顺铂增强食管癌相关基因2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

 摘要：目的:探讨食管癌相关基因2（esophageal cancer-related gene 2,ECRG2）蛋白联合顺铂（cisplatin, DDP）化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色法检测二者对EC9706细胞凋亡的影响;Western blotting检测二者对EC9706细胞中p53蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示,ECRG2蛋白可抑制EC9706细胞增殖,ECRG2蛋白和DDP联用后抑制细胞增殖作用增强,且在一定浓度范围内呈时间、剂量依赖关系。Hoechst 33258染色显示,ECRG2蛋白和DDP联合作用24 h后EC9706细胞凋亡数目多于单用ECRG2蛋白。Western blotting结果提示ECRG2蛋白和DDP联合用药较单用ECRG2蛋白明显上调p53蛋白的表达。结论: DDP 可增强ECRG2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,其增强诱导EC9706细胞凋亡的机制可能与上调p53蛋白的表达有关。     

p16和p27表达对前列腺癌细胞系的作用

目的 探讨p16和p27Kip1 基因蛋白对抑制前列腺癌细胞增殖和调控其凋亡的作用.方法 构建携带人P16和p27基因的腺病毒载体,转染体外培养的前列腺癌细胞系PC-3,采用RT-PCR、Western blot检测目的 基因的表达.通过细胞生长试验、流式细胞仪检测PC-3转染前后细胞增殖和凋亡的变化.结果 病毒滴度Ad-p16为115×10^8 pfuPml 、Ad-p27为112×10^9 pfuPml ,RT-PCR 检测可见p16-mRNA（520bp）和p27Kip12mRNA （320bp）表达,Western blot检测有p16 蛋白（65KD）和P27蛋白（27KD） 特异表达,并可明显抑制PC-3细胞的增殖,诱导其凋亡,联合基因治疗组与单基因组相比差异显著（P＜0.01）.结论 p16和p27可明显抑制前列腺癌细胞株PC-3的增殖,增加细胞的凋亡,转染携带p16和p27的重组腺病毒载体有望成为治疗前列腺癌的有效方法.     

干扰素-α联合高三尖杉酯碱下调K562细胞端粒酶逆转录酶及端粒酶活性诱导细胞凋亡

目的：研究干扰素-α(IFN-α)联合高三尖杉酯碱(HHT)对K562细胞端粒酶逆转录酶及端粒酶的作用，并探讨其与细胞凋亡的关系。方法:IFN-α、HHT以及两药联合作用K562细胞后用MTT法检测细胞增殖，吉姆萨-瑞氏染色观察细胞形态，PI-Annexin VFITC双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡,Krupp改良的荧光素标记的端粒重复扩增方法(TRAP)检测K562细胞端粒酶活性，RT-PCR方法检测hTERT mRNA表达变化。结果:5×106U·L-1 IFN-α分别联合5-40 μg·L-1 HHT诱导K562细胞凋亡从而抑制其生长，单用HHT时IC50为27.35 μg·L-1，联用5×106 U·L-1 IFN-α后IC50降为18.72 μg·L-1；IFN-α与HHT联用明显下调hTERT mRNA表达并抑制K562细胞的端粒酶活性。结论：IFN-α联合HHT可以诱导细胞凋亡，这可能与下调细胞hTERT mRNA的表达水平，抑制端粒酶活性有关。两药联合作用强于单独用药，提示临床IFN-α联合HHT治疗慢性髓细胞白血病（CML）可能比单用HHT效果更好。     

腺病毒介导的IL-24表达对PC-3人前列腺癌细胞体内外抑癌效应

目的:研究腺病毒介导的IL-24基因表达对前列腺癌细胞体内外的抑癌效应及分子机制。方法:将扩增的Ad-IL-24感染PC-3细胞,用RT-PCR和Western blot法检测IL-24基因在PC-3细胞中的表达;MTT法检测IL-24基因表达对PC-3细胞的生长影响;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡变化;RT-PCR法检测IL-24基因的表达对PC-3细胞中的Bcl-2、Bax、p53和Caspase3凋亡相关基因表达的影响。用Ad-IL-24在裸鼠PC-3移植瘤的瘤体内注射治疗,通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、CD34等与细胞凋亡和血管形成相关因子的表达。结果:IL-24基因在PC-3细胞中成功表达,对PC-3细胞增殖有明显抑制作用,可上凋p53、Bax、Caspase-3基因和下凋Bcl-2基因表达,进而诱导细胞凋亡。Ad-IL-24能显著抑制裸鼠前列腺癌移植瘤生长,瘤重的抑制率可达54%;免疫组化结果显示Ad-IL-24不仅能明显上调Bax和Caspase-3基因和下调Bcl-2基因表达,而且能引起与血管形成标记基因CD34表达水平下降。结论:腺病毒介导的IL-24基因表达在体内外可明显抑制PC-3细胞的生长,诱导其凋亡。其机制可能与上凋P53、Bax、Caspase-3基因和下凋Bcl-2和CD34基因表达水平有关。     

氟伐他汀对大鼠心肌梗死后左室重构及caspase-3表达的影响

目的：观察氟伐他汀对大鼠心肌梗死后左室重构及凋亡基因caspase-3的影响。 方法： 复制心肌梗死动物模型，实验分为4组，Ⅰ组假手术组，Ⅱ组假手术+氟伐他汀组，Ⅲ组模型组，Ⅳ组模型+氟伐他汀组。Ⅱ和Ⅳ组术后给氟伐他汀10 mg·kg^-1·d^-1共4周，观察左室结构及心动超声变化，心肌羟脯氨酸含量及caspase-3表达。 结果： Ⅳ组心肌超微结构和左室重构指标改善程度明显高于Ⅲ组，羟脯氨酸含量及免疫组化caspase-3阳性细胞明显少于Ⅲ组（P<0.05），RT-PCR caspase-3 mRNA表达也明显少于Ⅲ组（P<0.05）。 结论： 氟伐他汀能改善大鼠心梗后左室重构，并下调凋亡基因caspase-3表达，抑制细胞凋亡。     

阿司匹林增强TRAIL诱导的HepG-2细胞凋亡

目的:研究阿司匹林能否增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导的HepG-2细胞凋亡,并初步探讨其作用机制。方法:HepG-2细胞放入含15%胎牛血清的DMEM培养液中培养,改良苯酚-品红染色观察细胞形态变化,MTT法检测细胞增殖程度,TUNEL法检测细胞凋亡指数,RT-PCR检测细胞中survivinmRNA的表达水平,FCM检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:不同浓度的阿司匹林联合TRAIL实验组细胞增殖抑制率明显高于空白对照组及TRAIL和阿司匹林单独用药组,且细胞凋亡指数也明显提高,凋亡率与阿司匹林的浓度呈现剂量依赖关系,联合用药组凋亡相关基因survivin的表达与空白对照组和TRAIL和阿司匹林单用组相比明显下调。结论:阿司匹林能够增强TRAIL诱导的HepG-2细胞凋亡,其作用机制可能与survivin基因的表达下调有关。     

E2F陷阱DNA对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的诱导

目的：为观察转录因子E2F陷阱DNA 对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M增殖和凋亡的影响。方法：采用脂质体lipofectamine将E2F decoy DNA、ARE decoy DNA和control decoy DNA分别转染PC-3M细胞，MTT检测其对细胞增生的影响，倒置相差显微镜观察细胞形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡率，并进行染色体DNA断裂的测定；通过RT-PCR检测转染的PC-3M细胞中c-Myc mRNA、cyclin D1 mRNA表达水平的变化，通过Western blotting检测细胞中c-Myc蛋白、cyclin D1蛋白表达水平的变化。结果：E2F decoy DNA转染后的PC-3M细胞的生长受到明显抑制;转染后的细胞形态变化符合凋亡的典型改变，染色体断裂明显,细胞凋亡率为26.35%；c-Myc、cyclin D1的表达受到抑制。结论：E2F decoy DNA可诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M凋亡和抑制细胞增殖,其机制可能涉及到c-Myc mRNA、cyclin D1的表达变化。     

p53AIP1基因转染对PC-3M人前列腺癌细胞生物学特性的影响

目的观测p53调节的凋亡诱导蛋白1(p53AIP1)对PC-3M人前列腺癌细胞的增殖、细胞周期、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法构建真核载体pDC316-p53AIP1,并进行双酶切及PCR鉴定。在LipofectamineTM2000介导下转染至体外培养的PC-3M人前列腺癌细胞系中,Western blot法检测其表达,CCK-8法检测PC-3M细胞增殖情况,流式细胞术分析PC-3M细胞周期变化和annexinV-FITC/PI结合流式细胞术凋亡情况,TranswellTM实验检测p53AIP1对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建了pDC316-p53AIP1真核表达载体,重组质粒转染PC-3M细胞后,Western blot法检测p53AIP1在PC-3M细胞中有表达,CCK-8结果显示表达的p53AIP1能抑制PC-3M细胞增殖(P0.05),流式细胞术检测细胞周期阻滞在S/G2-M期(P0.05)且p53AIP1能促进PC-3M细胞凋亡,TranswellTM侵袭和迁移实验显示p53AIP1使细胞侵袭迁移能力均降低(P0.05)。结论p53AIP1抑制PC-3M细胞的周期、增殖、侵袭及迁移,并能促进其凋亡。     

3-甲基腺嘌呤对顺铂诱导HeLa细胞凋亡的影响

目的 采用自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬,观察其对顺铂(DDP)诱导HeLa细胞凋亡的影响,探讨自噬在DDP诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用.方法 用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察3-MA对DDP抑制HeLa细胞生长情况的影响;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;间接免疫荧光法检测自噬标志蛋白LC3和p62的变化;Hoechst荧光染色检测细胞凋亡.结果 MTT法显示,3-MA与DDP联合应用导致HeLa细胞生长抑制率增加;光镜结果显示,3-MA与DDP联合应用加剧了HeLa细胞收缩变圆,促进死亡;间接免疫荧光法检测到3-MA与DDP联合应用减弱了DDP诱导的HeLa细胞LC3聚集及其与p62的共定位;Hoechst荧光染色检测到3-MA与DDP联合应用增加HeLa细胞凋亡率.结论 3-MA抑制自噬能够促进DDP诱导HeLa细胞发生凋亡.     

单细胞蛋白质组图谱鉴定3,3′-二吲哚甲烷诱导乳腺癌的干细胞特性

目的 3,3’-二吲哚甲烷（DIM）是一种由吲哚-3-甲醇转化而来的二聚体化合物，被认为在乳腺癌化学预防药物具有应用前景。本研究首次从单细胞水平探讨了DIM诱导乳腺癌干细胞（CSC）的可塑性。方法 采用MTT法检测细胞增殖。流式细胞仪检测MCF-7细胞周期分布和凋亡情况。采用单细胞质谱流式技术（CyTOF）检测DIM诱导的MCF-7细胞的单细胞蛋白质组学特征及其对CSCs的可塑性。结果 DIM呈浓度依赖性抑制MCF-7细胞增殖。当DIM浓度为10、20、30μmol/L时，DIM分别诱导7%、11.3%和15%的细胞凋亡，S期细胞比例分别由16.6%降至15.1%、14%和8.5%，流式细胞仪检测结果显示，DIM处理后MCF-7细胞CD133+Nanog+亚群比例明显增加。SPADE分析显示DNA损伤和凋亡阳性细胞主要发生在干性标志表达相对较低的类群中。通过t-SNE分析，DIM诱导的信号通路蛋白在非CSC样细胞和CSC样细胞中的变化模式有显著差异。结论 上述结果提示DIM在抑制MCF-7细胞增殖的诱导肿瘤干细胞的可塑性。     

威麦宁对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响(英)

目的：探讨威麦宁对小鼠Lewis肺癌的抑制作用，并检测其对细胞周期的影响。 方法:采用流式细胞术分析、免疫组化法检测药物对模型鼠肿瘤细胞周期及对cyclin D1表达的影响。 结果:威麦宁浓度在100 mg·kg^-1·d^-1、150 mg·kg^-1·d^-1、200 mg·kg^-1·d^-1、250 mg·kg^-1·d^-1时，对小鼠Lewis肺癌的抑制率分别为19.14%、33.59%、40.63%、51.56%, 药物对肿瘤的抑制作用具有剂量依赖性；该药物可将肿瘤细胞阻滞在G₀-G₁期，并降低肿瘤细胞cyclin D1的表达（P<0.01）。 结论:威麦宁对小鼠Lewis肺癌抑制作用的机制之一可能是通过降低肿瘤细胞cyclin D1的表达，将肿瘤细胞阻止于G₀-G₁期，使细胞不能进入S期进行DNA复制，从而抑制肿瘤的生长。     

人参单体皂甙Rh2增强顺铂对PC-3M致凋亡效应的研究

目的:探讨人参单体皂甙Rh₂与顺铂(DDP)联合应用对前列腺癌细胞株PC-3M细胞凋亡的影响。方法:应用MTT实验检测细胞生长抑制率,NP-40快速分离片段化DNA电泳、流式细胞计量术观察PC-3M细胞凋亡的变化。结果:15.0mg/LRh₂与0.4mg/LDDP联合给药:①可使0.4mg/LDDP的肿瘤细胞生长抑制率由25.0%提高到61.0%,增加了1.44倍;②凋亡片段化DNA电泳检测显示较二者单独给药时更明显的DNA凋亡梯形电泳带;③可使0.4mg/LDDP诱导PC-3M细胞凋亡率从0.3%提高到52.2%,相当于其10倍剂量4.0mg/LDDP的诱导凋亡效应(57.4%),明显高于Rh₂单独应用的凋亡率13.6%(P＜0.01)。结论:Rh₂能显著增强DDP对PC-3M前列腺癌细胞的致凋亡效应。     

益气活血解毒方对小鼠Lewis肺癌生长转移及血管生成的作用

目的：研究益气活血解毒方对小鼠Lewis肺癌生长及自发性肺转移的作用并探讨其作用机制。方法:复制小鼠Lewis肺癌模型并随机分组,腹腔注射给药 10 d 后，观察抑瘤率，HE染色观察瘤组织病理学变化，免疫组化法检测瘤组织增殖细胞核抗原（PCNA）的表达；给药 20 d 后，观察肺转移瘤结节数、瘤组织微血管密度（MVD），免疫组化法和ELISA法分别检测瘤组织及血清血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果:益气活血解毒方能减少小鼠Lewis肺癌肿瘤重量和肺转移灶数，高低剂量(24 mg·kg^-1·d^-1,12 mg·kg^-1·d^-1)抑瘤率分别为48.29%、37.26%，肺转移结节数分别为1.67、3.50，对照组为6.44；并能抑制肿瘤细胞PCNA的表达，降低肿瘤组织微血管密度,抑制肿瘤细胞及血清中VEGF的表达。结论:益气活血解毒方能抑制小鼠Lewis肺癌的生长与转移,其机制可能与抑制VEGF表达,减少肿瘤血管生成有关。     

利福平对鱼藤酮处理的大鼠多巴胺神经元的保护作用

目的：观察利福平对鱼藤酮诱导帕金森病大鼠模型多巴胺神经元的保护作用以及对α-突触核蛋白形成和聚集的抑制作用。方法: 持续3周给SD大鼠背部皮下注射鱼藤酮（1.5 mg·kg^-1·d^-1）以诱导其黑质多巴胺神经元丢失的同时，应用利福平（30 mg·kg^-1·d^-1）灌胃给药，并通过对大鼠进行行为学、黑质病理学、TH和α-突触核蛋白的免疫活性以及蛋白量的表达情况等方面的检测以证明利福平对帕金森病动物模型多巴胺神经元具有保护作用，对α-突触核蛋白的形成和聚集具有抑制作用。结果: 低剂量长期背部皮下注射鱼藤酮可诱导SD大鼠出现行为学、黑质病理学、TH及α-突触核蛋白的免疫活性和蛋白量的表达情况的改变，而应用利福平灌胃后这些变化均显著减少。结论: 利福平对鱼藤酮帕金森病大鼠模型的多巴胺神经元具有保护作用，此作用与其对模型中α-突触核蛋白的形成和聚集的抑制作用密切相关。     

吡格列酮对脂质灌注大鼠糖代谢和PPAR-γ表达的影响

目的：探讨吡格列酮 (Pio) 对游离脂肪酸诱导的胰岛素抵抗大鼠糖代谢和PPAR-γ表达的影响。方法:采用扩展正糖钳夹实验和［3-3H］标记葡萄糖示踪技术，观察了4 h脂质灌注导致大鼠血浆游离脂肪酸（FFA）升高引起糖代谢和脂肪组织PPAR-γ表达变化及Pio处理后的影响。 结果:在钳夹稳态期，对照组（N组）血浆FFA水平明显降低，而脂质灌注组（L组）和吡格列酮+脂质组（P/L组）FFA水平明显升高。 P/L组葡萄糖输注率(GIR)较N组明显降低（P<0.01）, 而L组又明显低于P/L组（P<0.01）；N组和P/L组肝糖输出 (HGP) 与基础值相比被明显抑制达85%（均P<0.01），在L组，胰岛素对HGP的抑制作用受到明显障碍（仅抑制8.7%）。L组和P/L组葡萄糖清除率（GRd）明显低于N组（P<0.01）。P/L组脂肪组织PPAR-γ表达明显增加。 结论:脂质灌注诱导了大鼠胰岛素抵抗。吡格列酮干预使大鼠脂肪组织PPAR-γ表达明显增加，并抑制了内源性肝糖产生，从而部分逆转了脂质诱导的胰岛素抵抗。     

西红花酸对H2O2诱发心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的影响

目的：探讨西红花酸对过氧化氢（H₂O₂）诱导的培养心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的作用。 方法： 通过光镜观察细胞形态、碘化丙啶（PI）染色法和流式细胞术相结合检测培养细胞凋亡率、免疫荧光染色法和流式细胞术相结合检测细胞中caspase-3、Bcl-2蛋白。 结果： 在本实验使用浓度范围内，各浓度H₂O₂组细胞形态明显改变、凋亡率明显高于正常对照组，1×10^-4 mol·L^-1 H₂O₂可使培养心肌细胞Bcl-2蛋白表达明显减少，而caspase-3表达明显增多；各剂量西红花酸组细胞形态学改变减少、凋亡率明显低于1×10^-4 mol·L^-1 H₂O₂组，细胞中Bcl-2蛋白减少幅度与caspase-3增加幅度均减小，且较高浓度（5×10^-5 mol·L^-1）西红花酸组比较低浓度（5×10^-7 mol·L^-1）西红花酸组作用也更明显（P<0.05）。 结论： 西红花酸能够减轻H₂O₂对培养心肌细胞的损伤性凋亡作用，可能与稳定细胞内凋亡相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2的功能有关。     

吡格列酮对高脂血症大鼠血管内皮功能的保护作用

目的： 用1种PPARγ激动剂吡格列酮，观察其能否逆转高脂血症大鼠的内皮功能障碍。方法: 将36只健康雄性Wistar大鼠随机分为6组（每组6只）：正常对照组（control），高脂血症组（HC，即溶剂对照组）及吡格列酮1.5 mg·kg^-1·d^-1组、3 mg·kg-1·d-1组、10 mg·kg^-1·d^-1组、20 mg·kg^-1·d^-1组（HC＋PIO）。通过比较给予累积浓度的ACh（内皮依赖性舒血管物质）和酸化NaNO₂（非内皮依赖性舒血管物质）后血管的舒张程度来反映血管内皮功能；使用MS2000生理信号记录分析系统记录的参数（包括±dp/dt_max）来判定心脏功能。结果: （1）高脂血症可以导致严重的血管内皮舒张功能障碍，给予10^-9-10^-5 mol/L累积浓度的ACh后，高脂血症组血管张力与正常对照组相比有显著差异，血管最大舒张程度由99.78%±3.01%降低到50.51%±2.45%（P<0.01），而给予10^-8-10^-4 mol/L累积浓度的酸化NaNO₂后，2组间的血管张力无明显差别（P>0.05）；（2）吡格列酮可以剂量依赖性地减轻高脂血症引起的血管内皮舒张功能失调，且10 mg·kg^-1·d^-1剂量组作用最明显；（3）吡格列酮在减轻血管内皮舒张功能障碍的同时，也减轻了高脂血症大鼠心功能的损伤。结论: 吡格列酮可以直接减轻高脂血症引起的血管内皮功能障碍，从而可能会有效预防随后发生的动脉粥样硬化及缺血性心脏病。     

阿托伐他汀对Lewis大鼠实验性自身免疫性心肌炎作用的研究

目的： 探讨阿托伐他汀对实验性自身免疫性心肌炎(EAM）大鼠Th1/Th2偏离的影响及对EAM的治疗价值。方法: 6-8周雄性Lewis大鼠31只，其中8只作为正常对照；23只以猪心肌肌球蛋白免疫制成EAM模型，免疫后随机分为阿托伐他汀大剂量（10 mg·kg^-1·d^-1）组、小剂量（1 mg·kg^-1·d^-1）组和未治疗组，连续用药 21 d。第 21 d，行超声心动图检测；取心肌组织，观察大体及镜下炎症程度；ELISA检测血浆IL-2、IL-4、IL-10及IFN-γ等细胞因子水平,并以IFN-γ/IL-4比值作为Th1/Th2偏离方向指标。结果: 阿托伐他汀使EAM大鼠心室肥厚减轻，LVEDd降低，射血分数增加；心脏重量/体重比值及炎症程度分级显著降低；Th1型细胞因子(IFN-γ, IL-2)水平降低，Th2型细胞因子水平(IL-4, IL-10)升高。3组间TC、TG及HDL-C水平未见明显差异。结论: 阿托伐他汀使Th1/Th2平衡向Th1方向偏离，抑制EAM炎症反应。表明阿托伐他汀的免疫调节效应及在自身免疫病治疗中的应用前景。     

猪肺表面活性物质对大鼠早期脂多糖性急性肺损伤的治疗作用

 目的： 观察猪肺表面活性物质（PPS）混悬液对大鼠早期脂多糖(LPS)性急性肺损伤（ALI）的治疗作用。方法： SD大鼠随机分为4组：生理盐水组、低、中、高3个不同剂量PPS给药组，各组动物均气道内滴注LPS 1.5 mg·kg-1,30 min后分别经气管滴注100 mg·kg^-1、150 mg·kg^-1、200 mg·kg-1PPS（PPS组）或等量生理盐水（对照组）。之后观察6 h，监测大鼠的PaO2和PaCO₂，计算各组大鼠存活率。大鼠处死后检测肺系数（LI），肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白(TP)含量，白细胞（WBC）数和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度，并观察肺病理组织学改变。结果： 与生理盐水组相比，LPS损伤大鼠早期气道内滴入外源性PPS可提高PaO₂，降低PaCO₂，提高存活率，减轻肺水肿及肺毛细血管膜的通透性，PPS150组、PPS200组的治疗效果优于PPS100组。结论： PPS早期给药对LPS气道内滴注致ALI具有明显的治疗作用。     

维生素K3对雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M细胞的凋亡诱导作用

目的： 观察维生素K3对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M的凋亡诱导作用。方法： MTT增殖抑制实验；吖啶橙染色检测细胞凋亡；流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化；NAC抗氧化试验；DCFH-DA荧光分光光度法检测细胞内活性氧簇（ROS）水平；RT-PCR检测GSH-Px和CAT基因表达的改变。结果： 60 μmol/L剂量以上的VK3均可以有效抑制PC-3M细胞的增殖，并且呈时间剂量依赖性；联合应用不同剂量NAC（5、10、20、40、80 μmol/L）与VK₃（60 μmol/L）共同作用于PC-3M细胞后，结果显示与单独应用VK3相比各浓度的NAC能不同程度增加细胞存活率；吖啶橙染色证明在VK₃（60 μmol/L）作用12 h后，PC-3M细胞出现凋亡的形态学改变；流式细胞计数结果显示VK₃（60 μmol/L）作用12 h后细胞出现凋亡峰，细胞周期被阻滞于G₀/G₁期；DCFH-DA荧光染色，在VK₃作用后1-2 h，细胞内即出现了较强的荧光表达；RT-PCR结果显示，在VK₃作用后细胞内的CAT和GSH-Px两种主要的抗氧化酶类表达降低。结论： VK₃可能主要通过引起PC-3M细胞内氧化应激诱导细胞发生凋亡。