外周血差异显示编码3mRNA定量检测在前列腺癌患者诊断与治疗监测中的初步应用

目的探讨外周血差异显示编码3（DD3）mRNA定量检测在前列腺癌诊断和治疗监测中意义。方法用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）方法对35例未治疗前列腺癌、58例内分泌治疗后前列腺癌、59例良性前列腺增生患者和10例健康男性志愿者外周血DD3mRNA含量进行定量检测,并对DD3mRNA诊断及疗效监测价值进行评价。结果未治疗前列腺癌组外周血DD3mRNA含量明显高于治疗后前列腺癌组、前列腺增生组和健康男性志愿者组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。未治疗前列腺癌患者随着临床分期增加,外周血DD3mRNA含量也增高,差异具有统计学意义（P〈0．01）。当临界值为846拷贝／ml时,DD3mRNA曲线下面积为0．822（95％CI：0．725～0．919）,灵敏度、特异度分别为74．3％、89．8％。结论外周血DD3mRNA定量检测是前列腺癌诊断的良好指标,可作为内分泌治疗过程疗效监测的指标。     

前列腺癌特异DD3基因实时荧光定量PCR检测方法建立及初步应用

目的：建立实时荧光定量PCR检测特异DD3基因方法,探讨其在前列腺癌早期诊断中的应用价值．方法：根据Genebank中的DD3 mRNA全序列,设计DD3基因的特异引物和探针,构建用于制备DD3基因检测的定量标准品的克隆载体;建立DD3基因的实时荧光定量方法,分别用于前列腺癌患者全血、尿液、前列腺液标本的检测．结果：经稳定性、特异性、重复性和敏感性实验评价,DD3基因实时荧光定量PCR方法的最低检测限为1．64×10^3拷贝／L,线性范围为1．64×10^3～1．64×10^15拷贝／L．对临床收集的19份前列腺癌患者,20份非前列腺癌患者、30份健康者的全血、尿液及前列腺液标本进行检测．19份前列腺癌患者标本中阳性率分别为100％（全血）、80％（尿液）、100％（前列腺液）;20份非前列腺癌患者标本中只有1份前列腺液出现低拷贝值（1×10^5拷贝／L）;30份健康者标本均为阴性．在全血、尿液、前列腺液标本中,前列腺癌患者DD3 mRNA含量明显高于非前列腺癌患者和健康者（P〈0．05）．结论：DD3基因是一种用于前列腺癌早期诊断的特异性指标,可用于生物体液中少量癌细胞的检测,在前列腺癌早期诊断、微转移诊断、预后判断、指导治疗等方面均具有潜在的应用价值．     

前列腺癌患者前列腺癌基因3的表达

目的评价前列腺癌基因3（PCA3）在前列腺癌诊断中的临床应用价值。方法选取我院2009年11月~2010年11月收治的30例前列腺癌（前列腺癌组）、22例前列腺增生（前列腺增生组）患者及12例健康男性（对照组）,采用逆转录聚合酶链式反应方法检测其外周血中PCA3 mRNA表达情况。结果对照组及前列腺增生组外周血标本中未见PCA3 mRNA阳性表达,而前列腺癌组患者外周血标本中PCA3 mRNA阳性率为99.3%（28/30）,差异有高度统计学意义（χ2=65.283,P〈0.01）。结论前列腺癌中PCA3 mRNA有明显组织特异性的阳性表达,有望成为前列腺癌诊断的新肿瘤标志物。     

良性前列腺增生症与前列腺癌的鉴别诊断

目的探讨瘦素、雄激素受体（AR）、游离态前列腺特异性抗原（F-PSA）与总前列腺特异性抗原（T-PSA）在前列腺癌（PCA）与前列腺增生（BPH）患者血清的表达及其在PCA与BPH鉴别诊断中的意义。方法选择我院2008年1月～2010年9月经病理诊断的PCA患者54例、BPH患者52例及同期健康体检者48例。ELISA法检测正常组、PCA组和BPH组患者血清中瘦素的含量、免疫组化Elivison法测定AR、全自动化学发光免疫分析仪检测F-PSA和T-PSA含量,并计算F/T值、进行统计分析。结果 PCA组的血清瘦素水平明显高于BPH组及健康组（P〈0.05）;PCA组AR阳性率明显高于BPH组（P〈0.05）;PCA组的F/T值低于BPH组和健康组,各组间F/T比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 PCA及BPH的鉴别诊断应该在PSA基础上结合瘦素和AR综合判断,以提高诊断的正确性。     

前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PSM-E在外周血的定量表达

【目的】检测分析前列腺特异性膜抗原（PSMA）及其新型剪接变异体（PSM．E）在前列腺癌（PCA）及良性前列腺增生（BPH）患者外周血中的表达,探讨其意义。【方法】通过实时荧光定量PCR方法对PSM—E、PSMA在前列腺癌（53例）和前列腺增生（79例）两组患者外周血中定量表达,分析其差异。【结果】PSM．E相对表达量在PCA组（-8．22±0．32）高于BPH组（-9．99±0．41）,P〈0．001;PSMA相对表达量在PCA组（-12．514-0．31）高于BPH组（-13．72±0．48）,差异有统计学意义,P〈0．05;PCA组和BPH组内PSMA与PSM—E相对表达量有相关性（r=0．36,P〈0．05;r=0．65,P〈0．01）,与血清PSA均不相关。【结论】外周血定量检测PSM—E表达差异可用于区分良性前列腺增生和前列腺癌;与PSMA相比PSM．E表达量更高,其检测的灵敏度更高,PSM—E诊断前列腺癌的敏感性和特异性更好。     

前列腺液中DD3mRNA定量检测无侵入性诊断前列腺癌的意义

目的探讨前列腺按摩后前列腺液沉渣中DD3mRNA含量在前列腺癌诊断中的应用价值。方法在前列腺穿刺活检前或术前麻醉后收集前列腺按摩后患者的前列腺液。其中前列腺癌（Pca）患者31例,前列腺增生患者（BPH）59例,离心取细胞沉淀物,用荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应（Real time RT-PCR）方法检测DD3mRNA和PSAmRNA含量,以PSAmRNA作为管家基因校正前列腺液沉渣中的前列腺细胞,以DD3mRNA/PSAmRNA比值表示DD3mRNA含量。SPSS 13.0分析相关数据,以穿刺活检或术后病理检查结果为金标准,用受试者工作特征曲线（ROC）对DD3mRNA诊断性能进行分析,并与血清tPSA进行比较,同时探讨前列腺液DD3mRNA相对定量值阳性率与病理分级的关系。结果前列腺癌患者前列腺液DD3mRNA表达量明显高于BPH,差异具有统计学意义（P〈0.05）。ROC曲线分析结果显示,曲线下面积（ROC-AUC）=0.879（95%CI=0.795～0.964）。DD3mRNA相对定量值截断值取0.015313时,其诊断效能最大。其灵敏度为0.806,特异度为0.864,准确性0.67,阳性预测值75.8%,阴性预测值89.5%,阳性似然比、阴性似然比分别为5.97、0.224。若血清tPSA分别以4ng/ml和10ng/ml为截断值时,灵敏度分别为83.8%和54.84%,特异度分别为61.02%和83.05%,不同病理分级之间DD3mRNA的阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论前列腺液中DD3mRNA测定的诊断性能明显高于血清PSA,作为前列腺癌的一种非损伤性诊断方法具有良好的应用前景。     

前列腺癌患者外周血前列腺特异性膜抗原mRNA检测的意义

目的 观察前列腺癌（PCa）患者外周血前列腺特异性膜抗原mRNA（PSMA-mRNA）的表达,并探讨其临床意义。方法从PCa患者外周血中分离单个核细胞,采用RT-PCR方法检测其中PSMA-mRNA的表达。以前列腺增生（BPH）患者为对照。结果PCa患者PSMA-mRNA阳性率为60．8％（45／74）,BPH患者PSMA-mRNA阳性率为5．9％（1／17）;伴远处转移的PCa患者外周血PSMA-mRNA阳性率高达89．5％（34／38）,无远处转移者阳性率为38．9％（14／36）;PCa患者中血清PSA≥20μg/L者PSMA-mRNA阳性率（68．8％）,显著高于PSA〈20μg／L者（23．0％）。结论外周血PSMA-mRNA检测可诊断前列腺癌血行播散及转移。     

DD3 mRNA及DD3 mRNA/D定量检测对前列腺特异性抗原灰区前列腺癌诊断的临床价值

目的研究前列腺组织中DD3 mRNA及DD3 mRNA/D定量检测在前列腺特异性抗原(PSA)灰区前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法选择sPSA 4~10 ng/ml的前列腺增生(BPH)患者1 12例和前列腺癌(PC)患者25例,进行RT-PCR、PSA检测、B型超声检查及前列腺穿刺活检。观察其DD3 mRNA、DD3 mRNA/D、血清PSA(sPSA)、前列腺穿刺活检标本PSA(uPSA)、总PSA/游离PSA比值(f/tPSA)、s/uPSA、PSA密度(PSAD)等参数的差异,并应用ROC曲线分析各参数的诊断价值。结果 2组患者年龄、前列腺体积比较差异无统计学意义(t=12.87、12.31,P>0.05);tPSA、PSAD比较差异均有统计学意义(t=7.31、6.89,P<0.05);PC组DD3 mRNA/PSA mRNA比值明显高于BPH组(t=7.86,P=0.009);PC组DD3 mRNA/D比值明显高于BPH组(t=7.28,P=0.05)。ROC曲线分析结果表明,以0.27为截断值,DD3 mRNA/PSA mRNA的曲线下面积为0.841(95%C1 0.666~0.997);以2.01为截断值,DD3 mRNA/D的曲线下面积为0.907(95%C1 0.790~0.869)。结论 DD3 mRNA含量、DD3 mRNA/D定量检测可以显著提高检出PSA灰区前列腺癌的敏感度,对PSA灰区前列腺癌的早期筛查诊断意义重大,DD3 mRNA/D具有更好的诊断效能。     

尿液中PCA3mRNA和融合基因TMPRSS2：ERGmRNA的检测在前列腺癌早期临床诊断中的应用

目的研究前列腺按摩后尿液中PCA3mRNA联合融合基因TMPRSS2：ERG亚型T1E4mRNA的定量检测在早期前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法收集前列腺癌（PCa）患者53例和前列腺增生（BPH）患者37例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,用实时荧光定量RT—PCR的方法检测PSAmRNA、PCA3mRNA和T1E4mRNA的含量,以PSAmRNA来校正尿液中的前列腺癌细胞。以PCA3mRNA／PSAmRNA表示PCA3mRNA的含量,以T1E4mRNA／PSAmRNA表示融合基因T1E4mRNA的含量。用ROC曲线对T1E4mRNA及PCA3mRNA诊断PCa的性能进行分析。结果尿T1E4mR．NA／PSAmRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积（AUC）为0．802（95％CI：0．709～0．895）,以0．007为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为56．6％和94．6％。尿PCA3mRNA／PSAmRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积（AUC）为0．646（95％CI：0．533—0．758）,以0．001为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度为47．2％和73．0％。PCa组PCA3mRNA（P=0．009）及T1E4mRNA（P=0．000）的含量均高于BPH组,T1E4mRNA联合PCA3mRNA定量检测的敏感度为81．1％,比单独应用PCA3mRNA和T1E4mRNA检测的敏感度分别提高了33．9％和24．5％。结论前列腺癌按摩后尿沉渣中可以检测到TMPRSS2：ERG亚型T1E4mRNA,联合PCA3mRNA和T1E4mRNA两个指标定量检测,可以显著提高检出前列腺癌的敏感度。此联合检测方法可以用于早期的前列腺癌诊断。     

SYBR GreenⅠ实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测前列腺癌抗原3mRNA表达水平

目的采用SYBR Green I实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,建立检测前列腺癌抗原3(DD3)mRNA的标准,定量检测人体不同组织中该基因的表达水平。方法从LNCaP细胞中采用RT- PCR法扩增特异性DD3基因片段,将其与pMD18-T载体连接,转化宿主菌JM109,对质粒标准进行聚合酶链反应(PCR)检测及测序。纯化后检测质粒拷贝浓度,制备梯度浓度标准品。应用LightCycler荧光定量PCR仪对标准品进行检测。取正常人乳腺组织、膀胱、结肠、尿道、肺、睾丸、精囊、卵巢、正常前列腺组织、前列腺增生及前列腺癌组织,定量检测DD3 mRNA表达。结果建立稳定的检测DD3 mRNA的标准,正常人乳腺、膀胱、结肠、尿道、肺、睾丸、精囊、卵巢中无DD3 mRNA表达,在正常前列腺及前列腺增生组织中低表达,两者间差异无显著性 (P>0．05);在前列腺癌中高表达(P<0．05)。结论应用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR技术检测 DD3 mRNA表达水平简便、可行、经济。DD3基因的表达具有良好的前列腺癌特异性。     

前列腺癌患者外周血中前列腺特异抗原,前列腺特异膜抗原和人腺体激肽释放酶mRNA的表达及临床意义

目的:采用巢式RT-PCR方法,检测前列腺癌合并骨转移的患者外周血中前列腺特异抗原(PSA)、前列腺特异膜抗原(PSMA)和人腺体激肽释放酶mRNA的表达,探讨其临床意义.方法:应用巢式RT-PCR的方法,检测外周血中PSA、PSMA和hK2mRNA表达.结果:巢式PCR能够检测到经淋巴细胞稀释的LNCaP细胞的PSA、PSM和hK2mRNA的灵敏度,稀释浓度分别为10-6、10-6及10-7.检测初发伴骨转移的前列腺癌患者外周血PSA、PSMA和hK2mRNA的阳性率分别为59.45%、51.35%、59.46%,其中三种检测同时阳性的为32.43%;检测接受内分泌治疗后出现骨转移的前列腺癌患者的阳性率分别为57.14%、85.71%、83.33%,其中三种检测同时阳性的为52.48%.局限性前列腺癌患者、健康男性及健康女性的检测结果均为阴性.以β-actin mRNA做为内参照,所有临床标本检测均为阳性.结论:采用巢式RT-PCR检测前列腺癌患者外周血PSMA、hK2和PSA mRNA有助于发现进入循环系统的前列腺癌细胞,提示隐匿性转移的存在.PSMA和hK2较适合用于内分泌治疗后患者的检测.三种指标联合检测有助于提高敏感性.     

尿液中PCA3 mRNA和融合基因TMPRSS2:ERG mRNA的检测在前列腺癌早期临床诊断中的应用

目的研究前列腺按摩后尿液中PCA3 mRNA联合融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的定量检测在早期前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法收集前列腺癌(PCa)患者53例和前列腺增生(BPH)患者37例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,用实时荧光定量RT-PCR的方法检测PSA mRNA、PCA3 mRNA和T1E4 mRNA的含量,以PSA mRNA来校正尿液中的前列腺癌细胞。以PCA3 mRNA/PSA mRNA表示PCA3 mRNA的含量,以T1E4 mRNA/PSA mRNA表示融合基因T1E4 mRNA的含量。用ROC曲线对T1E4 mRNA及PCA3 mRNA诊断PCa的性能进行分析。结果尿T1E4 mR-NA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.802(95%CI:0.709～0.895),以0.007为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为56.6%和94.6%。尿PCA3 mRNA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.646(95%CI:0.533～0.758),以0.001为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度为47.2%和73.0%。PCa组PCA3 mRNA(P=0.009)及T1E4 mRNA(P=0.000)的含量均高于BPH组,T1E4 mRNA联合PCA3 mRNA定量检测的敏感度为81.1%,比单独应用PCA3 mRNA和T1E4 mRNA检测的敏感度分别提高了33.9%和24.5%。结论前列腺癌按摩后尿沉渣中可以检测到TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA,联合PCA3 mRNA和T1E4 mRNA两个指标定量检测,可以显著提高检出前列腺癌的敏感度。此联合检测方法可以用于早期的前列腺癌诊断。     

外周血前列腺癌基因3基因联合甲基化谷胱苷肽S-转移酶P1基因在前列腺癌诊断中的意义

目的研究前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)患者及健康者血清中前列腺癌基因3(PCA3)基因和甲基化胎盘型谷胱苷肽S-转移酶P1(GSTP1)的表达情况,探讨PCA3基因联合甲基化GSTP1基因作为前列腺癌早期诊断的价值。方法随机选取80例PCa患者为PCa组、120例BPH患者为BPH组和100例健康男性志愿者为对照组为研究对象,均采用RT-PCR技术分别检测外周血前列腺癌基因3(PCA3)基因和甲基化GSTP1基因在血清中表达水平化表达情况,并进行对比分析。结果 PCa组血清中PCA3基因和甲基化GSTP1基因浓度均明显高于BPH组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);BPH组和对照组血清中PCA3基因和甲基化GSTP1基因浓度均无差别,差异无统计学意义(P>0.05)。PCA3基因和甲基化GSTP1基因诊断PCa其敏感度分别为72.5%(58/80)、85.0%(68/80),特异度分别为87.5%(70/80)、77.5%(62/80);而联合检测时其敏感度可增至95.0%(76/80),特异度为90.0%(72/80)。结论外周PCA3基因和甲基化GSTP1基因检测都是PCa诊断的良好指标,PCA3基因联合甲基化GSTP1基因检测可弥补PCA3基因敏感性低和甲基化GSTP1基因特异性低的缺点,更有利于早期PCa诊断。     

前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PSM-E 在外周血的定量表达

 【目的】 检测分析前列腺特异性膜抗原(PSMA)及其新型剪接变异体(PSM-E)在前列腺癌(PCA)及良性前列腺增生(BPH)患者外周血中的表达,探讨其意义&#65377; 【方法】 通过实时荧光定量PCR方法对PSM-E&#65380;PSMA在前列腺癌(53例)和前列腺增生(79例)两组患者外周血中定量表达,分析其差异&#65377; 【结果】 PSM-E相对表达量在PCA组(-8.22 ± 0.32)高于BPH组(-9.99 ± 0.41),P < 0.001;PSMA相对表达量在PCA组(-12.51 ± 0.31)高于BPH组(-13.72 ± 0.48),差异有统计学意义,P < 0.05; PCA组和BPH组内PSMA与PSM-E相对表达量有相关性(r = 0.36,P < 0.05; r = 0.65,P < 0.01),与血清PSA均不相关&#65377; 【结论】 外周血定量检测PSM-E表达差异可用于区分良性前列腺增生和前列腺癌;与PSMA相比PSM-E表达量更高,其检测的灵敏度更高,PSM-E诊断前列腺癌的敏感性和特异性更好&#65377;     

前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA表达

目的：检测前列腺癌患者及对照者外周血单个核细胞前列腺特异性抗原(PSA）mRNA表达,并探讨其临床意义。方法：选择39例前列腺癌患者,12例健康体检者作为对照,取5 mL静脉血,肝素抗凝,Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞,RT-PCR检测PSA mRNA表达。结果：①39例前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA表达阳性检出率66.7%（26/39）,其中血清PSA＞20.0 μg·L^-1者23例,PSA mRNA表达阳性检出率87.9%（20/23）;血清PSA≤20.0 μg·L^-1者16例,PSA mRNA表达阳性检出率37.5%（6/16）。对照组未见阳性表达。②16例血清PSA≤20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者PSA mRNA阳性表达的Gleason评分为：1~4分0/3,5~7分1/8,8~10分5/5,6例阳性者均为中、低分化癌。 结论：外周血单个核细胞PSA mRNA的检测在血清PSA＞20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者中具有较高的敏感度,是一种可靠的检测方法。血清PSA≤20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA的检测可以预示微转移的发生。     

尿液中PCA3评分对前列腺癌早期诊断的临床意义

目的：探讨不同尿液中前列腺癌基因3 （PCA3）评分的截断值对可疑前列腺癌患者诊断的应用价值.方法：纳入123例因血清总前列腺特异性抗原（t-PSA）升高和（或）直肠指诊（DRE）异常住院的患者,采集前列腺按摩后的初始尿液标本,使用实时定量PCR检测尿沉渣中PSA及PCA3 mRNA的表达,测定穿刺前尿样PCA3的评分.结合穿刺的病理结果分析不同尿PCA3评分的截断值对诊断前列腺癌的敏感性和特异性（阳性预测和阴性预测）.结果：经穿刺病理结果证实前列腺癌32例,前列腺良性增生91例.当取PCA3评分截断值为35时,可避免52.7％（48例）的患者进行不必要的穿刺,8.8％（8例）的患者被漏诊（被漏诊的患者均是低危前列腺癌）;当取PCA3评分截断值为50时,可避免72.5％（66例）的患者进行不必要的穿刺,但13.2％（12例）的患者被漏诊,且2例（16.7％）是中高危前列腺癌.结论：检测可疑前列腺癌患者尿液中PCA3评分可减少不必要的穿刺,且取截断值为35时可获得较高的诊断价值.     

CgA 和 PCA3的表达在前列腺癌患者诊断中的应用研究

［摘要］目的　探讨血液及尿液中CgA、PCA3的表达在列腺癌患者诊断中的临床应用意义．方法　采用随机数字表法随即抽取62例患者和62例健康受检者,试验组为前列腺癌患者,对照组为健康受检者,对两组受检者血液及尿液中CgA、PCA3进行定量检测,讨论其在前列腺癌患者的诊断中的临床意义．结果　前列腺癌组的CgA、PCA3阳性表达率明显高于对照组的健康受检者,且前列腺癌患者CgA值会随着病情的进展而增加,健康受检者CgA值基本不变,差异具有统计学意义（P＜0.05）．结论　CgA、PCA3的组织特异性阳性表达可对前列腺癌的诊断提供可靠的依据,可以成为前列腺癌的肿瘤标志物,显著提高前列腺癌诊断的敏感度,值得进一步推广.     

CgA和PCA3的表达在前列腺癌患者诊断中的应用研究

目的 探讨血液及尿液中CgA、PCA3的表达在列腺癌患者诊断中的临床应用意义.方法 采用随机数字表法随即抽取62例患者和62例健康受检者,试验组为前列腺癌患者,对照组为健康受检者,对两组受检者血液及尿液中CgA、PCA3进行定量检测,讨论其在前列腺癌患者的诊断中的临床意义.结果 前列腺癌组的CgA、PCA3阳性表达率明显高于对照组的健康受检者,且前列腺癌患者CgA值会随着病情的进展而增加,健康受检者CgA值基本不变,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 CgA、PCA3的组织特异性阳性表达可对前列腺癌的诊断提供可靠的依据,可以成为前列腺癌的肿瘤标志物,显著提高前列腺癌诊断的敏感度,值得进一步推广.     

双重实时荧光逆转录聚合酶链反应检测尿液DD3/PSA mRNA比值及其应用

目的建立双重实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测尿液DD3／PSAmRNA比值,评价其初步应用。方法分别在前列腺特异性抗原（PSA）基因外显子1和2、差异显示编码3（DD3）基因外显子1和3之间设计一对引物和一条探针,PSA和DD3基因的TaqMan—MGB探针5’分别标记HEX和FAM荧光素,建立双重实时荧光RT—PCR检测尿液DD3／PSAmRNA比值的方法,并对方法学进行评价。对34例前列腺癌（PCa）、44例良性前列腺增生（BPH）患者前列腺按摩后尿液中的DD3／PSAmRNA比值进行检测,评价其临床应用价值。结果扩增产物经测序证明为PSA和DD3特异性片段。以LNCaP细胞cDNA作模板,PSAmRNA和DD3mRNA最低检测限分别为0,6细胞／反应和60细胞／反应。DD3／PSAmRNA比值批内、批间变异系数分别为3．8％-4,7％和4．1％-4,9％。PCa组尿液DD3／PSAmRNA比值明显高于BPH组（P〈0．01）。尿液DD3／PSAmRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积（AUC）为0．746（95％CI：0．630—0．862）,当截断值为0．254时其敏感度和特异度分别为64．7％和77.3％,其阳性率与临床和病理分级均无关。结论成功建立了双重实时荧光RT—PCR检测尿液DD3／PSAmRNA比值的分子生物学诊断方法。该方法对PCa诊断具有较高特异度和敏感度,且节省操作时间、降低实验成本,有望成为PCa早期诊断的有效方法。     

检测外周血Lunx mRNA表达用于诊断肺癌微转移的临床价值

目的：研究检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血Lunx mRNA表达对于诊断肿瘤微转移的临床价值。方法：采用荧光定量RT-PCR技术,对42例NSCLC患者及18例良性肺部疾病患者外周血Lunx mRNA进行检测。结果：NSCLC患者外周血Lunx mRNA表达的阳性率为40．5％（17／42）,Ⅰ-Ⅱ期NSCLC患者的阳性率为18．8％（3／16）,Ⅲ期患者的阳性率为47．1％（8／17）,Ⅳ期患者阳性率为66．7％（6／9）,而肺部良性疾病患者外周血无1例阳性表达。结论：检测外周血Lunx mRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移的一个参考指标。