CISH技术检测乳腺癌HER2基因的方法改进

原癌基因HER2/nue定位于染色体17q12-21,具有酪氨酸激酶活性。已证实在20%～30%的乳腺癌患者中HER2基因扩增或蛋白过表达,临床赫赛汀治疗有效。因此,精确评估HER2基因扩增状况十分重要。     

GP和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因状态的比较

目的 通过与进口PathVysion HER2试剂盒比较,评价国产金菩嘉GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因状态的临床应用价值.方法 收集108例乳腺浸润性导管癌(简称"乳腺癌")肿瘤组织标本,分别采用FISH技术与GP HER2试剂盒和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因表达水平,比较2种试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因表达差异,并评价GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增的敏感度、特异度和准确性.结果 GP HER2试剂盒和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增率分别为25.0%(27/108)和26.9%(29/108).与PathVysion HER2试剂盒相比,GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增的敏感度、特异度和准确性分别为89.7%(26/29)、98.7%(78/79)和96.3%(104/108),PPV和NPV均为96.3%(26/27,78/81).GP HER2试剂盒检出第17号染色体多倍体的敏感度、特异度和准确性分别为93.3%(14/15)、100%(93/93)和99.1%(107/108).结论 GPHER2试剂盒在检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因状态的敏感度和特异度及准确性高,在临床评价乳腺癌HER2基因状态中具有广泛应用价值.     

GP和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因状态的比较

目的 通过与进口PathVysion HER2试剂盒比较,评价国产金菩嘉GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因状态的临床应用价值.方法 收集108例乳腺浸润性导管癌(简称乳腺癌)肿瘤组织标本,分别采用FISH技术与GP HER2试剂盒和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因表达水平,比较2种试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因表达差异,并评价GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增的敏感度、特异度和准确性.结果 GP HER2试剂盒和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增率分别为25.0%(27/108)和26.9%(29/108).与PathVysion HER2试剂盒相比,GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增的敏感度、特异度和准确性分别为89.7%(26/29)、98.7%(78/79)和96.3%(104/108),PPV和NPV均为96.3%(26/27,78/81).GP HER2试剂盒检出第17号染色体多倍体的敏感度、特异度和准确性分别为93.3%(14/15)、100%(93/93)和99.1%(107/108).结论 GPHER2试剂盒在检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因状态的敏感度和特异度及准确性高,在临床评价乳腺癌HER2基因状态中具有广泛应用价值.

Abstract：

Objective To evaluate clinical application of Jin Pujia GP HER2 probe kit in testing HER2 gene status of breast cancer through comparing it with PathVysion HER2 probe kit. Methods HER2 gene status were detected from 108 cases with invasive ductal breast cancer using GP and PathVysion HER2 probe kits by FISH. HER2 gene expression levels were measured by GP and PathVysion HER2 probe kits, and the sensitivity, the specificity and the accuracy of GP HER2 probe kit were evaluated. Results HER2 gene amplification positive rates detected by GP HER2 probe kit and PathVysion HER2 probe kit were 25.0%(27/108) and 26.9% (29/108), respectively. As compared with PathVysion HER2 probe kit, the sensitivity, the specificity and the accuracy of the GP HER2 kit were 89. 7% (26/29), 98.7% (78/79)and 96. 3% ( 104/108), respectively, whereas the PPV and NPV were 96. 3% (26/27) and 96. 3% (78/81), respectively. The GP HER2 probe kit had a sensitivity of 93.3% ( 14/15), a specificity of 100%(93/93) and an accuracy of 99. 1% (107/108) for detecting polysomy 17. Conclusion GP HER2 probe kit has high sensitivity and specificity for detecting HER2 gene status in breast cancer patients, and it has clinical application value.     

GP和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因状态的比较

目的 通过与进口PathVysion HER2试剂盒比较,评价国产金菩嘉GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因状态的临床应用价值.方法 收集108例乳腺浸润性导管癌(简称"乳腺癌")肿瘤组织标本,分别采用FISH技术与GP HER2试剂盒和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因表达水平,比较2种试剂盒检测乳腺癌患者HER2基因表达差异,并评价GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增的敏感度、特异度和准确性.结果 GP HER2试剂盒和PathVysion HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增率分别为25.0%(27/108)和26.9%(29/108).与PathVysion HER2试剂盒相比,GP HER2试剂盒检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因扩增的敏感度、特异度和准确性分别为89.7%(26/29)、98.7%(78/79)和96.3%(104/108),PPV和NPV均为96.3%(26/27,78/81).GP HER2试剂盒检出第17号染色体多倍体的敏感度、特异度和准确性分别为93.3%(14/15)、100%(93/93)和99.1%(107/108).结论 GPHER2试剂盒在检测乳腺癌患者组织标本中HER2基因状态的敏感度和特异度及准确性高,在临床评价乳腺癌HER2基因状态中具有广泛应用价值.     

双色银染原位杂交技术检测胃癌HER2基因扩增及临床意义

目的 探讨双色银染原位杂交技术（dual-color silver-enhanced in-situ hybridization,DSISH）检测胃癌人类表皮生长因子受体2（human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2）基因扩增的可行性及其与临床病理学特征的关系.方法 应用DSISH技术检测230例患者胃癌切除组织中HER2基因扩增状态,并进行相关统计学分析.结果 DSISH检测230份胃癌标本中43例存在HER2基因扩增,HER2基因扩增率为18.7％.HER2基因扩增与胃癌的分化程度、淋巴结转移有关（P均＜0.05）,与患者年龄、性别、肿瘤发生部位、浸润深度、神经以及脉管侵犯无关（P均＞ 0.05）.结论 DSISH技术检测胃癌HER2基因扩增状态具有可行性;HER2基因扩增可以反应胃癌生物学行为.     

乳腺癌HER-2基因扩增FISH检测技术的应用体会

<正>近年来,FISH技术已成为检测乳腺癌HER-2基因扩增的一种常用手段,该技术具有较高的灵敏度及特异性,但易受多种因素的影响,现将我们在实验中取得的一些经验介绍如下,供同行参考。1材料与方法     

荧光原位杂交和基因组半定量法检测乳腺癌组织中c-erbB-2基因扩增

目的利用荧光原位杂交(FISH)与基因组半定量法检测乳腺正常良性和恶性组织中原癌基因c-erbB-2的扩增情况。方法收集50例临床切除的乳腺肿瘤组织,抽提收集样品基因组DNA并扩增c-erbB-2的特异序列构建转化子,以c-erbB-2的特异序列为探针进行间期核FISH检测乳腺肿瘤组织中c-erbB-2基因的扩增,并采用基因组半定量法比较不同组别乳腺组织中c-erbB-2基因的扩增。结果FISH检测发现正常乳腺组织中未出现c-erbB-2扩增,而良性与恶性组织中有不同程度的扩增,基因组半定量分析显示恶性肿瘤组织中c-erbB-2扩增程度高于良性与正常组织。结论c-erbB-2扩增是乳腺癌变的可靠的分子指标。可用荧光原位杂交与基因组半定量法对乳腺癌进行分子生物学诊断,且前者的敏感性与稳定性优于后者。     

数字PCR检测循环肿瘤DNA中HER2基因扩增对胃癌的预后评估

目的 探讨基于数字PCR(d PCR)检测循环肿瘤DNA(ctDNA)中人类表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增在胃癌进展监测及预后评估的临床应用价值。方法 选取2018年11月至2020年12月华中科技大学协和深圳医院收治的60例胃癌患者为病例组,以同期20名健康体检者为对照组。建立dPCR技术方法检测胃癌患者ctDNA中HER2基因扩增及阳性阈值,评价其与免疫组织化学（IHC）联合荧光原位杂交技术（FISH）病理诊断HER2表达结果一致性,分析胃癌患者术前ctDNA中HER2基因扩增与临床病理特征的关系。同时选择24例Ⅲ、Ⅳ期的进展期胃癌患者纳入随访研究,分析术后监测ctDNA中HER2基因扩增与无进展生存时间的关系。结果 HER2基因扩增比值的阳性阈值设为1.40,dPCR技术定量检测ctDNA中HER2基因扩增的敏感度、特异性分别达到0.90、0.94;胃癌患者dPCR检测HER2基因扩增、IHC与FISH联合检测HER2表达阳性率分别为20%(12/60)、16.7%(10/60),两种方法检测结果符合率一致性较好（k=0.778,P<0.01）。dPCR检测胃癌患者...     

荧光原位杂交法和免疫组织化学法检测乳腺癌HER2基因状态比较

HER编码相对分子量185KD的跨膜癌基因蛋白P185,该蛋白与HER家族成员及其配体之间相互作用,通过细胞间的信号传导,调节细胞生长、生存、分化和增殖[1].     

荧光原位杂交和基因组半定量法检测乳腺癌组织中c—erbB-2基因扩增

目的利用荧光原位杂交（FISH）与基因组半定量法检测乳腺正常良性和恶性组织中原癌基因c-erbB-2的扩增情况。方法收集50例临床切除的乳腺肿瘤组织，抽提收集样品基因组DNA并扩增c—erbB-2的特异序列构建转化子，以c-erbB-2的特异序列为探针进行间期核FISH检测乳腺肿瘤组织中c-erbB-2基因的扩增，并采用基因组半定量法比较不同组别乳腺组织中c-erbB-2基因的扩增。结果FISH检测发现正常乳腺组织中未出现c-erbB-2扩增，而良性与恶性组织中有不同程度的扩增，基因组半定量分析显示恶性肿瘤组织中c-erbB-2扩增程度高于良性与正常组织。结论c-erbB-2扩增是乳腺癌变的可靠的分子指标。可用荧光原位杂交与基因组半定量法对乳腺癌进行分子生物学诊断，且前者的敏感性与稳定性优于后者。     

FISH和IHC检测乳腺癌患者HER2/neu基因影响因素的研究

目的 观察乳腺癌石蜡包埋组织荧光原位杂交(FISH)和免疫组化(IHC)检测乳腺癌患者HER2/neu基因状态,比较不同切片方法及不同结果判读人员的经验区别.方法 55例乳腺癌石蜡包埋组织分组切片和观察判读,观察1组:由技术人员选定区域切片,平行检测HER2/neu基因状态;观察2组:先切片做HE染色,由初级病理医师根据病理图像选定区域后切片,平行检测HER2/neu基因状态,并由初级病理医师分析结果;观察3组,由中、高级病理医师根据病理图像选定区域后重新切片检测,判读分析.结果 观察1组和观察2组,IHC(-)和IHC(1+)与FISH检测一致性较好,IHC(2+)和IHC(3+)与FISH检测的相符率分别为33.33%/33.33%,50.00%/100.00%;2组的一致性分别为中等和较好(K1=0.478,K2=0.659);共有10例患者入选观察3组,重新切片后,6例患者结果不同,其中3例为取材误差,3例为判读误差,3例取材误差均出现在观察1组.结论 FISH和IHC检测乳腺癌患者HER2/neu基因状态受到制片、结果判读等多种因素影响,实验室应制定标准化的操作程序,严密的质量控制和质量保证措施,才可得到准确而可靠的结果.     

乳腺癌组织及癌旁组织HER2基因CpG岛甲基化水平及其mRNA表达的研究

目的探讨乳腺癌组织及癌旁组织人类表皮生长因子受体2(HER2)基因CpG岛甲基化率和HER2mRNA表达的差异。方法收集经病理确诊的50份乳腺癌组织和对应的癌旁组织样本,采用焦磷酸测序法、实时聚合酶链反应(PCR)和免疫组化法分别检测HER2启动子CpG岛甲基化率、HER2 mRNA表达和HER2蛋白表达。结果 HER2阳性乳腺癌组织HER2 mRNA相对表达量高于HER2阴性癌组织(P0.05),但HER2启动子CpG岛甲基化率差异无统计学意义(P0.05)。HER2阴性乳腺癌组织HER2基因启动子CpG岛甲基化率显著高于对应的癌旁组织(P0.05),而HER2 mRNA表达则低于对应的癌旁组织(P0.05)。HER2阳性的乳腺癌组织与其对应的癌旁组织之间以及HER2阳性与阴性癌旁组织之间,HER2基因启动子CpG岛甲基化率和HER2 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(P0.05)。结论在HER2阴性的乳腺癌癌旁组织中,HER2基因启动子CpG岛的低甲基化可能是HER2 mRNA高表达的机制之一。     

胃癌组织HER-2基因扩增和蛋白表达检测及临床意义

目的 探讨免疫组化（immunohistochemistry,IHC）法检测胃癌HER-2蛋白表达和荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）法检测HER-2基因扩增的临床意义.方法 收集256例胃癌患者手术切除及胃镜活检的胃癌组织标本,分别采用IHC法及FISH法检测胃癌组织HER-2蛋白表达及基因扩增状态,并对结果进行统计学分析.结果 256例胃癌组织标本中,有26例HER-2蛋白表达阳性,阳性率为10.16％;46例HER-2基因有扩增,阳性率17.97％.26例HER-2蛋白表达（3＋）的标本中,24例有HER-2基因扩增,2例无扩增;95例HER-2蛋白表达（2＋）的标本中,20例有基因扩增,75例无扩增;90例HER-2蛋白表达（1＋）的标本中,2例有基因扩增,88例无扩增;45例HER-2蛋白表达（0）的标本中,HER-2基因均无扩增.IHC法和FISH法检测HER-2表达阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 IHC法检测胃癌HER-2蛋白表达可作为临床治疗的初筛,HER-2蛋白表达（2＋）的患者应常规行FISH法,以确定HER-2基因扩增状态.FISH法检测结果具有较高的稳定性和可靠性,联合IHC法可更准确和客观评价胃癌预后,并指导临床选用靶向药物治疗.     

HER2乳腺癌相关基因的发现为新疗法带来了希望

苏格兰的科学家发现一种基因,该基因在HER2阳性乳腺癌患者的高表达中起关键作用。这一发现提高了对这种常见乳腺癌新疗法的希望。来自英国爱丁堡大学突破乳腺癌研究所的该研究的领导者EladKatz博士,他的     

乳腺癌HER-2基因扩增与临床病理特征的关系

目的 比较荧光原位杂交(FISH)和免疫组化(IHC)检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体2(HER-2)基因扩增及蛋白表达的一致性,并探讨HER-2基因扩增与临床病理特征的关系.方法 回顾性分析本院采用FISH法检测HER-2基因状态的112例乳腺癌,与IHC结果进行一致性分析,并对HER-2基因扩增与年龄、组织学分级、淋巴结转移及激素受体的关系进行统计学分析.结果 112例浸润性乳腺癌中,HER-2基因扩增57例,其中IHC检测HER-2(3+)者27例,(2+)者29例,(1+)者1例,分别占IHC病例总数的96.4％ (27/28)、48.3％ (29/60)和5.3％ (1/19).HER-2基因扩增与雌/孕激素受体呈负相关,而与年龄、组织学分级、淋巴结转移差异不显著.结论 对于IHC检测HER-2(3+)、(+或0)的病例可选择性做FISH进行确认,对于HER-2(2+)病例应常规进行FISH检测,以便更加准确和客观地对治疗和预后进行评价.     

ELISA方法检测乳腺癌患者血清HER2的临床价值

目的：HER2基因扩增和HER2蛋白过表达是乳腺癌患者预后不良的分子标志,是临床指导靶向HER2治疗的标准。肿瘤细胞中HER2蛋白胞外域经蛋白酶裂解脱落入血,血清中HER2水平改变可以用于监测乳腺癌的进展和治疗疗效。本研究旨在分析血清HER2水平与乳腺癌组织HER2表达状态的相关性,并探讨血清HER2水平与临床病理因素的关系,以评价其潜在的临床应用价值。方法：分别采用ELISA和免疫组化方法检测70例乳腺癌患者血清HER2水平和肿瘤组织HER2表达状态,Spearmen秩相关分析二者的相关性,χ2检验分析血清HER2与临床病理因素的关系。结果：乳腺癌患者血清HER2水平和组织HER2表达呈正相关（r=0．686,P〈0．001）;肿瘤直径大于2cm患者血清HER2水平高于小于等于2cm患者（χ2=9．071,P=0．030）;临床II-III期患者血清HER2水平高于I期患者（χ2=9．001,P=0．030）;ER阴性患者血清HER2水平高于ER阳性患者（χ2=16．307,P〈0．0.001）：PR阴性患者血清HER2水平高于PR阳性患者（χ2=16．164,P〈0．001）,而血清HER2水平在不同患者年龄、组织学分级和淋巴结状态等临床病理因素各组间无统计学差异。结论：乳腺癌患者血清HER2水平可以反应肿瘤组织HER2表达状态,其水平升高提示乳腺癌恶性程度高、预后差,是潜在的乳腺癌预后预测和疗效监测的血清学标志,     

双色荧光原位杂交技术检测乳腺癌石蜡切片人类表皮生长因子受体2基因扩增

目的:应用荧光原位杂交技术检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,Her-2)基因扩增情况.并对操作方法进行优化.方法:收集2008年4月至2008年10月期间我院乳甲科进行手术治疗的乳腺癌患者的癌组织病理切片,采用荧光原位杂交(FISH)技术检测Her-2基因扩增情况,并与免疫组化结果相比较,分析两者的相关性,同时优化操作方法.结果:收集的40例乳腺癌石蜡切片中,免疫组化检测Her-2蛋白表达(+++)有6例,(++)有22例,(+)有7例,(-)有5例.其中Her-2蛋白表达(+++)的标本FISH检测结果均为阳性,基因扩增与蛋白表达的符合率为100%;Her-2蛋白表达(++)的标本FISH结果有6例阳性,16例阴性,基因扩增与蛋白表达的符合率为27.3%.Her-2蛋白表达(+)及(-)的标本FISH结果均为阴性.Her-2蛋白表达(++)及以上的标本基因扩增与蛋白表达的符合率达到42.9%(r=0.584,P＜0.01).结论:FISH检测乳腺癌Her-2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果符合率较好,可作为乳腺癌Her-2基因检测的一项新技术;在具体操作时,应注意严格控制切片厚度、消化时间及变性杂交温度等因素.     

HER2与乳腺癌抗肿瘤治疗策略

HER2基因的过度表达与乳腺癌的关系极为为密切,它增加肿瘤细胞的侵袭力,破坏机体组织抗侵袭屏障,通过增加血管内皮生长因子的表达,促进肿瘤新生血管形成,促进癌细胞的扩散和转移,参与化疗耐药的机制,抑制细胞凋亡,促进肿瘤细胞存活。这些特殊的分子生物功能奠定了HER2能作为乳腺癌生物治疗靶点的理论基础,现就近年来以HER2为靶点的抗肿瘤研究最新进展综述如下。     

荧光原位杂交技术检测乳腺癌Her-2/neu扩增

目的：探讨荧光原位杂交技术（FISH）检测乳腺癌Her-2/neu的扩增情况,比较FISH法与免疫组织化学（I HC）法检测结果的一致性。方法：收集乳腺癌患者手术切除的肿瘤标本50例。经石蜡包埋,组织切片后,应用FISH法检测Her-2/neu扩增情况,I HC法检测Her-2/neu蛋白表达情况,并对两种检测方法的结果进行统计学分析。结果：50例标本中FISH阳性17例,FISH阴性33例,FISH阳性率34%（17/50）。50例标本中I HC（～）14例,I HC（0～＋）36例,I HC蛋白表达率28%（14/50）。FISH法与I HC法检测结果的总符合率为82%（41/50）（K=0.581）。结论：FISH法具有较高的稳定性与可靠性,临床开展FISH法检测Her-2/neu基因扩增情况作为I HC法的补充,可以更加准确和客观地对乳腺癌患者的治疗和预后进行评价。