MMP-11)对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、转移的影响,探讨其对骨肉瘤细胞上皮-间质转化的调控作用。方法 对数生长期Saos-2细胞随机分为空白对照组(正常培养)、siRNA-MMP-11组(转染siRNA-MMP-11)、ovRNA-MMP-11组(转染ovRNA-MMP-11)。转染48 h采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞MMP-11 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测细胞E-cadherin、N-cadherin、MMP-11蛋白相对表达量,采用Transwell小室实验检测侵袭细胞数,采用划痕实验检测迁移细胞数;采用MTT法检测转染后培养72 h时3组细胞增殖率。结果 转染48 h, ovRNA-MMP-11组MMP-11 mRNA和蛋白相对表达量(1.511±0.082、1.688±0.115)均高于空白对照组(1.339±0.211、1.024±0.066)、siRNA-MMP-11组(1.147±0.382、0.382±0.068)(P<0.05),空白对照组...     

雌激素对香烟烟雾诱导肺上皮间质转化的影响

目的 探究在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)中,雌激素通过调控miR?21/SMAD信号通路对香烟烟雾诱导的肺上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响.方法 RT?qPCR、Western b...     

miR-577对胶质瘤细胞上皮-间质转化的调控作用及机制

目的探讨miR-577调控胶质瘤细胞上皮-间质转化活性的机制。方法将人源性胶质瘤细胞U87细胞分为miR-577类似物组、miR-577抑制物组和空白对照组,分别转染miR-577 mimic、miR-577 inhibitor和miR577-NC。转染24 h后,采用划痕实验检测各组细胞迁移距离,采用Transwell小室实验检测各组细胞侵袭细胞数,采用反转录PCR法检测各组细胞β-catenin mRNA表达水平,采用Western blot法检测各组细胞vimentin、E-cadherin蛋白相对表达量。结果 miR-577抑制物组、空白对照组、miR-577类似物组细胞迁移距离[(3.44±0.55)、(2.13±0.21)、(1.04±0.14)mm]、侵袭细胞数[(128.50±8.11)、(84.60±4.20)、(39.80±6.01)个]、细胞β-catenin mRNA相对表达量(0.80±0.06、0.61±0.04、0.45±0.06)和vimentin蛋白相对表达量(0.82±0.06、0.67±0.08、0.31±0.02)均依次降低(P0.05),E-cadherin蛋白相对表达量(0.44±0.04、0.76±0.05、0.89±0.08)依次增高(P0.05)。结论 miR-577可能作为抑癌基因,通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的活性,降低人源性胶质瘤U87细胞上皮-间质转化活性,从而抑制肿瘤发展。     

启膈散对食管鳞状细胞癌上皮-间质转化的影响

目的探究中药方剂启膈散对食管癌细胞系上皮-间质转化的影响。方法启膈散经过煎煮、浓缩制备成为冻干粉。Eca109细胞分别与浓度为50、100、200μg/ml的启膈散共培养,用CCK-8法检测细胞增殖活性;用Transwell实验检测细胞迁移能力;用荧光定量PCR法和蛋白质免疫印迹法分别检测E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白和波形蛋白mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组相比,200μg/ml启膈散可以显著抑制细胞增殖;100μg/ml和200μg/ml启膈散可以显著抑制细胞迁移;随着启膈散浓度的升高,E-钙粘蛋白mRNA和蛋白水平表达量均上升,N-钙粘蛋白和波形蛋白mRNA及蛋白水平表达量均下降。结论启膈散抑制食管癌细胞上皮-间质转化并影响细胞迁移。     

口腔鳞状细胞癌瘤芽与上皮-间质转化相关性分析及临床意义

目的:观察口腔鳞状细胞癌瘤芽(tumorbudding)与上皮–间质转化(EMT)相关性,进一步探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法:收集我院2007年至2013年收治的30例口腔鳞状细胞癌患者手术切除的标本,根据HE染色瘤芽数量将其分为2组,低瘤芽组(≤5),高瘤芽组(5)。免疫组织化学观察切片组织波形蛋白(Vimentin)表达情况,分析瘤芽数量与上皮间质转化的相关性以及与临床病理特征的关系,Kaplan-Meier法进行生存分析,组间差异采用Log-rank检验。结果:低瘤芽组共22例,高瘤芽组共18例,病理学检查发现瘤芽内肿瘤细胞形态与肿瘤主体细胞无差异,瘤芽数量与患者年龄、性别、无相关性,瘤芽与肿瘤大小、临床分期以及淋巴结转移呈正相关(P0.05),高瘤芽组其Vimentin的表达率明显高于低瘤芽组,提示瘤芽与口腔癌EMT过程相关,是EMT的形态学表现。两组患者的中位生存期(overallsurvival,OS)分别为40.4,26.5个月(χ2=5.265,P=0.012),两组中位无进展生存期(progression-freesurvival,PFS)分别为35.8,22.1个月(χ2=6.744,P=0.009)。结论:口腔鳞状细胞癌组织瘤芽数量与EMT密切相关,代表恶性和侵袭能力更高的癌细胞亚群,可作为口腔鳞状细胞癌患者的预后判断指标。     

沉默Tiam1基因对大肠癌LoVo细胞上皮-间质转化的影响

目的:探讨RNAi技术沉默Tiam1对大肠癌LoVo细胞上皮-间质转化(EMT)的影响.方法:应用RNAi技术将Tiam1的特异性干扰片段转染处理LoVo细胞,采用Real time-RT PCR方法检测Tiam1表达水平和沉默前后LoVo细胞E-cadherin、Vimentin、RhoA、RhoC、Rac1的表达水平;扫描电镜、透射电镜,HE染色观察细胞结构及形态变化;考马斯亮蓝染色观察细胞骨架变化.结果:与对照组比较,RNAi组的Tiam1 mRNA表达水平明显降低;RNAi组的E-cadherin mRNA表达水平比对照组上调,差异具有统计学意义(P ＜ 0.05),RNAi组Vimentin、RhoA、RhoC、Rac1的mRNA表达水平与对照组比较差异均无显著性(全部P ＞ 0.05);扫描电镜显示RNAi组细胞胞体比对照组变圆、细胞突起明显变短或消失,丝状微绒毛减少,变为扁平盘状突起;透射电镜显示RNAi组细胞表面丝状微绒毛比对照组有较明显减少;HE染色显示对照组细胞散在生长,呈细长梭形,RNAi组细胞生长较集中,呈圆形或类圆形;RNAi组细胞质中丝网状的骨架蛋白结构及点状肌动蛋白小体比对照组减少.结论:沉默Tiam1能在一定程度上使已发生EMT的大肠癌细胞出现上皮表型及降低其迁移运动能力,对EMT有一定程度的逆转作用,推测Tiam1通过诱导EMT来促进大肠癌侵袭、转移,至于其确切机制尚待进一步研究.     

白细胞介素-22对转化生长因子β1诱导的大鼠肝细胞上皮-间质转化的调控作用

目的研究白细胞介素-22(IL-22)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝细胞上皮-间质转化(EMT)的调控作用。方法将大鼠正常肝细胞BRL-3A细胞分为空白对照组、模型对照组和梯度浓度的重组IL-22(1、10、50 ng/ml)干预组,除空白对照组外,各组均给予2 ng/ml的TGF-β1进行刺激,培养48 h,实时荧光定量PCR检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)m RNA的表达量;Western blot检测E-cadherin、vimentin蛋白的表达量。结果空白对照组vimentin m RNA和蛋白的相对表达量分别为0.99±0.11、0.67±0.08,E-cadherin m RNA和蛋白的相对表达量分别为0.98±0.08、0.77±0.06;与空白对照组相比,模型对照组vimentin m RNA(1.24±0.02)和蛋白(0.96±0.06)的表达均增强(t值为-3.805和-4.946,均P<0.05),E-cadherin m RNA(0.81±0.06)和蛋白(0.58±0.03)的表达均减弱(t值为2.868和4.890,均P<0.05)。与模型对照组相比,梯度浓度重组IL-22干预组vimentin m RNA(0.97±0.10、0.57±0.03、0.30±0.77)和蛋白(0.86±0.03、0.74±0.02、0.61±0.04)的表达均减弱(F值为115.068和45.057,均P<0.05),E-cadherin m RNA(1.03±0.07、1.31±0.02、1.61±0.09)和蛋白(0.70±0.02、0.80±0.03、0.88±0.03)的表达均增强(F值为81.163和59.197,均P<0.05);梯度浓度的重组IL-22(1、10、50 ng/ml)干预组之间比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 TGF-β1能诱导大鼠肝细胞发生EMT,IL-22能够逆转TGF-β1介导的EMT,且呈剂量依赖性。     

骨形态发生蛋白-7抑制大鼠肾小球上皮间质转化的实验研究

目的:观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对阿霉素(ADR)肾病鼠肾小球P-cadherin、β-catenin和Desmin表达的影响,探讨BMP-7在上皮间质转化中的作用。方法:SD大鼠一次性尾静脉注射阿霉素10mg/kg诱导肾病模型。将诱导成功的24只模型鼠随机分两组:阿霉素肾病组(AN,n=12);AN+BMP-7处理组(AB组,n=12)。另设正常鼠为对照组(NC,n=10)。第10周末,检测大鼠血浆同型半胱氨酸(HCY)、醛固酮(ALD)、心房利钠肽(ANP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平,24h尿蛋白(24h UP)及尿液足细胞(UPC)。RT-PCR和Western boltting检测肾小球P-cadherin、β-catenin、Desmin mRNA和蛋白质的表达。结果:与NC组相比,AN组HCY、ALD、AngⅡ、24h UP水平均显著升高,ANP明显降低,UPC无显著差异。AB组HCY、ALD、AngⅡ、24h UP较AN组下降,ANP明显升高,UPC无显著差异。AN组较NC组P-cadherin mRNA及蛋白质的表达明显下调,β-catenin和Desmin mRNA及蛋白质表达明显上调。BMP-7维持阿霉素肾病鼠肾小球P-cadherin的表达,抑制β-catenin和Desmin的表达。结论:BMP-7减轻阿霉素肾病危险因素;上调P-cadherin mRNA和蛋白质的表达,下调β-catenin和Desmin mRNA和蛋白质的表达,抑制肾小球上皮间质转化。     

局部晚期直肠癌患者同期放化疗的护理

目的 通过对局部晚期直肠癌患者在同期放化疗期间实施全方位的护理,达到提高患者的治疗耐受性,使其能顺利按计划完成治疗方案.方法 对25例局部晚期直肠癌患者,在接受同期放化疗期间,实施全方位的心理护理、静脉炎的预防护理、消化道反应的护理、骨髓抑制的护理、神经毒性反应的护理、照射野皮肤的护理及人工肛门的护理.结果 局部晚期直肠癌患者同期放化疗后出现不同程度的毒副反应,其中照射野皮肤反应25例;消化道反应25例;骨髓抑制20例;神经毒性反应7例;静脉炎反应2例.25例患者均能按计划完成治疗方案.结论 同期放化疗期间通过积极的对症治疗,加强护理措施,将患者的不适降到最低,提高了患者的生存质量.     

上皮-间质转化与胰腺癌生物学行为的关系

目的探讨上皮-间质转化（EMT）在胰腺癌浸润转移中的作用。方法采用免疫组织化学PV 6000法检测47例胰腺癌组织上皮-钙黏蛋白（E-cad）和波形蛋白（Vim）的表达。把E-cad阴性-Vim阳性表达作为癌细胞发生EMT的免疫表型。结果 47例胰腺癌组织中E-cad和Vim阳性率分别为46.8%、23.4%,其中E-cad阴性-Vim阳性表达7例,EMT发生率为19.1%。EMT发生率与胰腺癌的分化程度和转移有关（χ^2=6.73、4.06,P〈0.05）,与临床分期和1年生存率无关（χ^2=3.56、2.72,P〉0.05）。结论 EMT在胰腺癌的分化、浸润和转移过程中起重要作用。     

DDR1对结直肠癌侵袭和上皮细胞间质转化的影响

目的 探究盘状结构域受体1(DDR1)对结直肠癌侵袭、上皮间质转化(EMT)的影响及机制。方法 收集2018年1月至2021年1月在日照市人民医院进行外科手术肿瘤切除治疗的60例结直肠癌癌组织及其癌旁组织。免疫组化检测结直肠癌组织和癌旁组织中DDR1蛋白表达水平。体外培养人结肠上皮细胞和结直肠癌细胞,Western blot检测DDR1蛋白表达水平。随后结直肠癌上皮细胞分为转染DDR1阴性干扰片段组(DDR1-NC)、转染DDR1干扰片段组(DDR1-siRNA)、过表达DDR1无关片段组(OVE-NC)和过表达DDR1组(OVE-DDR1),Western blot检测DDR1、IL-6、p-STAT3和EMT相关蛋白表达变化。Trasnswell检测结直肠癌细胞侵袭情况。结果 与癌旁组织相比,结直肠癌组织DDR1蛋白阳性表达率明显增加,差异有统计学意义(χ²=20.979,P<0.05)。与人结肠上皮细胞相比,结直肠癌细胞DDR1蛋白表达明显增加差异有统计学意义(t=2.970、8.398、4.977、5.253,P<0.05)。与DDR1-NC组...