EGCG 对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡及survivin、VEGF表达的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对鼻咽癌细胞增殖、凋亡及生存素(survivin)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法:体外培养鼻咽癌细胞,以不同质量浓度EGCG处理,采用MTT法检测细胞增殖抑制作用,Hoechst33258染色观察凋亡细胞并计算细胞凋亡率,流式细胞仪检测细胞周期变化,RT-PCR检测survivin和VEGF的表达变化.结果:EGCG处理后,CNE-2细胞增殖明显受到抑制,呈时间和剂量依赖性;CNE-2细胞凋亡率显著升高;CNE-2细胞周期阻滞于G1/G0,表现为浓度依赖性;survivin和VEGF的表达明显下调,随EGCG浓度的增加有下降趋势.结论:EGCG能抑制鼻咽癌细胞增殖、促进其凋亡;机制可能与EGCG下调survivn和VEGF的表达有关.     

卡介苗对人鼻咽癌CNE-2Z细胞周期及凋亡的影响

目的 探讨卡介苗(BCG)对鼻咽癌CNE-2Z细胞周期及凋亡的影响.方法 碘化丙啶染色法检测细胞周期,Annexin V-FITC检测细胞凋亡,Western blotting检测周期相关蛋白表达.结果 BCG作用不同时间后,G1期细胞百分率由未处理细胞(对照组)的(47.1±0.9)%升高至72 h作用组的(65.3±1.3)%,S期细胞百分率由对照组的(39.2±0.7)%降低至72 h作用组的(17.6±0.5)%.不同处理时间组和对照组均未检出明显细胞凋亡.CyclinD1蛋白表达随着BCG作用时间的延长逐渐减弱.结论 BCG体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞CyclinD1低表达,促使细胞周期发生G1/S期阻滞.     

人参皂苷Rg1对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡、侵袭和迁移的影响

目的探究人参皂苷Rg1对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡、侵袭和迁移的影响。方法采用不同浓度的人参皂苷Rg1处理鼻咽癌CNE-2细胞,同时选择无显著细胞毒性的Rg1低浓度、中浓度、高浓度(观察组)进行后续实验,对照组不做Rg1处理。采用CCK-8检测细胞增殖倍数,使用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,免疫印迹法检测相关蛋白表达情况。结果与对照组比较,观察组人参皂苷Rg1浓度越高,CNE-2细胞数量越少,增殖倍数、侵袭能力及Ki-67、血管内皮生长因子的表达水平越低,Q2区凋亡细胞越多,Caspase-3蛋白表达水平越高,差异有统计学意义(P 0. 01)。划线24 h后,观察组的缝隙间距明显大于对照组,差异有统计学意义(P 0. 01)。结论人参皂苷Rg1可促进鼻咽癌CNE-2细胞凋亡,抑制CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭能力,为临床治疗鼻咽癌提供新思路和理论基础。     

没食子酸通过活化线粒体通路诱导CNE-2鼻咽癌移植瘤细胞的凋亡

目的:观察不同浓度的没食子酸(gallic acid,GA)对鼻咽癌移植荷瘤裸鼠的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:建立人鼻咽癌CNE-2细胞株荷瘤裸鼠移植性肿瘤模型,随机分为6组:正常对照组(control,con组),模型组(nasopharynx cancer,NPC组),没食子酸10,20,40μg/kg组(GA-10μg/kg,GA-20μg/kg,GA-40μg/kg)和阳性对照组(顺铂,DDP组);经相应处理后,处死裸鼠,测量瘤体积,称量瘤体重量并计算抑瘤率;流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率;Western印迹检测肿瘤细胞中cytochrome C(Cyt C)、cleaved-cas 9,cleaved-cas 3与cleaved-PARP的蛋白表达水平。结果:与NPC组相比,给予GA后瘤体体积与重量随其浓度升高而减小,抑瘤率与肿瘤细胞凋亡率增大;与NPC组相比,肿瘤细胞线粒体中Cyt C的蛋白表达随GA浓度增加而减少,胞质中CytC的蛋白表达则相反,细胞中cleaved-cas 9,cleaved-cas 3与cleaved-PARP的蛋白水平显著增加,与GA浓度呈正相关。结论:没食子酸可能通过调控线粒体通路诱导鼻咽癌移植瘤细胞的凋亡。     

人鼻咽癌CNE-2细胞转染方法的比较研究

目的比较三种非病毒载体转染方法转染人鼻咽CNE-2细胞。方法分别采用脂质体转染法、电穿孔转染法、磷酸钙纳米颗粒转染法将pEGFP-N1质粒DNA转染人鼻咽癌CNE-2细胞,转染24h后荧光显微镜观察EGFP的表达,计算转染率;MTT实验比较各转染方法对CNE-2细胞的细胞毒性。结果脂质体转染组的转染率为（51．9±2．8）％;电穿孔转染组的转染率为（42．8±2．6）％;磷酸钙纳米颗粒转染组的转染率为（48．1±2．3）％。经统计学分析,三种方法转染CNE-2细胞的转染率相互之间有显著的差异（P〈0．001）;MTT结果显示,磷酸钙纳米颗粒转染法的细胞毒性最小。结论磷酸钙纳米颗粒转染法转染效率相对较高,而细胞毒性小,可作为转染CNE-2细胞的首选转染方法。     

白藜芦醇对肾细胞癌ACHN细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨白藜芦醇对肾细胞癌ACHN细胞增殖及凋亡的影响及可能机制。方法对数生长期ACHN细胞随机分为对照组(100μmol/L培养液)、25μmol/L白藜芦醇组(100μmol/L培养液+25μmol/L白藜芦醇)、50μmol/L白藜芦醇组(100μmol/L培养液+50μmol/L白藜芦醇)、100μmol/L白藜芦醇组(100μmol/L培养液+100μmol/L白藜芦醇)、200μmol/L白藜芦醇组(100μmol/L培养液+200μmol/L白藜芦醇)。培养12、24、48 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活力;培养24 h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用荧光探针法检测ACHN细胞氧化型二氯荧光素(dichlorofluorecin, DCF)荧光强度,采用Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphom-2, Bcl-2)、caspase-3蛋白表达。结果对照组及25、50、100、200μmol/L白藜芦醇组培养12 h(0.71±0.01、0.63±0.01、0.56±0.03、0.48±0.02、0.39±0.02)、24 h(1.19±0.04、1.00±0.02、0.79±0.03、0.63±0.03、0.41±0.06)、48 h(1.62±0.02、1.15±0.03、0.79±0.04、0.62±0.04、0.41±0.08)细胞增殖活力吸光度值依次降低(P0.05),培养24 h细胞凋亡率[(7.73±0.87)%、(12.64±1.13)%、(29.43±1.25)%、(37.73±1.24)%、(48.56±1.78)%]依次升高(P0.05);培养24 h,对照组及25、50、100、200μmol/L白藜芦醇组细胞DCF荧光强度[(5.40±0.70)、(14.97±1.33)、(17.03±0.80)、(19.67±1.16)、(31.50±2.28)u/(s·mg)]及caspase-3相对表达量(0.24±0.02、0.58±0.02、1.19±0.05、1.41±0.05、1.74±0.06)依次升高,Bcl-2相对表达量(1.67±0.10、1.11±0.16、0.94±0.11、0.67±0.09、0.53±0.02)依次降低(P0.05)。结论白藜芦醇可诱导肾细胞癌ACHN细胞内活性氧累积,上调caspase-3表达,下调Bcl-2表达,进而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,且呈剂量依赖性。     

一氧化氮(NO)对细胞凋亡的影响

细胞凋亡受到多种因素的调控。NO是一种作用广泛的无机小分子物质。它对不同细胞的细胞凋亡的影响是不同的。它能促进巨噬细胞细胞凋亡的发生，而对其它细胞的细胞凋亡起抑制作用，但它都是通过NO－GTP环化酶－cGMP途径发挥作用。     

一氧化氮（NO）对细胞凋亡的影响

细胞凋亡受到多种因素的调控。ＮＯ是一种作用广泛的无机小分子物质。它对不同细胞的细胞凋亡的影响是不同的。它能促进巨噬细胞细胞凋主恨的发生，而对其它细胞的细胞凋亡起抑制作用，但它都是通过ＮＯ－ＧＴＰ环化－ｃＧＭＰ途径发挥作用。     

卡介苗体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞ICAM-1表达

摘要：目的：探讨卡介苗（bacillus CalmetteGuerin,BCG）对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）CNE-2Z细胞及细胞间黏附分子1（intercellular adhesion molecule1,ICAM-1）表达的影响及可能的调控机制。 方法：显微镜观察细胞形态学变化和记录细胞被胰蛋白酶完全消化所用时间;流式细胞术检测细胞表面ICAM-1表达;免疫细胞化学检测细胞NF-κB表达,western blot检测ICAM-1、NF-κB表达。 结果：BCG作用24、48和72 h细胞对培养介质的粘附力增加,且被胰蛋白酶完全消化所用的时间明显长于对照组［(5.8±0.4)、(7.8±0.4)、(8.8±0.4) min vs (5.0±0.5) min,F=22.01,P<0.01］;流式细胞术检测24、48和72 h组ICAM-1表达的平均荧光强度（MnX）明显高于对照组［(25.2±0.4)、(28.7±1.1)、(37.2±1.6) vs(23.4±0.9), F=112.34,P<0.01］;免疫细胞化学结果表明,BCG作用72 h组NF-κB表达水平高于对照组。western blot结果表明,各组NF-κB和ICAM-1表达均明显高于对照组。 结论：BCG体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞ICAM-1表达,且该过程可能与NF-κB信号途径有关。     

小干扰RNA对鼻咽癌CNE-2细胞Bcl-2基因的放射增敏研究

目的:探讨Bcl-2基因的特异性小干扰RNA(siRNA)对鼻咽癌细胞的辐射增敏作用.方法:构建Bcl-2基因的特异性siRNA的真核表达载体,并借助脂质体将其转入鼻咽癌CNE-2细胞.荧光显微镜观察转染效率;流式细胞仪检测Bcl-2蛋白在鼻咽癌细胞的表达,并检测CNE-2细胞的凋亡率;流式细胞仪检测Bcl-2基因的特异性siRNA真核表达载体联合X射线照射后CNE-2细胞的凋亡率.结果:流式细胞仪检测结果显示:转染组明显降低了Bcl-2蛋白在CNE-2细胞的表达,且转染组的细胞凋亡率明显增加.转染联合X射线照射后细胞凋亡率也明显增加,且明显高于阴性对照+X射线组和单纯X线照射组.结论:siRNA可以有效干扰鼻咽癌CNE-2细胞内Bcl-2基因的表达,可明显增强鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性.     

TACE对肝癌细胞凋亡和增殖的影响

目的探讨经动脉化疗栓塞术(TACE)对肝细胞癌细胞凋亡指数(AI)和细胞增殖指数(PCNA-LI)的影响,以及AI和PCNA-LI的相关性.方法经病理证实的肝细胞癌病例63例,包括单纯手术组42例,TACE组21例.采用TUNEL法和免疫组织化学SP法分别检测各标本的AI和PCNA-LI. 结果 TACE组AI高于单纯手术组,PCNA-LI低于单纯手术组(P<0.01),AI和PCNA-LI呈高度负相关(P<0.01).TACE组术后血清AFP值较术前下降(P< 0.05),肿瘤缩小,坏死率增高(P<0.01).结论 TACE可以明显增加HCC细胞凋亡率,降低细胞增殖率,从而促使肿瘤缩小,促进肿瘤坏死,达到治疗目的.     

二磷酸氯喹对K562细胞增殖与凋亡的影响

本研究探讨二磷酸氯喹对K562细胞增殖与凋亡的影响及其可能的作用机制。用细胞增殖试验（MTT法）检测不同浓度二磷酸氯喹对K562细胞的增殖抑制作用；应用细胞形态学检查、流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡；以罗丹明123（Rhodamine 123）为细胞染色剂，采用流式细胞术检测不同浓度二磷酸氯喹处理后K562细胞线粒体膜电位（△Ψm）的变化。结果表明：用不同浓度二磷酸氯喹（1.5625、3．125、6．25、12．5、25、50、100μmol／L）分别作用于K562细胞24、48和72小时后，细胞生长活力明显降低，具有剂量依赖性；典型的细胞形态学改变、亚G1峰的测出、梯形条带的显现共同证实了二磷酸氯喹能诱导K562白血病细胞凋亡；Rhodamine 123染色显示二磷酸氯喹处理的K562细胞线粒体膜电位强度下降。结论：二磷酸氯喹对K562细胞有生长抑制、诱导凋亡作用，其作用可能与细胞线粒体膜电位（△Ψm）下降有关。     

茶多酚对前列腺癌PC-3M细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨茶多酚对前列腺癌PC-3M细胞增殖及凋亡的影响。方法设立对照组与实验组,采用MTT比色法检测TP对PC-3M细胞增殖的影响;吖啶橙/溴化乙锭染色法观察诱导细胞凋亡情况;流式细胞术分析细胞周期;RT-PCR和Western blot检测Caspase-3基因的转录与表达。结果与对照组比较,MTT法示实验组对PC-3M细胞的增殖抑制作用增强;细胞染色法示实验组凋亡率增高;流式细胞术显示细胞阻滞于G1期,增殖指数降低;RT-PCR与Western blot示Caspase-3基因转录与翻译上调,上述结果在一定范围内呈时间、剂量依赖性(P0.05)。结论茶多酚对人前列腺癌PC-3M细胞具有增殖抑制、促进凋亡作用,与上调caspase-3基因的转录与表达有关。     

腺苷对人胃癌MGC-803细胞增殖与凋亡的影响

目的观察腺苷(adenosine)对人胃癌MGC-803细胞的增殖、凋亡的影响。方法 CCK-8法检测不同浓度腺苷(0.01~10 mmol/L)对胃癌MGC-803细胞增殖的影响。流式细胞仪检测腺苷(0.25、0.5、1 mmol/L)对细胞凋亡的影响。Western blot检测腺苷处理后细胞内凋亡相关蛋白和内质网应激相关蛋白的表达量。结果腺苷能抑制胃癌MGC-803细胞的活力,并且呈现浓度和时间依赖性(P0.05)。腺苷(0.25、0.5、1 mmol/L)处理24 h后,细胞的总凋亡率显著升高(P0.01)。腺苷可以引起凋亡相关蛋白Caspase-3活化片段的蛋白表达量上调(P0.01)。腺苷能诱导内质网应激(ERS)相关蛋白Caspase-4活化片段、p-JNK、CHOP、GRP78的表达量上调(P0.05)。结论腺苷可以抑制胃癌MGC-803细胞的增殖,并且促进凋亡,而内质网应激可能参与了腺苷引起的凋亡。     

熊果酸对人卵巢癌 SKOV3细胞增殖与凋亡的影响

【目的】探讨熊果酸(Ursolic acid,UA)对人卵巢癌 SKOV3细胞增殖与凋亡的影响。【方法】常规培养人卵巢癌 SKOV3细胞,应用 UA 浓度为5、10、20、40和80μmol/L 分别干预12 h、24 h 和48 h,采用 MTT 法检测细胞增殖;采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化,应用 Western blot 技术检测细胞周期相关蛋白 P21、CyclinD1的表达水平。【结果】与空白对照组(0μmol/L UA)比较,40和80μmol/L UA 分别作用 SKOV3细胞12 h、24 h 和48 h 后 OD 值均显著降低(P <0.05);10、20和40μmol/L UA 作用24 h 后 SKOV3细胞早期凋亡率、晚期凋亡率和 G0/G1期比率较对照组升高,20和40μmol/L UA 作用24 h 后 SKOV3细胞周期蛋白 Cyclin D1明显降低而 P21水平显著升高(P <0.05)。【结论】体外实验中,UA 可抑制人卵巢癌 SKOV3细胞增殖和促其凋亡,其机制可能与细胞周期蛋白 Cyclin D1表达降低和 P21表达升高有关。     

干扰素α-2b对HL-60细胞抑增殖与促凋亡的影响

为了研究干扰素α-2b （IFNα-2b）对HL-60细胞增殖与凋亡的影响，采用瑞氏染色观察HL-60细胞的形态变化．吖啶橙／溴化乙锭双染色观察细胞凋亡，通过CDl3测定观察细胞膜抗原表达及成熟分化，MTT实验观察增殖活性。结果显示：加入IFNα-2b 48小时后，HL-60细胞凋亡率升高，增殖活性下降，而且随着IFNα-2b浓度的升高，抑制作用更加明显。CD13表达逐渐下降，细胞形态逐渐向成熟转化。结论：IFNα-2b能促进HL-60细胞凋亡、抑制HL-60细胞增殖和促进分化成熟。     

吲哚美辛对喉癌细胞Hep-2增殖与凋亡及COX-2蛋白表达的影响

目的探索吲哚美辛对喉癌细胞增殖与凋亡的作用以及对细胞COX-2蛋白表达的影响。方法Hep-2细胞暴露于含吲哚美辛（125，250，500μM）的培养基中，培养24小时，用MTT方法检测各组药物与溶剂对照组相比对细胞增殖的影响；用台盼蓝染色法检测吲哚美辛对细胞活力的影响；吖啶橙染色法观察吲哚美辛（250μM）对细胞形态的影响；流式细胞仪分析法检测吲哚美辛（250μM）对细胞周期和细胞凋亡的影响，Western blot检测吲哚美辛对细胞COX-2蛋白表达的影响。结果吲哚美辛使Hep-2细胞增殖及细胞活力明显降低，细胞形态发生明显变化，细胞质萎缩而细胞核相对较大，S期细胞分数明显增加，细胞出现凋亡峰，而COX-2蛋白表达量增加。结论吲哚美辛强烈抑制Hep-2细胞增殖与细胞活力，明显改变细胞初始形态，阻滞细胞从S期向G2／M期转化，并诱导其凋亡，吲哚美辛对Hep-2细胞的上述作用机制与COX-2的特异性抑制途径无关。     

Apo-2L对放射线诱导鼻咽癌CNE细胞凋亡作用

目的了解凋亡素2配体（Apo-2L）与放射治疗协同对体外培养鼻咽癌CNE细胞增殖周期及凋亡率的影响。方法 MTT法检测不同浓度Apo-2L对鼻咽癌CNE细胞的影响,确定Apo-2L与细胞作用时间及浓度。将细胞随机分为对照组、Apo-2L组、Apo-2L＋放射组及单纯放射组,分别给予相应的处理后制成细胞悬液,流式细胞仪分析细胞凋亡率和细胞周期变化。结果鼻咽癌CNE细胞的抑制率与Apo-2L的浓度呈正相关（r=0.91,P〈0.05）,当用浓度为100μg/L的Apo-2L处理CNE细胞24h,Apo-2L＋放射组凋亡率较其他各组明显升高,差异有显著性（F=8.64,P〈0.05）。Apo-2L＋放射组G2-M期比率较其他各组显著降低（F=7.74,P〈0.05）。结论Apo-2L对体外培养鼻咽癌CNE细胞有抑制增殖和促进凋亡作用;Apo-2L联合放射线治疗可以使细胞周期同步化,并明显提高CNE细胞的凋亡率。     

Zebularine对K562细胞的增殖及凋亡的影响

[目的]探讨药物zebularine对白血病细胞株K562增殖及凋亡的影响.[方法]选择白血病细胞株K562,试验分为对照组(未加入zebularine组)、实验组 (zebularine终浓度分别为 250 μM,500 μM)组3个组.MTT试剂盒检测12 h、24 h、36 h、48 h和 72 h后K562细胞...