肺炎支原体肺炎患儿TNF-α、IL-6、IL-8及T细胞亚群变化意义

目的探讨肺炎支原体肺炎（MPP）患儿外周血TNF-α、IL-6、IL-8及T细胞亚群（CD3＋/CD4＋/CD8＋）变化和临床意义。方法选择25例正常患儿作为对照组,25例轻症MPP作为实验A组,25例重症MPP为实验B组,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定外周血TNF-α、IL-6、IL-8浓度变化以及采用流式细胞术测定外周血T淋巴细胞亚群（CD3＋/CD4＋/CD8＋）的表达水平。结果 MPP患儿急性期外周血TNF-α、IL-6、IL-8浓度明显高于对照组,且实验B组显著高于实验A组,P〈0.05;MPP患儿CD3＋、CD3＋CD4＋细胞百分率及CD4＋/CD8＋比对照组明显降低,实验B组比实验A组显著下降,P〈0.05。结论 MPP患儿病情严重程度与TNF-α、IL-6、IL-8浓度变化呈正相关,与T细胞亚群CD3＋、CD3＋CD4＋细胞百分率及CD4＋/CD8＋变化呈负相关。     

肺表面活性物质对哮喘T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响

目的观察肺表面活性物质（PS）对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响,揭示PS对CD4＋、CD8＋T细胞增殖周期的具体作用机制及其在哮喘治疗中的意义。方法利用细胞培养技术,通过体外PS干预,流式细胞仪测定经PS干预和未经PS干预的CD4＋、CD8＋T细胞的细胞周期分布和CD4＋、CD8＋T细胞内细胞周期调节蛋白p27kip1、cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达水平。结果哮喘患者CD4＋、CD8＋T细胞分别与PS体外共同培养后,加PS组的S期、G2/M期的CD4＋T比例显著低于对照组（P〈0.01）;G0/G1期的CD4＋T细胞比例显著高于对照组（P〈0.01）。加PS组的S期CD8＋T比例显著低于对照组（P〈0.01）;G2期的CD8＋T细胞比例略低于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）;G0/G1期的CD8＋T细胞比例高于对照组（P〈0.05）。CD4＋T细胞内p27kip1的表达水平高于对照组（P〈0.05）;CD4＋T细胞内cyclinE表达水平显著低于对照组（P〈0.01）;CD4＋T细胞内cyclinA、cyclinB的表达水平低于对照组（P〈0.05）。CD8＋T细胞内p27kip1的表达水平高于对照组（P〈0.05）;CD8＋T细胞内cyclinE、cyclinA表达水平低于对照组（P〈0.01）;CD8＋T细胞内cyclinB的表达水平与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 PS通过抑制CD4＋T细胞的正性细胞周期调节蛋白cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达和上调其负性细胞周期调节蛋白p27kip1的表达,抑制CD4＋T细胞的DNA合成和细胞分裂,进而抑制CD4＋T细胞增殖;通过下调CD8＋T细胞内cyclinE、cyclinA的表达,上调p27kip1的表达,抑制CD8＋T细胞DNA合成。     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者外周血T细胞亚群、NK细胞的变化及其与预后的关系

[目的]探讨HBV相关慢加急性（亚急性）肝衰竭（HBV-ACLF）患者外周血T细胞亚群、NK细胞的变化趋势及其与预后的关系。[方法]选取HBV-ACLF患者46例,慢性乙型肝炎（CHB）患者40例,健康志愿者20例,采用流式细胞仪检测外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞及NK细胞计数,用SPSS 18.0软件对其进行统计学分析。[结果]HBV-ACLF组外周血CD3＋、CD4＋T细胞、NK细胞计数与慢性乙肝组、健康对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）;HBV-ACLF组外周血CD8＋T细胞与健康对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）。HBVACLF患者死亡组中CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞及NK细胞计数均低于存活组,2组CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞比较差异有统计学意义（P〈0.01）。[结论]HBV-ACLF患者存在T细胞亚群失衡和细胞免疫紊乱,提示细胞免疫参与了HBV-ACLF的发病和进展。     

肺癌患者外周血细胞亚群及其与临床关系分析

目的分析肺癌患者外周血T细胞亚群及NK细胞活性的表达,研究其与肺癌患者临床分期及化疗的关系。方法分析2009年6月至2010年7月苏州大学附属第一医院收治的89例肺癌患者及30例健康体检者外周血中流式细胞仪（flowcytometry,FCM）检测的T细胞亚群及NK细胞活性及血中CEA含量。结果Ⅰ~Ⅱ期、不同病理分化级别及CEA正常范围内的肺癌患者外周血各细胞亚群分布与健康对照组无统计学差异;Ⅲ~Ⅲ期及CEA升高肺癌患者CD4＋、CD4＋/CD8＋、CD2＋8细胞比值下降（P〈0.05）,CD8＋、CD4＋、CD2＋5细胞比值升高（P〈0.05）,NK细胞比例较健康对照组无统计学差异。化疗2周后患者外周血CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋、CD2＋8比值降低（P〈0.01）,CD8＋、CD4＋、CD2＋5细胞比值升高（P〈0.01）,NK细胞比例升高。结论肺癌患者免疫功能存在一定抑制,Ⅲ~Ⅳ期及CEA升高的患者免疫抑制更明显,化疗后患者各细胞亚群分布较前并未得到改善,甚至恶化。     

热疗对NSCLC化疗患者T淋巴细胞亚群及NK细胞的影响

目的探讨热疗辅助治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的临床效果及机制。方法将58例NSCLC患者随机分为观察组和对照组各29例,分别予热疗联合化疗及单纯化疗。采用流式细胞仪检测两组治疗前后T淋巴细胞亚群和NK细胞。结果两组治疗后CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD3＋、NK细胞均高于治疗前,CD;低于治疗前（P〈0．05）;观察组治疗后CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋、NK细胞均高于对照组治疗后,CD8＋低于对照组治疗后（P〈0．05）。观察组有效者CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋、NK细胞均高于对照组有效者,CD8＋低于对照组有效者（P〈0．05）。结论NSCLC患者普遍存在T淋巴细胞亚群及NK细胞功能低下,化疗可有效改善T淋巴细胞亚群及NK细胞功能,同时配合热疗可以更好的发挥两者的协同和相加作用,最大程度的提高患者的细胞免疫功能,增强疗效。     

Graves眼病患者T细胞亚群与自身免疫抗体相关关系的研究

目的通过研究早期Graves眼病（GO）患者（病程〈2年）的T细胞亚群与TRAb、TMA、TGA等自身免疫抗体之间的关系，探讨免疫机制在早期GO发病机制中的作用。方法（1）采用流式细胞仪检测早期Graves眼病和正常对照组各20例的T细胞亚群及CD4^＋／CD8^＋T细胞的百分含量。（2）检测早期GO患者的TRAb、TMA、TGA并与T细胞亚群、CD4^＋／CD8^＋T细胞之间的关系进行直线相关分析。结果（1）在早期GO患者中，CD4^＋T细胞和CD4^＋／CD8^＋T细胞比值增高（P均〈0．05）。（2）早期GO组中T细胞亚群、CD^＋／CD8^＋T细胞的百分含量与TRAb、TMA、TGA之间无显著相关关系（P均〉0．05）。结论在早期GO患者中，①存在着T细胞亚群的失衡，这在Graves眼病的发病机制中起了重要作用；②其T细胞亚群改变与甲状腺自身免疫抗体及其他自身免疫抗体之间无显著相关关系。     

胃癌患者手术前后外周血CD28及T细胞亚群检测的临床意义

目的探讨胃癌患者手术前后外周血CD28和T淋巴细胞亚群的表达变化及其意义。方法采用流式细胞仪检测55例胃癌患者（胃癌组）手术前后外周血CD28和T淋巴细胞亚群变化,并与40例健康体检者（对照组）及41例胃良性肿瘤患者（良性组）比较。结果胃癌组术前CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋、CD8＋CD2＋8水平明显低于、CD8＋水平显著高于术后及对照组、良性组,（P〈0.05）;分期Ⅲ、Ⅳ患者CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋、CD8＋CD2＋8水平明显低于、CD8＋水平显著高于Ⅰ、Ⅱ期者（P〈0.05）;结论胃癌患者CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋、CD8＋CD2＋8表达水平低下,影响B7-CD28共刺激通路,使T细胞不能有效的清除肿瘤,手术切除肿瘤有助于改善患者的细胞免疫功能。     

恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群及Treg细胞检测的临床应用

目的探讨恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞及调节性T细胞（Treg细胞）的变化及其检测的临床应用。方法应用免疫荧光技术和流式细胞仪检测80例恶性肿瘤患者及40例健康人外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞及CD4＋CD2＋5Treg细胞的百分数并对结果进行统计学分析。结果治疗前,恶性肿瘤患者组外周血CD3＋、CD4＋/CD3＋、CD1＋6＋CD5＋6/CD3-NK细胞百分数较正常对照组降低（P〈0.05）,CD8＋/CD3＋、CD4＋CD2＋5Treg细胞较对照组升高（P〈0.05）;化疗后患者外周血CD4＋CD2＋5Treg细胞比例较治疗前下降（P〈0.05）。结论恶性肿瘤患者存在免疫功能紊乱,外周血淋巴细胞亚群检测,尤其是NK细胞及Treg细胞用于肿瘤的监测有助于恶性肿瘤患者病情及疗效的判断。     

ITP血小板特异性抗体和T淋巴细胞亚群及NK细胞变化的意义探讨

目的：检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者抗血小板膜糖蛋白（GPⅡb／Ⅲa、GPⅠb／Ⅸ）特异性抗体表达、T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化,探讨相关因素在ITP发病机制中的作用。方法：应用改良血小板抗原单克隆抗体固相化检测技术（MAIPA）、流式细胞术分别检测52例ITP和24例正常对照组抗血小板膜糖蛋白（GPⅡb／Ⅲa、GPⅠb／Ⅸ）特异性抗体表达、T淋巴细胞亚群及NK细胞变化。结果：ITP组的血小板计数明显低于正常对照组（P〈0．05）;抗GPⅡb／Ⅲa及GPⅠb／Ⅸ抗体A值均高于正常对照组（P〈0．05）;相关分析表明ITP组血小板计数与两种特异性抗体水平均呈负相关关系;在T淋巴细胞亚群变化中,ITP组CD3^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋T淋巴细胞百分比及CD4^＋／CD8^＋的比值均明显低于正常对照组（P〈0．05）,CD8^＋T淋巴细胞百分比则显著高于正常对照组（P〈0．05）;NK细胞百分比明显低于正常对照组（P〈0．05）。结论：血小板特异性抗体及T淋巴细胞亚群的变化可较好地反映ITP这一病理过程,对提高诊断水平及指导临床有一定的实用价值。     

成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者外周血T细胞亚群变化及意义

目的探讨T细胞亚群变化在成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）发病中的作用。方法应用流式细胞技术测定24例LADA患者（LADA组）、18例速发性1型糖尿病（T1DM）者（T1DM组）及20例健康人（对照组）T细胞表面分子CD4^＋、CD8^＋,以百分比表示各表面分子阳性T细胞占外周血淋巴细胞的比例;测定胰岛功能相关指标[空腹C肽（FC-P）和糖负荷后2h C肽（2h—CP）、胰岛素释放指数（HOMA-IS）]的相关性。结果LADA与T1DM组C1MT细胞、CD4^＋／CD8^＋值明显高于对照组（P〈0．01）,LADA与T1DM元显著差异。CD4^＋T细胞2h-CP呈明显负相关。结论T淋巴细胞亚群失衡参与介导了胰岛β细胞的损伤和LADA的发生,     

慢性HBV感染者CD8^＋ T细胞免疫反应的研究

目的观察不同慢性HBV感染者外周血CD8^＋ T细胞的细胞内毒性颗粒和细胞因子的表达水平。方法用rHBcAg作为刺激剂,采用免疫荧光染色结合流式细胞术分析慢性乙型肝炎中度、重度患者以及无症状HBV携带者外周血CD8^＋ T细胞的IFN-γ/IL-4和穿孔素/颗粒酶B表达水平。结果慢性乙型肝炎重度患者CD8^＋T细胞的穿孔素及颗粒酶B百分率显著高于正常对照（P〈0.01）和HBV携带者（P〈0.05,P〈0.01）,中度患者显著高于正常对照（P〈0.05）。2组慢性乙型肝炎IFN-γ＋/CD8^＋ T细胞（Tc1）百分率均高于正常对照和HBV携带者（P〈0.05）。HBV携带者CD8^＋T细胞的穿孔素和颗粒酶B表达以及Tc1百分率与健康对照差异无统计学意义。IL-4^＋/CD8^＋ T细（Tc2）表达各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CD8^＋ T细胞中穿孔素/颗粒酶B表达率的增加以及Tc1细胞增加与慢性HBV感染的肝损伤有关。     

乙型肝炎患者外周血B淋巴细胞检测的意义

目的探讨乙型肝炎患者外周血B淋巴细胞计数与乙型肝炎发病的关系。方法使用流式细胞术检测80例急、慢性乙型肝炎患者B淋巴细胞和T淋巴细胞亚群,并同期检测患者血清AST和ALT。以20例健康成人作为研究对照。结果急性乙型肝炎组B淋巴细胞数为11.8±6.1%,健康对照组为11.5±3.9%（P〉0.05）;慢性乙型肝炎组B淋巴细胞数为17.9±8.1%,明显高于健康对照组和急性乙型肝炎组（均为P〈0.01）;健康对照组B淋巴细胞数与CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞数均无显著相关性（均为P〉0.05）;急性乙型肝炎组B淋巴细胞数与CD3＋、CD4＋细胞数无显著相关性（均为P〉0.05）,但与CD8＋细胞数呈显著负相关（P〈0.05）;慢性乙型肝炎组B淋巴细胞数与CD3＋细胞数呈显著负相关（P〈0.01）,与CD4＋、CD8＋细胞数均呈显著负相关（均为P〈0.05）。高水平B淋巴细胞数患者血清AST和ALT显著高于低水平者（分别为t=2.07,P〈0.05和t=2.18,P〈0.05）。结论慢性乙型肝炎患者外周血B淋巴细胞数量显著升高,其意义还有待进一步探讨。     

胃癌患者手术前后外周血T细胞亚群分布变化及意义

目的观察原发性胃癌患者手术前后外周血T细胞亚群分布变化及其意义。方法采用流式细胞术检测42例胃癌患者（胃癌组）手术前后及20例健康献血者（对照组）外周血T细胞亚群CD4^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD4^＋的水平。结果与对照组相比,胃癌组术前外周血CD4^＋细胞减少、CD4^＋／CD4^＋降低,而CD8^＋增多,P均〈0．05。与术前相比,胃癌组患者术后CD4^＋细胞增多、CD4^＋／Cd4^＋增高,CD8^＋细胞减少,P均〈0．05。结论胃癌患者外周血T细胞亚群分布异常,手术可逆转此异常。     

慢性乙肝患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞检测分析

探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血中的表达和临床意义。采用流式细胞术检测128例CHB、肝硬化患者和30例正常人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达。结果显示CHB临床各型CD4^＋CD25^＋调节性T细胞均高于对照组,其中CHB中度、重度组与对照组比较升高显著（P〈0．05或P〈0．01）。HBeAg阳性组与HBeAg阴性组和对照组比较升高显著（P〈0．01）。因此认为CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在CHB发病过程中可能起着重要的作用,进一步研究其在CHB发病机制中所发挥的作用,将有助于我们更清楚的了解CHB的发病机制,为CHB的免疫治疗提供新的思路。     

未经治疗的潜伏梅毒患者外周血淋巴细胞亚群的变化及意义

目的了解未经治疗的潜伏梅毒患者外周血淋巴细胞亚群的变化,并探讨其临床意义。方法对41例未经治疗的潜伏梅毒患者及29例健康对照者的抗凝全血,采用流式细胞仪检测相关淋巴细胞亚群（包括T淋巴细胞亚群、NK细胞及B细胞）,比较两组间的差异,并对其血清学滴度的变化进行相关性分析。结果潜伏梅毒患者CD4＋T淋巴细胞数、CD4＋/CD8＋比值均低于正常对照组（P〈0.01）,CD8＋T淋巴细胞数明显高于对照组（P〈0.01）;CD3＋、CD1＋9、CD1＋6CD5＋6与正常对照组相比无显著性差异（P〉0.05）;梅毒血清学滴度与CD4＋T淋巴细胞数量呈负相关。结论未经治疗的潜伏梅毒患者淋巴细胞亚群失衡,存在细胞免疫抑制。     

老年原发性高血压患者外周血淋巴细胞亚群及活化状态的研究

目的：探讨老年原发性高血压患者外周血淋巴细胞亚群活化状态变化。方法采用流式细胞术检测65岁以上老年原发性高血压患者（观察组）170例和体检健康者（对照组）50例外周血淋巴细胞亚群以及活化状态。结果观察组B淋巴细胞表达的 CD3-CD19＋高于对照组,T 淋巴细胞活化表达的 CD3＋CD8＋CD38＋高于对照组,CD3＋HLA- DR＋, CD3＋CD8＋HLA- DR＋以及NK细胞表达的CD16＋CD56＋高于对照组（均P＜0.05）。T淋巴细胞表达的CD3＋低于对照组（均P＜0.05）。T细胞亚群表达的CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋比例下降,调节性T细胞CD3＋CD4＋CD25＋比例上升,但与对照组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论老年原发性高血压患者B淋巴细胞、NK淋巴细胞和CD8＋T细胞的活化能力显著增加。     

婴儿巨细胞病毒性肝炎抗病毒治疗前后血T细胞亚群和尿CMV DNA变化

目的研究婴儿巨细胞病毒（CMV）肝炎治疗前后血T细胞亚群和尿CMV DNA的变化及临床意义。方法选择CMV肝炎患儿46例,CMV无症状性感染患儿20例,健康查体婴儿20例,比较3组间尿CMV DNA含量和血T细胞亚群的差异。比较46例CMV肝炎患儿治疗前后血T细胞亚群和尿CMV DNA的水平。结果 CMV肝炎患儿组尿CMV DNA含量明显高于CMV无症状性感染组和健康对照组,差异有统计学意义（t=2.375、P〈0.05;t=16.27、P〈0.01）。CMV肝炎患儿组CD4^＋T淋巴细胞的水平和CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞的比值较无症状性感染组和健康对照组均降低,CD8^＋T淋巴细胞水平较其他组升高,差异有统计学意义。CMV肝炎患儿抗病毒治疗后,尿CMV DNA含量明显下降,CD4^＋T淋巴细胞的水平和CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞的比值较治疗前升高,差异有统计学意义,CD8^＋T淋巴细胞水平较治疗前明显下降,差异有统计学意义。结论 CMV肝炎患儿细胞免疫功能受损。抗CMV治疗能有效改善患儿的细胞免疫功能,治疗前后监测血T细胞亚群和尿CMV DNA变化对判断预后和指导临床治疗有重要意义。     

多发性骨髓瘤患者T细胞共刺激分子表达和调节性T细胞检测及意义

目的通过检测多发性骨髓瘤患者外周血T细胞共刺激分子CD28表达及CD4^＋CD25^high调节性T细胞（Tregs）水平,探讨其免疫功能状态及临床意义。方法采用流式细胞术检测38例多发性骨髓瘤患者及20例健康志愿者外周血T细胞亚群cD。表达和CD4^＋CD25^high Tregs水平。分别采用透射免疫比浊法、溴甲酚绿法及速率法测定患者血清β2-微球蛋白（β2--MG）、白蛋白（Alb）及乳酸脱氢酶（LDH）水平。结果与正常对照组相比,多发性骨髓瘤患者外周血CD4＋T细胞百分率降低、CD8^＋T细胞百分率升高、CD4／CD8比值降低（P〈0．05或P〈0．01）,进一步研究发现CD4^＋和CD8^＋T细胞CD28表达均较对照组明显下降,而CD4^＋CD25^high Tregs百分率显著升高（P〈0．05,P〈0．01）。CD4^＋和CD8^＋T细胞CD28表达在进展期明显低于稳定期（P均〈0．01）,而CD4^＋CD25^high Tregs在稳定期和进展期间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。多发性骨髓瘤患者CD4^＋T细胞CD28表达、CD8^＋T细胞C28表达均与其血清β2-MG水平呈负相关,而与Alb水平呈正相关（P〈0．05,P〈0．01）,CD4^＋CD25^high Tregs与Alb水平呈负相关（P〈0．05）。结论多发性骨髓瘤患者存在T细胞亚群共刺激分子CD28表达缺陷和CD4^＋CD25^high Tregs扩增,并与病情进展及预后存在一定相关性。     

肺炎支原体肺炎合并心肌受损患儿免疫功能分析

目的探讨肺炎支原体肺炎（MPP）合并心肌受损患儿免疫功能状态。方法选择MPP合并心肌受损的患儿30例为研究组,选择未合并心肌受损的30例MPP患儿作为对照组。在流式细胞仪上检测外周血T淋巴细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋。采用ELISA法测定IL-2和IL-4含量。结果与对照组比较,研究组CD3^＋和CD4^＋细胞表达率明显降低（P均〈0.05）;CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋细胞稍有降低,但差异无统计学意义（P均〉0.05）;血清IL-4水平明显升高（P〈0.05）;血清IL-2水平明显降低（P〈0.05）。结论 MPP合并心肌受损患儿T淋巴细胞活化功能被抑制程度更明显,Th1功能亢进而Th2功能抑制。     

β-arrestin 2对急性支气管哮喘小鼠模型脾CD4^＋T细胞T-bet表达的影响

目的探讨β-arrestin 2在急性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠模型脾CD4＋T细胞中的表达及对T-bet表达的影响。方法建立急性哮喘小鼠模型,免疫磁珠分离小鼠脾源性CD4＋T细胞,RNA干扰β-arrestin 2的表达后,检测CD4＋T细胞β-arrestin 2、T-bet mRNA和蛋白的表达。结果 siRNA-β-arrestin 2-1123沉默效果最佳,相对于未转染siRNA的哮喘组及其他siRNAβ--arrestin 2转染组,β-arrestin 2 mRNA明显降低（P〈0.01）;哮喘小鼠模型脾CD4＋T细胞β-arrestin 2蛋白的表达明显高于正常组（P〈0.01）;β-arrestin 2沉默后,哮喘小鼠脾CD4＋T细胞T-bet mRNA和蛋白的表达明显升高（P〈0.05）。结论β-arrestin 2可能通过抑制小鼠CD4＋T细胞T-bet的表达参与哮喘的发病。