几丁糖庆大霉素局部药物释放系统的临床应用研究

对几丁糖庆大霉素局部药物释放系统治疗慢性骨髓炎的疗效及体内动力学行为进行研究，为其临床推广应用提供理论依据。采用外科病灶清除术后残腔内置入几丁糖庆大霉素缓释药治疗慢性骨髓炎１８例。监测术后不同时间庆大霉素血药浓度，血尿素氮（ＢＵＮ）和肌酐（Ｃｒ）值，局部引流液中庆大霉素浓度。以术后切口愈合情况、临床表现和Ｘ线片评定疗效。结果，血药浓度峰值（０．８３μｇ／ｍｌ）在２４小时出现，维持时间为４天；术后ＢＵＮ和Ｃｒ值无增加；术后局部引流液中庆大霉素浓度为金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度数百倍。１８例患者均获随访，随访时间６个月～３４个月，平均２４．８个月。初期愈合１６例，无一例复发。认为，几丁糖庆大霉素缓释药是临床治疗慢性骨髓炎的有效方法，具有简便安全，且无需二期取出载体的优点，为临床推广应用提供了理论依据。     

几丁糖凝胶预防骨感染的实验研究

为了观察几丁糖凝胶对骨感染的影响，按Ｎｏｒｄｅｎ法制作兔金黄色葡萄球菌骨髓炎模型，随机分为几丁糖组、醋酸组及对照组，观察术后动物一般情况、Ｘ线片表现、骨培养及细菌计数。结果显示：几丁糖组骨感染率与其它两组无差别，但术后动物体重增加，Ｘ线片上病变程度减轻，细菌计数减少，明显优于其它两组。证明几丁糖对骨感染有一定的缓解作用。其原因可能与几丁糖具有抑菌作用、提高动物免疫机能及体内降解缓慢有关。     

几丁糖万古霉素缓释放系统的制备

目的：研制几丁糖万古霉素缓释放系统。方法：几丁糖作为药物缓释载体是一种良好生物相容性的氨基多糖，通过分子间交联，溶剂蒸发，和模具分隔技术，制成药物的缓释放系统。同时测定几丁糖万古霉素DDS的抑菌作用。结果：制备的几丁糖万古霉素DDS有效抑制金黄色葡萄球菌和大肠樾 菌10d。结论：几丁糖与万古霉素能有效结合，并能缓慢释放万古霉素，体外达到较持久的抑菌作用。     

几丁糖影响体外细胞生长的实验研究

用不同剂量的几丁糖溶液分别加入人成纤维细胞和表皮角化细胞于细胞培养液中,培养72小时,测定细胞数。结果:人成纤维细胞数随着几丁糖溶液剂量的增加而减少;人表皮角化细胞数随着几丁糖溶液剂量的增加,在一定范置内相应增加。从而肯定丁几丁糖溶液能抑制人成纤维细胞生长,促进人表皮角化细胞生长。     

几丁糖庆大霉素药物释放系统的研究

目的　研究几丁糖庆大霉素药物释放系统释放行为及临床应用疗效。　方法　以 3 0只家兔为实验对象 ,采用体外、体内释放实验评价几丁糖庆大霉素缓释药缓释效果 ;临床上采用几丁糖庆大霉素缓释药治疗慢性骨髓炎 18例 ,以术后切口愈合情况、临床表现和X线表现评定疗效。　结果　体外释放实验显示第 1天释放量为 92 6 7μg/颗 ,其后下降并以 4 0 μg·颗 -1·d-1较低水平稳定释放 ,达 2 5天以上 ;体内释放实验显示血药浓度峰值 ( 0 92 μg/ml)在 2 4h出现 ;术后血尿素氮 (BUN)和肌酐 (Cr)值无增加 ;术后第 8周 ,药棒周围骨组织中庆大霉素浓度仍在骨髓炎常见致病菌最小抑菌浓度 (MIC)以上。临床应用 18例患者均获随访 ,随访时间 6～ 3 4个月 ,平均 2 4 8个月。初期愈合率88 9% ( 16/ 18) ,无复发。　结论　几丁糖庆大霉素缓释药具有较好体内外缓释作用 ,临床上对于治疗骨感染有应用前景。     

RBX-庆大霉素药物释放系统的研制及体外释放实验

目的 :研制复合bBMP的异种骨庆大霉素局部药物释放系统 ,为治疗开放性骨折提供简便有效方法。材料和方法 :以复合bBMP的异种骨为核心载体 ,采用明胶包裹法和聚已内酯 (Poly ε caprolacton ,PCL)多重包裹法制成复合庆大霉素的植骨材料 ,对其进行表面结构和体外释放实验研究。结果 :2种方法制成的植骨材料均在 2 4h内有一爆发释放 ,并能维持一定时间的缓慢释放。其中PCL多重包裹法制成的RBX -G -LDDS在 2 5d时仍能达到 4.38ug/ml的释放浓度 ,高于庆大霉素对金黄色葡萄球菌的MIC(2ug/ml)。结论 :RBX -G -DDS具有良好的体外缓释特性 ,结合RBX的诱导成骨作用 ,能提供一种治疗开放性骨折的新方法     

几丁糖抑制细菌生长的实验研究

在表皮葡荡球菌、金黄色扼萄球菌、大肠艾希氏菌、绿脓假单胞菌、白色念珠菌培养液中，按倍比稀释法加入不同剂虽的几丁糖溶液，在３７℃恒温下培养１８小时。观察培养液中细菌生长，得到几丁糖最小抑菌浓度为：表皮葡荡球菌０．００８％，金黄色葡荡球菌０．０１６％，大肠艾希氏菌０．０３２％，绿脓假单胞菌０．０６４％，白色念珠菌１％。实验结果表明，几丁糖溶液具有广谱抗菌作用。     

几丁糖阿霉素缓释药粒的体外实验研究

几丁糖是一种无毒、无副作用，生物相容性良好，可在体内自然降解吸收的生物材料。利用几丁糖缓慢降解的特性，将其与阿霉素制成几丁糖阿霉素缓释药粒，并进行体外释放试验及其浸出液的体外抑制ＯＳ－１１６骨肉瘤试验。结果表明，该缓释药粒可使阿霉素呈缓慢稳定的释放，其第１，２０，４０及６０天浸出液的ＯＳ－１１６骨肉瘤的抑制率分别为５８．１１％，３６．４８％，２４．３２％及２１．６２％。认为，几丁糖与阿霉素制成的缓释药粒具有良好的缓释功能，且不影响阿霉素的活性，是化疗药物缓释的极好载体，并可应用于骨肿瘤术后的局部治疗。     

几丁糖预防肌腱粘连的临床研究

目的　观察医用几丁糖预防肌腱粘连的临床作用。方法　对 2 6例 34条粘连肌腱进行手术松解 ,其中 13例 19条肌腱在粘连松解术后用 2 %的几丁糖涂布在松解肌腱上作为应用组 ;另外 13例 15条松解后肌腱不用几丁糖作为对照组。结果　两组病例术后经过平均 5个月的随访 ,按 TAM法评定疗效 ,应用组 19条肌腱中 ,疗效优良者 17条 ,优良率 89.5 % ;显著高于对照组的 6 0 % (x2 =4.0 5 ,P<0 .0 5 )。结论　医用几丁糖具有预防或减轻肌腱粘连的作用。     

几丁糖薄膜对肌腱粘连及愈合影响的实验研究

目的　研究几丁糖薄膜对肌腱粘连和愈合的影响,为临床应用几丁糖薄膜预防肌腱术后粘连提供实验依据。方法　以55 只6～8 个月来亨鸡的趾深屈肌腱为实验模型,将切断的趾深屈肌腱周围包裹几丁糖薄膜,术后2、4、6、8和10 周分别测量肌腱的活动或抗张强度,肉眼及病理切片观察肌腱的粘连、愈合情况。结果　几丁糖薄膜能有效预防肌腱粘连,早期(即4 周内)可以影响肌腱愈合,4 周后可加快肌腱愈合和增加肌腱抗张强度。结论　几丁糖薄膜具有无毒副作用、生物通透性好及生物降解、吸收好,并可以选择性抑制成纤维细胞生长等优点,能有效预防肌腱粘连,晚期(4 周后)可加快肌腱愈合,是一种较为理想的预防肌腱粘连的生物材料     

载药骨基质明胶缓释体的研制与实验

目的　研制载药骨基质明胶缓释体 ,为人工关节感染和松动的防治提供新方法。方法　将BMG溶于头孢唑林钠溶液 ,通过真空吸附、冻干等处理 ,制得载药BMG。测定其体内、体外释药浓度及持续时间以及载药BMG的诱导成骨能力。结果　载药BMG体外对金葡菌的抑制作用为 2 2d ,体内为 14d。载药BMG体内释药时 ,局部组织浓度高 ,血浆浓度低 ;局部组织早期浓度高 ,以后为稳定的低浓度释放。载药BMG中掺入抗生素后不影响BMG的诱导成骨能力。结论　载药BMG既能持续释放有效浓度的抗生素 ,又具有强的诱导成骨能力 ,可望成为防治人工关节感染和松动的一种新方法。     

纤维蛋白凝胶复合骨形态发生蛋白和庆大霉素缓释药物治疗感染性骨缺损的实验研究

目的 探讨将纤维蛋白凝胶(FG)作为骨形态发生蛋白(BMP)及庆大霉素的共同载体,一期治疗感染性骨缺损。方法 48只青紫兰兔,制作慢性骨髓炎模型,清创后造成胫骨干骺端内侧1.5 cm长半环形骨缺损,采用三种方法进行处理:A组,植入FG、BMP和庆大霉素复合物;B组植入FG/BMP复合物;C组作为空白对照。术后观察动物一般情况,作骨细菌培养及其计数,X线摄片及组织学检查。结果 A组感染控制及骨修复均良好,感染控制率、再生骨量明显优于B组;B、C两组在感染控制率上无显著差异;C组动物骨修复差。结论 FG、BMP及庆大霉素复合物具有抗感染及促进成骨的双重作用,可用于感染性骨缺损的治疗,也可用于污染严重的开放性损伤造成的骨缺损的治疗,方法简便、易行。     

The in Vitro Elution of Gentamicin Sulphate from Methylmethacrylate Bone Cement: A Comparative Study

The in vitro elution of gentamicin from three brands of bone cement has been studied. One was found to have a much longer lasting activity than the other two. This activity and the possible deleterious side effects from the use of gentamicin in bone cement as a routine procedure are discussed.     

阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体的制备及相关研究

目的：研制阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体，分析其缓释性能及对骨肉瘤细胞OS－9901的抑制能力。方法：按Urist法制备异体脱钙骨基质骨粒，经冻干、真空吸附等处理，载入阿霉素与骨水泥按1：1复合，制得阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体。对该缓释体行体内外药物释放及其浸出液的体外抑瘤试验。结果：缓释体体外第1d释放量为总的19．23％，其后在较低水平维持相对稳定的缓慢释放，持续释放70d以上；其第1、20、40、70d的浸出液对骨肉瘤细胞OS－9901的抑制率分别为64．27％，41．68％、28．71％及24．32％。体内释药时，局部骨组织浓度高于血浆中浓度；局部骨组织早期浓度高，以后为稳定的低浓度释放。结论：该缓释体具有良好的缓释功能，在70d内对骨肉瘤细胞OS－9901维持良好有效的抑制率。     

负载重组人骨形态发生蛋白-2壳聚糖纳米微球的制备及异位成骨活性研究

目的 制备负载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的壳聚糖纳米微球,并考察其成骨活性. 方法 应用离子交联法制备空白壳聚糖纳米微球和rhBMP-2壳聚糖纳米微球,应用透射电镜观察微球的形态,激光粒径分析仪测定其粒径的分布,检测其载药量、包封率及累积释药率.取24只SD大鼠,随机分为4组,每组6只.以无菌手术分别在大鼠左侧股部建立肌袋.A组大鼠肌袋内植入rhBMP-2壳聚糖纳米微球(含rhBMP-2 1 mg),B组大鼠肌袋内植入rhBMP-2 1 mg,C组大鼠肌袋内植入空白壳聚糖纳米微球,D组大鼠肌袋内不做任何处理.评估rhBMP-2壳聚糖纳米微球的成骨活性.结果离子交联法制备的壳聚糖纳米微球球形规整、分散均匀,微球平均粒径为230.0 nm,分布较集中,包封率为66.87％±4.58％,载药率为(33.44±2.29) μg/mg.A、B、C、D组的ALP活性平均分别为(1.94±0 35)、(1.48±0.56)、(0.20±0.07)及(0.18±0.06) kat/g,差异有统计学意义(F=42.959,P=0.000),A、B组明显高于C、D组,且A组高于B组.4组钙含量平均分别为(5.20±1.42)、(3.80±1.40)、(0.19±0.08)、(0.20±0.08)μg/mg,差异有统计学意义(F=39.242,P=0.000),A、B组明 显高于C、D组,且A组高于B组. 结论 离子交联法可成功制备出均一的rhBMP-2壳聚糖纳米微球,该微球具有良好的载药性能和缓释性能,且其骨诱导活性优于单纯rhBMP-2.     

抗菌素骨-庆大霉素药物释放特性的实验研究

目的探讨明胶及戊二醛交联明胶作为缓释剂的缓释效果。方法用不同浓度明胶通过超声和负压双重复合法制备庆大霉素抗菌骨，采用微生物测定法测定其体内外释放特性。结果未复合明胶抗菌骨，其药物体外释放仅能维持7d，8％、12％明胶抗菌骨能维持12d，14d，25％明胶抗菌骨药物体内释放维持14d，而戊二醛联明胶未起到进一步的缓释作用。结论明胶可作为局部用药的缓释剂，而戊二醛交联对明胶缓释效果无进一步加强。     

重组人骨形态发生蛋白-2壳聚糖纳米微球的制备及检测

目的 制备负载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)壳聚糖纳米微球,并检测其粒径、形态、降解及药理特性,以评估壳聚糖纳米微球作为rhBMP-2缓释载体的可行性.方法 以壳聚糖为原料、三聚磷酸钠为交联剂,通过离子交联法制备负载rhBMP-2壳聚糖纳米微球,应用透视电镜观察微球的形态、激光粒径,分析其粒径分布、溶菌酶降解,了解降解特性.通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测rhBMP-2壳聚糖微球的载药率、包封率和释药规律.结果 离子交联法制备的壳聚糖纳米微球,平均粒径大小为230nm,成球性较好,包封率和载药率分别为(66.867±4.575)％、(33.437±2.290)μg/mg;体外释药试验rhBMP-2可以从壳聚糖纳米微球中缓慢释放,释放行为符合双向动力学规律,整个释放过程可达30 d.结论 离子交联法可成功制备壳聚糖纳米微球并具有缓释rhBMP-2的能力,为进一步应用于骨组织工程研究提供实验依据.     

壳聚糖相对分子质量对微囊及包裹肝细胞活性的影响

目的 观察壳聚糖相对分子质量对微囊机械强度和通透性及包裹肝细胞活性的影响.方法 通过微囊搅拌实验比较中、低分子量壳聚糖形成的微囊的机械强度,比较2种微囊对异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白(FITC-BSA)通透性,及细胞染色实验判断2种微囊包裹小鼠原代肝细胞活性的区别.结果 微囊搅拌100 min后中分子量壳聚糖微囊破损率100%,低分子量壳聚糖微囊破损率5%,两种微囊机械强度差异有统计学意义(P＜0.05),微囊溶液中加入HTC-BSA15 min后,低分子量壳聚糖微囊内荧光强度为4 AU,中分子量壳聚糖微囊内荧光强度为1.5 AU,两种微囊对FITC-BSA的通透性差异有统计学意义(P＜0.05),低分子量壳聚糖形成的微囊包裹肝细胞培养1周后细胞染色实验显示微囊中活肝细胞数为100%,中分子量壳聚糖形成的微囊包裹的活肝细胞数约为40%,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低分子量壳聚糖相对于中分子量壳聚糖更适合于作微囊的材料.

Abstract：

Objective To study the influence of molecular weight of chitosan on microcapsules and hepatocytes in microcapsules. Methods The mechanical strength, permeability to fluoresceine isothiocyanate-bovine serum albumin (FITC-BSA) and activity of hepatocytes in microcapsules were compared between two kinds of microcapsules made by low and middle molecular weight chitosan. Results After 100 min of stirring microcapsules, all middle molecular weight chitosan microcapsules were damaged, 5% low molecular weight chitosan microcapsules were damaged. There was significant difference in breakage rate of the mechanical strength between two microcapsules (P ＜ 0. 05). Fifteen min after addition of FITCBSA into microcapsule solution, fluorescence intensity in the low molecular weight chitosan microcapsules was 4 AU, and that in middle molecular weight of chitosan microcapsules was 1. 5 AU, suggesting there was significant difference in permeability to FITC-BSA between two kinds of microcapsules (P ＜ 0. 05).One week after culture of microencapsulated hepatocytes, staining test showed that 100% of liver cells in low molecular weight chitosan microcapsules were alive, while the number was about 40% in middle molecular weight chitosan microcapsules (P ＜ 0. 05). Conclusion Low molecular weight chitosan is more suitable as materials of microcapsules than molecular weight chitosan.     

Effectiveness of tissue engineered based platelet gel embedded chitosan scaffold on experimentally induced critical sized segmental bone defect model in rat

BackgroundHealing and regeneration of large bone defects are a challenging problem for reconstructive orthopedic surgeons.PurposeThis study investigated the effectiveness of chitosan scaffold (CS), platelet gel (PG) and their combination (CS-PG) on healing process of an experimentally induced critical sized segmental bone defect model in rat.MethodsFifty bilateral defects were created in the mid diaphysis of the radial bones of 25 Sprague-Dawley rats. The animals were randomly divided into five equal groups. The bone defects were either left untreated or treated with corticomedullary autograft, CS, PG or CS-PG. Plain radiographs were provided from the radial bones on weeks 2, 5, and 8 after injury. In addition, clinical examinations were done for the healing radial bones. The animals were euthanized after 8 weeks of injury, and their harvested samples were evaluated by gross morphology, histopathology, scanning electron microscopy, CT-scan, and biomechanical testing.ResultsCompared with the defect group, the PG and autograft treated bone defects had significantly superior radiological scored values, bone volume and biomechanical performance which had positive correlation with their superior gross pathological, histopathological and ultra-structural features. Compared with the untreated defects, the PG and CS-PG treated defects showed significantly superior structural and functional properties so that PG had the highest value. In addition, CS had low value in bone regeneration. Although combination of CS and PG improved the healing efficacy of the CS, this strategy reduced the ability of PG to increase osteoconduction and osteoinduction during bone regeneration.ConclusionApplication of PG alone enhanced bone healing and can be regarded as a promising option for bone tissue engineering in clinical settings. Chitosan was not effective in bone reconstruction surgery and further investigations should be conducted to find a suitable carrier for PG.     

防粘连几丁糖膜的制备和部分性能测定

目的制备防粘连几丁糖膜及测定其部分性能.方法在透析后的几丁糖与明胶混合液中加入戊二醛交联后置入冻干机冻干制得几丁糖膜.测定湿润时间、吸水量和吸水率表示其吸水性能.动物实验研究膜的止血性能,观察与创面的粘附情况,记录出血时间,以膜或纱布中Hbo光度吸收值表示出血量.结果几丁糖膜具有良好的吸水性能,适合用于止血.与创面粘附良好,几丁糖膜组、纱布组的出血时间分别为(78.25±6.42)s、(119.05±11.39)s,Hb光度吸收值为0.76±0.51、1.63±0.72,明显优于纱布对照组(P＜0.01).结论几丁糖膜具有一定的止血性能.